至生胶囊对人食管癌细胞Eca-109侵袭作用的影响

目的：探讨人食管癌细胞Eca-109对重组基底膜的侵袭作用及至生胶囊对其侵袭能力的影响。方法：取12只健康日本大耳白兔,随机分为至生胶囊高剂量组、低剂量组、复方斑蝥胶囊对照组、生理盐水空白组4组,每组3只,连续给药3d,末次给药后2h内分别从耳中央动脉无菌采血,制备含药血清,采用Transwell细胞培养小室建立人肿瘤细胞体外侵袭模型,光学显微镜观察侵袭细胞的相对数目来表示肿瘤细胞的侵袭能力。结果：至生胶囊高剂量组、低剂量组对人食管癌细胞Eca-109有明显的抑制作用,与对照组、空白组比较,组间有显著性差异（P〈0.05）。结论：至生胶囊能明显抑制人食管癌细胞Eca-109对重组基底膜侵袭能力。     

“通膈汤”含药血清对食管癌细胞增殖和凋亡的影响研究

目的:观察中药复方通膈汤含药血清对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响。方法:将大鼠分为空白血清组和通膈汤低、中、高剂量组,分别灌胃给予蒸馏水和通膈汤不同剂量水溶液。连续灌胃10d后,腹主动脉取血,离心并收集血清。食管癌Eca-109细胞培养,经消化、计数,制成细胞悬液,接种,置于培养箱中,每孔加入含相应浓度含药血清的培养基。CCK-8法(CCK试剂盒)检测通膈汤含药血清对Eca-109细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测含药血清对Eca-109细胞周期和凋亡的影响,细胞黏附试验和transwell(转移)侵袭试验检测含药血清对细胞黏附能力及侵袭能力的影响。结果:10%和20%通膈汤各剂量含药血清对Eca-109细胞的增殖有明显抑制作用,该作用随时间延长而增强。20%通膈汤低、中剂量含药血清组细胞G1期(DNA合成前期)比例明显高于空白血清组(P0.05),G2+S期(DNA合成期+DNA合成后期)比例明显低于空白血清组(P0.05)。与空白血清组比较,20%通膈汤各剂量含药血清组细胞凋亡率显著增大。20%、10%、5%含药血清能显著降低Eca-109细胞的黏附能力及侵袭能力。结论:通膈汤含药血清可以抑制食管癌Eca-109细胞增殖,诱导其凋亡并降低细胞黏附及侵袭能力。     

至生胶囊调节食管癌造模大鼠细胞凋亡及Fas, FasL蛋白表达的研究

目的:观察至生胶囊对食管癌造模大鼠细胞凋亡及Fas,FasL蛋白表达的影响,从分子生物学角度分析其作用机制。方法:选用健康Wistar大鼠,除空白组外,其余大鼠均ip甲基戊基亚硝胺(MANA)5 mg.kg-1,1次/周,连续18周造模。末次注射后将造模大鼠随机分为模型组、至生胶囊高(0.75 g.kg-1)、中(0.5 g.kg-1)、低(0.25 g.kg-1)剂量组、西药替加氟组(20 mg.kg-1),ig,1次/d,连续4周。原位末端标记法(TUNEL)检测对食管癌癌细胞凋亡的促进作用;免疫组化法检测大鼠食管细胞中Fas,FasL蛋白的表达。结果:至生胶囊可明显促进食管癌细胞的凋亡,高、中、低剂量组、化疗组均促进凋亡,与模型组比较均有统计学意义(P<0.05),高、中剂量组疗效明显优于化疗组、低剂量组(P<0.05),且呈一定量效关系。各药物治疗组Fas表达阳性率均有不同程度的升高,FasL表达阳性率均有不同程度的降低。结论:至生胶囊能促进食管癌细胞凋亡,其作用机制可能与其提高Fas表达、降低FasL表达有关;至生胶囊促进食管癌细胞凋亡及调节Fas,FasL表达的作用存在一定的量效关系,至生胶囊高剂量此种作用优于替加氟。     

苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖抑制及其机制研究

本研究采用MTT法检测苦参素在体外对人食管癌Eca-109细胞增殖率的影响、采用流式细胞术检测对细胞周期的影响,探讨苦参素对人食管癌Eca-109的增殖抑制作用,为苦参素应用于食管癌治疗提供实验依据.     

姜黄素对人食管癌耐药细胞逆转作用的实验研究

目的研究姜黄素对食管癌耐药细胞的作用及作为食管癌多药耐药逆转剂的可能性。方法采用20、40、80μmol/L姜黄素作用体外培养Eca-109/Taxol细胞及Eca-109细胞,倒置显微镜观察姜黄素对Eca-109/Taxol细胞作用的形态变化,CCK-8法检测姜黄素对两种细胞的增殖抑制率并计算姜黄素的逆转效应。流式细胞术检测姜黄素对Eca-109/Taxol细胞的凋亡率及测定罗丹明123在癌细胞内的蓄积。采用全自动酶标仪检测Caspase-3活性、免疫细胞化学法检测P-gp在癌细胞中的表达。结果 Eca-109/Taxol细胞经不同浓度姜黄素作用后,细胞生长变慢、细胞变圆,部分细胞悬浮于培养液中。随着姜黄素浓度的增高,对Eca-109/Taxol细胞生长抑制作用逐渐增强。姜黄素对Eca-109/Taxol细胞具有明显的耐药逆转作用,10μmol/L姜黄素逆转2.50倍,40μmol/L姜黄素逆转6.83倍,且在一定浓度范围内呈剂量依赖性。姜黄素与低浓度Taxol联合应用,可使Eca-109/Taxol细胞中Caspase-3活力提高。流式细胞仪检测显示,随姜黄素浓度的增加,癌细胞的凋亡率逐步增高,20μmol/L姜黄素作用24 h后凋亡率为(13.6±1.3)%,80μmol/L姜黄素凋亡率为(43.5±1.6)%,组间比较,差异有统计学意义(P0.01),同时可使Eca-109/Taxol细胞内Rho123的蓄积增高(P0.01);20μmol/L姜黄素对Eca-109/Taxol细胞作用24 h可明显抑制P-gp在Eca-109/Taxol细胞中的表达。结论姜黄素对Eca-109/Taxol细胞生长具有抑制作用,可以较强地逆转癌细胞对Taxol耐药性,可能是食管癌临床化疗中较好的耐药逆转药物。     

豆根管食通口服液对人食管癌细胞端粒酶活性影响的实验研究

目的 观察豆根管食通口服液体外对Eca-109细胞毒性及端粒酶活性的影响,从细胞分子水平探讨该药的作用机制.方法 实验选择人Eca-109细胞株,采用MTT分析法,测定不同浓度豆根管食通口服液单用及与5-氟脲嘧啶(5-Fu)合用对Eca-109细胞的直接细胞毒作用;采用端粒重复序列扩增法(TRAP)、酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测端粒酶的活性变化.结果 ①豆根管食通口服液对Eca-109细胞的细胞毒作用:MTT结果显示对Eca-109细胞的生长有明显的抑制作用,各实验组与正常对照组OD值的差异有统计学意义,且在一定的浓度范围内存在剂量依赖性.②豆根管食通口服液对Eca-109细胞端粒酶活性的影响采用TRAP-PCR-ELISA法检测端粒酶活性, 1倍及2倍的IC50豆根管食通口服液与对照组相比存在非常显著性差别;24 ～72 h各实验组和端粒酶阳性对照组相比均有非常显著性差异(P﹤0.01);3个剂量中药培养食管癌Eca-109细胞至相同时间段,其端粒酶活性表达显示出一定的量效关系,在0.5倍至2倍IC50之间,呈现出正相关.结论①豆根管食通口服液在体外具有明显抑制Eca-109细胞的作用,与药物浓度呈正相关;②在一定的浓度范围内豆根管食通口服液可下调Eca-109细胞的端粒酶活性;③抑制端粒酶活性可能是豆根管食通口服液的抗癌机制之一.     

苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖抑制及其机制研究

本研究采用MTT法检测苦参素在体外对人食管癌Eca-109细胞增殖率的影响、采用流式细胞术检测对细胞周期的影响,探讨苦参素对人食管癌Eca-109的增殖抑制作用,为苦参素应用于食管癌治疗提供实验依据。1材料与方法1·1材料1·1·1细胞株人食管癌细胞株Eca-109由郑州大学公共卫生学     

藤梨根提取物对人食管癌细胞生长抑制作用的研究

观察藤梨根正丁醇提取物对培养的人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,探讨藤梨根对人食管癌细胞的作用机制。方法:MTT比色法检测藤莉根正丁醇提取物在不同浓度(1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml)及不同时间(24 h、48 h、72 h)对Eca-109细胞生长抑制作用,TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应。结果:藤梨根正丁醇提取物对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达到87.2%。同时,提取物对瘤细胞有明显的凋亡效应,而在对照组,未见有明显凋亡现象。结论:藤梨根正丁醇提取物能有效抑制人食管癌Eca-109细胞生长。     

基于内质网应激通路探讨α-细辛醚对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制作用

目的:基于内质网应激通路探讨α-细辛醚诱导人食管癌Eca-109细胞增殖抑制作用及其相关机制。方法:采用MTT法检测α-细辛醚对Eca-109细胞的增殖抑制情况;荧光定量PCR技术检测内质网应激通路相关基因Caspase-4和GRP78 mRNA的表达情况;Western Blot检测Caspase-4和GRP78蛋白表达水平。结果:α-细辛醚可显著抑制Eca-109细胞增殖,并具有一定的剂量时间反应关系;α-细辛醚不同剂量(25μg/ml、50μg/ml)分别作用24h、48h后Caspase-4 mRNA和蛋白的表达减少,GRP78 mRNA和蛋白的表达增加。结论:α-细辛醚对人食管癌Eca-109细胞的增殖具有抑制作用,并呈现明显的剂量时间反应关系,其机制可能是通过上调GRP78,下调Caspase-4的表达实现的。     

蒙药沙日胶囊药效学研究

目的:通过体内、体外实验研究沙日胶囊药效学。方法:采用体外抑菌和体内抗菌的试验,观察沙日胶囊对相关菌种抑制作用;对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌感染小鼠的保护作用,以及对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌所致家兔体温升高的影响,同时观察了对鹿角菜所致大鼠足踝关节肿胀的影响。结果:体外实验表明,沙日胶囊对变形杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌等有较强的抑菌作用;体内实验表明,沙日胶囊0.75g/kg和1.5g／kg剂量组均对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌感染小鼠有明显保护作用(P<0.05),沙日胶囊1.5g／kg剂量组对感染金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌家兔体温升高有明显抑制作用。沙日胶囊对1％0.05ml鹿角菜所致大鼠足踝关节肿胀有明显缓减作用。结论:沙日胶囊有较强的抗菌作用。     

浅议影响小儿头皮静脉穿刺的因素

头皮静脉穿刺是儿科护士必备的技术，其成功率的高低直接危机患儿的痛苦乃至生命，掌握这门过硬的技术，尽量做到一针见血，是儿科护士的天职，也是衡量合格护士的标准之一。本人从事儿科护理工作已多年，现将这方面的体会做一报告。     

对《伤寒论》与《温疫论》的再思考

通过分析伤寒与温疫的证治特点、《伤寒论》与《温疫论》的篇章结构、张仲景与吴又可所处的时代背景,以及现代医学对出血热与鼠疫的认识,梳理热病证治的发展历史与脉络。     

基于《伤寒论》引发古代伤寒学派思考

《伤寒论》这一中医经典著作,指导临床,疗效显著,活人无数,尤其是对外感热病的发展影响颇深.伤寒学派是以研究或阐述张仲景《伤寒论》辨证论治及理法方药为中心的医学学术群体,该学派学术璀璨,连绵千年.现就以古代此派的形成、发展、争鸣3个阶段进行初步探析,认为其形成于晋唐,发展于宋元,争鸣于明清.     

百年以来《伤寒论》理论研究述评(之二)

从中华人民共和国建立到文化大革命爆发的近20年间,是新时期仲景学说研究队伍的形成———发展期。在这一时期,对《伤寒论》原著的注释和校正工作,揭开了新中国教材编写的序幕;对《伤寒论》中一些有代表性问题或关键性字词的考订,是一个特点;对《伤寒杂病论》方法论的研究,也是这一时期出现的新特点。此外,这一时期,对六经的研究逐渐深入;对方证的研究仍是热门话题;对伤寒方中用药规律的研究出现热潮;对张仲景治疗方法原理的研究开始活跃;比较性研究热度不减;专题性研究渐成趋势。     

百年以来《伤寒论》理论研究述评(之一)

近百年来,公开发表的研究《伤寒论》的学术论文约3万篇,内容涉及张仲景生平事迹、《伤寒论》版本传承、《伤寒论》学术思想和临床应用研究等多个方面。民国时期是近代仲景学术研究的萌芽——发动期,这一时期的文章具有以下时代特点:①期刊和作者群有明显的地域和社团性;②体现了中西医结合的研究方向;③研究空间不断扩大;④学术争鸣空前活跃。     

基于效应的针刺穴位组学研究思考

根据“穴位组学概念”的提出,针对针刺机理进行深入研究。目的在于揭示针刺的生物学基础,阐明针刺的科学性,并对相关针刺处方进行优化,围绕临床针刺治疗手段中的关键技术进行标准化与规范化研究,实现针刺科学机理转化为实际应用,从而更好的服务于临床。     

中药蛇床子的研究进展

概述近年来有关蛇床子的化学成分、药理作用和临床应用和研究进展。     

艾灸足三里对胃黏膜病变的作用机制研究

艾灸足三里在脾胃病的临床疗效肯定,其机制研究也随着现代医学的发展不断完善。大量研究证明,艾灸足三里促进胃黏膜修复的信号传导是通过神经实现的,其作用机制是系统而复杂的,既可以直接调节胃肠内分泌激素的水平,也可以作用于胃黏膜损伤的信号传导途径上。因此,艾灸足三里对于各种原因引起的胃黏膜病变及病变的各个阶段都有一定作用,且作用机制不尽相同。据现有研究,对未来艾灸足三里的机制研究进行展望。     

腧穴热敏化艾灸疗法治疗压疮的疗效观察

目的:观察腧穴热敏化艾灸对压疮患者的治疗护理效果。方法:对Ⅰ、Ⅱ期压疮患者治疗组采用腧穴热敏化艾灸治疗,每次灸至感传现象消失,每日1次。对照组不避热敏化穴,在患者压疮部位附近穴区采用红外线照射40min后,将百多邦软膏敷于压疮疮面,以无菌纱布覆盖,每日1次。两组同时加强专科护理措施,并在疗程(包括不足7d痊愈者)结束后统计疗效。结果:治疗组和对照组有效率分别为100%、72.4%。二者有显著差异(P<0.05)。结论:腧穴热敏化艾灸疗法对压疮患者疗效明显,值得推广应用。     

追源欲求真伤寒——评《宋以前伤寒论考》

《宋以前伤寒论考》是日本汉方现代医家研究《伤寒论》的成果。是书既重视古代文献的梳理,又结合临床的诊疗实际,考据宋以前的《伤寒论》,提出时态系列伤寒论、痰饮伤寒论、阳明病胃家寒及《金匮要略》杂病是伤寒的伴随症状等很多独到见解,对我国的《伤寒论》研究有启发作用。