雷公藤醇提物对骨髓细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察雷公藤醇提物对大鼠骨髓细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法:体外培养大鼠股骨骨髓细胞,经不同浓度的雷公藤醇提物作用后,采用MTT比色法检测对骨髓细胞增殖的影响;采用流式细胞仪PI单标法检测对骨髓细胞周期的影响;采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双标法检测对骨髓细胞凋亡的影响。结果:雷公藤醇提物可明显抑制正常骨髓细胞增殖,并且此抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性。细胞周期进程的结果显示,与正常对照组相比,雷公藤组G0/G1期细胞比例显著增多,S期和G2/M期细胞比例显著减少,细胞增殖指数显著降低,早期凋亡率显著升高。结论:雷公藤醇提物可明显抑制骨髓细胞增殖,使骨髓细胞阻滞于G0/G1期,并能诱导细胞凋亡。     

归脾汤含药血清对骨髓细胞增殖的影响

目的观察归脾汤含药血清对大鼠骨髓细胞体外增殖的影响。方法应用血清药理学实验方法,采用MTT比色法检测归脾汤含药血清对骨髓细胞的增殖效应,并采用流式细胞仪检测其对骨髓细胞细胞周期的影响。结果归脾汤含药血清能显著促进骨髓细胞增殖,使细胞进入由G0/G1期进入5期以及由5期向G2/M期转化,从而有利于骨骼细胞的增殖。结论归脾汤含药血清对大鼠骨髓细胞有很好的增殖作用。     

龟鹿二仙汤含药血清对大鼠成骨细胞细胞周期调控的研究

目的 探讨龟鹿二仙汤含药血清对体外培养SD大鼠成骨细胞（OB）增殖功能以及细胞周期与凋亡的调控作用,分析其防治骨质疏松症的作用机理.方法 采用胰蛋白酶-Ⅱ型胶原同浓度（10％、15％、20％）的龟鹿二仙汤含药血清加入OB培养体系（对照组等量生理盐水灌胃）,培养24、48、72 h,应用MTT比色法来检测其对OB增殖功能的影响.培养72 h后流式细胞仪分析DNA含量,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞仪分析细胞早期凋亡.结果 龟鹿二仙汤含药血清对OB的增殖作用呈浓度依赖性,在培养72 h后显著促进其增殖作用.DNA含量分析显示,含药血清组的S期和G2/M期细胞百分率比对照组明显增加,龟鹿二仙汤含药血清对OB具有抗凋亡作用,高浓度组作用最显著.结论 龟鹿二仙汤含药血清对体外培养SD大鼠OB增殖具显著作用且呈浓度依赖性,在体外可抑制OB凋亡从而治疗骨质疏松.     

莪术瓜蒌汤含药血清抑制PGLH7细胞增殖的实验研究

目的:探讨莪术瓜蒌汤含药血清对体外培养的PGLH7细胞增生、细胞周期和凋亡的影响.方法:不同剂量莪术瓜蒌汤含药血清处理体外培养的PGLH7细胞后,采用MTT法观察血清对细胞增殖的作用;PI染色、流式细胞仪进行细胞周期时相分析;Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:高剂量莪术瓜蒌汤血清组能明显抑制PGLH7细胞增生;流式细胞仪分析表明:中、高剂量莪术瓜蒌汤血清组处理PGLH7细胞24h、48h后,S期细胞百分率下降;细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性.结论:本实验提示莪术瓜蒌汤含药血清可能是通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制肺癌细胞的增殖.     

莪术瓜萎汤含药血清抑制PGLH7细胞增殖的实验研究

目的：探讨莪术瓜蒌汤含药血清对体外培养的PGLH7细胞增生、细胞周期和凋亡的影响。方法：不同剂量莪术瓜蒌汤含药血清处理体外培养的PGLH7细胞后，采用MTT法观察血清对细胞增殖的作用；PI染色、流式细胞仪进行细胞周期时相分析：Annexin V—FITC／PI双染色、流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：高剂量莪术瓜蒌汤血清组能明显抑制PGLH7细胞增生；流式细胞仪分析表明：中、高剂量莪术瓜蒌汤血清组处理PGLH7细胞24h、48h后。S期细胞百分率下降；细胞凋亡率上升．呈剂量依赖性。结论：本实验提示莪术瓜蒌汤含药血清可能是通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制肺癌细胞的增殖。     

预知子醇提物联合雷公藤红素对SMMC7721细胞增殖和凋亡的影响

目的观察预知子醇提物联合雷公藤红素对SMMC7721细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法将不同浓度预知子醇提物和雷公藤红素分别作用于SMMC7721细胞72 h,MTT法获得细胞存活率、72 h IC_(50)后,计算药物相互作用指数(CDI)。将SMMC7721细胞分为空白对照组、预知子醇提物组、雷公藤红素组和预知子醇提物+雷公藤红素组(联合组),光镜观察细胞形态,荧光显微镜观察细胞核形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测线粒体凋亡途径、内质网应激途径、自噬相关和线粒体-内质网结构偶联(MAM)相关蛋白的表达。结果预知子醇提物和雷公藤红素72 h IC50剂量CDI值为0.45,存在显著协同效应。联合组细胞存活率明显降低(P0.05),细胞形态发生改变,且部分细胞核呈碎块状,细胞凋亡率较其余3组显著升高(P0.05)。与空白对照组比较,雷公藤红素组和联合组线粒体凋亡相关蛋白Caspase-3表达明显降低(P0.05),联合组cleaved Caspase-3表达明显降低(P0.05),预知子醇提物组内质网应激相关蛋白Grp78表达明显降低(P0.05),雷公藤红素组和联合组Grp78蛋白表达明显升高(P0.05);联合组Chop蛋白表达较其余3组均明显升高(P0.05);与空白对照组比较,预知子醇提物组和联合组自噬相关蛋白p62、LC3BⅡ及LC3BⅡ/Ⅰ比值均显著升高(P0.05),各给药组MAM标志物Mfn2表达均升高但差异无统计学意义(P0.05)。结论预知子醇提物联合雷公藤红素可抑制SMMC7721细胞增殖、诱导细胞凋亡,预知子醇提物和雷公藤红素作用靶点不尽相同;二者的一致性效应机制方面,除Caspase-3和cleaved Caspase-3、Chop和Mfn2等分子外,尚需进一步扩大关注面。     

六味地黄丸含药血清对骨髓细胞增殖的影响

目的观察六味地黄丸含药血清对正常大鼠骨髓细胞体外增殖的影响。方法体外培养大鼠股骨骨髓细胞,加入不同浓度的六味地黄丸含药血清,采用MTT比色法检测对骨髓细胞增殖的影响,采用流式细胞仪PI单标法检测对骨髓细胞周期的影响。结果与正常对照组比较,六味地黄丸含药血清能显著促进骨髓细胞增殖,促使细胞由G0/G1期进入S期以及由S期进入G2/M期,从而有利于骨髓细胞的增殖。结论六味地黄丸含药血清对大鼠骨髓细胞有很好的促增殖作用。     

六味地黄汤含药血清对H_2O_2致HUVECs损伤的保护作用

目的:研究六味地黄汤含药血清对过氧化氢(H2O2)损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的保护作用,并阐明其可能的机制。方法:六味地黄汤药物煎剂浓缩为生药2g/ml,以人临床用量×动物等效剂量比值×血清稀释度为参考浓度给家兔灌胃(35g/kg),每天2次,连续3天,正常对照组给予等量生理盐水。于末次给药后1 h(灌药前禁食不禁水12 h)颈动脉取血,分离血清。本实验采用400μmol/L H2O2复制HUVECs损伤模型,六味地黄汤含药血清分为3个剂量干预组(体积分数为5%、10%、20%),MTT法测定细胞活力,电子显微镜观察细胞内超微结构的改变,PI单染法流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化,激光共聚焦检测细胞内钙离子荧光强度的改变。结果:体积分数5%、10%、20%六味地黄汤含药血清均能促进H2O2损伤的血管内皮细胞增殖;电镜和流式细胞仪检测结果均显示体积分数为5%、10%、20%的六味地黄汤含药血清可减少血管内皮细胞凋亡;激光共聚焦结果提示六味地黄汤抑制H2O2所致的血管内皮细胞凋亡可能是通过降低细胞内钙离子浓度实现的。结论 :六味地黄汤含药血清可以抑制H2O2诱导的细胞凋亡,这种保护作用是通过改变细胞内钙离子浓度实现的。     

芍药甘草汤含药血清对哮喘大鼠T淋巴细胞凋亡及p-Akt磷酸化表达水平的影响

目的:观察芍药甘草汤含药血清对哮喘大鼠T淋巴细胞凋亡及p-Akt磷酸化表达水平的影响,探讨芍药甘草汤防治支气管哮喘的作用机制。方法:哮喘大鼠脾脏原代T细胞培养后分为6组:空白对照组、阴性对照组、5%、10%、20%芍药甘草汤含药血清组和PI3K抑制剂LY294002组。MTT法检测各组细胞生长抑制情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和细胞周期;Western Blot法检测各组细胞p-Akt表达水平。结果:与空白对照组比较,PI3K抑制剂LY294002组显著抑制大鼠T淋巴细胞生长(P0.01),促进T淋巴细胞凋亡(P0.01),并显著降低其p-Akt磷酸化水平(P0.01);与空白对照组比较,5%、10%和20%含药血清组能显著抑制大鼠T淋巴细胞生长(P0.01),促进T淋巴细胞凋亡(P0.01),显著增加G0/G1期细胞比例(P0.01),同时显著降低G2/M细胞比例和T淋巴细胞p-Akt磷酸化水平(P0.01)。结论:芍药甘草汤防治支气管哮喘的作用机制可能通过抑制T淋巴细胞生长、促进其凋亡及降低T淋巴细胞p-Akt磷酸化水平有关。     

大戟大枣汤含药血清通过PI3k/Akt通路对乳腺癌细胞凋亡的影响

目的探讨大戟大枣汤含药血清通过PI3k/Akt通路对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法制备大戟大枣汤高、中、低剂量组及阴性组的含药血清,作用于体外培养的MCF-7细胞。吖啶橙-溴乙锭染色观察大戟大枣汤含药血清作用对细胞形态学的变化,Hoechst333342/PI染色分析细胞凋亡情况,免疫荧光法检测PI3k/Akt通路相关蛋白的表达,Western blot检测大戟大枣汤含药血清联合LY294002对PI3k/Akt通路相关蛋白的表达影响。结果荧光显微镜下可见大戟大枣汤含药血清作用后细胞贴壁能力下降、形态变得圆润、数量减少。与阴性对照组比较,大戟大枣汤含药血清组细胞凋亡增高(P0.05,P0.01),PI3k、p-Akt、p-FoxO3a蛋白表达降低(P0.05,P0.01);大戟大枣汤含药血清联合LY294002作用后,细胞中p-Akt、p-FoxO3a蛋白表达较单独使用大戟大枣汤含药血清更低。结论大戟大枣汤含药血清可通过抑制PI3k/Akt信号通路调控MCF-7细胞凋亡。     

加味四君子汤含药血清对肝癌Hep-G2细胞的影响

目的:探讨加味四君子汤含药血清对肝癌Hep-G2细胞增殖、凋亡、周期的影响及其作用机制。方法:不同浓度加味四君子汤含药血清处理Hep-G2细胞后,采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖;Annexin V/碘化丙啶(PI)流式细胞术检测细胞凋亡率和周期;hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡形态;免疫印迹法(Western blot)检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路相关蛋白表达水平。结果:加味四君子汤含药血清呈浓度依赖性抑制肝癌Hep-G2细胞的增殖,诱导Hep-G2细胞凋亡,阻滞细胞于G0/G1期。hoechst33342染色后,随着含药血清浓度的增加,Hep-G2细胞核显著呈碎块状致密浓染。同时,加味四君子汤含药血清能够抑制Hep-G2细胞Akt,m TOR,核糖体S6蛋白激酶(S6),真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)的磷酸化,从而上调Bcl-2相关X蛋白(Bax)和下调细胞周期蛋白(Cyclin D1),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达。加味四君子汤含药血清与300 nmol·L-1的PI3K/m TOR双重抑制剂VS-5584联合使用具有协同作用,含药血清能增强PI3K/m TOR双重抑制剂VS-5584对Hep-G2细胞中PI3K/Akt/m TOR信号通路靶点Akt和m TOR磷酸化的抑制作用。结论:加味四君子汤含药血清能抑制Hep-G2细胞的增殖,诱导其凋亡,阻滞其于G0/G1期,其机制可能通过阻断PI3K/Akt/m TOR信号通路而实现。     

草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞体外增殖与凋亡的影响

目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响.方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应用Annexin V与碘化丙啶(PI)双染色荧光显微镜及透射电镜技术观察药物作用后细胞形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率的变化.结果:①MTT实验表明草苁蓉乙醇提取物能抑制HSC-伪细胞增殖,并显出量效和时效关系.0.75 g·L-1草苁蓉刺激12,24,36,48 h对HSC-T6增殖的抑制率分别为(44.58 ±1.42)％,(51.56±1.34)％,(63.83±0.99)％,(74.77±3.40)％(P＜0.05).②荧光显微镜及透射电镜观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC -T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变,细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等.③草苁蓉处理后HSC-T6被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,且表现出明显量效关系.0.75 g·L-1草苁蓉乙醇提取物改变HSC-T6周期分布,使G0/G1期细胞由(50.33±0.80)％增至(61.46±1.07)％,表现出G0/G1期阻滞;同时诱导HSC-T6凋亡,凋亡率由(1.44±0.43)％增至(14.20±0.98)％(P＜0.05).结论:草苁蓉乙醇提取物可明显抑制HSC-T6细胞增殖,其作用可能与诱导细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期有关.     

健脾消癥方对人胃癌细胞MGC803凋亡和细胞周期的影响

目的:观察健脾消癥方对胃癌细胞株MGC803增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:(1)采用MTT法观察不同浓度的健脾消癥方对胃癌细胞株MGC803增殖的抑制作用;(2)使用Annexin V/PI荧光双染法检测健脾消癥方诱导肿瘤细胞进入凋亡的比例;(3)应用流式细胞仪检测健脾消癥方对MGC803细胞周期的影响。结果:(1)健脾消癥方对MGC803细胞有较强的抑制增殖的作用,并呈一定的浓度依赖性。(2)健脾消癥方高、中、低浓度组对胃癌细胞株MGC803作用24h后,早期凋亡率分别为49.83%、55.29%、16.73%。健脾消癥方高、中、低浓度组对胃癌细胞株MGC803作用48h后,早期凋亡率分别为84.52%、55.58%、51.76%。(3)与阴性对照组相比,健脾消癥方各浓度组对胃癌细胞株MGC803作用48h后,可将细胞阻滞于G2-M期,健脾消癥方高浓度组在G0-G1期前出现较明显的亚二倍体峰。结论:(1)健脾消癥方可明显抑制胃癌细胞株MGC803的增殖作用。(2)健脾消癥方对人胃癌细胞株MGC803有明显的诱导凋亡及阻滞细胞周期在G2-M期的作用。     

告达庭诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的作用

目的：观察Caudatin体外对人肝癌细胞SMMC7721的作用。方法：采用MTT法测定不同浓度的Caudatin作用于SMMC7721细胞24，48和72h对其生长的抑制作用。用流式细胞仪以PI单染检测细胞周期、以Annexin V／PI双染检测细胞凋亡，比色法测定Caspase-3酶活力。结果：Caudatin体外能抑制人肝癌细胞SMMC7721的增殖并呈明显的时间和剂量依赖性。Caudatin体外能诱导SMMC7721细胞凋亡，并使细胞周期阻滞于G0／G1期。Caspase-3的酶活力随着Caudatin体外作用时间的延长先升高并于8h达到最大，再随时间的变化而降低。结论：Caudatin体外能显著抑制人肝癌细胞SMMC7721的生长，其抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞增殖、阻滞细胞周期于G0／G1期，并通过激活Caspase-3诱导肿癌细胞凋亡有关。     

半枝莲含药血清对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用

目的：探讨中药半枝莲提取物（ESB）对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用。方法：体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶组。应用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡;流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况。结果：ESB高、中剂量含药血清组有一定的抑制H22肝癌细胞增殖的作用,且呈明显的时效关系。荧光显微镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示：细胞周期各时相中,ESB高、中、剂量含药血清组S期细胞所占的比例明显减少,G1期细胞增多,有明显的诱导凋亡作用。其中空白对照、ESB低、中、高剂量组、5-氟尿嘧啶组H22细胞凋亡率分别为0.51%、1.07%、3.15%、7.83%、11.26%。结论：ESB含药血清不仅可直接抑制小鼠H22肝癌细胞生长,而且可有效诱导细胞凋亡。     

清毒饮、养正片影响白血病K562细胞增殖周期、细胞凋亡的实验研究

目的:观察清毒饮、养正片诱导人白血病细胞株K562细胞凋亡及对细胞增殖周期的作用;探索其时效关系,为临床提供选择最佳用药时机的实验基础.方法:制备含清毒饮、养正片药物血清,建立相应的培养体系,加入含药小鼠血清,培养K562细胞株;分别于培养12、24、36、48、72h收集细胞,固定、染色、上流式细胞仪进行细胞周期、细胞凋亡的检测.结果:人白血病K562细胞株存在有自然凋亡,正常小鼠血清无诱导该细胞凋亡的作用;清毒饮、阿糖胞苷具有诱导细胞凋亡的作用,且随着培养时间的延长凋亡率愈加明显.清毒饮对K562细胞周期的影响,还表现出明显的时间依赖性;随着培养时间的延长,当细胞出现明显凋亡时,细胞株S期显著下降,G0/G1期升高,提示清毒饮和清毒加养正合剂都可引起K562细胞株的G0/G1期阻滞,对凋亡的敏感性增强.结论:清毒饮能抑制K562细胞增殖、促进细胞分化、诱导细胞凋亡,提示该中药复方具有从分子水平抗肿瘤细胞增殖的效应,这也是中药复方协同化疗药物治疗白血病在增效减毒方面的关键机制;清毒饮对K562细胞发生细胞毒作用,是通过抑制其细胞周期S期、将其阻滞于G1期,并通过促进K562细胞凋亡实现的,其作用强度与时间呈密切正相关.     

白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制

目的:考察白皮杉醇(PIC)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖、凋亡及细胞周期的作用,并对其作用机制进行探讨。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法考察PIC(0,2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μmol·L-1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞成活率的影响,并计算半抑制率(IC50);采用碘化丙啶(PI)染色观察PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)对MDA-MB-468细胞周期的影响;采用细胞凋亡检测(Annexin V-FITC/PI)双染法观察PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的诱导凋亡作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察不同浓度PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)对MDA-MB-468细胞增殖、凋亡蛋白的影响,并用Western blot对分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路相关蛋白进行检测。结果:MTT比色法结果显示,与空白组比较,PIC(5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μmol·L^-1)可呈浓度依赖性地抑制MDA-MB-468细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),IC50为(39.4±4.6)μmol·L^-1;作用48 h,PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)呈浓度依赖性地升高MDA-MB-468细胞处于细胞周期G0/G1期细胞(P<0.01);呈浓度依赖性地诱导MDA-MB-468细胞凋亡(P<0.01),其中,PIC(20.0μmol·L^-1)诱导细胞凋亡率为49.87%;PIC(10.0,20.0μmol·L^-1)可明显降低MDA-MB-468细胞中β-catenin及原癌基因(C-myc),黏附因子(CD44)蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01);PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)可显著抑制蛋白激酶B(Akt)磷酸化,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)蛋白的磷酸化,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的蛋白表达水平(P<0.01);增强半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和磷酸化β-catenin的蛋白表达(P<0.01)。结论:PIC可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,从而诱导其凋亡。     

小柴胡汤含药血清对肝癌HepG-2细胞的影响

目的:探讨小柴胡汤含药血清抑制HepG-2肝癌细胞增殖的作用机制.方法:大鼠灌服小柴胡汤3.69 g·kg-1,空白组给予等量蒸馏水,1次/d,连续7d,末次给药1h后腹主动脉取血制备小柴胡汤含药血清.以HepG-2肝癌细胞为研究对象,实验分为10％空白血清组,5％,10％,20％含药血清组.采用倒置显微镜观察含药血清对HepG-2细胞作用后的形态改变,噻唑蓝(MTT)法测定其对生长抑制的影响,流式细胞术分析细胞凋亡的情况,罗丹明123(Rh123)荧光染色观察细胞线粒体膜电位的变化.结果:与空白血清组比较,小柴胡汤含药血清能够抑制HepG-2肝癌细胞增殖,10％含药血清抑制细胞增殖具有时间依赖的特点;流式检测结果表明,10％小柴胡汤含药血清作用HepG-2肝癌细胞8h后,凋亡率从6.78％上升至19.51％;Rh123荧光染色显示,细胞线粒体膜电位明显降低.结论:小柴胡汤含药血清能够抑制HepG-2肝癌细胞增殖,促进其凋亡,线粒体途径参与了该过程.     

补肾益精丸对雷公藤多苷诱导睾丸支持细胞损伤的影响

目的:探讨补肾益精丸干预雷公藤多苷诱导睾丸支持细胞损伤的作用机制。方法:将36只SD大鼠按体质量随机分为无药血清组、雷公藤多苷组和补肾益精丸组,每组各12只,制备含药血清。体外培养小鼠睾丸支持细胞,取对数生长期细胞分为空白对照组、无药血清组、雷公藤多苷组和补肾益精丸组,每组4孔。血清干预后采用MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞周期。结果:补肾益精丸组细胞增殖率高于雷公藤多苷组,差异具有统计学意义(P<0.05),补肾益精丸组细胞增殖率与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,无药血清组及雷公藤多苷组G1期细胞数增多,S期细胞数减少;补肾益精丸组与雷公藤多苷组比较,S期细胞数增多。结论:雷公藤多苷对睾丸支持细胞的增殖具有抑制作用,主要作用于细胞G1期及S期。补肾益精丸可有效拮抗雷公藤多苷对睾丸支持细胞的损伤。     

甜橙黄酮对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用及其机制研究

目的:探讨甜橙黄酮对人胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用及其机制.方法:采用MTT法观察甜橙黄酮对AGS胃癌细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测甜橙黄酮对细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI标记定量检测细胞凋亡率,DNA片段化分析进一步验证甜橙黄酮对细胞凋亡的作用;Hoechst 33342染色后倒置荧光显微镜观察凋亡细胞形态;Westem blot检测对p21和p53蛋白表达的影响.结果:甜橙黄酮可明显抑制 AGS胃癌细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性;甜橙黄酮可阻滞细胞于G2/M期和增加AGS胃癌细胞凋亡率,并随剂量增大作用增强;60 pmol·L-1甜橙黄酮作用48 h产生凋亡特有的梯形条带;Hoechst 33342染色观察到甜橙黄酮给药组出现细胞核浓缩、边缘化以及凋亡小体等细胞凋亡的形态特征;甜橙黄酮可呈剂量依赖地增强p21和p53蛋白表达.结论:甜橙黄酮可显著抑制人AGS胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于G2/M期,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与上调p21和p53蛋白有关.