花椒抗肺癌A549细胞作用及其机制的研究

目的:研究花椒挥发油抗肺癌A549细胞作用及其可能的机制.方法:花椒挥发油按不同时间(24h、48h、72h)及不同浓度(0.5～8mg/ml)分别处理A549细胞,MTs法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期.结果:4mg/ml花椒挥发油处理A549细胞72h可显著地抑制A549细胞增殖,1mg/ml花椒挥发油处理A549细胞72h即可导致亚凋亡峰的出现.结论:花椒挥发油可抑制A549细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

花椒抗宫颈癌Caski细胞作用及其机制的初步研究

目的研究花椒挥发油抗宫颈癌Caski细胞作用及其可能的机制。方法花椒挥发油按不同时间（24,48,72 h）及不同浓度（0.5～8 mg/ml）分别处理Caski细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期。结果4 mg/ml花椒挥发油处理Caski细胞72h可显著地抑制Caski细胞增殖,1 mg/ml花椒挥发油处理Caski细胞72 h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少。结论花椒挥发油可抑制Caski细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

花椒体内外抗肿瘤作用及其机制的初步研究

目的 研究花椒挥发油体内外抗小鼠H22肝癌细胞作用及其免疫学机制.方法 花椒挥发油按不同时间(24,48,72h)及不同浓度(0.5～8 ms/ml)分别处理H22细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期.建立H22荷瘤小鼠模型,观察小鼠肿瘤的生长情况,计算肿瘤生长抑制率;ELISA法检测花椒挥发油处理后小鼠血清中IL-2和IL-12的活性.结果 4 mg/ml花椒挥发油处理H22细胞72 h可显著地抑制H22细胞增殖,1 mg/ml花椒挥发油处理H22细胞72 h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,花椒挥发油对小鼠实体瘤生长具有显著抑制作用,但不能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和IL-12的水平.结论 花椒挥发油可抑制H22细胞增殖并激发细胞凋亡,但不能通过提高机体的免疫功能发挥抗肿瘤作用.     

荆芥挥发油抗肿瘤作用的研究

目的:研究荆芥挥发油的抗肿瘤活性,确定其最小杀伤肿瘤细胞的剂量;同时观察诱导细胞凋亡的最小剂量以确定其抗肿瘤机制。方法:根据药物作用的不同时间,分为24h、48h、72h三组,每组分设不同剂量(0.125mg/ml-16mg/ml)。以吐温-80作为助溶剂对荆芥挥发油倍比稀释,对人A549肺癌细胞进行抗肿瘤试验,采用SRB方法和形态学确认细胞杀伤率,并采用荧光染料Hochest33258染色检测细胞的凋亡水平。结果:大于或等于4mg/ml以上剂量的荆芥挥发油提取物对A549具有较高的抑瘤率,最低可达91.2%;最低抑瘤浓度为1mg/ml,抑瘤率为43.3%。形态学观察结果表明,被杀伤的细胞体积萎缩、细胞膜皱缩、成活细胞数稀疏、数量明显低于空白对照组。不同给药时间的研究结果表明,与作用时间为24h组比较,48h及72h组的杀伤作用效果更佳(P<0.05或P<0.01)。以低于杀伤浓度的剂量(0.125-1mg/ml)作用于A54972h,利用Hochest33258观察其对A549细胞凋亡的影响,结果表明,0.25mg/ml-1mg/ml剂量的荆芥挥发油提取物作用于细胞72h对肿瘤细胞具有明显的诱导细胞凋亡的作用。结论:高浓度(4mg/ml-16mg/ml)的荆芥挥发油对人肺癌A549细胞株有杀伤作用,低浓度(0.25mg/ml-1mg/ml)的荆芥挥发油对A549有诱导细胞凋亡的作用。     

艾叶挥发油对A549细胞的抑制作用

目的研究艾叶挥发油对A549细胞的抑制作用。方法 MTT法检测挥发油对A549细胞的抗增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。皮下注射A549细胞建立肺癌模型后,裸鼠随机分为阴性对照组、5-氟尿嘧啶组(10 mg/kg)及艾叶挥发油低、中、高剂量组(57.5、115、230 mg/kg),考察挥发油对肿瘤生长及体质量的影响。HE染色观察病理组织。结果挥发油明显抑制细胞增殖,并呈浓度依赖性。424.8μg/mL挥发油处理细胞48 h后,细胞凋亡率最高(67.1%),G0/G1期细胞比例降低,G2/M期细胞比例无明显变化,S期细胞比例增加。与阴性对照组比较,挥发油组肿瘤质量和体积显著降低(P<0.05,P<0.01),裸鼠体质量无明显变化(P>0.05)。结论艾叶挥发油可阻滞A549细胞于S期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,而且安全性高。     

白英提取液对人肺癌A549细胞凋亡及Fas／FasL基因表达的影响

目的探讨白英提取液（STE）对人肺癌A549细胞凋亡及fas／fasL基因表达的影响。方法体外培养肺癌A549细胞，以0（正常对照组），10，20和40mg／ml STE处理A549细胞48h，并以25mg／L顺铂（DDP）作为阳性对照、采用MTT法检测细胞增殖抑制率，TUNEL法检测凋亡率，半定量RT—PCR检测fas和fasLmRNA表达。结果与正常对照组比较，STE各浓度组细胞增殖抑制率显著上升（P〈0．01），细胞凋亡率明显升高（P〈0．01），基因fasmRNA表达显著上升（P〈0．05或P〈0．01），而fasLmRNA表达明显下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论STE通过上调fas基因和下调fasL基因表达，诱导细胞凋亡，从而抑制A549细胞增殖。     

壳寡糖诱导肺癌细胞A549凋亡及其机制初探

目的 研究壳寡糖对人肺癌细胞A549的增殖抑制作用及对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Survivin表达的影响.方法 利用金属配位氧化法制备壳寡糖,采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的壳寡糖处理不同时间对A549细胞增殖的抑制作用,Wright's-Giemsa染色后观察壳寡糖处理后的A549的形态学变化,利用免疫组织化学法分析壳寡糖对A549细胞中Bcl-2、Bax、Survivin表达量的影响.结果 5.0 mg/ml壳寡糖处理A549细胞48 h后对细胞增殖的抑制率为56.70％.荧光显微镜下观察Wright's-Giemsa染色后细胞的细胞膜褶皱,细胞核固缩,并出现凋亡小体.免疫组织化学法分析表明,壳寡糖能够上调促凋亡蛋白Bax的表达,下调抑制凋亡蛋白Bcl-2、Survivin的表达.结论 壳寡糖对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用,推测其可能通过上调Bax和下调Bcl-2、Survivin的表达诱导细胞凋亡.     

卷丹百合体外对肺腺癌A_(549)细胞抑制作用的实验研究

目的:研究百合对肺腺癌细胞株A549增殖作用的影响及其相关机制。方法:体外培养肺腺癌细胞株A549,用不同浓度的百合水提物分别作用于对数期生长的A549细胞24、48和72h,MTT(甲基噻唑基四唑)比色法检测百合对A549细胞增殖的抑制率,碘化丙啶(PI)染色,荧光显微镜下观察细胞形态改变及凋亡情况。结果:MTT法检测结果显示,百合水提物在1~8mg/mL浓度范围内、24~72h时间范围内对A549的生长有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖关系(P<0.05);PI染色荧光显微镜观察显示百合作用48h后,细胞出现凋亡的形态学改变。结论:百合具有体外抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用,其可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抑制A549细胞增殖的作用。     

湖北土家族绿茶抗肿瘤作用实验研究

目的：研究从湖北土家族绿茶提取的茶多酚在体内外抗小鼠H22肝癌细胞的作用及其免疫学机制。方法：茶多酚按不同时间（24h，48h，72h，96h）及不同浓度（1—16mg／m1）分别处理H22细胞，MTS法分析细胞的增殖速度，用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期。建立H22荷瘤小鼠模型，观察小鼠肿瘤的生长情况，计算肿瘤生长抑制率；ELISA法检测茶多酚处理后小鼠血清中IL-2和IL—12的活性。结果：8mg／ml茶多酚处理H22细胞72h可显著地抑制H22细胞增殖，2mg／ml茶多酚处理H22细胞72h即可导致亚凋亡峰的出现，且G0／G1期细胞增多，S期和G2／M期细胞减少，茶多酚对小鼠体内肿瘤生长也具有抑制作用，而且显著提高荷瘤小鼠血清中IL-2和IL—12的水平。结论：湖北土家族绿茶可抑制H22细胞增殖并激发细胞凋亡，并能提高机体的免疫功能发挥抗肿瘤作用。     

四种基源的川贝母对非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用

目的：观察四种不同基源的川贝母（梭沙贝母、暗紫贝母、卷叶贝母、甘肃贝母）对非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用。方法：以不同浓度的川贝母作用于A549细胞,分别用MTT法、细胞生长曲线观察四种基源的川贝母对A549增值抑制的影响,及其细胞形态学变化。结果：MTT显示川贝母浓度为10mg/L～150mg/L时,对A549的48、72小时抑制率为5%～92%,呈浓度和时间的依赖关系;梭沙贝母、甘肃贝母、暗紫贝母、卷叶贝母72小时IC50值分别为50mg/L、62mg/L、66mg/L、76mg/L;生长曲线提示：随着川贝母作用时间的延K,细胞增殖抑制率逐渐升高,呈明显的时效和量效关系;荧光倒置显微镜下观察出现明显凋亡形态学的变化。结论：四种不同基源的川贝母都对非小细胞肺癌A549细胞有增值抑制作用,其中梭沙贝母的抑制作用最好,其次分别是甘肃贝母、暗紫贝母、卷叶贝母,但这四种不同基源的川贝母之间作用差异性不大。     

苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。     

刺梨果多糖对肺腺癌A549 细胞增殖、凋亡的作用及机制研究

探讨刺梨果多糖对肺腺癌A549 细胞增殖、凋亡的作用及机制。方法 在0、2、4、6、8、 10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞24、48、72 h 后,采用CCK-8 法检测A549 细胞增殖情况。在0、2、6、 10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞24、48 h 后,采用细胞划痕实验测定A549 细胞的迁移情况;Transwell 实 验测定A549 细胞侵袭情况。在0、2、6、10 g·L-1 刺梨果多糖干预A549 细胞48 h 后,采用流式细胞术（PI 单 染法）测定A549 细胞周期;流式细胞术（Annexin V-FITC/PI 双染法）测定A549 细胞的凋亡情况;Real-Time PCR 法测定A549 细胞的周期、凋亡相关基因表达水平;Western Blot 法测定A549 细胞的周期、凋亡相关蛋白 表达水平。结果 （1）干预24、48、72 h 后,与对照组（0 g·L-1）比较,刺梨果多糖2、4、6、8、10 g·L-1 组的 A549 细胞生长受到显著抑制,细胞的存活率显著降低（P＜0.05,P＜0.01）,刺梨果多糖干预48 h 的IC50 值为 6.109 g·L-1,后续实验采用2、6、10 g·L-1 浓度作为刺梨果多糖低、中、高剂量。（2）干预48 h 后,与对照组比 较,刺梨果多糖2、6、10 g·L-1 组的A549 细胞迁移距离显著增加（P＜0.05,P＜0.01）,细胞侵袭数量显著减少 （P＜0.05,P＜0.01）;刺梨果多糖6、10 g·L-1 组的G0/G1 期、G2/M 期细胞比例均显著升高（P＜0.05,P＜0.01）, S 期的细胞比例显著降低（P＜0.01）;刺梨果多糖2、6、10 g·L-1组A549 细胞的G0/G1、G2/M 期相关调控因子 CDK-4、CDK-6、CyclinD1、CDK-1、CyclinB1 mRNA 及蛋白表达水平均显著下调（P＜0.05,P＜0.01）;A549 细胞的凋亡率均显著升高（P＜0.01）;凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 mRNA 表达显著上调 （P＜0.05,P＜0.01）;促凋亡Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 蛋白表达显著上调（P＜0.05,P＜0.01）, 抗凋亡Bcl-2 蛋白表达显著下调（P＜0.05,P＜0.01）。结论 刺梨果多糖能够抑制A549 细胞的增殖、迁移和 侵袭,阻滞细胞周期于G0/G1 和G2/M 期,并通过线粒体通路和死亡受体通路诱导A549 细胞凋亡。     

仙鹤草水提液对肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的：探讨不同浓度的仙鹤草水提液对体外培养的人肺癌细胞系A549细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用不同浓度的仙鹤草水提液分别作用于体外培养的人肺癌细胞A549细胞株24、48、72h后，MTT法观察药物对肺癌A549细胞生长的抑制效应；作用于细胞48h后倒置显微镜观察细胞形态学的改变；应用AO／EB荧光染色法，观察不同浓度仙鹤草水提液对细胞凋亡的影响；Annexinv／PⅠ双染流式细胞仪检测经药物作用后A549细胞凋亡情况。结果：仙鹤草水提液可剂量依赖性地抑制A549细胞的增殖，以48h的增殖抑制作用最好；通过倒置显微镜可明显观察到细胞的形态学改变；细胞荧光染色出现了明显的凋亡细胞，表现为细胞皱缩、核染色质浓缩、核碎裂等凋亡特征性的形态学改变；流式细胞仪检测结果显示，仙鹤草水提液可明显诱导细胞凋亡。结论：仙鹤草水提液可对人肺癌细胞系A549细胞具有显著的体外增殖抑制作用，其主要作用可能与诱导细胞凋亡有关。     

黄芪-莪术协同作用调节SIRT3/HIF-1α通路对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移的影响

目的 观察黄芪-莪术药对通过调节SIRT3/HIF-1α信号通路对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及侵袭和迁移能力的影响。方法 复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,观察黄芪-莪术不同配比（1:1、2:1、3:1）干预14 d后对移植瘤重和肺转移的影响,计算抑瘤率,以抑瘤率优选黄芪-莪术配比;体外培养人肺腺癌A549细胞,采用CCK-8法检测不同浓度黄芪-莪术提取物对A549细胞增殖的抑制作用,筛选其最佳给药浓度和作用时间,流式细胞仪检测A549细胞凋亡率,细胞划痕实验和Transwell实验检测A549细胞移动性及侵袭能力变化,Western-blot检测侵袭相关蛋白（COX-2、CD44v6、MMP-9）的表达水平,Western-blot及RT-PCR检测SIRT3/HIF-1α通路蛋白和mRNA表达。结果 黄芪-莪术不同配比干预后,小鼠瘤重和肺转移灶数明显减少（P <0.05）,其中3:1配比抑瘤作用最显著（P <0.05）;黄芪-莪术提取物0.4～0.8 mg/mL干预48 h对A549细胞增殖的抑制作用明显,应用0.4、0.6、0.8 mg/mL浓度处理...     

苦参碱和氧化苦参碱对人肝癌细胞株 SMMC-7721凋亡的影响

目的：探讨苦参碱与氧化苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法采用MTT法检测SMMC-7721细胞增殖,并采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测SMMC-7721细胞凋亡。结果苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.50～2.00 mg/ml时,细胞增殖抑制率均逐渐上升,呈药物浓度和作用时间的依赖性;同样浓度下（1.00 mg/ml）,苦参碱增殖抑制作用强于氧化苦参碱[24 h、48 h和72 h时苦参碱组分别为（42.39±0.04）%、（51.69±0.03）%、（78.98±0.05）%,氧化苦参碱组分别为（21.36±0.02）%、（36.16±0.02）%、（61.24±0.13）%;P均＜0.05]。苦参碱与氧化苦参碱浓度为0.25、0.50、1.00 mg/ml时SMMC-7721细胞凋亡率显著增高;同样时间点（48 h）,苦参碱对细胞凋亡的诱导强于氧化苦参碱[0.25、0.50、1.00 mg/ml时,苦参碱组凋亡率分别为（4.08±0.20）%、（4.32±0.19）%、（9.93±0.18）%,氧化苦参碱组分别为（2.20±0.18）%、（3.08±0.26）%、（9.01±0.20）%;P均＜0.05]。结论苦参碱和氧化苦参碱可抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡。     

鸦胆子油乳脂质纳米粒对A549细胞抑制作用的研究

目的探讨鸦胆子油乳脂质纳米粒对人非小细胞肺癌A549细胞株的抑制、凋亡作用及其机制。方法用MTT法检测设不同浓度实验组(30、60、90、120 mg/L)及不同作用时间(24、48、72 h)药物对细胞的抑制率;用流式细胞仪检测药物浓度60 mg/L作用24、48、72 h后实验组细胞的凋亡率;RTPCR检测Caspase-3 mRNA的表达。结果不同浓度、时间鸦胆子油乳脂质纳米粒对A549细胞增殖的影响:细胞增殖抑制率在一定剂量范围内随浓度的增加而增加,具有剂量依赖性,用相同浓度鸦胆子油乳脂质纳米粒(60 mg/L)干预A549人肺腺癌细胞24、48、72 h,抑制率在一定时间范围内随时间的延长而增加,具有时间依赖性。用相同浓度鸦胆子油乳脂质纳米粒(60 mg/L)干预A549人肺腺癌细胞24、48、72 h凋亡率分别是:48.67%±1.42,64.82%±1.46,68.25%±1.32。RT-PCR结果提示鸦胆子油乳脂质纳米粒上调了Caspase-3 mRNA的表达。结论鸦胆子油乳脂质纳米粒可以抑制人肺腺癌A549细胞增殖和诱导凋亡,并呈时间-剂量关系,其机制可能与上调Caspase-3的表达有关。     

番荔枝内酯对肺腺癌A549细胞周期及凋亡的影响

目的：探讨番荔枝内酯 Bullatacin 诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法采用 MTT 法检测不同浓度（6.25、12.5、25、50、100μg/mL）Bullatacin对A549细胞的抑制增殖作用,依照MTT结果取浓度25μg/mL Bullatacin作用于A549细胞0、12、24、48 h,流式细胞仪分析其对A549细胞增殖周期的影响,观察其对细胞凋亡的干预作用。Western Blot 检测不同实验组 ERK、JNK、p38磷酸化与总蛋白的表达。结果不同浓度Bullatacin作用于A549细胞后,呈明显的剂量依赖性;25μg/mL Bullatacin能将A549细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡;与空白组比较,P-ERK、P-JNK、P-p38的蛋白表达均明显增强。结论 Bullatacin明显抑制A549细胞增殖,并诱导其凋亡,其机理与Bullatacin通过磷酸化各蛋白激酶而激活MAPK通路有关。     

α-细辛醚通过Bcl-2途径诱导人肺癌A549细胞凋亡研究

目的:探讨α-细辛醚通过bcl-2途径对人肺癌细胞系A549增殖抑制作用及凋亡诱导作用。方法:人肺癌A549细胞孵育24 h后,分别加入不同剂量α-细辛醚(0.25、0.5、1 mg/ml)作用于A549细胞,继续培养12,24,36,48 h,采用MTT法检测不同浓度α-细辛醚对A549细胞的增殖抑制情况;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR法检测凋亡相关基因bcl-2和bax mRNA的表达,western blot检测bcl-2和bax蛋白表达水平。结果:随着α-细辛醚剂量(0.25、0.5、1 mg/ml)的增加,可明显抑制A549细胞的增殖,这种抑制作用具有时间和剂量依赖性;流式细胞仪检测细胞发生了凋亡;α-细辛醚不同剂量(0.25、0.5、1 mg/ml)作用48h后bcl-2 mRNA和蛋白表达明显减少,bax mRNA和蛋白表达明显增加。结论:α-细辛醚对人肺癌A549细胞有明显的增殖抑制作用,并呈现时间和剂量依赖性;α-细辛醚可通过下调bcl-2表达和上调bax表达而诱导人肺癌A549细胞发生凋亡。     

博落回提取物血根碱对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨博落回提取物血根碱对结肠癌Caco-2细胞和肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法用不同浓度(0.625~5μg/ml)的血根碱分别处理结肠癌Caco-2细胞和肺癌A549细胞24h,MTT法测定细胞活力,流式细胞技术检测细胞凋亡百分率。结果不同浓度的血根碱对Caco-2细胞和肺癌A549细胞的生长均有明显的抑制作用,并增加肿瘤细胞凋亡百分率,呈现出一定的剂量依赖性(P0.05或P0.01)。结论博落回提取物血根碱可抑制结肠癌Caco-2细胞和肺癌A549细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡。     

莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的探讨莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法体外培养肺腺癌细胞A549,MTT比色法测定莪术油对A549细胞作用24、48、72 h后抑制率;流式细胞术分析莪术油对A549细胞作用24 h后细胞周期的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测莪术油对A549细胞作用24 h后细胞凋亡与坏死情况。结果莪术油对A549细胞增殖的抑制率随时间延长明显升高,随药物浓度增加抑制作用增强;莪术油对A549细胞作用24 h后,细胞周期停滞在G0/G1期,阻止其进入S期;细胞的早期凋亡、晚期凋亡和坏死比例随着莪术油浓度的增加而增加,且坏死细胞的比例高于凋亡细胞。结论莪术油对A549细胞的增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖,其作用是通过阻滞细胞周期及诱导凋亡和坏死来实现的。