十种清热解毒中药提取物抗泛耐药鲍曼不动杆菌感染的研究

目的 研究金果榄、矮脚苦蒿和姜黄等十种清热解毒中药抗泛耐药鲍曼不动杆菌(XDR-AB)感染的活性,筛选出具有体内抗感染活性的中药提取物,为发现新型抗XDR-AB感染的抗菌药物提供研究基础。方法 分别采用水、50%乙醇、95%乙醇提取十种清热解毒中药并制成不同浓度的药物浸膏,与课题组前期优化的XDR-AB感染秀丽隐杆线虫模型共孵育,通过线虫的存活率判断中药提取物的体内抗XDR-AB活性。结果 随着姜黄和土荆皮提取物浓度的增大,XDR-AB感染的线虫存活率不断提高。姜黄的水提取物、50%乙醇提取物和95%乙醇提取物在浓度1 000μg/mL时,可使XDR-AB感染的秀丽隐杆线虫存活率分别提高至54.2%(与阴性对照组比较,P<0.001)、18.8%、13.3%;土荆皮的水提取物、50%乙醇提取物和95%乙醇提取物在浓度1 000μg/mL时,可使XDR-AB感染的秀丽隐杆线虫存活率分别提高至47.4%(与阴性对照组比较,P<0.001)、23.8%、15.8%。结论 姜黄和土荆皮水提取物具有较好的抗XDR-AB感染活性,可对其主要化学成分进行体外抗菌药效验证,以期发现新型抗X...     

RND外排泵对多重耐药鲍曼不动杆菌AYE菌株生物被膜形成的影响

 目的 探讨多重耐药鲍曼不动杆菌AYE菌株RND外排泵基因影响生物被膜形成的作用机制。方法 采用无标记基因敲除方法分别敲除AYE菌株的RND外排泵基因（adeB、adeFGH、adeIJK）,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）验证菌株外排泵基因敲除情况,通过结晶紫染色法检测菌株基因敲除前后生物被膜形成情况,比较4种外排泵抑制剂（PAβN、奥美拉唑、维拉帕米、CCCP）对AYE菌株生物被膜形成的影响。结果 qRT-PCR结果显示,AYE菌株RND外排泵基因（adeB、adeFGH、adeIJK基因）成功敲除,获得AYE△ adeB、AYE△ adeFGH、AYE△ adeIJK菌株,生物被膜形成量分别为1.59±0.06、2.15±0.19、1.91±0.02,其中adeB和adeIJK基因敲除后菌株生物被膜形成量低于敲除前（AYE：2.31±0.01）,差异均有统计学意义（均P<0.05）。在PAβN、奥美拉唑、维拉帕米、CCCP作用下,鲍曼不动杆菌标准菌株AYE的生物被膜形成量分别为2.14±0.03、2.24±0.02、1.93±0.05、2.09±0.04,均低于对照组（AYE：2.31±0.01）,差异均有统计学意义（均P<0.05）,其中PAβN形成量最少。结论 外排泵基因adeB、adeFGH、adeIJK对多重耐药鲍曼不动杆菌AYE生物被膜的形成有重要作用,外排泵抑制剂PAβN、奥美拉唑、维拉帕米、CCCP对鲍曼不动杆菌AYE菌株生物被膜的形成有抑制作用。     

研究鲍曼不动杆菌外排泵在氟喹诺酮类药物耐药中的作用

目的研究外排泵基因ade B的存在与鲍曼不动杆菌对氟喹诺酮类药物耐药的相关性,以及外排泵抑制剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)对耐药率的影响,以探讨主动外排作用在鲍曼不动杆菌耐药中所起的作用。方法采用K-B琼脂纸片扩散法进行药敏试验,琼脂稀释法检测环丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星等3种氟喹诺酮类药物对58株鲍曼不动杆菌的MICs,同时检测在加入CCCP后3种药物MICs的变化情况。结果 58株鲍曼不动杆菌临床菌株中,45株至少对1种氟喹诺酮类药物耐药,13株对3种氟喹诺酮类药物全部敏感,总耐药率为77.6%(45/58)。加外排泵抑制剂CCCP后,鲍曼不动杆菌临床菌株对3种氟喹诺酮类药物的耐药率都降低:45株耐药株中31株外排泵表型阳性。对3种药物全部敏感的13株菌株中有1株外排泵表型阳性。鲍曼不动杆菌耐药株外排基因ade B检出率(100%)明显高于敏感株(76.9%)(χ~2=11.0,P0.01)。结论 CCCP在体外可以抑制鲍曼不动杆菌对氟喹诺酮类药物主动外排作用,降低鲍曼不动杆菌的MICs值。外排基因ade B的存在与鲍曼不动杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性具有相关性。     

儿童携带多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的:通过对该院儿科和河北省儿童医院临床分离的142株鲍曼不动杆菌的耐药性进行分析,为治疗儿童携带多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌临床合理使用抗生素、提高抗生素使用效率、减少多重耐药鲍曼不动杆菌的发生、提高治疗效果提供理论依据。方法:采用K-B纸片扩散法对19种抗生素的耐药性进行试验,采用游标卡尺测量完全抑制区的直径包括纸片的直径。抑菌环大小判读参照M100,并报告测试的细菌对药物的耐药情况。结果:142株鲍曼不动杆菌中多重耐药菌72株,泛耐药菌24株,非多重耐药菌46株。多重耐药和泛耐药鲍曼不动杆菌对头孢类、碳氢酶烯类、氨基糖甙类、青霉素类、喹诺酮类、四环素类及磺胺类药物的耐药率均达到41.00%~99.00%,多粘菌素类药物的耐药率为0。结论:儿科病房分离的142株鲍曼不动杆菌对19种抗生素的耐药性逐渐提高,通过耐药性分析建议临床联合用药可以提高临床疗效。     

临床多重耐药鲍曼不动杆菌的研究进展

随着新型广谱抗菌药物的广泛应用,鲍曼不动杆菌的耐药率逐年升高,多重耐药甚至泛耐药鲍曼不动杆菌的临床分离率明显增高。此文对近年来国内外多重耐药鲍曼不动杆菌感染的耐药机制、分型检测方法及临床治疗作一综述。     

泛耐药鲍曼不动杆菌的研究进展

鲍曼不动杆菌已成为医院感染的重要病原菌.随着广谱抗生素的广泛应用,鲍曼不动杆菌的耐药率逐渐增高.临床上已出现了泛耐药菌株,而且其分离率也逐年上升,已成为临床抗感染治疗的难题.此文对近年来国内外泛耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制、分型方法、临床治疗策略及最新研究等方面作一综述.     

重症监护室泛耐药鲍曼不动杆菌感染暴发流行调查与控制对策

目的 研究重症监护室泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)感染危险因素及控制措施.方法 采用现场采样检验和药敏试验方法,对某医院呼吸重症监护室(RICU) 一起下呼吸道泛耐药鲍曼不动杆菌杆菌暴发流行事件进行调查.结果 该医院重症监护室2010年8月24日～12月13日期间连续发生了6例下呼吸道医院感染病例.经药敏试验证明,所检出的鲍曼不动杆菌对临床常用22种抗菌药物中的20余种耐药,且耐药谱相同或相近.经对室内空气及环境表面采样检验,在床具栏杆、呼吸机面板、护士办公室电话机表面等均检出(PDR-AB).结论 此次泛耐药鲍曼不动杆菌感染来源于RICU环境污染,呈广泛耐药性,经医护人员手传播,经过积极治疗病人,采用消毒隔离,强化环境清洁与消毒措施,有效控制了感染流行.     

医院内鲍曼不动杆菌感染调查及泛耐药情况分析

目的:了解某院近3年来医院内鲍曼不动杆菌感染现状,分析其耐药谱变迁及泛耐药情况,为临床了解及防控院内感染提供依据。方法:对医院2007年-2009年分离的鲍曼不动杆菌分布及耐药情况进行回顾性分析。细菌鉴定采用美国德灵细菌鉴定仪。结果:3年间共分离到鲍曼不动杆菌305株,其中2007年72株2,008年91株,2009年142株,其中通过呼吸道感染占82.12%。泛耐药菌株感染率呈现出逐年上升趋势,2007年5株(占6.94%)2,008年9株(占9.89%)2,009年有19株(占13.38%)。结论:鲍曼不动杆菌感染呈逐年上升趋势,以呼吸道感染方式为主,其泛耐药菌株感染率呈上升趋势。应加强病房环境和人员消毒,加强抗生素的合理使用,控制鲍曼不动杆菌在医院内的定值和播散,重视泛耐药鲍曼不动杆菌监测。     

外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用

目的探讨外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用。方法 M-H琼脂稀释法检测临床分离的泛耐药鲍氏不动杆菌(PRABA)对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)及羰氰氯苯腙(CCCP)处理前后MIC值的变化情况,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光RT-PCR检测泛耐药株adeB基因及adeBmRNA量。结果 PRABA对环丙沙星、四环素、头孢噻肟较CCCP处理前其MIC下降两个折点;头孢西丁下降4个折点,1号与5号菌株庆大霉素下降6个折点,为原MIC值的1/64;10株PRABAadeB基因阳性,2株全敏感鲍氏不动杆菌(PSABA)未检测到adeB基因,PRABAadeB基因mRNA的表达量平均为(0.84E+3)拷贝。结论主动外排泵adeB基因高表达与鲍氏不动杆菌产生泛耐药相关。     

30例泛耐药鲍曼不动杆菌感染治疗体会

鲍曼不动杆菌(AB)是一种不发酵糖类的革兰阴性菌,它广泛分布于土壤、水和湿热环境中,属于条件致病菌,可引起肺内感染、伤口感染、泌尿系感染、败血症等,75％住院患者可发生定植,也是医护人员皮肤上最常见的革兰阴性菌.AB具有强大的获得耐药性和克隆传播能力,多重耐药AB(XDR-AB)、泛耐药AB(PDR-AB)、全耐药AB呈世界性流行[1-3],已成为我国院内感染最重要的病原菌之一.由于缺乏有效的抗生素治疗,XDR-AB、PDR-AB所致的全身感染已成为院内感染致死的一个重要原因.我们对确诊的30例医院获得性PDR-AB感染患者的临床资料进行回顾性分析,总结治疗经验及体会.     

秀丽隐杆线虫-泛耐药肺炎克雷伯菌感染模型的建立

目的建立泛耐药肺炎克雷伯菌（XDRKP）感染秀丽隐杆线虫感染模型。方法在液体条件下,利用临床分离的XDRKP菌株感染秀丽隐杆线虫,观察线虫存活及体内细菌数量变化情况。结果线虫感染XDRKP后活动明显迟缓,不同浓度的XDRKP对线虫的致死情况不同。log-rank检验显示,1.5×10⁶ CFU/mL XDRKP组与E.coli OP₅₀对照组的生存曲线差异无统计学意义（χ2=0.08,P>0.05）;1.5×10⁷、1.5×10⁸ CFU/mL组与E.coli OP50对照组的生存曲线差异均有统计学（χ²值分别为229.37、275.98,均P<0.001）,1.5×108与1.5×10⁷ CFU/mL XDRKP组线虫的生存率低于对照组。实验获得上清悬液,经细菌纯培养后进行细菌鉴定和药敏测试,证实为XDRKP。XDRKP感染线虫4、6、12、24 h后,线虫体内细菌总量分别为（0.28±0.02）×10⁵、（0.50±0.38）×10⁵、（1.73±0.56）×10⁵、（2.62±0.53）×10⁵ CFU/mL,不同时间线虫体内细菌总数存在统计学差异（F=1 363.39,P<0.001）。结论成功建立了秀丽隐杆线虫-XDRKP感染模型。     

表皮葡萄球菌主动外排氟喹诺酮的实验研究

目的探讨耐药表皮葡萄球菌中是否存在主动外排系统,以揭示表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制.方法应用琼脂稀释法检测表皮葡萄球菌耐药株和敏感株在加入主动外排抑制剂利血平和碳酰氰间氯苯腙（CCCP）后,对环丙沙星、司帕沙星的最低抑菌浓度（MIC）变化情况.结果加入CCCP及利血平后,表皮葡萄球菌敏感株及多数耐药株对环丙沙星、司帕沙星的MIC变化不大,而利血平可以使耐药菌SR79对环丙沙星的MIC减低7倍.结论表皮葡萄球菌中可能存在针对氟喹诺酮药物的主动外排系统.     

主动外排抑制剂对耐氟喹诺酮的表皮葡萄球菌MIC的影响

目的 探讨耐药表皮葡萄球菌中是箭存在主动外排系统，以揭示表皮葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法 应用琼脂稀释法检测表皮葡萄球菌耐药株和敏感株在加入主动外排抑制剂利血平和碳酰氰间氯苯腙（CCCP）后对环丙沙星、司帕沙星的最低抑菌浓度（MIC）变化情况。结果 加入CCCP及利血平后表皮葡萄球菌敏感株及多数耐药株对环丙沙星、司帕沙星的MIC变化不大，而利血平可以使耐药菌SR79对环丙沙星的MIC减小8倍。结论 表皮葡萄球菌中可能存在针对氟喹诺酮药物的主动外排系统。     

生化标志物动态测定评估鲍曼不动杆菌感染的社区获得性肺炎患者早期诊断的临床研究

目的探讨生化标志物动态测定评估鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)感染的社区获得性肺炎(community-acquired pneumonin,CAP)患者早期诊断的临床研究。方法首先确证AB病原体。47例CAP患者AB感染后1 d、3 d、5 d和100例正常对照组进行血清PCT、hs-CRP、IL-6和MPV水平的动态分析,并进行对比性研究。受试工作特征曲线评估了4指标早期诊断AB感染CAP的临床价值。结果 47例CAP患者AB感染后1 d和3 d血清PCT、hs-CRP、IL-6和MPV水平较之100例正常对照组明显增高(P均<0.01),第5 d增高(P均<0.05),呈明显降低趋势。ROC曲线显示,血清PCT、hs-CRP、IL-6和MPV在临界值确定后,AUC分别为0.896、0.853、0.821和0.803,灵敏度为89.3%~81.5%,特异度为82.5%~71.4%,阳性预测值为88.6%~78.3%,阴性预测值为90.1%~81.7%。结论血清PCT、hs-CRP、IL-6和MPV早期诊断的最佳时间是CAP患者感染AB后的1 d~3 d,从而及早进行治疗。     

湘雅医院15年间医院感染现患率调查

［摘要］目的了解湘雅医院感染的实际情况及变化趋势,为有效预防与控制医院感染提供依据。方法采用床旁调查与病历调查相结合的横断面调查方法,调查该院2000—2014年（2006年未进行）某一日所有住院患者的医院感染现患率、横断面抗菌药物使用率及细菌培养送检率。结果2000—2014年医院感染现患率从6.30%降低至3.91%,差异有统计学意义（χ2=35.14,P＜0.001）;社区感染现患率为15.61%~15.76%,各年度比较,差异无统计学意义。医院感染现患率最高的科室为综合重症监护病房（ICU）;医院感染与社区感染均以下呼吸道感染居首位;泌尿道置管率呈下降趋势,动静脉置管率呈上升趋势,差异均有统计学意义（χ2值分别为5.21、96.24,均P＜0.001）。2008—2014年治疗性使用抗菌药物患者病原体送检率为36.37%~44.51%,医院感染病例病原体送检率为34.00%~44.99%,医院感染病原体检出率为41.57%~68.48%,均呈增长趋势,差异均有统计学意义（χ2值分别为22.78、10.03、26.49,均P＜0.001）。感染病原体以革兰阴性（G-）菌为主;抗菌药物横断面使用率与联合用药率均呈下降趋势,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论该院医院感染防控与抗菌药物管理取得初步成效,医院感染现患率与抗菌药物横断面使用率均明显下降,感染病原体以G-菌为主,感染部位以下呼吸道居首位。     

Evaluation of the pathogenicity of Listeria spp. in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis has proven to be a useful model for studying host-pathogen interactions as well as the ability of nematodes to serve as vectors for the dispersal of foodborne pathogens. In this study, we evaluated whether C. elegans can serve as a host for Listeria spp. While there was an effect of growth media on C. elegans killing, C. elegans exposed to L. monocytogenes and L. innocua pregrown in Luria-Bertani medium showed reduced survival when compared to nonpathogenic E. coli OP50, while L. seeligeri showed survival similar to E. coli OP50. In a preference assay, C. elegans preferred E. coli over L. monocytogenes and L. innocua, but showed no preference between L. monocytogenes and L. innocua. A gentamicin assay indicated that L. monocytogenes did not persist within the C. elegans intestinal tract. Our findings that L. monocytogenes and L. innocua strains tested have equally deleterious effects on C. elegans and that L. monocytogenes did not establish intestinal infection conflict with other recently published results, which found intestinal infection and killing of C. elegans by L. monocytogenes. Further studies are thus needed to clarify the interactions between L. monocytogenes and C. elegans, including effects of environmental conditions and strain differences on killing and intestinal infection.     

重症医学科连续5年鲍曼不动杆菌感染分布及耐药性变迁

目的了解重症医学科(ICU)鲍曼不动杆菌(AB)感染分布及耐药性变化,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。方法采用回顾性调查方法,收集某院2010—2014年分离自ICU住院患者的病原菌资料,统计分析其构成与耐药性。结果2010—2014年综合ICU共分离病原菌3 807株,其中AB 488株,AB总检出率为12.82%,检出率由2010年的6.94%逐年增加至2014年的17.33%,差异有统计学意义(χ2=45.58,P0.01)。检出AB以痰标本为主,占72.13%,其次是伤口分泌物、血、导管及尿等。AB对阿米卡星的耐药率最低(30%),对亚胺培南和美罗培南的耐药率逐年上升明显(趋势χ2值分别为42.99、53.91,均P0.001);AB对其他常用抗菌药物的耐药率均50%。结论 ICU AB检出率及耐药率逐年增加,临床上应加强细菌的耐药性监测工作,积极采取有效措施隔离患者,预防和控制AB在ICU内的聚集流行。     

综合ICU一起疑似鲍曼不动杆菌感染暴发的调查

目的分析重症监护病房(ICU)多重耐药鲍曼不动杆菌(AB)医院感染暴发流行的流行病学特征,为医院感染预防与控制提供依据。方法采用流行病学调查和环境卫生学监测的方法调查2015年4月1日—26日入住某院ICU后发生肺部感染的患者,分析各种危险因素并采取相应的预防控制措施。结果先后共发生15例泛耐药AB医院获得性下呼吸道感染。15例患者共分离AB15株。1、3、4、5号患者检出AB药敏结果相同;6、7、8、9号患者检出AB药敏结果相同;10、11号患者检出AB药敏结果相同;时间均相对集中。共采集43份环境表面和医务人员手标本,床头柜AB检出率为100.00%(1/1),监护仪按钮为75.00%(6/8)、医务人员手为66.67%(4/6),治疗桌、输液泵按钮、医生鼻拭子均未检出AB。至2015年5月下旬综合ICU内未再出现类似新发病例。结论此次AB医院感染可能通过ICU环境表面和医务人员手播散,患者检出的AB呈广泛耐药性,积极治疗患者和采取严格的消毒隔离措施,可有效控制进一步流行。     

Efficacy of sub-MIC level of meropenem and ciprofloxacin against extensive drug-resistant (XDR) Pseudomonas aeruginosa isolates of diabetic foot ulcer patients

The increasing emergence of extensive drug-resistant bacteria (XDR) among chronic diabetic foot ulcer patients (DFU) possess serious threat which leads to foot amputation. The ideal measurement estimations of the presently accessible medications are getting insufficient against extensive drug-resistant strains. For quite a long-time piperacillin monotherapy, Piperacillin-tazobactam, ceftazidime, Carbapenem class of anti-toxin, ceftalozane-Tazobactam, and so on, has been the suggested therapy towards persistent instances of diabetic foot ulcer but because of the resistance mechanism of the potent pathogens the potency and usage of the antibiotic concentration regime is under the radar. Based on this hypothesis two isolates namely VIT PC 7 &VIT PC 9 were found to be resistant to all five classes of antibiotics exhibiting extensive drug resistance (XDR). The whole-genome sequence of Pseudomonas aeruginosa VIT PC 7 and VIT PC 9 data showed the presence of various RND efflux related genes and antibiotic resistance genes. The broth microdilution assay showed minimum inhibitory concentration (MIC) for ciprofloxacin and meropenem, Synergistic test was performed through checkerboard analysis and sub-MIC concentration of ciprofloxacin/meropenem was deduced using ∑ FICI, Time kills analysis was done for varying time interval to check the maximum reduction in CFU/ml of the bacterial cells, sub-MIC level of meropenem and ciprofloxacin showed inhibitory activity at lower concentration respectively. In vitro time-kill analysis showed the decrease in the number of cells, suggesting that the synergistic antimicrobial combinations are effective in decreasing the MIC level, and combinational test involving sub-MIC level of antibiotics also showed maximum reduction in biofilm forming cells, portraying the effectiveness of both the drugs. Accordingly, an expansion in the antimicrobial spectrum can be accomplished by utilizing the ideal measurements of ciprofloxacin/meropenem in persistent condition like diabetic foot ulcer, sub-MIC level of ciprofloxacin/meropenem could be a promising choice for anticipation against the ongoing drug-resistant crisis.