胰淀素对脂肪变性人L-02肝细胞甘油三酯代谢的影响

目的 研究胰淀素对脂肪变性人L-02肝细胞甘油三酯代谢的影响及其可能机制.方法 以人L-02肝细胞为实验对象,用含50％胎牛血清的高糖改良杜氏伊格尔培养基（DMEM）孵育肝细胞72 h,制备肝细胞脂肪变性模型.实验分为正常肝细胞组（A组）、脂肪变性肝细胞组（B组）、不同浓度胰淀素孵育脂肪变性肝细胞组：0.01 μmol/L（C组）、0.1μmol/L（D组）,1μmol/L（E组）和5μmol/L（F组）,胰淀素孵育时间为24 h.油红O染色观察每组肝细胞的形态和肝细胞内脂滴情况,甘油三酯定量检测试剂盒检测每组肝细胞内甘油三酯的含量,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测每组肝细胞内脂肪酸合成酶（FAS） mRNA和乙酰辅酶A羧化酶（ACC） mRNA的表达情况.进行正态性和方差齐性检验后,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 用含50％胎牛血清的高糖DMEM培养基孵育肝细胞72 h后,肝细胞胞浆内充满大量红色脂滴,细胞内甘油三酯含量显著升高,说明肝细胞发生脂肪变性.A组甘油三酯含量为（415±52） mg/g蛋白,B组为（1129±96） mg/g蛋白（t=874,P＜0.05）；C、D、E、F组肝细胞内红色脂滴数量减少,甘油三酯含量分别为（898±77）、（740±83）、（515 ±30）、（628±48） mg/g蛋白（F =48.0,P＜0.05）.RT-PCR结果显示肝细胞脂肪变性后细胞内FAS mRNA和ACC mRNA表达增加,分别是A组的（1.35 ±0.03）、（1.51 ±0.04）倍,差异具有统计学意义（t=47.2、62.9,P ＜0.05）.不同浓度胰淀素处理后各组肝细胞内FAS mRNA和ACC mRNA表达有不同程度的下降.C、D、E、F组FAS mRNA的表达量分别是B组的（0.89 ±0.02）、（0.61 ±0.06）、（0.53 ±0.04）和（1.27±0.01）倍,与B组相比差异均具有统计学意义（t =16.2、58.7、70.4、41.2,均P＜0.05）.当胰淀素浓度为5μmol/L时,FASmRNA表达水平较B组升高.C、D、E、F组ACC mRNA的表达量分别是B组的（0.74±0.02）、（0.66 ±0.01）、（0.49 ±0.02）和（1.46±0.05）倍,与B组相比差异均具有统计学意义（t=30.6、40.6、61.1、57.3,均P＜0.05）.当胰淀素浓度为5μmol/L时,ACC mRNA的表达水平较B组升高.结论 胰淀素孵育脂肪变性肝细胞后肝细胞内甘油三酯含量下降,脂肪变性程度减轻,可能与肝细胞内FASmRNA和ACC mRNA表达水平变化有关.     

替米沙坦上调内脏脂肪组织的脂联素表达并改善胰岛素抵抗

目的 探讨替米沙坦对体外原代培养的人前脂肪细胞和OLETF大鼠脂肪组织中脂联素表达以及胰岛素敏感性的影响.方法 提取人腹部皮下和内脏的前脂肪细胞,原代培养并传代后接种于无血清培养基,分为对照组（H-N）、吡格列酮组（H-P）和替米沙坦（H-T）组.葡萄糖消耗试验测定细胞的胰岛素敏感性,实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术测定细胞脂联素mRNA的表达,放射免疫法测定培养基上清脂联素的分泌量.4周龄雄性OLETF大鼠28只,初始体重150～180 g.高脂喂养,分为对照组（O-HFD组,10只）、吡格列酮组（O-P组,8只）和替米沙坦组（O-T组,10只）.口服葡萄糖耐量实验和高胰岛素-正糖钳夹实验检测胰岛素抵抗指数和60 ～ 120 min葡萄糖输注速度以测定大鼠胰岛素抵抗水平,RT-PCR和Western blotting技术检测大鼠皮下和内脏脂肪组织脂联素的mRNA和蛋白表达.计量资料均数比较应用单因素方差分析.结果 H-T组和H-P组内脏前脂肪细胞的葡萄糖消耗量较之H-N组明显升高[分别为（5.6±1.6）、（4.4±1.6）、（2.0±0.8）mmol/L,F=20.240,P＜0.05].O-T和O-P组大鼠高胰岛素-正糖钳夹实验得到的60 ～ 120 min葡萄糖输注速度明显高于O-HFD组大鼠[分别为（18±5）、（20±4）、（10±3） mg·kg-1·min-1,F=8.136,P＜0.05].O-T和O-P组大鼠的HOMA胰岛素抵抗指数也显著低于O-HFD组大鼠（分别为10.0±8.6、5.5±2.0、17.8±10.1,F=5.784,P＜0.05）.替米沙坦可降低高脂饲养OLETF大鼠升高的腹围、内脏脂肪系数和血清游离脂肪酸水平,并改善大鼠的空腹高血糖,差别有统计学意义[分别为（24.0±2.0）比（26.5±2.7） cm、5.8％±2.4％比8.6％±2.4％、（2.8±0.7）比（5.3±1.8）μg/L、（10±6）比（15±7） mmoL/L,均P＜0.05].H-T较之H-N组原代培养人前脂肪细胞和O-T较之O-HFD组大鼠脂肪组织脂联素的mRNA表达和蛋白分泌量均明显上调（均P＜0.05）.H-T较之H-P组人内脏脂肪细胞和O-T较之O-P组大鼠内脏脂肪组织脂联素mRNA和蛋白表达水平均升高或有上升的趋势（分别为59.9±2.0比6.0±1.6、1.807±0.297比1.332±0.112、4.43±2.57比1.71±0.57、2.6±0.9比1.9±0.5,均P＜0.05）.结论 替米沙坦具有提高OLETF大鼠与人前脂肪细胞胰岛素敏感性、缓解大鼠的内脏性肥胖和改善大鼠糖脂代谢功能紊乱的作用,并很可能通过上调脂肪尤其是内脏脂肪的脂联素表达来完成.     

球形脂联素和葡萄糖对INS-1细胞内PPARα、CPT1与ACO基因表达的影响

以3、11、20 mmol/L葡萄糖或在5 mmol/L葡萄糖浓度时以2.5 mg/L球形脂联素孵育INS-1细胞24 h,RT-PCR检测PPARa、肉毒碱棕榈酸转移酶1(CPT1)和酰基辅酶A氧化酶(ACO)mRNA的表达.结果 显示,随着葡萄糖浓度的升高,INS-1细胞PPARa和CPT1、ACO mRNA的表达降低(均P＜0.05),球形脂联素增加PPARα(0.945±0.153 vs 0.749±0.069)、CPT1(0.590±0.029 vs 0.388±0.037)和ACO(1.553±0.131 vs 1.287±0.224)mRNA的表达(均P＜0.05),可被AMP活化的蛋白激酶(AMPK)抑制剂阿糖腺苷所抑制(分别为0.360±0.113、0.248±0.037和0.942±0.303,均P＜0.05).     

脂联素对乳腺癌细胞MCF7生长抑制的影响

目的 观察脂联素对人乳腺癌MCF7细胞株生长抑制的影响及探讨其可能的作用机制.方法 RPMI 1640培养基培养MCF7细胞.应用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测MCF7细胞脂联素受体的表达.观察脂联素（20、40 μg/ml）作用48 h后对细胞计数、细胞周期的影响.检测脂联素对细胞磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α（p-AMPKα）/总腺苷酸活化蛋白激酶α（AMPKα）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）/蛋白激酶B（Akt）、细胞周期素D1（cyclinD1）及细胞周期素E2（cyclinE2）表达的影响.采用方差分析进行统计学分析.结果 （1）MCF7细胞表达脂联素受体1和受体2.（2）脂联素对MCF7细胞的生长具有抑制作用,且此作用呈现为剂量依赖性.当脂联素浓度为20和40μg/ml时,MCF7的细胞计数分别为对照组的86.7％和72.9％（F=20.438,P＜0.05）.（3）脂联素可抑制MCF7细胞的增殖,使较多的细胞停留于G1/G0期（对照组为45.1％±0.7％,20 μg/ml脂联素组49.1％±1.3％,40 μg/ml脂联素组50.1％±1.1％,F=17.339,P＜0.05）,而S期细胞比例相对减少（对照组39.9％±1.2％,20μg/ml脂联素组36.4％±1.5％,40 μg/ml脂联素组36.0％±2.1％,F=9.715,P＜0.05）,此作用呈剂量依赖性.（4）脂联素作用30 min可增加MCF7细胞p-AMPKα （Thr172）表达（对照组、20、40 μg/ml脂联素组相对表达量分别为0.44±0.01、0.67±0.02、0.72±0.03,F=91.07,P＜0.05）,作用24 h可降低cyclin D1的表达（对照组、20、40 μg/ml脂联素组相对表达量分别为0.81±0.03、0.70±0.03、0.59±0.03,F=30.25,P＜0.05）,作用48 h可降低cyclin E2的表达（对照组、20、40 μg/ml脂联素组相对表达量分别为0.83±0.04、0.72±0.02、0.64±0.02,F=21.17,P＜0.05）.结论 脂联素可抑制乳腺癌细胞株MCF7的生长,其作用机制可能与AMPK激活、降低cyclin D1和cyclinE2表达有关.     

Roux-en-Y胃旁路术对肥胖糖尿病大鼠糖脂代谢及炎症水平的影响

目的 研究Roux-en-Y胃旁路术（RYGB）对自发型肥胖糖尿病（ZDF）大鼠模型糖脂代谢及全身炎症水平的影响.方法 30只雄性ZDF大鼠采用完全随机分组方法分为3组：RYGB手术组（n=10）、匹配饮食控制对照组（PF组,n=10）、自由进食对照组（AL组,n=10）.定期测量大鼠体重与摄食量.在术前及术后10周时,对各组大鼠行口服糖耐量试验,检测血糖、血脂、肝脏转氨酶及血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）与单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）等炎症相关指标,处死各组大鼠后取附睾脂肪,采用实时定量-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测脂肪细胞TNF-α、IL-1β与MCP-1 mRNA表达水平.组间数据比较采用t检验与方差分析.结果 术后10周口服糖耐量试验结果表明,RYGB组、PF组及AL组在各个时间点的血糖值比较均有统计学差异[分别为：基线空腹血糖（FPG）：（6.8±0.5）、（8.7±2.2）、（20.6±3.0） mmol/L,F=12.4,P＜0.05;30 min：（14.0±0.8）、（19.1±4.3）、（31.7±0.9）mmol/L,F=20.1,P＜0.05;60 min：（15.4±1.1）、（20.2±7.1）、（33.0 ±0.3）mmol/L,F =22.5,P ＜0.05;90 min：（13.2 ±0.6）、（20.0±5.8）、（32.4±0.4）mmol/L,F=14.7,P ＜0.05;120 min：（8.3 ±0.3）、（14.0±5.2）、（29.1±1.2）mmol/L,F =20.5,P ＜0.05].血清总胆固醇（TC）、游离脂肪酸（FFA）水平显著低于PF组和AL组[分别为：TC：（3.82±0.13）比（4.10 ±0.37）比（5.25±0.25） mmol/L,F=15.3,P＜0.05,FFA：（0.47±0.14）比（0.93±0.08）比（0.78 ±0.06） mmol/L,F=3.4,P＜0.05].RYGB组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平均较AL组明显下降[分别为TNF-α（124 ±23）比（532±52）mmol/L,t =5.8,P＜0.05;IL-1β（61±l6）比（250±32）mmol/L,t=4.3,P＜0.05],且脂肪组织中上述两种炎症因子mRNA在3组大鼠中的表达趋势与血清水平基本一致;而MCP-1在3组中表达无统计学差异（均P＞0.05）.结论 Roux-en-Y胃旁路术能显著改善肥胖2型糖尿病大鼠的糖脂代谢,减轻脂肪肝及全身炎症水平,且这种改善作用不依赖于摄食量减少.     

大鼠肾周脂肪组织趋化因子样受体1过表达对非酒精性脂肪性肝炎的影响*

目的 探讨慢病毒介导的趋化因子样受体1（CMKLR1) 在大鼠肾周脂肪组织中过表达对非酒精性脂肪性肝炎的影响。方法 将42只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、转染组各12只和空转染组6只。给予对照组普通饮食喂养,给予其余组高脂饮食喂养。在造模开始时给予各组经尾静脉注射溶媒和真病毒或空病毒。在实验第8 w和12 w,分批处死大鼠,取肝组织行苏木精-伊红染色,观察组织病理学变化;采用酶联免疫吸附法测定血清凯莫瑞和脂联素水平;分别采用RT-PCR法和Western blot法测定肾周脂肪组织CMKLR1和脂联素mRNA和它们的蛋白表达。结果 模型组大鼠肝组织炎症程度明显于对照组和转染组;在实验8 w和12 w,模型组血清凯莫瑞水平分别为（4.65±0.48） mmol/L和 (4.47±0.37）mmol/L,与对照组水平无明显差异[（4.38±0.43）mmol/L和（4.16±0.27）mmol/L],但均显著低于转染组水平[（7.66±0.53）mmol/L和（6.74±0.59）mmol/L,P<0.05];在8 w时,模型组脂肪组织CMKLR1 mRNA及其蛋白相对量分别为（0.235±0.008）和（0.206±0.005）,与对照组水平无显著差异[（0.226±0.008）和（0.21±0.117）],但显著低于转染组水平[（0.579±0.016）和（0.504±0.121）,P＜0.05];第12 w时,脂肪组织CMKLR1 mRNA及其蛋白表达水平与第8 w时结果相似;在8 w时,模型组大鼠血清脂联素水平、脂肪组织脂联素 mRNA及其蛋白表达水平分别为[【（31.82±1.51）mmol/L、（0.126±0.005）和（0.14±0.008）],显著低于对照组[（37.92±4.09）mmol/L、（0.262±0.007）和（0.35±0.016）,P<0.05]和转染组水平[（36.50±2.43）mmol/L、（0.193±0.058）和（0.232±0.012）,P<0.05];在12 w时,所测血清脂联素水平、脂肪组织脂联素 mRNA水平及其蛋白表达水平与第8 w时结果相似。结论 慢病毒介导的大鼠脂肪组织内过表达CMKLR1可显著改善大鼠非酒精性脂肪性肝炎时肝组织病理学损害。     

脂联素通过增强线粒体生物合成和功能减轻高糖/高脂诱导的心肌细胞损伤

目的:观察脂联素(APN)是否通过增强线粒体生物合成和功能减轻高糖/高脂所致心肌细胞损伤。方法: 分离培养SD乳鼠的心肌细胞,培养3 d后分为3组:即对照组（培养基中含5 mmol/L葡萄糖和20 mmol/L甘露醇)、高糖/高脂组(培养基中含25 mmol/L葡萄糖和500 μmol/L软脂酸钠,培养18 h）及高糖/高脂+APN组（培养基中含25 mmol/L葡萄糖,500 μmol/L软脂酸钠和3 μg/ml APN球状片段,培养18 h）。高糖/高脂处理后,检测转录因子Tfam mRNA的水平、细胞线粒体膜电位与心肌细胞的凋亡。结果: 与对照组比较,高糖/高脂组Tfam mRNA的水平与线粒体膜电位均降低,细胞凋亡增加;APN处理可逆转上述作用。结论: 高糖/高脂降低心肌线粒体生物合成和导致线粒体功能障碍;APN可通过增加线粒体的生物合成和功能而发挥对心肌保护的作用。     

非经典Wnt信号通路在2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝炎发生与发展中的作用

目的 探讨非经典Wnt信号通路在2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)发生与发展中的作用.方法 将雄性SD大鼠24只随机等分为对照组和模型组.对照组喂以基础饲料;模型组喂以高糖高脂饲料.4周后,模型组注射链脲佐菌素(30 mg/kg)诱导2型糖尿病(T2DM).各组继续对应饲料喂养至12周,模型组成功造模为T2DM-NASH模型.取血清及肝脏组织.检测血清葡萄糖、ALT、AST水平;苏木素-伊红及油红O染色观察肝脏病理改变;免疫组织化学、Western blot检测肝脏Wnt5a、NF-κB p65蛋白的表达;实时PCR定量检测肝脏Wnt5a mRNA、NF-κB p65 mRNA的表达,分别与对照组比较.数据以均数土标准差(x-±s)表示,采用t检验和直线相关与回归分析进行统计学分析. 结果 对照组和T2DM-NASH组中,血清葡萄糖分别为(6.25土1.28)mmol/L和(31.21±0.86) mmol/L,t=-36.204;血清ALT分别为(31.00±3.69) U/L和(301.50±8.62)U/L,t=-99.94 ;血清AST分别为(77.58±1.83)U/L和(344.75±1.82) U/L,t=-358.85,P值均＜0.01.苏木素-伊红及油红O染色显示肝细胞脂肪变性及肝组织炎症.免疫组织化学结果显示对照组和TDM-NASH组的Wnt5a表达量(积分吸光度)分别为1.15E4±577.45和4.04E5±2.42E4,t=-56.24;NF-κB p65表达量(积分吸光度)分别为1.28E4±1.59E3和4.21E5±1.68E4,t=-83.895,P值均＜0.01.Western blot结果显示T2DM-NASH组Wnt5a蛋白相对表达量和对照组相比为4.21土0.34比1.00±0.25,t=17.030 ; T2DM-NASH组NF-κB p65蛋白相对表达量和对照组相比为4.93±0.76比1.00±0.13,t=11.438,P值均＜0.01.实时定量PCR结果显示T2DM-NASH组Wnt5a mRNA相对表达量和对照组相比为9.53±0.64比1.04土0.35,t=20.165,P＜0.01 ; T2DM-NASH组NF-κB p65 mRNA表达量和对照组相比为0.60±0.13比0.74±0.10,t=-1.802,P=0.125.相关性分析结果表明T2DM-NASH组肝组织Wnt5a蛋白表达水平分别与血清ALT、AST水平存在正相关性(r=0.64,P＜0.05;r=0.59,P＜0.05).肝组织Wnt5a与NF-κB p65蛋白表达存在正相关性(r=0.58,P＜0.05).结论 Wnt5a可能通过激活NF-κ B介导炎症反应参与到T2DM合并NASH的发生与发展.     

脂联素在小鼠急性肝损伤中的表达及作用

目的: 观察脂联素在小鼠急性肝损伤的表达及作用.方法: 健康♂BALB/c小鼠随机分为3组. 刀豆蛋白A(concanavalin A, ConA)组8只: ConA 30mg/kg 尾静脉注射. 脂联素组5只: 在静脉注射ConA前12 h和2 h, 分别应用脂联素3 mg/kg腹膜内注射. 对照组8只: 尾静脉注射生理盐水10mL/kg. 注射ConA 8 h后处死小鼠, 检测脂联素及ALT血清水平、肝组织病理变化、肝组织脂联素蛋白及mRNA的表达.结果: 脂联素血清水平在脂联素组与对照组无差异, 2组均高于ConA组(15.4±3.0 mg/L,16.5±2.8 mg/L vs 11.8±2.1 mg/L, P <0.05或0.01);肝组织脂联素蛋白表达在脂联素组强于对照组(5.39%±1.72% vs 1.82%±0.36%,P <0.05), 弱于ConA组(10.63±4.35%, P <0.05);肝组织脂联素mRNA表达在脂联素组和ConA组均强于对照组(0.46±0.17, 0.51±0.21 vs0.23±0.05, P <0.05或0.01);血清ALT水平及肝组织炎症程度脂联素组高于对照组(192.50±45.87 U/L vs 44.71±21.29 U/L;21.5±9.2vs 8.4±4.3, 均P <0.05), 低于ConA组(616.00±171.50 U/L, 48.5±8.6, 均P <0.05).结论: 在ConA诱导的急性肝损伤中, 肝组织脂联素蛋白及其mRNA的表达增强, 但血清脂联素水平降低. 脂联素对急性肝损伤小鼠起着抗炎作用.     

全反式维甲酸对高糖诱导的HK-2细胞外基质合成的影响及可能机制

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对高糖诱导HK-2细胞外基质合成的影响及其在延缓糖尿病肾病肾间质纤维化中的可能作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞随机分为七组:A组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、B组(30 mmol/L D-葡萄糖)、C组(5.5 mmol/L D-葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇)、D组(10~(-7)mol/L ATRA+30 mmol/L高糖)、E组(10~(-6)mol/L ATRA+30 mmol/L高糖)、F组(10~(-5)mol/L ATRA+30 mmol/L高糖)、G组(10μmol/L Y-27632+30 mmol/L高糖),各组细胞均培养48 h。应用ELISA法检测细胞培养液结缔组织生长因子(CTGF)和Ⅳ型胶原的表达水平;RT-PCR法检测细胞Rho A、ROCK1的表达水平。结果 B组Rho A mRNA及ROCK1 mRNA的表达较A组显著升高(P<0.05),D、E、F组Rho A mRNA及ROCK1 mRNA较B组均表达减少(P<0.05),且随着ATRA浓度的升高呈现剂量依赖性。G组Rho A mRNA的表达与B组无明显差异,但ROCK1 mRNA的表达较B组显著减少(P<0.05);直线相关分析显示高糖组,D、E、F组Rho A mRNA与ROCK1 mRNA表达呈正相关(r=0.854,P=0.030;r=0.895,P=0.016;r=0.883,P=0.020;r=0.867,P=0.025);ELISA结果显示D、E、F组及G组CTGF、Ⅳ型胶原表达较B组显著下降(P<0.05),且下降程度与ATRA浓度呈现剂量相关性。结论 ATRA在一定浓度范围内可抑制高糖诱导的HK-2细胞外基质的合成,延缓肾间质纤维化,其机制可能与抑制Rho A/ROCK通路有关。     

辛伐他汀抑制大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌的机制研究

目的 观察辛伐他汀对大鼠胰岛β细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)的抑制作用及其机制.方法 8周龄健康雄性Wistar大鼠60只,体重250～300 g,饲养1周内分批处死.采用胆管注射胶原酶法提取大鼠胰岛,将新鲜分离或经24 h培养的大鼠胰岛按体积大小分为对照组(胰岛数=60)和辛伐他汀组(胰岛数=60),对照组给予Kreb-Ringer碳酸氢盐缓冲液,辛伐他汀组以100μmol/L辛伐他汀水浴30 min或过夜培养24 h.两组经2.8、5.5、11.1、16.7、25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,采用37 ℃水浴法观测胰岛β细胞GSIS变化,选用生物化学发光法测定腺苷三磷酸(ATP)含量.两组间数据比较采用t检验.结果 100 μmol/L辛伐他汀水浴30 min后,在25.0 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛β细胞ATP含量较相应对照组明显下降[(9.2±1.6)vs(12.1±1.9)pmol/胰岛,t=2.97,P＜0.05],GSIS较相应对照组明显减少(2.31±0.38 vs 3.19±0.41,t=3.154,P＜0.05).100μmol/L辛伐他汀过夜培养24 h后,在11.1 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛β细胞ATP含量较相应对照组明显降低[(9.2±1.4)vs(11.9±2.0)pmol/胰岛,t=2.514,P＜0.05];在2.8 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛素分泌即已明显受到抑制(0.28±0.03 vs 0.47±0.05,t=2.460,P＜0.05).辛伐他汀浓度超过30 μmol/L时,可剂量依赖性地抑制GSIS(2.49±0.21 vs 3.17±0.23,t=2.445,P＜0.05).结论 高浓度辛伐他汀可能通过抑制胰岛β细胞ATP生成而抑制GSIS.     

男性非酒精性脂肪性肝病患者血糖波动研究

选取48例糖耐量正常男性为研究对象,其中非酒精性脂肪性肝病23例为病例组,无脂肪肝25例为对照组,应用动态血糖监测系统评价血糖波动情况。结果显示,病例组平均血糖波动幅度[MAGE,（2.17±1.13对1.45±0.42）mmol/L]和血糖标准差[SDBG,（0.88±0.45对0.61±0.21）mmol/L]均高于对照组(P＜0.05)。MAGE和SDBG与体重指数、腰围和糖负荷后0.5h血糖升高值(AG30)呈正相关(均P＜0.05)。以MAGE为因变量,行多元线性回归分析显示,△G30、腰围和年龄被引入方程(P＜0.05或P＜0.01)。以SDBG为因变量,行多元线性回归分析显示,AG30和腰围被引入方程（P＜0.05或P＜0.01）。     

老年2型糖尿病患者动态血糖监测分析

目的 探讨老年2型糖尿病患者的动态血糖波动特点.方法 对老年2型糖尿病患者(老年组)92例和中青年2型糖尿病患者(中青年组)58例进行动态血糖监测,对比分析两组患者血糖谱特征及老年不同糖化血红蛋白(HbA1c)水平糖尿病患者的血糖谱特征.结果 (1)老年组与中青年组比较,血糖波动系数(BGFC)增大[(2.68±1.00)mmol/L对(2.12±0.74) mmol/L,t=-3.691,P＜0.001];餐后血糖漂移幅度(PPGE)增大,早餐后分别为 ( 5.96±2.47) mmol/L对(5.11±2.44) mmol/L(t=-2.058,P＜0.05),晚餐后分别为(5.17±2.15) mmol/L对 (4.16±2.28) mmol/L(t=-2.730,P＜0.01);餐后血糖达峰时间延长,早餐后(112.5±29.7) min对(97.0±27.2) min(t=-3.225,P＜0.01),中餐后(140.0±39.7)min对 (118.1±42.6) min(t=-3.195,P＜0.01);低血糖发生频率增加(26.3%对5.5%,P＜0.05);最大血糖漂移幅度(LAGE)增大,分别为(9.66±2.48) mmol/L对(8.40±3.13) mmol/L(t=-2.720,P＜0.01);(2)老年组患者随HbA1c下降,低血糖发生率增加(P＜0.05);随 HbA1c升高,血糖波动幅度增大;(3)HbA1c与空腹血糖(FBG)、日平均血糖(MBG)、高血糖时间比(PT7.8、PT11.1)、最低血糖(LBG)、最高血糖(HBG)、BGFC、PPGE、LAGE均正相关(r=0.899～0.289,均P＜0.001);逐步回归分析显示,MBG、FBG、PT7.8与HbA1c独立相关(校正的R2=0.807,P＜0.05).结论 老年2型糖尿病患者血糖波动幅度大,易发生餐后高血糖和夜间低血糖,动态血糖监测能较详细地显示患者的血糖水平及波动特征.

Abstract：

Objective To investigate the characteristics of the blood glucose fluctuation in elderly patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM). Methods The 92 elderly patients with T2DM (the elderly group) and 58 young and middle-aged patients with T2DM (the non-elderly group) were monitored using the continuous glucose monitoring system(CGMS). The characteristics of glucose profiles of the two different age groups, and of the different glycosylated hemoglobin (HbA1c) level groups in the elderly were comparatively analyzed. Results (1)There was no significant difference in HbA1c level between the elderly group and the non-elderly group. Compared with the non-elderly group, the elderly group showed the increases in blood glucose fluctuant coefficient [BGFC, (2.68±1.00) mmol/L vs. (2.12±0.74) mmol/L, t=-3.691, P＜0.001], in postprandial glucose excursion (PPGE) of breakfast and supper [(5.96±2.47) mmol/L vs. (5.11±2.44) mmol/L, t=-2.058, P＜0.05; (5.17±2.15) mmol/L vs. (4.16±2.28) mmol/L, t=-2.730, P＜0.01], in the time to postprandial glucose peak of breakfast and lunch [(112.5±29.7) min vs. (97.0±27.2) min, t=-3.225, P＜0.01; (140.0±39.7) min vs. (118.1±42.6) min, t=-3.195, P＜0.01], in the frequency of hypoglycemia (26.3% vs. 5.5%, P＜0.05), and showed the largest amplitude of glycemic excursions [LAGE, (9.66±2.48) mmol/L vs.(8.40±3.13) mmol/L, t=-2.720, P＜0.01]. (2)In the elderly, along with decreased HbA1c, the incidence of hypoglycaemia increased (P＜0.05); And along with increased HbA1c, the amplitude of blood glucose fluctuation increased. There were significant differences in BGFC, PPGE of breakfast and lunch, and LAGE among different HbA1c level groups (P＜0.01, P＜0.05, P＜0.05, P＜0.001). (3)HbA1c was positively correlated with FBG, mean blood glucose (MBG), percentage of time at glycemia (PT7.8, PT11.1), the lowest blood glucose (LBG), the highest blood glucose (HBG), BGFC, PPGE and LAGE (r=0.899-0.289, all P＜0.001). Multiple stepwise regression analysis indicated that MBG, FBG and PT7.8 was the independent influential factor of HbA1c (adjusted R2=0.807, P＜0.05). Conclusions The elderly patients with T2DM are at a particularly high risk for postprandial hyperglycemia and nocturnal hypoglycemic episodes, CGMS could show glucose fluctuation characters of T2DM patients diurnally, and provide a clinical basis for reasonable therapy.     

白细胞介素1β和干扰素γ对小鼠胰岛素瘤βTC-6细胞胰岛素分泌功能的影响

目的探讨炎性细胞因子白细胞介素1β（IL-1β）、干扰素γ（IFN-γ）对小鼠胰岛β细胞株βTC-6胰岛素分泌功能的影响。方法将βTC-6细胞培养于高糖DMEM培养基,48h后换用无糖KRBH缓冲液培养30min,分别于含0、1．38、5．50和11．10mmol／L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素水平（GSIS）。在BTC-6细胞中分别加入不同浓度的IL-1β（0．15、1．50μg／L）和（或）IFN-γ（10、100U／m1）,24h后换用无糖KRBH缓冲液培养30min,在含1．38mmol／L葡萄糖的KRBH缓冲液中孵育60min,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素水平。多组间数据比较采用单因素方差分析,两组间数据比较采用t检验。结果βTC-6细胞在1．38mmol／L葡萄糖刺激时胰岛素分泌达高峰,与无葡萄糖刺激时相比差异有统计学意义[（151±14）对（120±4）mU／L,t=-4．215,P=0．006];5．50、11．10mmol／L葡萄糖刺激时胰岛素分泌较1．38mmol／L葡萄糖刺激时明显下降（均P〈0．05）。与单纯1．38mmol／L葡萄糖刺激组相比,IL-1β（0．15μg／L）组[（85．53±5．06）mU／L对（103．11±0．27）mU／L,t=4．897,P=0．039]、IL-1β（1．50μg／L）组[（62．62±0．64）mU／L对（103．11±0．27）mU／L,t=212．66,P〈0．001]葡萄糖刺激下胰岛素分泌水平显著下降,下降程度与IL-1β的剂量呈正相关;与单纯葡萄糖刺激组相比,IFN-γ（100U／m1）组葡萄糖刺激下胰岛素分泌显著下降[（73．2±1．6）对（105．2±1．8）mU／L,t=19．52,P：0．003];与IL-1β（0．15μg／L）组及IFN-γ（100U／m1）组相比,IL-1β联合IFN-γ组葡萄糖刺激下胰岛素分泌显著下降（F=77．38,P〈0．001）。结论IL-1β和IFN-γ对13TC-6细胞的胰岛素分泌功能有抑制作用,且两者间具有协同效应。     

丙氨酸转移酶升高的2型糖尿病患者伴有更多的心血管风险因素

根据血丙氨酸转氨酶(ALT)水平将4 509例2型糖尿病患者分为A组(n=449,ALT增高)和B组(n=4 060,ALT正常),ALT升高的患者为10%.与B组患者相比,A组患者相对年龄更轻[(48.5±11.3对55.7±11.4)岁,P＜0.01]、糖尿病病程更短[(36.8±45.0对56.2±58.8)个月,P＜0.01]、体重指数以及腰臀比更大[(27.7±3.9对25.8±3.4)kg/m2,P＜0.01;0.95±0.06对0.93±0.07,P＜0.01].两组之间的血压存在差别[收缩压(132±19对131±21)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,P=0.60;舒张压(78±10对75±10)mm Hg,P＜0.01].A组的空腹血糖[(9.04±2.91对8.63±3.05)mmol/L,P=0.008]、餐后血糖[(13.85±4.67对13.07±4.92)mmol/L,P=0.002]、HbA1C(8.11%±1.82%对7.74%±1.96%,P＜0.01)、空腹胰岛素[(10.59±7.31对7.97±7.18)mU/L,P＜0.01]和餐后胰岛素[(48.96±43.80对35.25±32.37)mU/L,P＜0.01]及稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR,4.11±2.85对3.00±2.92,P＜0.01)、甘油三酯[(2.77±2.50对2.19±2.99)mmoL/L,P＜0.01]明显增高,高密度脂蛋白胆固醇[HDL-C,(1.20±0.30对1.29±0.83)mmol/L,P=0.01]更低.Logistic回归分析说明,HbA1C、餐后胰岛素、HOMA-IR、尿酸和尿白蛋白与ALT水平正相关,HDL-C则为负相关.提示ALT增高的2型糖尿病患者发病年龄更轻,有更严重的胰岛素抵抗和更多的心血管危险因素.     

中老年男性肥胖者阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与代谢综合征相关性研究

目的 探讨中老年男性肥胖者阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)及其组分之间的关系.方法 选择中老年男性肥胖患者154例,根据多导睡眠呼吸监测仪监测结果诊断OSAHS及病情严重程度,测定MS相关指标,应用统计学方法对OSAHS各组相关指标及OSAHS与MS之间的关系进行比较分析.结果 与对照组比较,重度OSAHS组高密度脂蛋白胆固醇明显降低[(1.03±0.29)mmol/L对(1.31±0.38)mmol/L,P＜0.05],血糖[(6.61±1.76)mmol/L对(5.47±0.64)mmol/L]、收缩压[(133±13)mm Hg对(125±12)mm Hg]及舒张压[(99±10)mm Hg对(80±5)mm Hg]明显升高(均P＜0.05);MS患病率轻度OSAHS组25.7%,中度OSAHS组46.5%,重度OSAHS组84.4%,均明显高于对照组16.1%(均P＜0.01);在OSAHS患者中,MS患病率是对照组的6.16倍.结论 中老年男性肥胖患者OSAHS是MS发病的独立危险因素.

Abstract：

Objective To explore the relationship between obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome (OSAHS) and metabolic syndrome (MS) in obese middle-aged and older men. Methods We selectively recruited 154 obese middle-aged and older men matched for body mass index (BMI) and age. The polysomnography was performed for diagnosing OSAHS and for discriminating disease severity. The BMI, waist circumference, blood pressure, plasma glucose and lipid profiles were measured and analyzed in all subjects. Appropriate statistical methods were used to compare the components of MS in each group. Logistic regression was taken to elucidate the relationship between OSAHS and MS. Results Compared to control group, severe OSAHS group had significantly lower high density lipoprotein cholesterol level [( 1.03 ± 0.29 ) mmol/L vs. ( 1.31 ± 0. 38) mmol/L,P＜0. 05] and higher fasting glucose [(6.61±1.76) mmol/L vs. (5.47±0.64) mmol/L, P＜0. 05]as well as higher systolic blood pressure [( 133 ± 13) mm Hg vs. ( 125 ± 12) mm Hg, P＜0. 05] and diastolic blood pressure [(99±10) mm Hg vs. (80±5) mm Hg, P＜0. 05]. The prevalence of MS was significantly higher in OSAHS group than in control group (mild OSAHS group: 25.7%,moderate OSAHS group: 46. 5%, severe OSAHS group: 84.4%, control group: 16. 1 %, all P＜0. 01). OSAHS was independently associated with an increased prevalence of MS Odds ratio, 6.16).Conclusions OSAHS is independently associated with MS in obese middle-aged and older men.     

规范化治疗对妊娠期糖尿病患者血糖水平及妊娠结局的影响分析

目的探讨规范化治疗对妊娠期糖尿病(GDM)患者血糖水平、妊娠结局的影响。方法选择2018年1月—2020年1月收治的92例GDM患者作为研究对象,使用统计学软件SAS以随机数生成器模块随机分成两组,每组46例。对照组常规胰岛素治疗,观察组接受规范化治疗,比较两组患者血糖控制情况、胰岛素水平变化、脂联素与瘦素水平变化以及妊娠结局。结果两组患者治疗前血糖指标对比差异无统计学意义(t=0.799、0.182、0.194,P>0.05);治疗后观察组空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白分别为(5.16±0.95)mmol/L、(6.25±1.15)mmol/L、(5.21±0.69)%均低于对照组(6.48±1.05)mmol/L、(7.58±1.22)mmol/L、(6.45±0.65)%,差异有统计学意义(t=6.323、5.380、8.872,P<0.05)。两组患者治疗前胰岛素水平(FINS)、胰岛抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛功能指数(HOMA-β)对比差异无统计学意义(t=0.272、0.538、0.923,P>0.05);治疗后观察组FINS、HOMA-IR、HOMA-β分别为(8.25±0.65)mIU/L、(1.53±0.31)、(135.47±16.59),对照组分别为(8.32±0.68)mIU/L、(2.58±0.39)、(86.64±8.61),其中HOMA-IR、HOMA-β的对比有统计学意义(t=14.294、17.719,P<0.05)。两组患者治疗前脂联素、瘦素指标水平对比差异无统计学意义(t=0.210、0.270,P>0.05);治疗后观察组脂联素、瘦素分别为(54.39±8.41)mg/L、(3.45±0.58)μg/L,对照组分别为(43.69±7.62)mg/L、(4.65±0.69)μg/L,差异有统计学意义(t=6.395、9.029,P<0.05)。观察组产妇剖宫产、高血压、低血糖等的发生率相较于对照组差异无统计学意义(P>0.05)。观察组新生儿发生窒息、黄疸、呼吸窘迫综合征的总发生率低于对照组,差异有统计学意义(t=4.089,P<0.05)。结论GDM采用规范化治疗方案,血糖维持效果更理想,同时有利于患者胰岛功能和脂联素、瘦素的改善,对妊娠结局也有一定的积极影响。     

六例暴发性1型糖尿病患者临床特征分析

目的 比较分析暴发性1型糖尿病及经典1型糖尿病的临床特征,探讨暴发性1型糖尿病的发病机制.方法 入选2005年9月至2009年9月在我院内分泌科住院的以酮症酸中毒为首发症状的暴发性1型糖尿病患者6例(暴发性1型糖尿病组)和以酮症酸中毒为首发症状的初发经典1型糖尿病患者24例(经典1型糖尿病组),回顾性分析两组患者的临床特征,包括发病年龄、糖尿病病程、咽痛、咳嗽、发热等流感样症状、恶心、呕吐、腹痛等消化道症状、入院时随机血糖、糖化血红蛋白、C肽、丙氨酸转氨酶、肌酸激酶、肌酐、血钾、白细胞计数等.计量资料和计数资料分别采用t检验或x2检验进行统计分析.结果 与经典1型糖尿病组相比,暴发性1型糖尿病组发病年龄升高[分别为(46±6)、(19±6)岁,t=9.89,P＜0.01],糖尿病病程明显缩短[分别为(3.5±2.7)、(52.5±32.6)d,t=3.63,P＜0.01],咽痛、咳嗽、发热等流感样症状明显增多[分别为50%(3/6)、0(0/24),x2=13.33,P＜0.01],恶心、呕吐、腹痛等消化道症状亦增多[分别为83%(5/6)、0(0/24),x2=24.00,P＜0.01].与经典1型糖尿病组相比,暴发性1型糖尿病组入院时随机血糖升高[分别为(44±7)、(23±4)mmol/L,t=9.22,P＜0.01],糖化血红蛋白降低[分别为(7.1±1.0)%、(14.4±2.2)%,t=7.66,P＜0.01],餐后2 h C肽减少[分别为(0.21±0.17)、(0.58±0.39)μg/L,t=2.29,P＜0.05],丙氨酸转氨酶增高[分别为(206±124)、(10±2)U/L,t=8.18,P＜0.01],肌酸激酶升高[分别为(1038±447)、(79±10)U/L,t=11.11,P＜0.01],肌酐增加[分别为(179±39)、(55±16)μmol/L,t=12.33,P＜0.01],血钾升高[分别为(5.2±0.7)、(3.4±0.8)mmol/L,t=5.07,P＜0.01],白细胞计数增多[分别为(21.0±8.1)×109个/L、(6.0±1.9)×109个/L,t=8.64,P＜0.01].结论 暴发性1型糖尿病患者存在胰岛β细胞功能衰竭,代谢紊乱更为严重,免疫反应更加强烈,容易导致多脏器功能损害.     

胰岛新生相关蛋白对胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌功能的影响

目的 观察胰岛新生相关蛋白对胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌功能的影响.方法 INS-1细胞购自上海拜力生物科技有限公司.葡萄糖刺激实验中,INS-1细胞被分为实验组（50 mg/L胰岛新生相关蛋白与INS-1共培养）和对照组,经2.8、16.7 mmol/L含葡萄糖1640培养液刺激1 h后,采用放射免疫法检测上清液中胰岛素含量.另设立24、48 h组,分别以1、10、25、50、100、250、500 mg/L胰岛新生相关蛋白、INS-1细胞共培养,24或48 h后检测吸光度值.逆转录聚合酶链反应中,INS-1细胞被分为实验组（50 mg//L胰岛新生相关蛋白与INS-1共培养）和对照组,检测PCNA、Cyclin d1、Cdk4、P27、p38MAPK、JNK mRNA表达水平.采用t检验和单因素方差分析进行数据统计.结果 2.8 mmol/L葡萄糖刺激下,实验组胰岛素释放量高于对照组[分别为（74±16）、（39±9）mU/L,t=3.96,P＜0.05];16.7 mmol/L葡萄糖刺激下,实验组胰岛素释放量亦高于对照组[分别为（78±9）、（46±10）mU/L,t=4.72,P＜0.01].随着胰岛新生相关蛋白浓度增加,INS-1细胞增殖更为明显,具有剂量依赖性,且刺激48 h的效应强于24 h.50 mg/L胰岛新生相关蛋白干预24 h后,实验组和对照组相比,PCNA、Cyclin d1、Cdk4 mRNA表达上调（t值分别为7.64、5.98、12.87,均P＜0.01）,P27、p38MAPK、JNK mRNA表达下降（t值分别为10.61、27.64、2.95,均P＜0.05）.结论 胰岛新生相关蛋白干预后,INS-1细胞胰岛素释放水平增加,胰岛细胞数量增多,这可能与其影响细胞周期调控基因的表达有关.