衰老的分子调控机制及中药的干预作用

衰老(aging)是生物体组织、器官以及细胞功能随时间而逐渐丧失的渐进过程。有关衰老分子机制的学说包括经典的"端粒(telomere)学说"、"氧自由基(oxygen radical)学说"、"非酶糖基化(nonenzymatic glycosylation)学说"等,还有新近提出的"DNA甲基化(DNA methylation)学说"、"线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)学说"、"自噬(autophagy)学说"等。最新的研究表明,自噬是造血干细胞对抗衰老的一种有效措施。近年来,基于衰老的分子调控机制而发现了一些很有前途的抗衰老药物,如烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)和抗衰老肽——FOXO4-DRI。此外,在植物提取物领域中也有很多新发现,其中,以姜黄素(curcumin)、白藜芦醇(resveratrol)为代表的中药提取物以及一些单味中药、经典的中药复方可以在体内外干预人类衰老的分子调控机制而发挥一定的抗衰老作用。总之,基于衰老分子调控机制而研制或发掘抗衰老药物,尤其是天然药物,这是抗衰老研究领域的主要发展方向之一。     

慢性肾脏病肠道菌群失调的病理机制、治疗策略及中药的干预作用

肠道菌群失调是中、晚期慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)进展至尿毒症的高危因素之一,其特征就是益生菌减少、能产生尿毒素的条件致病菌(产尿素酶菌群、产内毒素菌群以及产代谢毒素菌群)增多。"肠-肾轴(gut-kidney axis)"学说和"慢性肾脏病-结肠轴(chronic kidney disease-colonic axis)"概念的核心观点认为,失调的肠道菌群通过加剧尿毒素蓄积和诱导全身性微炎症反应等途径加重肾脏的损伤。初步的临床试验和动物实验的结果显示,以乳酸菌和双歧杆菌制剂为代表的益生菌和以菊粉、低聚半乳糖为代表的益生元,还有鲁比前列酮、活性炭吸附剂等都可以针对CKD患者体内失调的肠道菌群,通过减轻尿毒素蓄积和抑制全身性微炎症反应等途径而改善肾功能。不仅如此,一些经口服或肠道给药的单味中药、中药复方还有中药提取物(大黄素等)在一定程度上也能调节肠道细菌,保护肠道上皮屏障,减轻尿毒素蓄积,延缓CKD进展。其中,大黄类经方——大黄甘草汤(浓缩颗粒TJ-84)改善肾衰竭动物模型体内尿毒素蓄积的靶点不是肾脏,而可能是"肠道菌群所启动的肠-肾轴"。基于此,针对中、晚期CKD患者肠组织中肠道菌群相关的病理因素(紧密连接蛋白、辅助性和调节性T细胞等)的干预性研究可能是今后的重点发展方向之一。     

老年期痴呆的中医药研究进展

近几年来,有关老年期痴呆的中医药研究越来越深入,总结出其主要病因病机为肾精不足,髓海失养;气血不足,脑神失养;痰瘀阻滞,脑窍失灵.并以此指导临床,采用辨证论治、专方专法、针灸等治疗本病,取得了一定疗效.随着研究的深入,运用中医中药将进一步改善患者临床症状、提高其生活质量.     

电针补益肾精法对围绝经期大鼠脑保护作用的实验研究

目的 观察电针补益肾精法和雌激素补充对去势大鼠脑缺血损伤后体内SOD、MDA及caspase-3的影响,比较这2种预处理方法对去势大鼠的脑保护作用。方法 将60只SD雌性大鼠随机分为4组,分别为假手术组、单纯去势组、雌激素预处理组、电针预处理组。除假手术组外,其余3组均行双侧卵巢切除(OVX)处理复制围绝经期大鼠模型,之后进行相关操作。电针预处理组大鼠以补益肾精为法,选“关元”及双侧“三阴交”进行针刺;雌激素预处理组给予苯甲酸雌二醇(0.15 mg/kg)肌内注射;所有4组均给予相同的捆绑处理,时间同电针预处理组。治疗结束后24 h,予4组大鼠脑缺血处理制备大脑中动脉缺血（MCAO）模型,缺血2 h后予再灌注处理,24 h后,处死大鼠,采血并取出脑组织,行NSS评分,并计算脑梗死体积,测定标本内E₂、SOD、MDA及caspase-3的含量。结果 电针预处理组血液及脑组织SOD含量显著高于雌激素预处理组（P<0.05）,MDA含量显著低于雌激素预处理组（P<0.05）,caspase-3含量2组间无明显差异（P>0.05）。结论 电针补益肾精法对围绝经期大鼠有脑保护的作用。     

疏肝利胆方干预胆色素结石模型豚鼠的作用机制研究

目的:探讨疏肝利胆方干预胆色素结石模型豚鼠的作用机制。方法:将15只豚鼠随机分为正常组、模型组及中药组,每组各5只。空白组和模型组每只豚鼠给予生理盐水1 m L·d-1灌胃,中药组给予疏肝利胆方灌胃。观察三组豚鼠成石率,并用酶联免疫吸附试验(EnzymeLinked Immuno Sorbent Assay,ELISA)测定豚鼠血清中白介素-15(Interleukin-15,IL-15)、IL-1β、IL-2、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)及胆汁中IL-15、IL-2、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)的含量。结果:中药组胆色素结石成石率较模型组明显下降,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,中药组中血清IL-15、IL-1β、PGE2的含量减少,IL-2的含量增加,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,中药组胆汁IL-15、CRP的含量减少,IL-2的含量增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:疏肝利胆方可减少胆色素结石成石率,其治疗胆色素结石机制与下调某些促炎细胞因子、调节免疫机理有关。     

番荔枝内酯对肺腺癌A549细胞周期及凋亡的影响

目的：探讨番荔枝内酯 Bullatacin 诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法采用 MTT 法检测不同浓度（6.25、12.5、25、50、100μg/mL）Bullatacin对A549细胞的抑制增殖作用,依照MTT结果取浓度25μg/mL Bullatacin作用于A549细胞0、12、24、48 h,流式细胞仪分析其对A549细胞增殖周期的影响,观察其对细胞凋亡的干预作用。Western Blot 检测不同实验组 ERK、JNK、p38磷酸化与总蛋白的表达。结果不同浓度Bullatacin作用于A549细胞后,呈明显的剂量依赖性;25μg/mL Bullatacin能将A549细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡;与空白组比较,P-ERK、P-JNK、P-p38的蛋白表达均明显增强。结论 Bullatacin明显抑制A549细胞增殖,并诱导其凋亡,其机理与Bullatacin通过磷酸化各蛋白激酶而激活MAPK通路有关。     

低剂量雷公藤甲素抑制Wnt3α/β-catenin信号通路活性改善高剂量D-葡萄糖诱导的足细胞转分化

探讨雷公藤甲素（triptolide,TP）改善高剂量D-葡萄糖（高糖）诱导的足细胞上皮-间充质转分化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用和分子机制。将体外培养的小鼠永生化足细胞分为正常组（normal group,N）、高剂量D-葡萄糖组（high dose of D-glucose group,H-TP）、低剂量TP组（low dose of TP group,L-TP）、高剂量TP组（high dose of TP group,H-TP）以及甘露醇组（mannitol group,MNT）,分别进行不同的干预：N组加入D-葡萄糖（D-glucose,DG,5 mmol·L^-1）;HG组加入HG（25mmol·L^-1）;L-TP组加入HG（25 mmol·L^-1）＋TP（3μg·L^-1）;H-TP组加入HG（25 mmol·L^-1）＋TP（10μg·L^-1）;MNT组加入DG（5 mmol·L^-1）＋MNT（24.5 mmol·L^-1）。在干预后的各时间点（24,48,72 h）,首先,观察TP对足细胞增殖活性的影响;其次,检测足细胞上皮细胞标志性分子（nephrin和podocin）、间充质细胞标志性分子（desmin和Ⅰ型胶原）以及EMT相关介质snail的蛋白表达水平;最后,检测足细胞Wnt3α/β-catenin信号通路关键信号分子Wnt3α和β-catenin蛋白表达水平。结果表明,HG不仅能引起足细胞nephrin和podocin蛋白低表达,desmin,Ⅰ型胶原和snail蛋白高表达,诱导足细胞EMT,而且,能促使足细胞Wnt3α和β-catenin蛋白高表达,激活Wnt3α/β-catenin信号通路。此外,L-TP对足细胞增殖能力没有影响,与HG联合干预不仅能明显恢复足细胞nephrin和podocin蛋白表达水平,抑制其desmin,Ⅰ型胶原和snail蛋白表达水平,改善足细胞EMT,而且,能明显降低HG诱导的足细胞Wnt3α和β-catenin蛋白高表达,抑制Wnt3α/β-catenin信号通路活性。总之,HG在体外能激活Wnt3α/β-catenin信号通路而诱导足细胞发生EMT;L-TP在体外能明显抑制Wnt3α/β-catenin信号通路活性而改善足细胞EMT,这可能是其干预足细胞EMT的作用和分子机制之一。     

胆宁片治疗豚鼠胆色素结石的实验研究

[目的]研究胆宁片治疗豚鼠胆色素结石的作用及机制。[方法]构建豚鼠胆色素结石模型,给予胆宁片小、中、大剂量治疗,治疗后观察豚鼠成石率,并用ELISA法测定血清中IL-15、IL-1β及胆汁中IL-15含量。[结果]胆宁片中、大剂量治疗后的豚鼠成石率较模型组下降,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组比较,胆宁片各剂量组血清中IL-15、IL-1β及胆汁中IL-15含量减少,差异有统计学意义（P〈0.01）,且胆宁片各剂量组间比较差异也有统计学意义（P〈0.01）。[结论]胆宁片能有效治疗豚鼠胆色素结石,其机制与减少IL-15、IL-1β含量有关。     

围绝经期女性皮质下动脉硬化性脑病的危险因素分析

目的研究围绝经期女性皮质下动脉硬化性脑病的危险因素。方法按照180例围绝经期女性患者头颅MRI结果,分为正常组和皮层下动脉硬化性脑病(SAE)组,并分析年龄、高血压病、糖尿病、血脂、颈动脉内中膜厚度等危险因素。结果两组间年龄、性激素水平、卒中史差异无统计学意义。SAE组高血压病、糖尿病发病率明显高于正常组(P<0.05);与正常组相比,SAE组的低密度脂蛋白胆固醇明显增高,SAE组的颈动脉内中膜厚度(IMT)明显增厚,差异有统计学意义(P<0.05),而总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和三酰甘油两组间比较差异无统计学意义。结论高血压病、糖尿病、颈动脉内中膜厚度、低密度脂蛋白胆固醇是围绝经期女性皮层下动脉硬化性脑病的危险因素。对以上危险因素进行干预的基础上,针刺治疗可以作为一种有益的尝试。     

补肾健脾方对AD大鼠AchE、ChAT及海马神经元凋亡的影响

目的研究中药补肾健脾方对阿尔茨海默(AD)大鼠血清及海马组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱转移酶(ChAT)及神经细胞凋亡的影响。方法雄性SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、假手术组及补肾健脾复方制剂小剂量、大剂量干预组。采用鹅膏蕈氨酸毁损大鼠脑Meynert基底核制备AD动物模型,中药补肾健脾方分别以3.6g/(kg.d)、7.2g/(kg.d)灌胃。30d后以水迷宫测试大鼠学习及记忆能力,对各组大鼠血清及脑海马匀浆中AchE、ChAT的活性进行测定,运用电镜技术及免疫组化检测海马中神经细胞的凋亡及Bax、Bcl-2的表达。结果与模型组比较,补肾健脾复方制剂大、小剂量干预组大鼠的平均逃避潜伏期明显缩短(P0.05),血清及匀浆中AchE的活性下降(P0.05),ChAT活性增高(P0.05),脑皮质的细胞凋亡显著减少(P0.05),脑皮质中Bax阳性神经元数量明显降低(P0.05),Bcl-2阳性神经元的数量显著增加(P0.05)。结论补肾健脾方可在抑制AchE活性的同时增加ChAT的活性,并可通过调节Bax/Bcl-2的表达减少海马组织中神经细胞的凋亡。