应用代谢组学探讨脾气虚大鼠血清小分子代谢谱群特征变化

目的:运用代谢组学技术探究脾气虚模型大鼠血清小分子代谢谱群特征变化,从而探索脾气虚证的生物学本质。方法:14只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和脾气虚证模型组各7只,模拟中医病因建立脾气虚大鼠模型。运用LC-Q/TOF-MS质谱技术对2组大鼠血清样本进行检测,通过主成分分析(PCA)、最小二乘判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘分析(OPLS-DA)比较2组大鼠血清代谢图谱,寻找差异性表达代谢物。结果:脾气虚大鼠与正常大鼠的血清代谢图谱间存在显著差异。与正常大鼠比较,脾气虚大鼠血清中葡萄糖、琥珀酸等小分子代谢物含量显著上升,雄酮、亚油酸等含量显著下降,通过OPLS-DA分析得到一些脾气虚证的潜在生物标志物。结论:脾气虚大鼠呈现出不同于健康大鼠的血清代谢谱群特征,该证型存在多种代谢通路异常,可能伴随机体能量供应障碍,也可能诱发糖尿病及心血管疾病。     

脾气虚证代谢综合征大鼠血清脂质代谢生物标志物代谢组学研究

目的:通过脾气虚证代谢综合征大鼠血清样本脂质代谢物进行非靶标脂质组学分析,寻找脾气虚证代谢综合征早期诊断相关的特征性脂质生物标志物,探索其微观物质基础。方法:将30只大鼠随机分为正常组、模型组,每组15只。模型组通过劳倦加饮食不节法造模。运用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)检测模型组和正常组生物样本血清的代谢轨迹,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘方判别分析(PLS-DA)寻找各组代谢物差异,筛选潜在内源性标志物。结果:潜在生物标志物主要有溶血磷脂酰胆碱、2-羟基丁酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸、亚油酸、花生四烯酸等。结论:脾气虚证代谢综合征大鼠模型存在明显脂质代谢紊乱,游离脂肪酸是脂质代谢中最活跃的成分。     

不同证型更年期综合征妇女血浆UPLC-QTOF/MS代谢组学特征研究

目的研究肾阴虚型、肝气郁结型及肝肾阴虚型更年期综合征妇女血浆超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-QTOF/MS)代谢组学特征,探讨UPLC-QTOF/MS代谢组学技术在妇女更年期综合征中医分型中的应用价值。方法对肾阴虚型、肝气郁结型、肝肾阴虚型更年期综合征妇女及健康同龄妇女各25例的血浆样品进行UPLCQTOF/MS检测,建立正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模型,比较不同证型更年期综合征妇女血浆代谢物谱的差异,寻找潜在的生物标志物。结果 OPLS-DA分析表明,不同证型更年期综合征及健康同龄妇女血浆UPLC-QTOF/MS代谢物谱能够被明确区分,鉴定出包括氨基酸、脂肪酸、磷脂、糖类、酯类以及醇类等16个潜在生物标志物在3组中存在明显差异。与健康同龄妇女相比,不同证型更年期妇女血浆内3种氨基酸含量异常(P<0.05),8种脂肪酸及有机酸类含量异常(P<0.05),磷脂、醇类、酯类、酮体及糖类各1种含量异常(P<0.05),不同证型更年期妇女发生明显氨基酸代谢、脂肪酸代谢、磷脂代谢、能量代谢以及糖代谢等代谢紊乱。结论不同证型更年期综合征妇女血浆UPLC-QTOF/MS代谢物谱存在显著差异,能从代谢组学分析中确定其特异生物标志物,据此在一定程度上区分更年期综合征的不同中医证型。     

基于代谢组学的冠心病患者气虚证识别模式

目的:筛选冠心病气虚证相关特征性代谢产物,尝试建立冠心病气虚证在代谢层面的识别模式。方法:氢核磁共振检测45例冠心病患者及15名正常人的血浆代谢产物,对数据进行PLS-DA、VIP及t检验/非参数检验分析,筛选出气虚证相关特征性代谢产物,聚类分析验证特征性代谢产物对气虚证的识别效果。结果:检测到冠心病患者和正常组血浆内源性代谢成分39种。PLS-DA积分矩阵图显示:冠心病患者与正常组,冠心病气虚证与非气虚证的分布区沿第一主成分t(1)轴方向完全分开。气虚证的特征性代谢产物包括乙酰谷氨酸、赖氨酸、缬氨酸和肉碱。结论:冠心病患者的异常代谢过程包括了氨基酸、糖、脂质及能量代谢、凝血过程及其他代谢过程;筛选出的4种生物标志物基本上实现了对冠心病气虚证的有效识别。     

气滞湿阻证代谢综合征大鼠血液代谢组学研究

目的通过对气滞湿阻证代谢综合征大鼠模型血浆标本进行代谢组学检测,寻找特征性代谢产物,诠释代谢物与生理病理变化的相对关系,从而揭示气滞湿阻证代谢综合征中医证候本质。方法健康雄性SD大鼠随机分成空白对照组和模型组,模型组复制制成气滞湿阻证代谢综合征。运用超高压液相色谱-四极杆-时间飞行串联质谱仪技术检测两组血浆样本中的小分子代谢产物,对所得到的代谢指纹图谱进行主成分分析和偏最小二乘法-判别分析,找出具有差异的特征代谢物。结果找到了潜在生物标志物,主要有β-羟丁酸、乙酰乙酸、丙酮酸、丝氨酸、溶血磷脂酰胆碱、N-乙酰胺基-2-脱氧-D-葡糖、同型半胱氨酸等。结论气滞湿阻证代谢综合征的发生与糖类、脂类、蛋白质代谢紊乱有关,这些体内的小分子化合物可能是代谢综合征中医证候的物质基础。     

脾气虚证大鼠尿液代谢组学异常及补中益气汤干预作用的研究

目的 运用代谢组学方法研究脾气虚证大鼠尿液的代谢表型变化,筛选出与脾气虚证相关的代谢标志物,并探讨补中益气汤的治疗作用。方法 利用核磁共振氢谱(1H-NMR)技术建立大鼠尿液的代谢指纹谱。应用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究正常对照组与模型组、模型组与补中益气汤组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)在尿液中选取生物标志物。结果 模型组及补中益气汤组的代谢表型发生了明显的变化,并筛选出与脾气虚证相关的9种代谢产物,补中益气汤对部分生物标志物有逆转作用。结论 脾气虚证大鼠的脂质及氨基酸代谢都出现了紊乱,能量代谢降低;经补中益气汤治疗后大鼠蛋白质代谢明显增强,保证了大鼠机体能量的供给。     

基于氢核磁共振技术HIV/AIDS肺脾气虚证患者尿液代谢组学研究

目的:探讨HIV/AIDS肺脾气虚证尿液的代谢组学特征。方法:采用氢核磁共振技术结合主成分分析、聚类分析方法比较24例HIV/AIDS肺脾气虚证和20例健康对照组的尿液代谢产物的差异。结果:氢核磁共振技术检测的HIV/AIDS肺脾气虚证患者与健康人尿液代谢物经PLS-DA分析后,代谢物轮廓可以分开;两组间差异性的变量约20个,大概推测为以下物质:甘氨酰-L-亮氨酸、L-缬氨酸、α-氨基丁酸、甲基丁二酸、丙酰甘氨酸等。结论:运用氢核磁共振技术可以将HIV/AIDS肺脾气虚证和健康人尿液代谢产物轮廓进行区分。部分可能存在的潜在特征性标志物有助于艾滋病中医证候的临床诊断,对其量化分析有一定的作用。     

基于1H-NMR的当归四逆汤抗凝血作用的代谢组学研究

采用¹H-NMR代谢组学技术研究当归四逆汤抗凝血作用机制以及对小鼠血浆内源性代谢产物的影响。当归四逆汤灌胃给药1周后,观察当归四逆汤对小鼠凝血酶时间的影响,并采用¹H-NMR技术分析小鼠血浆代谢指纹图谱,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA),研究给药组与正常组之间的代谢物组差异,筛选与抗凝血作用相关的潜在生物标志物。连续当归四逆汤灌胃给药1周后,能显著延长小鼠凝血酶时间(P<0.05)。代谢组学结果显示空白组和复方组能明显区分,与空白组比较,复方组内源性代谢产物肉碱、苯丙氨酸和异丁酸显著上调(P<0.01),赖氨酸、组氨酸和胆固醇显著下调(P<0.05)。肉碱、苯丙氨酸、组氨酸和胆固醇为当归四逆汤抗凝过程中潜在代谢标志物,当归四逆汤可能通过调节脂质代谢、能量代谢和氨基酸代谢影响血小板聚集功能和组织因子、纤维蛋白酶的表达来发挥抗凝作用。     

慢性阻塞性肺疾病稳定期肺气虚证及其中药干预的血浆代谢组学研究

目的运用代谢组学方法研究慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）稳定期肺气虚证及其中药干预的血浆代谢组学特征,探索其可能存在的生物标记物。方法选择40例COPD稳定期肺气虚证患者（肺气虚证组）,给予六味补气胶囊进行干预,并设健康对照组（37名）。分别对健康对照组及肺气虚证组药物干预前后进行肺功能检查;采用高效液相色谱-二极质谱联用仪检测血浆代谢物,利用主成分分析（principal component analysis,PCA）和偏最小二乘法（partial least squares,PLS）对数据进行统计分析,比较两组血浆代谢组学原始谱图和数据。进行两组全谱氨基酸代谢组学检测。结果与健康对照组比较,肺气虚证组治疗前肺功能明显下降（P〈0.05）,治疗30天后仍低于健康对照组（P〈0.05）。肺气虚证组治疗前的代谢谱与健康对照组明显不同,但治疗后有向健康对照组回归的趋势。发现15种COPD肺气虚证可能的疾病标记物。两组氨基酸代谢各有特点。结论运用血浆代谢组学方法可以发现COPD稳定期肺气虚证患者存在代谢谱和氨基酸代谢改变,并发现其潜在的疾病标记物。对COPD稳定期肺气虚证患者进行中医药干预,其代谢谱和氨基酸代谢具有积极的变化。     

基于蛋白质组学和代谢组学的HIV/AIDS肺脾气虚证的研究

现在已经进入了系统生物学高速发展的时代了,蛋白组学和代谢组学作为系统生物学的组成部分,对中医证候本质的研究将会更加客观化、标准化。采用i TRAQ-MS技术对HIV/AIDS肺脾气虚证患者血清进行了蛋白质组学检测,发现差异表达蛋白APOA-II、APOB、AZGP1;采用LC-MS技术对HIV/AIDS肺脾气虚证患者尿液和血液进行了代谢组学分析,比对出了9种可能的潜在标志物,包括TG、天冬氨酸、葡萄糖、磷脂酰乙醇胺等。对蛋白质组和代谢组学结果进行探讨,以期寻找HIV/AIDS肺脾气虚证的物质基础,为证候诊断提供量化依据。     

代谢综合征中医证型与颈动脉内-中膜厚度及血浆脂蛋白磷脂酶A2的关系研究

目的探究代谢综合征(MS)常见中医证型与颈动脉内-中膜厚度(IMT)及血浆脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)的关系,为MS中医辨证论治提供客观依据。方法选取MS患者60例作为研究组,经中医辨证分为气滞湿阻型、痰瘀互结型、气阴两虚型、脾肾气虚型4种证型,同时纳入健康体检者30人作为健康对照组,比较2组及研究组各型患者颈动脉IMT、血浆Lp-PLA2水平。结果研究组颈动脉IMT、血浆Lp-PLA2水平高于对照组(P<0.05)。研究组4种证型颈动脉IMT、血浆Lp-PLA2水平依次为:痰瘀互结型>气阴两虚型>脾肾气虚型>气滞湿阻型。痰瘀互结型、气阴两虚型颈动脉IMT高于脾肾气虚型、气滞湿阻型(P<0.05)。气阴两虚型、脾肾气虚型、气滞湿阻型血浆Lp-PLA2水平均低于痰瘀互结型(P<0.05);脾肾气虚型、气滞湿阻型血浆Lp-PLA2水平均低于气阴两虚型(P<0.05)。结论MS患者痰瘀互结型颈动脉IMT和血浆Lp-PLA2水平较高,颈动脉IMT、血浆LP-PLA2可以作为MS患者中医辨证分型的参考。     

肠易激综合征中医证型与胃肠激素水平变化的相关性研究

目的观察肝郁气滞型、脾胃虚弱型、肝郁脾虚型肠易激综合征患者胃肠激素的变化，探讨肠易激综合征的中医证型与血浆胃肠激素水平变化的相关性。方法103例肠易激综合征患者分为肝郁气滞证组35例，肝郁脾虚证组38例，脾胃虚弱证组30例，正常对照组10例。运用放射免疫同批测定血浆胃动素（MOT）、胆囊收缩素（CCK）和生长抑素（SS）水平。结果脾胃虚弱证组患者血浆MOT水平显著高于正常对照组（P〈0．05）；肝郁气滞证组明显低于正常对照组（P〈0．05）。3个证型组间比较，脾胃虚弱证组MOT水平显著高于肝郁气滞证组（P〈0．01）和肝郁脾虚证组（P〈0．05）。3个证型组血浆SS水平明显高于正常对照组（P〈0．01，P〈0．05），其中肝郁气滞证组明显高于脾胃虚弱证组和肝郁脾虚证组（P〈0．05）。结论不同中医证型的肠易激综合征患者上述胃肠激素存在不同的变化。肠易激综合征的中医证候与胃肠激素水平的变化具有相关性。     

340例代谢综合征患者的中医证素与微量白蛋白尿的相关性研究

目的:探讨代谢综合征的中医证素与微量白蛋白尿的关系。方法:采集340例代谢综合征患者的四诊资料,应用"证素辨证"的方法,对四诊资料进行分析统计,同时检测微量白蛋白尿(MAU)。结果:①代谢综合征基本证素:气虚、血虚、阴虚、阳虚、津亏、痰、血瘀、湿、热、气滞、心、肝、脾、肺、肾。②影响MAU的因素有中医证素肾、阳虚、血瘀,标准回归系数分别为0.47(P<0.01)、0.42(P<0.01)、0.334(P<0.05)。结论:由此推测MAU可作为代谢综合征肾、阳虚的参考指标之一。     

代谢综合征的中医证素与颈动脉内膜的相关性研究

目的探讨代谢综合征的中医证素与颈动脉内膜中层厚度的关系。方法采集120例代谢综合征患者的四诊资料,应用"证素辨证"的方法,对四诊资料进行分析统计,同时检测颈动脉内膜中层厚度。结果①代谢综合征基本证素:气虚、血虚、阴虚、阳虚、津亏、痰、血瘀、湿、热、气滞、心、肝、脾、肺、肾。②影响颈动脉内膜中层厚度的因素有中医证素痰、血瘀、肾、脾,其中与痰呈密切的正相关,标准回归系数分别为0.505(P0.01)、0.168(P0.01)、0.116(P0.05)、0.097(P0.05)。结论颈动脉内膜中层厚度可作为代谢综合征痰证的客观指标之一。     

代谢综合征178例辨证分型及相关性研究

目的:研究代谢综合征(MS)患者的中医辨证分型与体重指数、瘦素等指标的相关性。方法:收集178例代谢综合征病人的临床资料,辨证分为4种证型:气滞湿阻证、痰瘀互地证、气阴两虚证、脾肾气虚证,对相关资料进行研究。结果:气滞湿阻型及痰瘀互结型患者所占比例明显高于其他两个证型,其他两证所占比例相似。痰瘀互结证的腹围及体重指数明显高于其他三证,而气滞湿阻证又高于气阴两虚证及脾肾气虚证。气滞湿阻证和痰瘀互结证的TC、LDL-C、INS、2hINS和瘦素均明显高于其他二证。结论:气滞湿阻型及痰瘀互结型患者所占比例明显高于其他两个证型。气滞湿阻证和痰瘀互结证的胆固醇升高更为明显,胰岛素抵抗更加严重,且由脂肪细胞分泌的瘦素升高更多。     

肝硬变失代偿期中医证型与TNF-α和腹压的相关性研究

目的:观察肝硬变失代偿期中医证型与血浆TNF-α和腹压的相关性。方法:将180例肝硬变失代偿期患者进行中医辨证分型,检测血浆TNF-α和腹压并进行统计学分析,探讨三者之间的相关性。结果:肝硬变失代偿期常见的5个证型依次为气滞湿阻证、湿热蕴脾证、肝脾血瘀证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证,TNF-α含量:气滞湿阻证湿热蕴脾证脾肾阳虚证肝肾阴虚证肝脾血瘀证,腹压:气滞湿阻证湿热蕴脾证肝肾阴虚证脾肾阳虚证肝脾血瘀证。血浆TNF-α和腹压分别进行统计学比较为:气滞湿阻证与湿热蕴脾证、肝肾阴虚证与脾肾阳虚证组间比较无统计学意义(P0.05),气滞湿阻证、湿热蕴脾证与肝肾阴虚证和脾肾阳虚证比较有统计学意义(TNF-α:P0.05,腹压:P0.01);肝脾血瘀证与其余四证两两比较有统计学意义(P0.01)。结论:血浆TNF-α和腹压在肝硬变失代偿期各证型中均有不同程度升高,肝脾血瘀证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证三证型升高较明显,肝脾血瘀证最明显,并且血浆TNF-α和腹压成正相关。     

产后抑郁症的中医证型和方药规律

目的:探求产后抑郁症(Postpartum Depression,PPD)的证型和临床用药规律。方法:通过对1996年1月至2016年8月中国期刊全文数据库收录的中医治疗PPD的临床研究,对文献中的证型、方剂以及药物出现频次和比例进行统计归类,对药物和症状进行聚类分析。结果:通过整理分析得出21个PPD证型,其中心脾两虚、肝气郁结、气虚血瘀、脾肾两虚、痰热郁结为常见证型;证型要素分析,肝郁、血瘀、气滞、痰湿、痰瘀为常见实性证型;心脾两虚、气虚、血虚、脾肾两虚、阴虚、气血两虚、肾虚为常见虚性证型;病位主要在心、肝、脾、肾四脏;共得方剂108首,其中自拟方59首,成方49首,两者以补益剂、理气剂、理血剂为主;整理中药139味,分为9类,柴胡、当归、党参、白芍等为常用药。结论:PPD的证型、选方和用药具有不同于其他时期抑郁症的特点,强调以疏肝理气、产后补虚为法,兼以注重对血的调养,同时注重对PPD患者心身的共同调整。     

从脾胃论治缺铁性贫血的探讨

从脾胃为气血生化之源的学说入手,探讨缺铁性贫血与血虚的相关性,血虚证的病因病机及治疗原则和健脾生血法治疗缺铁性贫血的临床运用。笔者认为缺铁性贫血属于中医血虚范畴,主要病机为气血两虚、脾胃虚弱,治疗上以健脾和胃、益气养血为原则。治疗缺铁性贫血,在补铁的基础上配合健脾生血法可以收获更好的临床疗效,并减轻补铁带来的不良反应。     

复发性口腔溃疡中医分型与临床因素的相关性研究

目的:探讨复发性口腔溃疡3种中医证型与免疫指标、血清微量元素、病程、饮食、便秘、失眠等临床因素的相关性。方法:对50例复发性口腔溃疡患者根据中医辨证分为心脾积热型、阴虚火旺型、气血亏虚型3组,检测患者的血清免疫球蛋白、血清补体及血清铁等指标,同时调查患者的病程、饮食习惯、有无失眠、有无便秘等情况,分析相关因素在3种中医证型的复发性口腔溃疡患者之间的差异性。结果 :复发性口腔溃疡气血亏虚组患者病程明显长于心脾积热组及阴虚火旺组(P﹤0.05);心脾积热组患者血清IgA水平明显高于阴虚火旺组及气血亏虚组(P﹤0.05);心脾积热组患者血清C3水平明显低于气血亏虚组(P﹤0.05);气血亏虚组患者血清Fe离子水平明显低于心脾积热组(P﹤0.05);心脾积热组及阴虚火旺组患者饮食失调情况较气血亏虚组明显严重(P﹤0.05);心脾积热组患者便秘病例数明显多于阴虚火旺组及气血亏虚组(P﹤0.05);3组患者血清IgG、IgM、C4水平无明显差异;3组患者失眠病例数相比无明显差异(P=0.282)。结论:3种中医证型的复发性口腔溃疡患者在病程、血清IgA、C3、Fe、饮食习惯、便秘史等方面存在差异性。     

代谢综合征中医证素的相关因素分析

目的探讨代谢综合征的中医证素与影响因素的关系。方法对1 054例体检者进行调查,采集其中206例符合代谢综合征诊断患者的四诊资料,应用"证素辨证"方法进行证素判断,同时对代谢综合征影响因素进行收集,采用二分类Logistic回归方法进行分析。结果所调查人群代谢综合征患病率为19.55%;代谢综合征中医证素出现的频率依次为:病位证素为脾>肝>肾>心>肺,病性证素为痰>阴虚>气虚>湿>热>血瘀。证素心与吸烟正相关;证素肝与情绪不佳正相关;证素脾与饮食不当正相关,与高学历负相关;证素肾与高学历负相关,与年龄正相关;证素痰与饮食不当正相关;证素阴虚与睡眠不佳和家族史正相关;证素热与饮食不当和家族史正相关;证素湿与吸烟正相关;证素气虚与年龄正相关,与运动负相关;证素血瘀与家族史正相关。结论代谢综合征证素构成以脾、肝、肾、痰、阴虚、气虚、湿多见,各证素具有不同的影响因素,对影响因素的干预是预防代谢综合征发生发展的途径之一。