川芎嗪对人结肠癌HT29细胞凋亡的影响及其机制

目的观察川芎嗪对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响及作用机制。方法采用不同浓度TMP分别作用HT-29细胞,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western blot法检测基因PUMA及bax、bcl-2的表达。结果 TMP能有效抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖,诱导凋亡,且显示浓度和时间依赖性（P<0.01）;对293T细胞无显著性影响;TMP能提高促凋亡基因PUMA和 bax的表达,并下调抗凋亡基因bcl-2表达（P<0.05）。结论 PUMA及其下游信号通路介导了川芎嗪诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡。     

蛋白酶K对盐析法提取全血DNA的影响

盐析法是目前血液基因组DNA常用的提取方法之一,具有简便、快速、得到DNA的质量高的特点[1]。但有的研究中使用了蛋白酶K[2,3],有的研究中未使用蛋白酶K[1,4],均得到了高质量的DNA。为了了解蛋白酶K在盐析法提取全血DNA中的作用,     

α-硫辛酸对小鼠急性胰腺炎NF-κB活性影响的实验研究

目的观察α-硫辛酸对小鼠急性胰腺炎NF-κB活性的影响，探讨其对急性胰腺炎的保护作用及机制。方法选用健康昆明种小鼠96只，随机分为对照组、模型组和干预组。采用腹腔内注射L-精氨酸法建立小鼠急性胰腺炎模型，于术后第6、12、24、48小时分批处死小鼠，取胰腺组织进行病理评分，并测定胰SOD、MDA活性；免疫组化法检测胰腺细胞NF-κB活化情况。结果α-硫辛酸干预治疗后NF-κB活化被抑制（P〈0．05）；SOD上升，MDA降低（P〈0．05）；胰腺病理评分也降低（P〈0．05）。结论α-硫辛酸可抑制急性胰腺炎时胰腺细胞NF-κB活化，其机制可能是硫辛酸能改善胰腺氧化应激状态，从而减轻胰腺的病理损害。     

白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡与基因bcl-xl／bid表达的影响

目的:观察白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法:常规法制备白英水提物,实验分正常对照组、白英处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5mg/mL、25mg/mL和50mg/mL。流式细胞仪检测细胞凋亡,半定量RT-PCR和免疫化学分析细胞中bcl-xl、bid基因表达。结果:与正常对照组比较,白英处理组SGC-7901细胞增殖有显著性下降,细胞凋亡显著性增多(P<0.05);基因bcl-xl mRNA和Bcl-xl蛋白表达降低、bidmR-NA和Bid蛋白表达升高(P<0.05),并随白英浓度增加而加强。结论:白英水提物能诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,且有一定的量效关系,其作用机制可能与调控bcl-xl、bid基因表达有关。     

川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响

目的观察缺血再灌注后大鼠心肌细胞凋亡的特点及川芎嗪对其的影响。方法结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注180 min复制大鼠心肌缺血再灌注(IR)模型,川芎嗪保护组(IR+TMP)在结扎冠脉前30 min腹腔注射川芎嗪(20 mg/kg)。以TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化法分析Fas、FasL、Capase-8及Capase-3蛋白表达,荧光分析法测定Capase-3活性。结果缺血再灌注组(IR)心肌细胞凋亡指数23.47±3.88较对照组0.41±0.03有显著性升高(P<0.01),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著高于对照组(P均<0.05)。川芎嗪保护组(IR+TMP)心肌细胞凋亡指数1.81±0.25较IR组23.47±3.882有显著性降低(P<0.05),Fas、FasL、Capase-8、Capase-3蛋白及Capase-3活性均显著性低于IR组(P均<0.01)。结论缺血再灌注后心肌细胞凋亡数有明显的增多;川芎嗪对缺血再灌注后心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用,其机制可能与降低Fas死亡受体通路的信号转导有关。     

冬凌草甲素通过激活caspase途径诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡

目的 研究冬凌草甲素诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的作用原理及caspase途径在凋亡过程中的作用.方法 噻唑蓝(MTT)法,形态学观察,RT-PCR及流式细胞法.结果 冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞生长抑制作用呈时间剂量依赖性.形态学观察可见MDA-MB-231的增殖受明显抑制.冬凌草甲素可诱导细胞内抑制凋亡基因Bc1-xl表达量时间依赖性减少,促凋亡基因Bid表达量增加,caspase-3 的表达增加.40 μmol/L药物处理48 h后,流式法检测细胞凋亡率为75%.结论 冬凌草甲素诱导MDA-MB-231细胞凋亡,这种作用可能是通过改变Bc1-xl/Bid的表达比率、激活caspase-3 而实现的.     

白英乙醇提取物诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的实验研究

目的:探讨白英乙醇提取物对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及凋亡相关基因fas和caspase-3表达的影响。方法:采用体外培养人肺癌SPC-A-1细胞,随机分为正常对照组、白英乙醇提取物处理组(浓度分别为2.5、5、10mg.L-1)和阳性对照组(顺铂);药物处理48h后,用MTT法检测细胞增殖抑制率,转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法检测细胞凋亡率,半定量反转录-聚合酶链反应检测fas和caspase-3mRNA表达水平。结果:与正常对照组比较,白英各浓度组细胞抑制率显著上升(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01),fas和caspase-3mRNA表达显著上升(P<0.05或P<0.01)。结论:白英乙醇提取物可能通过上调fas和caspase-3基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制SPC-A-1细胞增殖。     

牛磺酸对缺血-再灌注大鼠血浆心肌肌钙蛋白T及心肌GRP78、Caspase-12表达的影响

目的探讨牛磺酸(taurine,Tau)对心肌缺血-再灌注损伤时血浆心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cT-nT)及心肌葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、胱天蛋白酶(Caspases)-12表达的影响及其意义。方法将50只大鼠按随机数字表法分为5组:假手术组(对照组,Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和Tau保护1组(Tau 1组)、Tau保护2组(Tau 2组)、Tau保护3组(Tau 3组),每组10只。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支1h,随后再灌注24h以建立心肌缺血-再灌注损伤动物模型;Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组分别在结扎冠状动脉前1h腹腔注射Tau 100、200、300mg·kg-1,余操作同I/R组;Sham组大鼠冠状动脉左前降支仅穿线,不结扎。采用酶联免疫法测定血浆cTnT水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,RT-PCR法和免疫组织化学法分析心肌细胞GRP78、Caspase-12基因表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果与Sham组比较,I/R组大鼠血浆cTnT、心肌组织中GRP78、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均显著升高(均P<0.01);与I/R组比较,Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组大鼠血浆cTnT水平、心肌组织中GRP78mRNA、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均呈显著降低(均P<0.05)。结论 Tau可显著减轻心肌缺血-再灌注损伤,其作用机制可能是Tau能下调缺血-再灌注心肌中GRP78和Caspase-12过表达。     

白英水提物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的:观察白英水提物(ESL)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法:常规法制备ESL;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组.白英处理组加入ESL终浓度分别为12.5、25、50 mg/mL.MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察SGC-7901细胞凋亡及形态变化,半定量RT-PCR分析基因bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达,荧光分析法测定Caspase-3活性.结果:与正常对照组比较,三个剂量白英处理组SGC-7901细胞增殖抑制均有显著性增加,且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡显著增多(P＜0.05),表现细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;bcl-xl mRNA表达显著下降(P＜0.05),bid、Caspase-9 mRNA表达显著性升高(P＜0.05),并随ESL浓度增加而加强,Caspaes-3活性亦显著性增高(P＜0.01).结论:ESL能剂量依赖性诱导SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,其作用与调控bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达和增强Caspase-3活性相关.     

大蒜素联合紫杉醇对人乳腺癌细胞增殖的影响及其机制

目的探讨大蒜素(DT)诱导MDA-MB-231细胞凋亡的作用及其机制。方法用人乳腺癌细胞株MDAMB-231细胞随机分为正常对照组、DT组(于培养基中加入终质量浓度为20μg·mL-1 DT作用细胞48h)紫杉醇(PTX)组(PTX 1μg·mL-1)和DT+PTX组。MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western blot检测puma、bax及bcl-2基因的表达。结果 DT+PTX组MDA-MB-231细胞增殖抑制率明显高于DT组、PTX组[(57.8±2.85)%比(25.45±1.58)%、(29.86±2.33)%,P<0.01]。DT+PTX组MDA-MB-231细胞凋亡率明显高于DT组、PTX组[(53.5±3.25)%比(24.7±1.45)%、(27.8±2.26)%,P<0.01]。DT+PTX组细胞中PUMA、Bax蛋白上调及Bcl-2蛋白表达下调的程度大于DT组、PTX组(P<0.05)。结论 DT、PTX合用可显著提高对MDA-MB-231细胞增殖抑制作用,诱导凋亡,两药合用具有协同抗肿瘤作用。 更多还原