基于Wnt/β-catenin调控EMT探讨氧化苦参碱联合贝伐珠单抗抗乳腺癌的体外活性机制

目的 观察氧化苦参碱（OM）联合贝伐珠单抗（BV）对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的作用,并基于分泌型糖蛋白（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路对OM调控BV引起的上皮间质转化（EMT）的机制进行探讨。方法 采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）实验观察OM（0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0 mmol·L^-1）及BV（0,0.25×10^-4,0.50×10^-4,1.00×10^-4,2.00×10^-4,4.00×10^-4,8.00×10^-4 mmol·L^-1）联合后对MCF-7细胞增殖的影响;通过侵袭小室法（transwell）和划痕损伤修复实验观察OM（4.0 mmol·L^-1）与BV（2.00×10^-4 mmol·L^-1）联合后对MCF-7细胞侵袭与迁移能力的影响;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）观察OM（4.0 mmol·L^-1）与BV（2.00×10^-4 mmol·L^-1）联合后对MCF-7细胞增殖相关蛋白的影响,并对Wnt/β-catenin信号通路及EMT相关蛋白的表达水平进行检测。结果 与空白组比较,OM（2.0,4.0,8.0,16.0 mmol·L^-1）可呈浓度依赖性地抑制MCF-7细胞的增殖（P<0.05,P<0.01）,而BV未表现出抑制MCF-7细胞增殖的作用,两药联合对MCF-7细胞增殖的抑制作用与OM比较差异无统计学意义。与空白组比较,OM可显著减少MCF-7细胞的迁移距离和侵袭细胞数目（P<0.01）,BV可明显增加MCF-7细胞的迁移距离和侵袭细胞数目（P<0.05,P<0.01）。与BV比较,联合后OM可显著抑制BV引起的MCF-7细胞的侵袭和迁移（P<0.01）。与空白组比较,OM及两药联用可明显抑制MCF-7细胞中与细胞增殖相关蛋白激酶B（Akt）和细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）蛋白的磷酸化（P<0.01）;OM及两药联用后显著降低Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin,原癌基因（c-Myc）,CD44,G₁/S-特异性周期蛋白-D₁（cyclin D₁）蛋白表达（P<0.05,P<0.01）;OM及两药联用可显著降低EMT中钙离子依赖的细胞N-钙黏蛋白（N-cadherin）,波形蛋白（Vimentin）蛋白表达,增加钙离子依赖的细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达水平（P<0.01）,BV组上述相关蛋白的表达相反（P<0.05,P<0.01）。结论 OM与BV联合后OM可通过有效抑制BV引起的Wnt/β-catenin通路激活逆转EMT机制发挥抗乳腺癌的作用。     

白皮杉醇对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468抗肿瘤作用及机制

目的:考察白皮杉醇(PIC)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-468增殖、凋亡及细胞周期的作用,并对其作用机制进行探讨。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法考察PIC(0,2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μmol·L-1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞成活率的影响,并计算半抑制率(IC50);采用碘化丙啶(PI)染色观察PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)对MDA-MB-468细胞周期的影响;采用细胞凋亡检测(Annexin V-FITC/PI)双染法观察PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的诱导凋亡作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察不同浓度PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)对MDA-MB-468细胞增殖、凋亡蛋白的影响,并用Western blot对分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路相关蛋白进行检测。结果:MTT比色法结果显示,与空白组比较,PIC(5.0,10.0,20.0,40.0,80.0,160.0μmol·L^-1)可呈浓度依赖性地抑制MDA-MB-468细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),IC50为(39.4±4.6)μmol·L^-1;作用48 h,PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)呈浓度依赖性地升高MDA-MB-468细胞处于细胞周期G0/G1期细胞(P<0.01);呈浓度依赖性地诱导MDA-MB-468细胞凋亡(P<0.01),其中,PIC(20.0μmol·L^-1)诱导细胞凋亡率为49.87%;PIC(10.0,20.0μmol·L^-1)可明显降低MDA-MB-468细胞中β-catenin及原癌基因(C-myc),黏附因子(CD44)蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01);PIC(5.0,10.0,20.0μmol·L^-1)可显著抑制蛋白激酶B(Akt)磷酸化,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)蛋白的磷酸化,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的蛋白表达水平(P<0.01);增强半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和磷酸化β-catenin的蛋白表达(P<0.01)。结论:PIC可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,从而诱导其凋亡。     

S168对放射性锶的促排效果和药理研究

新络合剂S₁₆₈(乙酰胺基丙叉二膦酸)对放射性锶有较好的促排效果。肌注S₁₆₈可使大鼠体内的⁸⁵Sr由尿排出50%以上, 为相同剂量的BADE和BAI冷尿锣排出量的1.5倍。增加S₁₆₈剂量, 尿⁸⁵Sr排出可高达70%, 但延缓给药时间效果降低。S₁₆₈的促排效果与剥量呈线性关系, Y尿带=4.13+0.078X。S₁₆₈合用中。(鸡内金)能提高疗效, 呈现两药相加作用。本文还详细介绍了S₁₆₈在小鼠、大鼠和狗身上进行药理研究的结果。     

椎管穿刺治疗化脓性脑脊髓膜炎5例体会

笔者自1989年～1991年应用椎管穿刺加用抗生素治疗化脓性脑脊髓膜炎5例,疗效满意,现报告如下:1临床资料患者均为本院住院病例。按王季午主编的《传染病学》诊断标准确诊。脑脊液常规及生化检测全部符合急性化脓性脑脊髓膜炎的改变。本组5例患者,男4例,女1例。年龄最大47岁,最小16岁,平均31.5岁。本组病人临床表现轻重不一,其中有2例合并中毒性休克。2治疗方法病人取侧卧位,按腰穿部位常规消毒皮肤、铺中、局麻。选用10~＃或12~＃腰椎穿刺针     

元宫型宫内节育器推杆用于治疗宫颈口粘连的临床观察

宫颈管粘连常见于绝径后妇女及宫颈锥切术后妇女,宫颈管粘连是指宫颈管粘膜受机械损伤后粘连致使颈管狭窄或闭锁.由于宫颈管粘连或成角、探针无法探入,常需行宫颈切开术或剥离术,并使用扩宫器以达到治疗的目的.笔者利用放置元宫型宫内节育器(IUD)的推杆扩张宫口,达到较好治疗效果,现报告如下. 1 临床资料 本文收集2009-2010年在本院门诊就诊时发现宫颈管粘连的病例,均成功使用元宫型IUD推杆扩张宫口.     

大黄甘草汤加减治疗小儿急性肠炎30例疗效观察

小儿肠炎为儿科常见病之一，多发于夏秋之季，可呈流行趋势，多见于二岁以下婴幼儿，以发热、吐、泻为主要症状。祖国医学则为“呕吐”“泄泻”之范畴，病程短、病势急、最易耗伤气液。目前，对此病的治疗可采用中、西结合方法，效果较满意。中药选方中我们选用《金贵要略》之大黄、甘草汤进行加减给予治疗，收到较好疗效。现将资料总结如下：     

输血性丙型肝炎的传播及防护

输血性肝炎是医院感染的重要病因之一，而丙型肝炎又占输血性肝炎的９０％以上，管好血站、血源，供给临床高质量的血液及其制品是预防医院感染性丙肝的首要措施。本文对丙肝传播的流行病学规律进行了深入分析，认为单采队员是丙肝传播的首要对象和高发人群，也是输血后丙肝传播的主要传播源，并由此提出了推行无偿献血、成分输血、自身输血、合理用血及加强血站管理的和１２条措施。     

β—受体高敏症的临床检查

自1994年5月至1996年4月,对42例经心电图发现ST-T改变的病人,进行了心得安试验,鉴别了功能性或器质性而引起的心肌缺血性改变,现报告如下。 1 临床资料 42例中男12例,女30例,年龄20～40岁。其主要表现为胸闷憋气的24人,心慌头晕乏力的10人,心前区不适、睡眠差的8人。心电图主要表现为ST段下移≥0.05mv,T波低平或倒置,窦性心动过速。     

胰腺癌患者围手术期的护理体会

目的探讨胰腺癌患者围手术期的最佳护理方法,减少术后并发症,促进患者康复的方法。方法根据2010年3月至2012年3月期间,我院对24名胰腺癌手术患者的围手术期护理进行分析体会。结果 24例患者术后出现并发症6例,死亡1例。结论胰腺癌患者身体状况差,手术时间长,手术过程复杂,并发症多,提高专项护理技术是促进胰腺癌术后恢复的重要环节。     

大黄甘草汤加减治疗小儿急性肠炎30例疗效观察

小儿肠炎为儿科常见病之一,多发于夏秋之季,可呈流行趋势,多见于二岁以下婴幼儿,以发热、吐、泻为主要症状。祖国医学则为“呕吐”“泄泻”之范畴,病程短、病势急、最易耗伤气液。目前,对此病的治疗可采用中、西结合方法,效果