黄芩不同中医调剂品的HPLC指纹图谱比较研究

目的:比较黄芩不同中医调剂品黄芩生饮片、3种酒制黄芩、条芩与枯芩样品之间的HPLC图谱,探讨各组样品间的化学差异。方法:采用HPLC法。色谱条件：Hypersil ODS2 C18柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相：甲醇-0.05%磷酸水溶液线性梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min ;检测波长280 nm。运用相似度软件、SIMCA-P与SPSS软件对指纹图谱进行分析。结果:不同黄芩指纹图谱组间分类明显,组内集中性好：生品与酒制品之间分类明显,差异很大;不同酒制品相比,酒炒和酒炒炭样品比较相近,酒烘与酒炒样品则差异明显;枯芩与条芩相比,差异明显。其中变化明显的成分是黄芩中黄酮类成分中极性较小的成分。结论:证明了古代中医区别用药的合理性,为黄芩质量控制及综合评价提供可靠的科学依据,并为黄芩合理用药提供参考。     

HPLC法测定玉屏风不同配伍中4种黄酮成分

目的 研究玉屏风黄芪-白术-防风1∶1∶1、2∶2∶1、3∶1∶1、4∶4∶1和防风-黄芪1∶2、黄芪-白术1∶1、防风-白术1∶2配伍剂量变化对槲皮素、芒柄花素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和升麻苷4种黄酮成分的影响。方法 对玉屏风配伍剂量变化的4组整方和3组拆方分别先用水回流提取,药渣再用80%乙醇回流提取,并采用HPLC法对水醇提取液中4种黄酮成分的含量进行了测定。结果 在整方中,4种黄酮成分的总量为3∶1∶1＞1∶1∶1＞2∶2∶1＞4∶4∶1,在拆方中,防风-黄芪＞防风-白术＞黄芪-白术。对单一成分而言,5-O-甲基维斯阿米醇苷＞升麻苷＞槲皮素＞芒柄花素;除芒柄花素外,其余3种成分的量均为水提液大于药渣醇提液,药渣醇提可使4种黄酮成分的量增加12.24%～40.64%。槲皮素和芒柄花素是黄芪药材中的有效成分,二者的含量均为3∶1∶1＞2∶2∶1＞4∶4∶1＞1∶1∶1,白术不含4种黄酮成分。结论 随着玉屏风配伍剂量的变化,水醇提取液中4种黄酮成分的含量明显改变,但这种改变并不是药材含量的线性加减。     

基于HPLC指纹图谱多软件分析的山西远志药材质量均一性评价

目的建立山西远志药材高效液相色谱指纹图谱的分析方法,为有效控制远志药材的质量奠定基础。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱,检测波长为318 nm,流速为1.0 ml/min,分析时间为80 min,分析10批山西远志药材的HPLC指纹图谱,并采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"、SPSS软件和SIMCA软件进行相似度分析、聚类分析和主成分分析。结果方法学考察实验表明所建立的指纹图谱方法稳定性、精密度和重现性均良好。山西不同来源的远志药材相似度大于0.8,聚类分析和主成分分析结果一致。结论山西远志药材的化学组成一致性较好,质量稳定。所建立的远志药材指纹图谱方法灵敏、稳定,可操作性强。     

中药材“辨状论质”解读及商品规格标准研究思路

通过解读药材“辨状论质”的含义并对其相关研究进行综述,分析中药材商品规格标准的现状和存在问题,提出药材“辨状论质”科学内涵的研究思路,对药材商品规格标准研究提出建议。目的是通过药材“辨状论质”研究规范商品规格标准,实现优质优价,保护优质中药材资源。     

不同款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量分析及 HPLC 指纹图谱研究

目的 建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,测定不同来源的药材中槲皮素和山柰素的量,评价产地、生长方式及炮制对款冬花中槲皮素和山柰素量的影响;并建立款冬花中黄酮醇苷类成分指纹图谱,为款冬花质量控制的制定提供依据。方法 采用 HPLC 建立款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量测定方法,色谱条件：Diamonsil C18 (200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为乙腈-水 (77∶23),检测波长：365 nm。采用 HPLC 法建立款冬花药材中黄酮醇苷类成分指纹图谱,色谱条件：ODS-BP C18 (200 mm×4.6 mm, 5 μm);流动相：乙腈-0.1% H3PO4 水溶液梯度洗脱;检测波长为 365 nm。结果 不同产地,炮制品与生品之间,其槲皮素和山柰素的量差异较大,不同生长方式的药材之间无明显差异;不同产地及批次的款冬花药材的指纹图谱相似度较高。结论 本研究建立的槲皮素和山柰素的定量测定方法简便、准确、重现性好,可用于款冬花药材中黄酮醇苷类成分的质量控制;不同来源的款冬花药材中的槲皮素和山柰素的量有明显差异;所建立的黄酮醇苷类成分的指纹图谱方法操作性强、重现性好,可作为款冬花黄酮醇苷类成分指纹图谱研究的基础。     

南柴胡和北柴胡组成的逍遥散抗抑郁作用的~1H-NMR代谢组学研究

目的 比较不同品种柴胡(南柴胡和北柴胡)组成的逍遥散的抗抑郁功效,探寻其对大鼠内源性代谢产物变化规律的影响.方法 采用慢性温和不可预知应激程序对大鼠进行为期4周的抑郁造模,在造模2周后分别ig给予由南柴胡或北柴胡组成的逍遥散(生药)46 g/kg水提取液、文拉法辛0.05 g/kg干预,每天1次,连续给药2周,观测动物行为学症状.应用核磁共振(1H-NMR)方法分析大鼠血清内源性代谢产物的变化规律.结果 2种逍遥散和文拉法辛对抑郁大鼠行为学指标均有显著影响,与模型组比较差异显著(P＜0.05、0.01).代谢组学研究结果显示,2种逍遥散和文拉法辛干预后,大鼠血清中异亮氨酸、氧化三甲胺、胆碱水平升高,而乳酸、N-乙酰糖蛋白、肌酸、苏氨酸及β-葡萄糖等水平降低,与模型组比较差异显著(P＜0.05、0.01).2个逍遥散组对抑郁大鼠行为学指标的影响组间比较未显示统计学差异.结论 不同品种柴胡组成的逍遥散均具有明显的抗抑郁作用,但功效有所差别,即南柴胡组成逍遥散的抗抑郁效果及起效时间略优于北柴胡.应用行为学与代谢组学相结合的方法评价逍遥散抗抑郁功效具有准确性好、灵敏度高等特点.     

基于气质联用的款冬花蕾动态发育代谢组学特征分析

目的:采用气相色谱-质谱法(GG-MS)结合代谢组学分析技术明确不同发育阶段款冬花蕾的代谢组学特征.方法:对款冬花5个不同发育阶段药材进行两相溶剂提取,得到极性和非极性部分,分别对其进行GC-MS测定.代谢产物的结构指认通过NIST数据库检索和对照品对照确定,将数据预处理后导入SIMCA-P软件进行多元统计分析.结果:共鉴定了54个代谢产物,包括35个极性化合物和19个非极性化合物;主成分分析(PCA)结果显示,5个阶段的款冬花蕾样品能较为明显的分开,且呈动态变化趋势;与传统采收期12月样品相比,10月和11月的花蕾样品与12月相距较近,说明这3个阶段的代谢物组成接近;而9月和3月的样品则距离较远,说明这2个时间点的样品化学差异较大.通过对部分特征代谢物相对含量进行比较,发现款冬花蕾发育过程中,脯氨酸、赖氨酸和亚油酸在发育初期含量较低,中期升至最高,在开花后又急剧下降;苹果酸和柠檬酸在中期含量较低;蔗糖的含量逐渐降低,开花后降至最低.结论:发育初期和开花后与传统采收期款冬花样品的化学差异较大,为其不能入药提供了科学依据,也为款冬花合理采收期的确定及其药效物质基础研究奠定了基础.     

正柴胡饮药理与临床应用研究

正柴胡饮源于明·张介宾《景岳全书》，由柴胡、陈皮、防风、赤芍、甘草、生姜6味药组成，具有发散风寒、解热镇痛的功效，主治外感风寒。发热恶寒，头痛鼻塞，四肢酸痛等。笔者对其药理与临床的研究状况进行综述和总结。     

RACE法在连翘花蕾全长cDNA文库构建中的应用

目的建立新的连翘花蕾全长cDNA文库构建方法。方法应用GeneRacer^TM试剂盒,采用改良RNA连接酶介导的快速扩增cDNA末端（RNA ligase-mediated rapid amplication of cDNA ends,RLM—RACE）技术构建连翘花蕾全长的cDNA文库,通过计算菌落数、蓝白斑数、酶切鉴定、序列分析等手段评价文库质量。结果通过增加模板用量的方法成功构建了连翘花蕾全长cDNA文库,该文库容量为3．47×10^5,重组率为81．6％,插入片段多集中在500—1000bp之间,所占比例为71％;随机测序的cDNA克隆中均含有完整开放阅读框的全长cDNA序列。结论应用RACE法成功构建了连翘花蕾全长cDNA文库。