桑螵蛸炮制前后蛋白质和多糖及脂类成分比较

目的:比较桑螵蛸炮制前后蛋白质提取率及多糖和脂类的含量差异。方法:采用考马斯亮蓝法测定桑螵蛸生制品蛋白质提取率,硫酸苯酚法和减重法分别测定桑螵蛸生制品中多糖和总脂的含量,抗坏血酸-钼蓝光度法测定磷脂的含量,并进行分析对比。结果:蛋白质提取率和多糖含量均为生品盐炒品蒸品,总脂含量为蒸品盐炒品生品,磷脂含量生品蒸品盐炒品。结论:桑螵蛸经过盐炒和蒸制后,蛋白质提取率以及多糖和磷脂含量均下降,总脂含量升高。     

基于SDS-PAGE技术的不同水蛭炮制品中水溶性蛋白的差异性研究

目的考察不同水蛭炮制品中水溶性蛋白的差异性。方法制备水蛭样品;采用考马斯亮蓝法测定水溶性蛋白质含量;SDS-PAGE法比较各样品中的蛋白的种类和丰度差异性;以生物检定技术为基础,检查水蛭及其炮制品的抗凝血酶活性。结果所用水蛭及其炮制品的抗凝血酶活性有明显差异;SDS-PAGE结果表明水蛭及其炮制品的蛋白种类、含量皆有明显差异。结论不同炮制方法中,动物药水蛭水溶性蛋白的含量差异明显,传统的高温炮制方法使水蛭中蛋白质发生了降解,其高温炮制的科学内涵有待深入的研究。     

珍珠母不同炮制品对小鼠抗抑郁作用研究

目的研究珍珠母生品、烘烤品、超微粉对小鼠的抗抑郁作用。方法采用小鼠悬尾实验研究珍珠母不同炮制品的抗抑郁作用。结果在小鼠悬尾实验中,珍珠母生品高剂量组,烘烤品低剂量组、中剂量组和高剂量组,超微粉低剂量组、中剂量组和高剂量组均能减少小鼠悬尾的完全不动时间;在AMPT诱导的小鼠悬尾实验中,珍珠母不同炮制品高剂量组均能减少小鼠悬尾完全不动时间。结论珍珠母有一定的抗抑郁作用。     

珍珠母镇静催眠作用及其不同炮制品对小鼠脑内5-羟色胺浓度的影响

目的探讨珍珠母的镇静催眠作用及其不同炮制品对小鼠5-羟色胺(5-HT)浓度的影响。方法腹腔注射PCPA,观察其对小鼠的催眠作用;ELISA法测定小鼠脑干匀浆液中5-HT的浓度。结果珍珠母的生品、烘烤品和超微粉品均能减少小鼠自主活动的次数,延长小鼠睡眠的时间,能够增加小鼠脑干内5-HT浓度,其中超微粉作用最强。结论珍珠母具有镇静、催眠作用,其作用机制与增加小鼠脑干内5-HT浓度有关。     

野生全蝎粉可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析研究

目的:探索野生全蝎粉水溶性蛋白质SDS-PAGE电泳的最佳分离条件,测定各蛋白质的大体分子量。方法:采用55%乙醇提取,75%以上乙醇沉淀的方法获得全蝎粉水溶性蛋白质,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量,SDS-PAGE法和Quantity one软件测定全蝎粉水溶性蛋白质的相对分子量。结果:全蝎粉水溶性蛋白质的含量为4.649 mg/mL;得到较好全蝎粉可溶性蛋白质的7条电泳谱带,相对分子质量分别为70.447,64.730,54.139,40.832,29.939,26.494,19.172 kDa。结论:这7条全蝎粉水溶性蛋白质的特征谱带可用于全蝎粉水溶性蛋白质的种类鉴别。     

动物药僵蚕高温麸炒的科学合理性

该研究旨在通过比较僵蚕麸炒前后总蛋白含量的差异及炒制后黄曲霉素限量的变化,探究动物药僵蚕高温炮制的科学合理性。采用考马斯亮蓝法测定水溶性蛋白质含量;SDS-PAGE法比较僵蚕生品及麸炒僵蚕的蛋白质差异性;柱前衍生-高效液相色谱法对样品中黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂进行限量检查。结果显示生僵蚕的水溶性蛋白质质量分数为(47.065±0.249) mg·g^-1,麸炒僵蚕的水溶性蛋白质质量分数为(29.756±1.961) mg·g^-1;生僵蚕的蛋白质电泳条带和麸炒僵蚕的电泳条带皆约为6条。在 31.90,26.80,18.71,15.00 kDa左右分别有一个蛋白片段,生品丰度大于麸炒品;而在10.18,8.929 kDa处条带麸炒品明显深于生品,即麸炒品蛋白丰度大于生品,推测可能是部分蛋白质降解为小分子多肽所致。生品中黄曲霉毒素G1,B1,G2,B2的质量分数分别为0.382,0.207,0.223,0.073 μg·kg^-1,而麸炒僵蚕中未检出。以上结果表明动物药僵蚕经过高温麸炒,蛋白质含量下降。这与炮制缓和药性的目的相吻合,而且僵蚕在麸炒过程中,通过炮制辅料的作用,毒性成分黄曲霉毒素完全被吸附,未检出毒性成分,增加了药材的安全性。麸炒僵蚕作为一种传统的炮制方法,具有科学合理性。     

鹿茸商品药材中水溶性蛋白质的含量分析

目的:建立鹿茸药材中水溶性蛋白质含量测定方法,以评价鹿茸商品药材的质量。方法:采用低温水提取,考马斯亮蓝显色,分光光度法分别测定鹿茸不同商品药材中水溶性蛋白质的含量。结果:样品中水溶性蛋白质的含量以牛血清蛋白计在10.84～54.2μg范围内具有良好线性关系,回归方程为Y=0.0111X+0.1372(r=0.9991)。结论:采用考马斯亮蓝比色法,测定鹿茸商品药材水溶性蛋白质的含量,方法简便、可靠,可作为鹿茸药材质量控制的方法。     

用考马斯亮蓝测定动物药材中可溶性蛋白质含量方法初探

目的探讨考马斯亮蓝法用于测定动物药材中可溶性蛋白质含量的稳定性研究。方法采用紫外分光光度法,以蟾蜍干体为原料,牛血清白蛋白为对照,在595nm处测定蛋白质与考马斯亮蓝结合复合物的吸光值。结果实验表明,吸光度和蛋白含量间具有良好的线性关系(r=0.996),样品在10min内测定稳定(RSD=5.0%)。结论本方法可靠、简单、快速。     

凯氏定氮法和考马斯亮蓝法测定方格 星虫多糖中蛋白质的含量

目的: 建立一种快速、简单、准确测定方格星虫多糖中蛋白质含量的方法。方法: 分别采用凯氏定氮法和考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,并进行稳定性、精密度、重复性和回收率测定。结果: 凯氏定氮法和考马斯亮蓝法测定方格星虫多糖中蛋白的含量分别为2.40%,2.22%,其回收率分别为98.69%,100.97%,2种方法测得蛋白质含量基本相同,无显著性差异(P>0.05)。结论: 综合考虑,凯氏定氮法简便、快速、准确,可用于方格星虫多糖中蛋白质的质量控制。     

舒血宁注射液中蛋白质的含量测定研究

目的:测定舒血宁注射液中蛋白质的含量。方法:采用考马斯亮蓝法测定舒血宁注射液中蛋白质含量。结果:舒血宁注射液中蛋白质的含量较低。结论:该方法可用于舒血宁注射液中蛋白质的含量测定,对该产品质量控制具有重要意义,测定结果可提高该产品的质量。     

全蝎蛋白药效组分的生物鉴定法研究

目的 :研究全蝎蛋白药效组分的提取方法,摸索全蝎蛋白药效组分SDS-PAGE的最佳电泳条件,测定全蝎蛋白药效组分电泳图谱条带的大致分子质量,确定其SDS-PAGE的表达特征,从而建立全蝎蛋白药效组分的电泳鉴别法。 方法 :采用水提与盐析法获得全蝎蛋白药效组分,考马斯亮蓝法测定蛋白药效组分的蛋白质含量,SDS-PAGE法和Alpha Ease FC 4.0.0软件测定全蝎蛋白药效组分的蛋白质相对分子质量。 结果 :全蝎蛋白药效组分的蛋白质质量分数为50.37%;得到较好的全蝎蛋白药效组分的10条电泳谱带,相对分子质量分别为94.162 0,66.400 0,40.357 0,27.541 0,22.518 0,19.520 0,12.766 0,11.190 0,9.665 3,8.534 2 KDa。 结论 :这10条谱带是全蝎蛋白药效组分的特征谱带,可用于全蝎蛋白药效组分的鉴别。     

4种常用蛋白质测定方法用于中药注射剂中大分子蛋白检测的适用性研究

目的探究4种常用蛋白质测定方法用于中药注射剂中大分子蛋白检测的适用性。方法比较磺基水杨酸法、考马斯亮蓝法、福林酚(Lowry)法、体积排阻色谱(SEC)法的灵敏度、专属性,并将4种方法分别用于测定5种市售中药注射剂中的大分子蛋白,比较测定结果。结果磺基水杨酸法灵敏度不高,考马斯亮蓝法和Lowry法的专属性较差,SEC法灵敏度高且专属性好。以SEC法测定5种市售中药注射剂样品,均未检出大分子蛋白。结论 SEC法可用于中药注射剂中大分子蛋白测定。     

基于COI条形码序列的珍珠母及其混伪品的DNA分子鉴定

目的：探讨应用COI条形码序列对珍珠母及其混伪品进行物种鉴定的可行性。方法：用MEGA4．0等软件计算珍珠母及其混伪品种内及种问变异,构建珍珠母及其混伪品的NJ树。结果：珍珠母种内COI序列变异小,种问存在较多的变异位点,种问的遗传距离显著大于种内的遗传距离。通过构建的系统聚类树图可以看出,珍珠母不同来源个体均聚在一起,能够与其混伪品区分开。结论：基于COI序列的DNA条形码技术可以很好的鉴定珍珠母的正品来源及其混伪品。     

A steryl glycoside fraction with hemolytic activity from tubers of Momordica cochinchinensis

A hemolytic fraction has been obtained from fresh tubers of Momordica cochinchinensis. The fraction was strongly adsorbed on DEAE-Sepharose CL6B. It did not stain with Coomassie brilliant blue in SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and it gave no immunoprecipitin arcs in immunoelectrophoresis. The hemolytic activity of the fraction was resistant to heat and proteolytic enzymes. The behavior of the fraction in thin-layer chromatography and its positive reaction in Liebermann-Burchard test indicated that the hemolytic activity of the fraction can be attributed to a steryl glycoside(s).     

光质对半夏生长及其药材品质的影响

以半夏为材料,采用蒽酮-浓硫酸法、考马斯亮蓝法、反相高效液相色谱法、反电位滴定法、酸性染料比色法等测量半夏在不同光质处理下的叶绿素含量、可溶性还原糖、可溶性蛋白、鸟苷、琥珀酸、生物碱等含量变化。得到结果为黄光可以促进半夏生长发育,促进块茎可溶性还原糖、总糖、生物碱及琥珀酸的合成,而蓝光促进块茎可溶性蛋白及鸟苷的合成;红、黄光提高叶绿素a,b含量,蓝光降低叶绿素a,b含量;白膜透过的光谱最均匀也最有利于叶绿素a 的合成;单光膜中,蓝膜与黄膜较有利于叶绿素a 的合成,而绿膜和红膜相对有利于叶绿素b的合成。红光下半夏的珠芽形成数最多,繁殖系数最大,说明在半夏的人工栽培中可以利用红光提高半夏的生产产量。     

基于COI条形码序列的珍珠母及其混伪品的DNA分子鉴定△

目的:探讨应用COI条形码序列对珍珠母及其混伪品进行物种鉴定的可行性。方法:用MEGA4.0等软件计算珍珠母及其混伪品种内及种间变异,构建珍珠母及其混伪品的NJ树。结果:珍珠母种内COI序列变异小,种间存在较多的变异位点,种间的遗传距离显著大于种内的遗传距离。通过构建的系统聚类树图可以看出,珍珠母不同来源个体均聚在一起,能够与其混伪品区分开。结论:基于COI序列的DNA条形码技术可以很好的鉴定珍珠母的正品来源及其混伪品。     

补骨脂生品、老品及新品的药效和毒性比较

对补骨脂盐炙新法制品同老法制品作了药效和毒性的比较研究。新法制品的升白作用优于老法制品;在止泻和对性器官重量的影响上,两者无显著差异。新法制品灌胃LD₅₀及对肾组织的损伤等毒性上则小于老法制品。结果提示本工艺改进有助于增效、减毒。     

土鳖虫胰酶酶解物抗凝活性部位分离纯化及组成分析

目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶酶解物进行分离纯化,初步确定其抗凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物,以APTT(活化部分凝血酶时间)为指标,采用溶剂萃取法,获得抗凝活性部位IV,经凝胶柱色谱法对其进行分离纯化获得胰酶酶解纯化物;采用考马斯亮蓝法对纯化物进行定量分析,通过MALDI-TOF-MS检测分离部分的分子量分布范围。结果:土鳖虫胰酶酶解物部位IV有较强的抗凝活性,其抗凝活性强度与酶解物质量浓度相关;部位IV经Sephadex G-25纯化后,通过考马斯亮蓝法测得其蛋白质量分数5.5%;进一步经Sephadex G-10脱盐的纯化物,采用MALDI-TOF-MS检测,确定为相对分子质量在850～910 Da的3组多肽混合物。结论:采用凝胶柱色谱法分离纯化土鳖虫胰酶酶解物是可行的,抗凝活性组分是<1 000 Da的小分子肽类。     

不同产地和不同部位的壁虎药材蛋白质比较研究

目的:为中药壁虎质量标准的制订与资源开发提供科学的实验依据及可靠的实验方法.方法:提取不同产地的无蹼壁虎药材不同部位(壁虎体与壁虎尾)的水溶性蛋白质,并对其进行含量测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较壁虎药材蛋白质含量和组成的产地差异和部位差异.结果:不同产地壁虎药材的蛋白质含量不同,同一产地壁虎药材的不同部位蛋白质含量也存在差异.蛋白质电泳图谱显示,除共有条带外,同一提取部位的蛋白条带的分布位置和数量随产地存在一定差异.结论:考马斯亮蓝染色法简便、快速,标准曲线线性关系良好,可以用来进行蛋白质含量的测定.聚丙烯酰胺凝胶电泳实验快速、准确、重复性好,得到的蛋白质电泳指纹图谱可作为壁虎药材质量评价和资源开发的重要依据之一.