白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α对血管平滑肌细胞及基质金属蛋白酶-2骨桥蛋白基因表达的影响

促炎细胞因子白细胞介素－１β和肿瘤坏死因子－α是血 滑肌细胞的强效促分裂原,为了探讨其促血管平滑肌细胞增殖是否与细胞外基质降解及粘附事成有关,本文以体外培养的血管平滑肌细胞为研究对象,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹及其质金属蛋白酶－２及骨桥蛋白的影响。结果发现,白细胞介素－１β和肿瘤坏死因子－α均可显著诱导基质金属蛋白本科及骨桥蛋的基因表达,血管平滑肌细胞受两种细胞因子刺激１２小时后,基质金属蛋白酶－２     

骨关节炎软骨细胞和滑膜细胞金属蛋白酶活性的影响因素

目的 探讨几种细胞因子、生长因子和药物等刺激物对骨关节炎软骨细胞及滑膜细胞金属蛋白酶活性的影响。方法 骨关节炎患者的单层软骨细胞和膜细胞均以白细胞介素-1β、转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α、双氯芬酸钠、多西环素和地塞松分别处理72h。应用酶谱分析细胞培养上清液中酶活性。结果 单层软骨细胞产生金属蛋白酶-9和-2，而滑膜细胞仅产生金属蛋白酶-2。白细胞介素-1β，肿瘤坏死因子-α和双氯芬酸钠均能显著增强金属蛋白酶-9活性，其中以白细胞介素-1β作用最强，与肿瘤坏死因子-α或双氯芬酸钠有协同作用。多西环素、转化生长因子-β1和地塞米松均能抑制金属蛋白酶-9和-2活性，并与白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α和地塞米松均能抑制金属蛋白酶-9和-2活性，并与白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α和双氯芬酸钠起拮抗作用。多西环素为最强的抑制物。结论 白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α可能为破坏关节软骨的重要细胞因子，转化生长因子-β1则为保护因子，多西环素则可能成为骨关节炎的有效治疗药物。     

白细胞介素-1β上行调节兔血管平滑肌细胞极低密度脂蛋白受体mRNA的表达

为了研究血管平滑肌细胞是否表达极低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析法检测培养兔主动脉平滑肌细胞表达极低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ的情况。结果发现，培养兔主动脉平滑肌细胞可以表达极低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ；而且，细胞因子白细胞介素－１β能使表达增强约２倍。提示极低密度脂蛋白受体有可能参与动脉平滑肌细胞源性泡沫细胞；白细胞介素－１β上行调节平滑肌细胞表达极低密度脂蛋白受体ｍＲＮＡ     

基质金属蛋白酶-10与内分泌代谢疾病的相关性

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)是依赖Zn2+的内源性蛋白水解酶,几乎可以降解细胞外所有基质。MMP-10属于其中的间充质溶解素类,主要降解蛋白多糖、纤维黏连蛋白等。很多激素和细胞因子可以改变其表达情况,如性激素、糖皮质激素、甲状腺素、白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α等。目前,有研究发现,MMP-10可以参与糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病、脂代谢异常、血管性疾病和代谢性骨病等多种内分泌代谢疾病的发生、发展、转归。     

洛伐他汀对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶3表达的影响

观察洛伐他汀对免血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶3表达的影响及其作用机制。用Westem blot检测基质金属蛋白酶3蛋白水平，采用电泳迁移率变动分析法测定AP-1结合活性，用逆转录聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶3mRNA水平。结果发现，自细胞介素1α和血小板源生长因子BB联合作用于免血管平滑肌细胞。可明显增加基质金属蛋白酶3的表达，洛伐他汀抑制这种刺激作用，使基质金属蛋白酶3的表达减低，且呈浓度依赖性；该抑制作用可被甲羟戊酸和双香叶酯基焦磷酸盐所逆转，而不被角鲨烯所逆转。白细胞介素1α和血小板源生长因子BB联合作用后使兔血管平滑肌细胞胆1结合活性和基质金属蛋白酶3mRNA水平明显增高，洛伐他汀抑制白细胞介素1α和血小板源生长因子BB上调AP-1结合活性的作用，但对基质金属蛋白酶3mRNA水平无明显影响。结果提示，洛伐他汀不依赖其调脂作用抑制血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶3的生成，从而在理论上有抗动脉粥样硬化和增加斑块稳定性的作用。     

氧化型低密度脂蛋白对大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2和9表达的影响

为探讨氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化的作用是否与基质金属蛋白酶表达活性改变有关,应用Northern blot、Dot blot、Westorn blott和明胶酶图分析方法观察氧化型低密度脂蛋白对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶－2和9的影响。结果显示,10mg/L氧化型低密度脂蛋白作用于血管平滑骨细胞24h,可明显增强基质金属蛋白酶－2和9mRNA的表达、蛋白分泌和酶的活性,高浓度的氧化型低密度脂蛋白对基质金属蛋白酶－2和9表达的影响不同,氧化型低密度脂蛋白浓度为50mg／L时,基质金属蛋白酶－9表达活性仍然高于对照细胞,但于10mg／L氧化型低密度脂蛋白的作用强度无显著差别;相同条件下,基质金属蛋白酶－2的基因表达和蛋白分泌明显降低。以上结果提示,氧化型低密度脂蛋白可诱导血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶－2和9的表达,并可促进细胞外基质降解。     

基质金属蛋白酶-9在系统性红斑狼疮发病中的作用

基质金属蛋白酶．9（MMP-9）是金属蛋白酶家族成员之一，其主要功能是降解细胞外基质，参与体内多种生理及病理过程如胚胎发育、创伤修复、血管形成、炎症、肿瘤的侵润及转移、结缔组织病等。基质金属蛋白酶（MMPs）在自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、原发性干燥综合征、系统性硬化症的发病中扮演了重要角色拉。越来越多的证据表明MMP-9通过降解血管基底膜的主要成分，使内皮细胞通透性增加，有利于炎性细胞侵入血管壁引起炎症反应，并可调节细胞因子的活性，从而参与系统性红斑狼疮（SLE）发病的多个环节。     

阿托伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞迁移和组织蛋白酶S表达的影响

目的 观察阿托伐他汀对白细胞介素1β诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移及组织蛋白酶S和核因子κB表达的影响.方法 取SD大鼠胸主动脉进行血管平滑肌细胞培养,采用Boyden小室实验评价不同浓度阿托伐他汀对白细胞介素1β诱导大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响,用细胞免疫化学和逆转录聚合酶链反应法检测各组组织蛋白酶S和核因子κB表达的变化.结果 与正常对照组相比,白细胞介素1β组血管平滑肌细胞迁移增多,核因子κB和组织蛋白酶s表达明显增加(P<0.01).1 μmol/L和10 μmol/L阿托伐他汀组可呈剂量依赖性地抑制白细胞介素1β所致的细胞迁移以及组织蛋白酶S和核因子κB表达(P<0.01).结论 阿托伐他汀可能通过抑制核因子κB使组织蛋白酶S表达减少,从而抑制血管平滑肌细胞迁移.     

基质金属蛋白酶与心肌间质重构

在心力衰竭的进展过程中，心室重构起主要作用。心室重构包括心肌实质重构和心肌间质重构，心肌间质重构是指成纤维细胞增生、纤维化以及细胞外基质胶原网的量和组成的变化。基质金属蛋白酶（MMPs）是一种能特异地降解细胞外基质成分的Zn^2 依赖的酶家族，心肌中的MMPs能够降解心脏中所有的基质成分，是心肌间质重构中基质降解的推动力量。MMPs的表达与活性受到肿瘤坏死因子-α、白介素－1β、血管紧张素Ⅱ、内皮素以及金属蛋白酶组织型抑制物等因子的调控。通过直接或间接的方法调节MMPs的活性，可以改变心肌间质重构过程，从而最终改变心力衰竭的进程。     

急性脑梗死患者基质金属蛋白酶-2和白细胞介素-1β含量的变化

脑梗死后缺血/再灌注(I/R)损伤是一个复杂的缺血级联反应,涉及多种机制,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)可通过降解基底膜,破坏血脑屏障,形成血管源性脑水肿,激活炎性细胞因子,引起炎性细胞浸润,直接导致持续性的细胞凋亡等在脑梗死后I/R损伤中发挥了重要的病理生理效应。本文从临床上动态观察MMP-2和白细胞介素-1β(IL-1β)含量变化与脑梗死的关系及其相关性,探讨二者在脑梗死发生发展中的作用。     

蛋白-酪氨酸激酶在大鼠血管平滑肌细胞诱导型一氧化氮合酶基因表达中的作用

为了解蛋白－酪氨酸激酶及蛋白激酶Ｃ在血管平滑肌细胞诱导型一氧化氮合酶基因表达中的作用,应用蛋白－酪氨酸激酶抑制剂抑制细胞蛋白－酪氨酸激酶活性及应用伏波脂耗竭细胞蛋白激酶Ｃ。结果发现蛋白－酪氨酸激酶抑制剂显著抑制了白细胞介素－１β诱导的血管平滑肌细胞诱导型一氧化氮合酶ｍＲＮＡ表达（０．８３０±０．１８９对０．５１９±０．１８０,Ｐ＜０．０５）和一氧化氮的释放（培养基亚硝酸盐浓度为８．９４±０．８６μｍｏｌ／Ｌ对２．８３±０．４７μｍｏｌ／Ｌ,Ｐ＜０．０１）。而耗竭细胞蛋白激酶Ｃ不影响其诱导型一氧化氮合酶基因表达和一氧化氮合成,表明白细胞介素－１β诱导的大鼠血管平滑肌细胞诱导型一氧化氮合酶基因表达信号转导为蛋白－酪氨酸激酶依赖性的而非蛋白激酶Ｃ依赖性的转导。     

细胞因子在调节骨吸收中的作用

本文就细胞因子在调节骨吸收中的刺激和抑制作用做一综述。讨论的刺激骨吸收的因子包括克隆刺激因子，白细胞介素－１、转化生长因子－α，肿瘤坏死因子降白细胞介素－６、抑制骨吸收的因子为转化生长因子－β、干扰素和白细胞介素－４。     

白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α对大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响

目的 观察白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α对大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达的影响.方法 采用贴块法原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞,选用第3～5代细胞随机分组实验:对照组、不同浓度白细胞介素1β干预组和不同浓度肿瘤坏死因子α干预组.用酶联免疫吸附法、逆转录聚合酶链反应分别检测诱导后细胞内皮脂肪酶蛋白及mRNA表达水平.结果 平滑肌细胞经不同浓度白细胞介素1β或肿瘤坏死因子α诱导24 h后,内皮脂肪酶表达水平上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),各浓度组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05).白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α分别为30μg/L、50μg/L时内皮脂肪酶表达水平最高.结论 白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α均能诱导大鼠主动脉平滑肌细胞内皮脂肪酶表达.     

促生长素释放激素及细胞因子对垂体促生长素基因表达的 …

目的 研究人促生长素释放激素（ｈＳＲＨ）、白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子－ａ（ＴＮＦ－ａ）对垂体前叶促生长素细胞中生和素基表达的调控作用及其与Ｐｉｔ－１的关系。方法 将含有人促生长素基因启动子和萤光素酶报告基因的融合基历表达质粒（ｐＧＬ２－ＧＨ－Ｌｕｃ）单独转染或与人Ｐｉｔ－１基因表达质粒（ＰｃＤＮＡ－Ｐｉｔ－ｌｃＤＮＡ）共转染于大鼠ＧＨ３细胞中，体外观察     

过氧化体增殖物激活型受体γ配体抑制巨噬—泡沫细胞炎性介质和基质金属蛋白酶2的分泌

目的在证实泡沫细胞有过氧化体增殖物激活型受体γ表达的基础上,探讨其配体对巨噬细胞、泡沫细胞炎性介质和基质金属蛋白酶分泌的影响。方法体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,给予氧化型低密度脂蛋白进一步诱导其转变为泡沫细胞,应用逆转录聚合酶链反应检测过氧化体增殖物激活型受体γmRNA表达;过氧化体增殖物激活型受体γ配体吡格列酮干预后用Western blot检测巨噬细胞CD40蛋白的表达;用酶联免疫吸附测定法测定泡沫细胞培养上清液中白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶2和9的浓度,Gelatin Zymog-raphy测定基质金属蛋白酶活性。结果巨噬细胞转化为泡沫细胞后其过氧化体增殖物激活型受体γ基因表达无显著变化。吡格列酮可显著抑制巨噬细胞CD40的表达,呈剂量依赖性;显著抑制泡沫细胞白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和基质金属蛋白酶9的分泌(P<0.05),抑制基质金属蛋白酶9的活性,对基质金属蛋白酶2的分泌和活性无影响。结论巨噬细胞、泡沫细胞中过氧化体增殖物激活型受体γ基因表达无变化。过氧化体增殖物激活型受体γ配体从多个环节抑制致动脉粥样硬化炎性因子的分泌,减少基质金属蛋白酶的释放并抑制其活性,对防治动脉粥样硬化有利。     

脑缺血和炎性细胞因子

细胞因子参与了脑缺血后组织损伤的病理过程,白细胞介素１－β和肿瘤坏死因子α的过量产生加重脑缺血损害,而转化生长因子β１的产生对脑缺血具有保护作用。     

白细胞介素-1β上行调节兔血管平滑肌细胞极低密度脂蛋白受体mRNA的表达

为了研究血管平滑肌细胞是否表达极低密度脂蛋白受体mRNA，采用Northernblot分析法检测培养兔主动脉平滑肌细胞表达极低密度脂蛋白受体mR-NA的情况。结果发现，培养兔主动脉平滑肌细胞可以表达极低密度脂蛋白受体mRNA；而且．细胞因子白细胞介素-1β能使表达增强约2倍。提示极低密度脂蛋白受体有可能参与动脉平滑肌细胞源性泡沫细胞；白细胞介素-1β上行调节平滑肌细胞表达极低密度脂蛋白受体mRNA可能是其参与动脉粥样硬化斑块形成途径之一。     

脂多糖致肺血管内巨噬细胞形态和功能的改变

目的探讨肺血管内巨噬细胞（ＰＩＭ）在感染性急性肺损伤（ＡＬＩ）发病中的作用。方法仿Ｍｏｒｔｏｎ法灌洗肺血管床，贴壁法分离猪ＰＩＭ，并用光镜、电镜观察鉴定；胸腺细胞增殖法测脂多糖（ＬＰＳ）刺激前后ＰＩＭ培养上清白细胞介素１β（ＩＬ－１β）活性，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法测肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）、白细胞介素６（ＩＬ－６）、白细胞介素８（ＩＬ－８）含量。结果刺激后的ＰＩＭ伪足增长、增多，溶酶体和吞噬体亦增多；释放ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－８增多，峰值分别出现在刺激后的１ｈ、２ｈ、４ｈ和６ｈ。与刺激前相比，Ｐ＜０．０１。结论改良的Ｍｏｒｔｏｎ法能成功分离猪ＰＩＭ；ＬＰＳ刺激后的ＰＩＭ吞噬分泌功能活跃，其中ＴＮＦα、ＩＬ－１β升高最早，提示其在ＡＬＩ发病早期起重要作用；而ＩＬ－６、ＩＬ－８升高较晚，可能在ＡＬＩ发病后期起重要作用     

小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及黄芪甲甙干预研究

目的 探讨黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA表达和蛋白质产生的影响.方法 Balb/c小鼠50只随机分为5组,空白对照组,腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;病毒性心肌炎对照组,小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×105TCID50柯萨奇B3病毒的Eagle's培养基,在腹腔注射含病毒的Earle's培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组,在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙剂量分别为0.07、0.2和0.6 ms/(kg·d)0.1 mL灌胃,共7 d.14 d后处死全部小鼠并取其心脏.心脏组织一半用于逆转录聚合酶链反应法测定心脏细胞因子mRNA表达.另一半用Western blot测定细胞因子蛋白质生成量.结果 空白对照组上述细胞因子均无明显表达,心肌炎对照组肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β,白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA和蛋白产生均显著高于空白对照组;同心肌炎对照组比较,高剂量黄芪甲甙组的肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β.白细胞介素6 mRNA和蛋白生成均显著下降,而白细胞介素10mRNA和蛋白明显升高.结论 黄芪甲甙明显降低小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏的致炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6,而升高炎症保护因子白细胞介素10.     

肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶介导心肌间质重塑的作用机制及对其药物干预的研究

心肌细胞外基质的合成与降解主要与位于其间的Zn2 -依赖基质金属蛋白酶(MMPs)及其特异性组织抑制剂(TIMPs)活性有关。有体外实验证实,炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可诱导心肌成纤维细胞MMPs、TIMPs的