黄芪治疗过敏性哮喘的实验研究

目的:观察扶正平喘中药对豚鼠哮喘发作的预防和治疗作用并探讨其作用机理.方法:48只豚鼠随机分成4组:正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、扶正平喘中药组.用鸡卵清蛋白(OVA)制成哮喘模型.地塞米松组和扶正平喘中药组分别于激发前3天灌药至激发后3天停药.计数外周血嗜酸细胞(EOS),观察肺切片中EOS的浸润情况.结果:哮喘组豚鼠外周血EOS明显增多,肺内支气管有大量的EOS浸润;地塞米松组、扶正平喘中药组豚鼠外周血EOS有不同程度增多,肺内支气管有不同量的EOS浸润,均少于哮喘组.结论:扶正平喘汤可降低外周血EOS,抑制肺内EOS浸润.具有类似肾上腺糖皮质激素样抗炎作用.     

扶正平喘汤对过敏性哮喘豚鼠NO、ET-1的影响术

目的探讨扶正平喘汤防治过敏性哮喘的机制。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、扶正平喘汤组，用鸡卵清蛋白雾化激发制成哮喘模型。地塞米松组与扶正平喘汤组分别于激发前3d给药，至激发后3d停药。用计数板计数外周血嗜酸性细胞（EOS）数量，观察小支气管形态学改变和肺组织中EOS浸润情况；生化法和放免法测定血清和肺泡灌洗液（BALF）中一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）的含量。结果扶正平喘汤可明显改善模型豚鼠小支气管损伤情况，减轻外周血和肺组织的EOS浸润程度，降低血清和BALF中NO的含量，降低BALF中ET-1的含量。结论扶正平喘汤可能通过减轻EOS浸润、调节机体NO和ET-1产生，对过敏性哮喘发挥预防和治疗作用。     

扶正平喘汤对过敏性哮喘豚鼠NO、ET-1的影响

目的探讨扶正平喘汤防治过敏性哮喘的机制。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、扶正平喘汤组,用鸡卵清蛋白雾化激发制成哮喘模型。地塞米松组与扶正平喘汤组分别于激发前3d给药,至激发后3d停药。用计数板计数外周血嗜酸性细胞(EOS)数量,观察小支气管形态学改变和肺组织中EOS浸润情况;生化法和放免法测定血清和肺泡灌洗液(BALF)中一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的含量。结果扶正平喘汤可明显改善模型豚鼠小支气管损伤情况,减轻外周血和肺组织的EOS浸润程度,降低血清和BALF中NO的含量,降低BALF中ET-1的含量。结论扶正平喘汤可能通过减轻EOS浸润、调节机体NO和ET-1产生,对过敏性哮喘发挥预防和治疗作用。     

五味地龙汤对哮喘豚鼠BALF中EOS和肺支气管组织形态学的影响

目的：观察五味地龙汤对实验性支气管哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞（EOS）的计数和肺、支气管组织形态学的影响。方法：用OVA腹腔注射及气道吸入激发建立哮喘豚鼠模型,对支气管肺泡灌洗液离心后计数BALF中EOS。光镜观察其肺支气管病理组织学变化。结果：①一般情况：哮喘模型组豚鼠均出现不同程度的呼吸次数增加、张口等呼吸困难症状,各药物组豚鼠OVA激发后,地塞米松组和五味地龙汤大剂量组没有出现明显不适症状。②BALF中EOS计数显示：各组与哮喘模型组EOS（15.57±1.51）个/mm3比较,差异均有非常显著的统计学意义（P〈0.01）。五味地龙汤大剂量组和地塞米松组与正常对照组EOS（0.83±0.75）个/mm3比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。哮喘性模型组BALF中EOS数明显增加。③光镜观察：模型组见支气管黏膜下层充血水肿,嗜酸性粒细胞灶状浸润,腔内可见部分粘液及渗出物。地塞米松组：气管及支气管管壁结构正常,无炎性渗出。五味地龙汤大剂量组：气管管壁结构逐渐恢复,炎症减轻,水肿明显消失。管腔炎性渗出物明显减少。结论：五味地龙汤可能通过减少气道EOS浸润,减轻炎性渗出,抑制杯状细胞和平滑肌增生,抑制气道重塑,从而发挥平喘的作用。     

柴朴汤对支气管哮喘豚鼠支气管肺组织中Bcl-2表达的影响

目的:观察中药柴朴汤对哮喘豚鼠支气管肺组织中Bc1-2表达的影响.方法:40只健康豚鼠随机分为正常对照组,哮喘模型组,地塞米松组(0.001 g·kg-1),柴朴汤组(0.35 g·kg-1),每组10只.采用卵蛋白腹腔注射和雾化吸入激发建立哮喘模型,各组豚鼠均于激发前30 min予相应灌胃处理,隔日1次,共7次.末次激发24h后,处死各组豚鼠.检测各组豚鼠血液中嗜酸性粒细胞数及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞(WBC)数,嗜酸粒细胞(EOS)数及百分比;HE染色法观察各组豚鼠支气管肺组织病理改变;免疫组化法检测支气管肺组织中Bcl-2蛋白表达,原位杂交法检测支气管肺组织中Bcl-2 mRNA的表达.结果:柴朴汤组外周血中EOS数,BALF中WBC敷、EOS数及百分比均较哮喘模型组明显降低(P＜0.05).与哮喘模型组比较,柴朴汤组支气管肺组织中Bcl-2 mRNA及蛋白的表达有显著性差异(P＜0.05).地塞米松组与柴朴汤组比较,无明显差异.结论:柴朴汤可以明显降低哮喘豚鼠外周血和支气管肺泡灌洗液中EOS,减轻支气管肺组织的炎症反应,下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平.     

佛手挥发油对支气管哮喘小鼠外周血、肺泡灌洗液及肺组织中嗜酸性粒细胞的影响

目的 观察支气管哮喘模型小鼠外周血、支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)的改变以及佛手挥发油对以上指标的影响.方法 Cs,小鼠以卵白蛋白(OVA)致敏造成哮喘模型,分为模型组,对照药物组,佛手挥发油高、中、低3个剂量组,另外10只为健康对照组,分别检测各组小鼠外周血、BALF中EOS的水平并观察肺组织病理切片中EOS的浸润情况.结果 模型组外周血、BALF与对照组比较,EOS均明显增加(P<0.01);肺组织病理切片显示支气管及血管周围大量EOS浸润,各佛手挥发油组与模型组相比外周血BALF中EOS均有不同程度下降,高剂量组差异尤为显著(P<0.01),各组肺组织病理切片中EOS浸润较模型组减少,剂量越大此作用越明显.结论 佛手挥发油可抑制哮喘小鼠外周血、BALF中EOS水平,减少肺组织EOS浸润,拮抗气道炎症而发挥平喘作用,作用强度与剂量有关.     

三拗汤加味对哮喘豚鼠肺内嗜酸细胞凋亡的影响

目的:观察三拗汤加味(SATJW)对哮喘豚鼠肺内EOS凋亡的影响.方法:60只豚鼠分为正常组、哮喘模型组、中药3个剂量组及博利康尼组,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿嘧啶缺口末端标记(TdT-mediated dUTPnick end labelling,TUNEL)技术原位标记细胞凋亡,计算机图像分析技术对气道壁EOS浸润和EOS凋亡进行定量检测,电镜观察BALF中凋亡细胞形态学改变.结果:哮喘模型组豚鼠支气管壁浸润显著增多.肺内凋亡细胞较少;各SATJW组EOS的浸润量较哮喘模型组有明显降低,凋亡较哮喘模型组明显.BALF中SATJW组电镜下见嗜酸性细胞染色质浓缩、边集、聚集在核膜周边.胞核发生固缩,胞膜皱缩等凋亡现象.结论:SATJW在哮喘发生过程中有诱导EOS凋亡的作用.     

复方辛夷口服液对实验性哮喘豚鼠气道炎症的影响

目的:观察中药疏风宣肺、利气平喘的复方辛夷口服液对实验性支气管哮喘豚鼠气道炎症的作用,并探讨其作用机理。方法:采用卵蛋白(OA)致敏豚鼠哮喘模型,60只豚鼠随机分为6组,空白组、模型组、阳性对照组、中药3个剂量组,分别观察引喘时间、肺组织病理学、支气管肺灌洗液(BALF)中嗜酸细胞(EOS)数目和凋亡情况。结果:复方辛夷口服液3个剂量组均能延长豚鼠引喘潜伏期,与模型组比较差异非常显著(P<0.01);模型组BALF细胞计数EOS量显著增高,中药组各剂量组BALF中EOS数均少于哮喘组(P<0.05~0.01)。模型组支气管黏膜轻度水肿,部分支气管内皱褶减少伴部分上皮脱落,支气管壁、管周及肺泡区见炎细胞浸润,其中较多嗜酸细胞浸润,支气管壁增厚;电镜见模型组细支气管破坏,肺泡Ⅱ型细胞变性,肺泡内EOS浸润。中药各剂量组以上改变显著较轻,见BALF中EOS凋亡。结论:疏风宣肺、利气平喘可以减轻哮喘的气道炎症,其作用与抑制嗜酸细胞浸润、促进嗜酸细胞凋亡有关。     

复方辛夷平喘液对哮喘豚鼠肺内LCA及淋巴细胞Fas表达的影响

目的：观察中药复方辛夷平喘液对实验性哮喘豚鼠肺内LCA及淋巴细胞Fas表迭的影响,探讨中药治疗哮喘的机理。方法：实验设空白组、哮喘模型组、中药3个荆量组及时照组。免疫姐化法检测豚鼠肺内LCA．流式细胞仪检测外周血淋巴细胞Fas表达。结果：(1)免疫组化见模型组肺泡内有阳性细胞,支气管壁及管用见较多阳性细胞．较空白组明显增高;复方辛夷平喘液各组阳性表达较空白组高,但低于模型组：(2)哮喘模型组淋巴细胞的fas表达较空白对照蛆下降明显(P＜0．01),复方辛夷平喘液各组fas表达水平较模型组均显著提高(P＜0．01)。结论：哮喘豚鼠存在肺内LCA高表达、血淋巴细胞fas低表达;复方辛夷平喘液下调LCA表达、上调Fas表达可能是其控制哮喘的作用途径之一。     

通肺平哮汤对哮喘豚鼠模型肺组织形态学的影响

目的 观察通肺平哮汤对哮喘豚鼠模型肺组织形态学的影响.方法 健康Hartley系豚鼠40只,随机分为空白对照组,病理模型组,地塞米松组,通肺平哮汤组各10只.采用OVA腹腔注射及气道吸入激发建立哮喘豚鼠模型,观察实验过程中哮喘豚鼠的一般情况及光镜下肺组织形态学变化.结果 哮喘模型组豚鼠均出现不同程度的呼吸频率加快、幅度增加、张口等呼吸困难症状,豚鼠OVA激发后,地塞米松组和通肺平哮汤组没有出现明显不适症状,一般情况明显优于模型组;光镜下观察:病理模型组见支气管黏膜下层充血水肿,嗜酸性粒细胞灶状浸润,腔内可见部分粘液及渗出物.地塞米松组:气管及支气管管壁结构正常,无炎性渗出.通肺平哮汤组:气道炎症细胞明显减少,管壁水肿明显消失,管腔炎性渗出物明显减少,支气管平滑肌无明显肥厚.结论 通肺平哮汤可改善支气管上皮损伤、粘液腺增生等病理改变而发挥治疗作用.     

三氧化二砷对哮喘豚鼠肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3表达的影响

目的：观察三氧化二砷对支气管哮喘豚鼠模型肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3表达的影响，探讨三氧化二砷治疗哮喘的可能机制。方法：健康雄性豚鼠40只随机分成对照组（A组）、哮喘组（B组）、As2O3治疗组（C组）、地塞米松治疗组（D组），每组10只。B、C及D组以卵白蛋白（OVA）作为抗原腹腔内注射联合雾化吸入复制哮喘模型，末次激发后24h处死豚鼠，制备豚鼠肺组织病理标本，苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织炎症改变；免疫组化检测CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3在肺组织中的表达。结果：（1）哮喘组肺组织CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3的阳性细胞数明显增加；（2）As2O3治疗组及地塞米松治疗组肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达相对于哮喘组均有不同程度的减轻，差异均有统计学意义。结论：哮喘豚鼠肺组织中CD34^＋祖细胞、Eotxin及CCR3表达增强。As2O3通过下调肺组织中CD∥祖细胞、Eotaxin及CCR3的表达水平，发挥其抗EOS性气道炎症的作用。     

扶正平喘颗粒对致敏小鼠哮喘的药效评价

目的 :观察扶正平喘颗粒的平喘作用。 方法 :采用卵清蛋白致敏喷雾法观察平喘作用。 结果 :扶正平喘颗粒能明显延长哮喘小鼠的引喘潜伏期,减少外周血嗜酸性粒(EOS)细胞的计数及肺组织组胺的释放。 结论 :扶正平喘颗粒具有明显的平喘作用且能降低哮喘小鼠外周血EOS细胞数及明显抑制肺组织组胺的释放。     

玻璃苣醇提取物对实验性哮喘豚鼠平喘作用机制的研究

目的：观察玻璃苣醇提取物对实验性哮喘豚鼠平喘作用机制的实验研究。方法：将48只健康SPF级豚鼠随机分为空白组,模型组,地塞米松组,玻璃苣醇提取物高、中、低剂量组,灌胃给药,每日1次,连续7天,同时每天均于给药后30min,以组织胺激发诱喘。取肺灌洗液测定其一氧化氮（NO）含量,嗜酸性粒细胞（EOS）数目,干扰素-γ（IFN-γ）,白细胞介素-4（IL-4）含量并计算其比值。结果：玻璃苣醇提取物使豚鼠肺灌洗液中EOS数目下降,NO浓度下降,IFN-γ含量升高,IL-4含量下降,比值升高。结论：玻璃苣醇提取物降低EOS在肺部的聚集,促进哮喘大鼠体内干扰素IFN-γ分泌和抑制IL-4表达,从而延长哮喘的潜伏期和降低支气管高反应性,达到治疗目的。     

“平喘汤”对哮喘大鼠肺组织EOS凋亡及Bax蛋白表达的影响研究

目的:观察平喘汤对哮喘大鼠肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡及Bax蛋白表达的影响,探讨平喘汤治疗哮喘的相关机制。方法:SD大鼠随机分为模型组、地塞米松组、正常组和平喘汤低、中、高剂量组。除正常组,其余各组大鼠以卵清蛋白(OVA)致敏、激发制备哮喘大鼠模型。于第1次哮喘激发(造模第21天)开始各组连续灌胃给予相应药物或生理盐水14d。观察各组大鼠一般状况、肺组织病理形态,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)测定肺组织EOS原位表达;免疫组化法(Western blot)检测Bax蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织有明显的病理变化,肺组织EOS呈强阳性表达(P0.01),Bax蛋白表达量明显减少(P0.01)。经药物干预后,各治疗组哮喘症状有所减轻,肺组织病理变化呈不同程度的改善。各治疗组大鼠肺组织EOS表达明显低于模型组(P0.01或P0.05),Bax蛋白表达明显高于模型组(P0.01或P0.05),其中平喘汤高剂量与地塞米松改善效果更为明显,且其改善效果相当。结论:平喘汤能够通过促进Bax蛋白表达,诱导EOS凋亡以减少肺组织炎性细胞浸润,进而缓解哮喘气道炎症。     

定喘穴穴位注射对哮喘豚鼠GM—CSF mRNA表达干预作用的研究

目的：探讨穴位注射对哮喘豚鼠粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF mRNA）基因表达及嗜酸性粒细胞（EOS）的干预作用。方法：采用卵蛋白（OVAV）致敏和激发哮喘豚鼠模型，分5组。采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测哮喘豚鼠及各对照组肺组织中GM—CSF mRNA表达变化。结果：穴位注射可有效抑制哮喘肺组织中GM—CSF mRNA的表达，有效抑制EOS的浸润，减轻气道炎症。结论：哮喘豚鼠支气管肺组织GM—CSF mRNA高表达可能在气道炎症中发挥重要作用。     

平喘方对支气管哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的实验研究

目的通过研究哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的影响,探索平喘方防治支气管哮喘的作用机制。方法通过对BALB/C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘小鼠模型。150只BALB/C小鼠随机分为5组,在激发哮喘7d、14d、21d时,用双抗体夹心ABC-ELISA法检测外周血和BALF中巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）水平,直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86＋、CD3-CD86＋细胞百分率,观察肺组织病理学改变。结果哮喘激发7d：各治疗组外周血和BALF中MIP-1α水平、CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0.01）;外周血CD3-CD86＋细胞百分率明显均明显低于模型组（P〈0.01）;哮喘激发14d：各治疗组外周血和BALF中CD3-CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0.01）;平喘方常规剂量组、地塞米松组外周血和BALF中MIP-1α水平均明显低于模型组（P〈0.01）;哮喘激发21d：各治疗组外周血和BALF中MIP-1α水平、CD3-CD86＋细胞百分率均明显低于模型组（P〈0.01）。肺组织病理显示,各治疗组细支气管壁结构完好,管腔内少量炎性渗出物,管周少量炎细胞浸润。肺组织胶原染色图像分析显示,各治疗组面积与光密度乘积较模型组明显减少（P〈0.01）。结论平喘方能显著降低MIP-1α水平、下调CD86分子表达、减轻气道黏膜上皮损伤,减少气道炎细胞浸润,减轻支气管壁及周围间质充血、水肿,具有减轻哮喘发病症状,改善哮喘气道炎症的作用。     

哮喘大鼠肺组织中EOS、NEU的变化及苗药热咳喘胶囊的干预作用

目的:观察哮喘大鼠肺组织中EOS、NEU的变化及苗药热咳喘胶囊的干预作用,探讨其防治哮喘的作用机制。方法:将40只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组及苗药热咳喘胶囊组;模型组、地塞米松组及苗药热咳喘胶囊组采用腹腔注射1%卵蛋白(OVA)方法建立哮喘模型,正常组与模型组第15天开始每次激发前1h予生理盐水3mL灌胃,连续7d,地塞米松组第15天开始每次激发前1h予醋酸地塞米松注射液50μg/mL 3mL腹腔注射,疗程为两周;苗药热咳喘胶囊组第15天起每次激发前1h予热咳喘胶囊2.10g/kg灌胃,疗程为两周;观察肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)浸润情况及计算EOS数量。结果:肺组织中正常组未见炎症细胞浸润;模型组见大量EOS、NEU浸润;苗药热咳喘胶囊组与地塞米松组见极少量EOS、NEU浸润,其中EOS计数,与正常组比较,模型组、苗药热咳喘胶囊组、地塞米松组均高于正常组,具有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,苗药热咳喘胶囊组、地塞米松组均低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05)。     

麻枳清肺对豚鼠过敏性哮喘的影响

目的：通过建立过敏性哮喘豚鼠模型,观察麻枳清肺（MZQF）对豚鼠过敏性哮喘模型的平喘作用。方法：腹腔注射含有150ugOVA和lOOg氢氧化铝的生理盐水1ml致敏,第7天,第14天分别再次致敏,第16天开始用1．5％OVA激发4次,建立豚鼠过敏性哮喘模型。观察MZQF对哮喘豚鼠引喘潜伏期,血液及支气管肺泡灌洗液中白细胞总数,嗜酸粒细胞百分率的影响以及豚鼠肺组织病理学组织的改变。结果：MZQF可以延长豚鼠的引喘潜伏期,减少哮喘豚鼠血液及肺泡灌洗液中白细胞总数,嗜酸粒细胞百分率,可减轻肺组织病理改变。结论：MZQF对豚鼠过敏性哮喘具有一定的治疗作用,具有平喘作用。     

甘利欣注射液对哮喘大鼠支气管和肺组织形态及嗜酸粒细胞数的影响

目的:观察甘利欣注射液对哮喘大鼠支气管和肺组织形态及嗜酸粒细胞(EOS)数的影响,探讨甘利欣注射液干预哮喘气道炎症的作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、地塞米松治疗组、大、中、小剂量甘利欣治疗组,每组10只,采用卵蛋白制作大鼠哮喘模型。各组给药2周后检测各组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液中EOS数,观察支气管和肺组织的病理形态改变。结果:模型对照组EOS数明显高于正常对照组(P<0.05),支气管上皮损伤及基底膜增厚明显。与模型对照组比较,地塞米松治疗组与大、中剂量甘利欣治疗组均可不同程度的下调EOS数,支气管上皮损伤及基底膜增厚明显减轻。小剂量甘利欣治疗组则无此作用。结论:甘利欣注射液治疗哮喘气道炎症的作用机制可能与减少EOS对肺组织的浸润有关。     

复方川贝颗粒对OVA介导的豚鼠过敏性哮喘模型的平喘作用机制研究

目的:探讨复方川贝颗粒对豚鼠哮喘模型的平喘作用机制.方法:70只豚鼠,随机分为7组,每组10只,雌雄各半,即模型组,复方川贝颗粒(0.67,1.34,2.68)g·kg-1组,二陈丸组(2.325 g·kg-1),地塞米松组(9.30×10-4 g·kg-1),正常对照组;试验开始第1天,豚鼠ip10％卵白蛋白(OVA)生理盐水溶液致敏,致敏后第13天灌胃给药,每日1次,给药7d,各组均按体重ig,模型组和正常对照组给予等容积蒸馏水,15 d后用1％卵白蛋白生理盐水溶液激发5次,每日1次,建立豚鼠过敏性哮喘模型,观察复方川贝颗粒对哮喘豚鼠血清中血栓素B2(TXB2)、白三烯B4(LTB4)的含量、哮喘潜伏期及肺部病理切片嗜酸粒细胞(EOS)计数.结果:与正常对照组比较,模型组豚鼠血清中的TXB2,LTB4含量明显升高(P＜0.01),EOS明显增多(P＜0.01).与模型组比较,复方川贝颗粒(1.34,2.68 g·kg-1)均能降低哮喘豚鼠血清中的TXB2,LTB4含量(P ＜0.05,P＜0.01);复方川贝颗粒(0.67,1.34,2.68 g·kg-1)剂量均能减少哮喘豚鼠小气道周围EOS总数(P＜0.01),延长豚鼠哮喘潜伏期(P ＜0.05,P＜0.01).结论:复方川贝颗粒对OVA介导的豚鼠过敏性哮喘模型的平喘作用机制与调节血清炎性介质和减少EOS浸润有关.