RP-HPLC制备色谱法分离黄芪甲苷

黄芪 Astragalus membranaceus (Fisch.)Bunge为常用中药 ,具有益气固表 ,利尿托毒等功效 [1] ,黄芪甲苷 (astragaloside )是其主要活性成分之一 ,常作为指标性成分用于黄芪药材和制剂的质量监控 [2 ,3 ] 。本文研究了采用 RP- HPLC制备色谱的方法从黄芪药材中分离制备黄芪甲苷单体 ,满足常规分析检测的需求。1　仪器与试剂实验仪器 :Waters 6 0 0高效液相色谱仪 ;色谱工作站 :MILLINUIM 3 2 (3 .0 5 .0 1版 ) ;检测器 :41 0示差折光检测器 ;分析柱 :Symmetry Shield TMC18色谱柱 (3 .9mm× 1 5 0 mm,5μm) ;进样器 :Rheo-dyne77…     

HPLC-ELSD法测定不同产地黄芪中黄芪甲苷

黄芪性温,味甘,为常用补气药。具有补气固表、利尿排毒、排脓、敛疮生肌等功效[1]。多年研究表明,黄芪皂苷是黄芪药效物质基础的重要组成之一,在抗衰老、调节免疫功能、保护心肌和大脑缺血等方面具有显著作用。黄芪甲苷是主要有效成分之一,具有抗炎镇痛、降压等重要生理活性[2]。本研究所用药材为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge var.mongholicus(Bunge)Hsiao或膜荚黄芪A.membranaceus(Fisch.)Bunge的干燥根,多为栽培或野生,分布于山西、内蒙、吉林、河北等地,本实验采用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法…     

黄芪皂苷类有效成分提取分离技术

黄芪甲苷和总皂苷是中药黄芪中的特征性成分，目前黄芪药材及含黄芪的单方与复方中药制剂多以黄芪甲苷和总皂苷含量为质量评价指标。关于黄芪中皂苷类成分的前处理方法的文献报道比较丰富。本文对近年来黄芪皂苷类成分提取分离方法的研究进展进行了归纳，列举并对比了水提法、醇提法、微波辅助提取法、柱前衍生化法、超临界CO2萃取法等方法的优缺点及适用范围，为黄芪及其制剂中皂苷类成分的分离提纯提供参考。     

不同来源黄芪药材中黄芪甲苷的定量分析

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus mem-branaceus(Fisch·)Bge·var·mongholicus(Bge·)Hsiao或膜荚黄芪A·membranaceus(Fisch·)Bge·的干燥根[1]。黄芪中的主要化学成分包括皂苷类、黄酮类及多糖类等[2]。黄芪中黄芪甲苷的含量测定已有较多的文献报道,包括薄层扫描、比色法和HPLC法[3-5],但以往文献测定的样品数量和考察范围有限。本研究采用HPLC-ELSD方法,对不同来源的59批黄芪药材进行了黄芪甲苷的含量测定,并比较了不同....     

黄芪的药理作用及临床研究进展

黄芪（radix Astragali）为豆科植物膜荚黄芪[Aaragalus membranaceus（Fisch）Bge．]、蒙古黄芪[Astragalus membranaceus（Fisch．）Bge．var mongholicus（Bge）Hsiao]的干燥根。味甘，性微温。功能补气、升阳、益卫、固表、利水、消肿和托疮生肌。主要成分为黄芪皂甙、黄芪多糖、γ-氨基丁酸、微量元素（硒、锰、铁、钙等），为临床各科应用较为广泛的中药之一。现将近年来黄芪药理作用及研究进展综述如下。     

黄芪的药理作用及其在运动医学中的应用

我国药典规定，药用黄芪有2种：豆科植物膜荚黄芪（Astragalus membranaceus（Fish）Bge）和蒙古黄芪（A．membranaceus Bge．var mongholicus（Bge）Hsiuo）的根。黄芪入肺、脾经，具有补气升阳、固表止汗、补气通痹、利水消肿、托疮生肌、延年益寿之功效。黄芪含有蔗糖、葡萄糖醛酸、黏液质、数种氮基酸、苦味质、胆碱、甜菜碱、叶酸、硒等成分。黄芪注射液是从黄芪中提取的灭菌水溶液，每1mL相当于生药2g。临床广泛用于循环系统、呼吸系统、泌尿系统、消化系统、免疫系统等疾病的治疗中。现代研究证实黄芪有如下药理作用。     

黄芪的临床应用

黄芪，为豆科植物蒙古黄芪及膜荚黄芪的干燥根，始载于《神农本草经》，为上品。清代吴其浚《植物名实图考》说：黄芪“有数种，山西、蒙古产者佳”。也即是说，除山西沁州绵上外，内蒙古产的黄芪也为道地药材。据现代药理研究证明，黄芪含皂苷类、多糖类等多种有效成份。其中皂苷类以黄芪甲苷为主，并含乙苷和丙苷等。还有黄酮类及黄芪多糖、多种氨基酸等。由于黄芪主产于北方，故现代中医处方，多写为“北芪”。     

黄芪及其制剂在儿科临床的应用

黄芪[Astragalus membranaceus（Fisch．）Bunge]为豆科多年生草本植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根，主要含有甙类、多糖、氨基酸及微量元素等。黄芪具有增强机体免疫力、利尿、抗衰老、保肝、降压等作用。现就近10年黄芪及其制剂在儿科临床应用的研究成果作一综述。     

黄芪植物来源及其产地分布研究

《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》1963年版和1977年版中记载“黄芪为豆科植物膜荚黄芪(黄芪)Astragalus membranaceus (Fisch．)Bunge或蒙古黄芪A．membranaceus(Fisch．)Bunge var．mongholicus (Bunge) Hsiao的干燥根”。在之后的1985年版、1990年版、1995年版、     

HPLC测定黄芪甲苷概况

黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ)是中药黄芪中的特征性成分,目前黄芪药材以及含黄芪的单方及复方中药制剂大多以黄芪甲苷为质量评价指标,由于黄芪甲苷只在紫外末端有吸收,以往文献报道以薄层扫描方法居多,近年来,通过HPLC方法测定黄芪甲苷以其在准确性、重现性、灵敏度等方面的优势而逐渐为人们广泛使用,本文对近五年来HPLC法测定黄芪药材及制剂中黄芪甲苷的前处理方法及色谱条件两方面综述如下.     

黄芪药材、饮片中黄芪甲苷含量测定方法的改进

目的：建立操作简便、重现性好的黄芪药材、饮片中黄芪甲苷的提取及含量测定方法。方法：比较4种不同的提取方法,用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量,色谱柱为Capcell PAK C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相为乙腈-水（32：68）。结果：简化的提取方法,黄芪甲苷的进样量在0.53～12.72μg范围内线性关系良好（r=0.9994）,平均回收率为98.91%,RSD=2.10%。结论：改进方法样品提取简单、方便、准确、重现性好,可作为黄芪药材、饮片中黄芪甲苷含量测定方法。     

黄芪免疫调节机制及临床应用进展

黄芪为多年生草本植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus（Fisch．）Bge．var．Mongholicus（Bge．）Msiao及膜荚黄芪Astragalus membranaceus（Fisch．）Bge．的根，主产于山西、黑龙江、内蒙古。黄芪味甘，性微温，入脾、肺经，生用能益卫固表、托毒生肌、利水消肿；炙用能补中益气、升阳举陷。黄芪含有多种皂苷、黄酮、多糖，以及氨基酸、亚油酸、生物碱、     

不同产地黄芪中黄芪甲苷含量比较研究

目的：改进黄芪含量测定方法，提高黄芪甲苷回收率，评价不同产地黄芪药材质量。方法：采用HPLC-ELSD对各种黄芪中的黄芪甲苷含量进行测定，并对其进行质量评价。结果：此方法回收率较高，各产地黄芪中黄芪甲苷的含量差别较大。结论：山西、内蒙古、黑龙江、甘肃各省产地的药材含量较高，可考虑在此进行规范化种植，为优质黄芪药材种植选址提供重要参考。     

碱水解法提高黄芪药材中黄芪甲苷的工艺研究

目的 建立碱水解法提高黄芪药材中黄芪甲苷收率的最佳工艺.方法 以黄芪甲苷的收率为考察指标,采用正交实验对黄芪甲苷的提取工艺进行优选.考察NaOH浓度、水解时间及料液比对黄芪甲苷收率的影响,采用高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)测定其含量.结果 NaOH溶液的浓度对黄芪甲苷的收率起主要作用,最佳工艺条件为:NaOH溶液的浓度为0.100 mol·L-1,室温静置水解2 h,黄芪药材与碱溶液的料液配比为1:12,黄芪甲苷的含量约是未经碱水解组的16.4倍.结论 碱水解法可显著提高黄芪药材中黄芪甲苷的含量.方法 简便易行,实用价值高,为工业化生产提供了依据.     

不同生长年限黄芪中黄芪甲苷和多糖含量比较

目的：通过不同生长年限黄芪药材中黄芪甲苷和黄芪多糖的含量比较,为选择黄芪的适宜采收时间提供依据。方法采用高效液相色谱蒸发光散射检测法测定黄芪甲苷含量,色谱柱为 Hypersil-Keystone C18,流动相为乙腈-水（33∶67）,流速1 mL/min,漂移管温度105℃,空气流速2.7 L/min。采用苯酚-硫酸比色法测定黄芪多糖含量,测定波长490 nm。结果黄芪甲苷的线性范围为1.25～6.28μg,平均回收率为97.28%（RSD＝1.42%）;黄芪多糖的线性范围为10～100μg,平均回收率为99.02%（RSD＝0.94%）。生长1年以上黄芪中黄芪甲苷含量均符合《中华人民共和国药典》标准,生长3年者黄芪甲苷含量最高;生长3年者黄芪多糖含量最高,2年者稍低。结论从黄芪甲苷和黄芪多糖的含量综合来看,适宜采收的黄芪生长年限至少为2年。     

黄芪中黄芪皂苷的提取分离工艺研究

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus （Fisch．）Bge．vsr．monghoicus （Bge．） Hisao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus（Fisch．） Bge．的干燥根。     

高效液相-蒸发光散射检测法测定黄芪药材中黄芪甲苷含量

目的：采用高效液相-蒸发光散射检测法（HPLC．ELSD）测定黄芪药材中黄芪甲苷的含量。方法：采用VenusilXBPC18（250．0mmx4．6mm,5灿m）色谱柱,流动相：乙腈-水（32：68）,流速：1．0mL·min-1,ELSD参数：雾化温度36℃,漂移管温度：60℃,通气压力30psi。结果：黄芪甲苷在1．4028—7．0640mg·L-1范围内有良好的线性关系,r=0．9998（n=5）,平均回收率为99．3％。结论：该方法分离度高,重现性好,灵敏度高,准确,简便,无干扰等优点,可广泛用于黄芪药材的质量控制。     

HPLC-ESI-MSn法测定黄芪药材中黄芪甲苷

目的 建立黄芪醇提物中黄芪甲苷的高效液相色谱-电喷雾-离子阱质谱测定方法,测定黄芪药材中黄芪甲苷.方法 超声法制备黄芪药材的总提物,反相色谱分离,采用离子阱质谱多级反应模式,以m/z807.4→627.2为提取离子对,外标法测定黄芪甲苷.结果 方法 最低检测限为5 ng/mL,线性范围为0.10～1.04 mg/mL,精密度、重复性、稳定性RSD均小于5.0%,平均加样同收率为96.51%.供试黄良药材中含黄芪甲苷为0.54 mg/g.结论 该方法 具有简便,快速和灵敏度高的特点,可用于黄芪药材及其生物制品样品中黄芪甲苷测定.     

硫磺熏蒸对黄芪中黄酮类和皂苷类成分的影响

目的测定硫磺熏前后黄芪中黄酮类和皂苷类成分的变化,确定硫磺熏对黄芪药材质量的影响,为评价熏硫加工对黄芪质量的影响提供依据。方法对收集的黄芪进行熏硫加工,采用HPLC-DAD法测定了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分,UPLC-ELSD法测定了黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷4种皂苷成分。结果硫磺熏过的黄芪药材中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷含量降低,毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷I、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷的含量变化不明显。结论黄芪熏硫加工后,黄酮苷成分有所降低,其余成分变化不明显。     

黄芪不同部位黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定

目的对黄芪药材不同部位黄芪甲苷及毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量进行测定并对比分析,为黄芪药材入药部位的合理性提供科学依据。方法采用HPLC-ELSD法测定黄芪不同部位黄芪甲苷的含量,HPLC-UV法测定黄芪不同部位毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。结果纤维根中黄芪甲苷含量最高(0.2207%~0.3219%),主根中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量最高(0.0219%~0.0297%)。结论黄芪药材产地加工应除去根头及纤维根,保证黄芪药材质量的稳定性,纤维根中黄芪甲苷可加以提取应用。