靶向性双自杀基因混合碘油对兔肝癌的介入治疗研究

目的评价携带血管内皮生长因子（VEGF）启动子调控的TK及CD融合双自杀基因重组腺病毒系统（AdVEGF-CDglyTK）与超液化碘油混合栓塞兔肝癌的治疗效果.方法 36只荷VX2瘤兔随机分4组,LP组（单纯超液化碘油栓塞组）;LP＋AdVEGF-CDglyTK组（超液化碘油＋AdVEGF-CDglyTK混合栓塞,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;AdVEGF-CDglyTK组（单纯灌注AdVEGF-CDglyTK,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;NS组（生理盐水治疗组）.于术前及术后第10、15天行CT检查观察肿瘤的体积,免疫组织化学法检测肿瘤组织VEGF的表达及微血管密度（MVD）.结果 4组兔术前肿瘤体积在统计学无显著性差异（P〉0.05）;介入治疗后10天、15天的各组之间肿瘤增长率均有显著性差异（P〈0.05）,LP＋AdVEGF-CDglyTK肿瘤增长率最小,而LP组肿瘤增长率小于AdVEGF-CDglyTK组,三个治疗组疗效均优于生理盐水对照组.VEGF表达方面：LP组表达最高,与其它三组相比有显著性差异（P〈0.05）,其它三组之间未见显著性差异.MVD表达：LP组最高,LP＋AdVEGF-CDglyTK组最低,与其它各组相比有显著性差异（P〈0.05）,而AdVEGF-CDglyTK组MVD表达也低于NS组,有显著性差异（P〈0.05）.结论在对兔肝癌的治疗中,与单纯碘油栓塞以及单纯灌注AdVEGF-CDglyTK相比,AdVEGF-CDglyTK与碘油混合肝动脉栓塞可以明显降低肿瘤的生长率,减少肿瘤组织VEGF的表达及减少肿瘤新生血管生成.     

兔VX2肝癌肝动脉栓塞术后肿瘤新生血管的变化与分析

目的分析兔VX2肝癌肝动脉碘化油栓塞术后残癌组织内新生血管生成的变化。方法将36只荷VX2肝癌实验兔随机分为实验组（n=24）、假手术组（n=6）及对照组（n=6）。于接种后第2周行肝动脉、门静脉造影检查,实验组以碘化油栓塞肿瘤供血动脉,假手术组经肝动脉灌注生理盐水2 ml,对照组于造影后处死。实验组、假手术组动物于第3周再接受造影检查并被处死。结果36只实验兔中35只为富血供肿瘤,主要由肝左动脉供血。在肿瘤周边癌组织内3组实验兔VEGF表达阳性率分别为（62.04±19.91）%、（43.38±19.65）%、（43.18±14.01）%,MVD计数分别为39.26±6.80、28.69±5.43、28.71±5.68,实验组与假手术组、对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。VEGF表达阳性率与MVD计数之间呈明显正相关（r=0.46,P=0.01）。结论TACE术后残癌组织的缺氧状态致VEGF表达及MVD计数较栓塞前明显增高,故加强肿瘤抗血管生成治疗是必要的。     

载多西紫杉醇脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对兔VX2肝癌微血管的作用

目的探讨载多西紫杉醇脂质微泡（DLLM）联合超声靶向微泡破裂（UTMD）对兔VX2肝癌微血管的抑制作用。方法建立60只兔VX2肝癌动物模型,将其随机分为6组（n=10）：单纯药物组（Doc组）、单纯载药微泡组（DLLM组）、药物＋超声组（Doc＋US组）、单纯微泡＋超声组（PLM＋US组）、载药微泡＋超声组（DLLM＋US组）及对照组,比较各组动物肿瘤组织的血管密度（MVD）、CD34及VEGF的表达。结果处理后DLLM＋US组的CD34表达水平低于其他各组,MVD明显降低,与其他各组相比差异有统计学意义（P〈0.01）;DLLM＋US组的VEGF表达水平明显低于其他各组（P〈0.01）。结论 DLLM联合UTMD能抑制兔VX2肝癌的微血管生成,从而抑制兔VX2肝癌的生长。     

介入治疗对兔VX2肝癌MMP-2/PCNA/VEGF表达的影响及其意义

目的：模拟不同方法介入治疗对兔VX2肝癌基质金属蛋白酶（MMP-2）、增殖细胞核抗原（PC-NA）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：将VX2瘤细胞接种于40只新西兰大白兔肝左叶，建立VX2肝癌模型，随机分为4组，每组10只。介入治疗前MRI测量并记录肿瘤直径。经股动脉途径行肝固有动脉插管，分别注入生理盐水（对照组）、水化碘油（A组）、Ad-p53（B组）、Ad-p53＋水化碘油（C组）。术后1周处死动物，取肿瘤组织制作石蜡切片（HE）染色，镜下观察肿瘤组织坏死情况。免疫组化方法测定MMP-2／PCNA/VEGF的表达。结果：经肝动脉插管介入治疗1周后，A、B、C组肿瘤生长受到明显抑制，与对照组比较，P均〈0.05。单纯碘油栓塞后，肿瘤区的MMP-2、PCNA及VEGF的表达略有升高，与对照组相比P〉0.05；B组与C组的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率降低，与对照组相比，P均〈0.05；有转移的MMP-2、PCNA及VEGF的表达阳性率均高于无转移者（P〈0.05）；MMP-2与VEGF、PCNA之间之间有相关性（P〈0.05）。结论：碘油＋Ad-p53可抑制肿瘤的生长，抑制肿瘤新生血管形成，减少转移。MMP-2、PCNA、VEGF的增高预示着肿瘤的高转移、高增殖能力，肿瘤血管的高形成能力。     

射频消融联合亚砷酸局部治疗对兔肝VX2肿瘤MVD和VEGF表达的影响

目的探讨射频消融(RFA)联合亚砷酸(AA)局部治疗对兔肝VX2肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法建立新西兰兔肝VX2肿瘤模型28只,按随机数字表法随机均分为4组,分别给予AA(AA组)、RFA(RFA组)、RFA AA(RFA AA组)和生理盐水(对照组)治疗,于治疗后第14d处死所有实验动物,通过免疫组织化学方法检测肿瘤组织MVD及VEGF的表达,并分析MVD与VEGF表达的相关性。结果对照组、AA组、RFA组及RFA AA组肿瘤组织MVD依次降低,分别为(38.50±0.44)、(23.07±0.47)、(18.65±0.39)和(11.36±0.36)个/HP,4组间两两比较均P<0.05;肿瘤组织VEGF表达阳性例数比也依次降低,分别为7/7、5/7、4/7和2/7,4组间两两比较均P<0.05。VEGF表达强度与MVD成正相关关系(r=0.47,P<0.01)。结论RFA AA联合治疗能减少肿瘤组织的MVD,抑制VEGF的表达。     

VEGF和MVD在术前接受过肝动脉栓塞化疗的肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)和平均微血管密度(MVD)在接受术前经导管肝动脉栓塞化疗(TACE)肝癌细胞中的表达和在二期切除肝癌复发预后中的意义。方法选取91例术前TACE和50例未行TACE肝癌手术切除标本,采用免疫组化方法检测两组标本VEGF、CD34的表达情况和MVD值。分析两组VEGF的表达情况和MVD值的差异,以及62例术前TACE后根治性切除的肝癌中VEGF的表达水平与复发的关系。结果 VEGF表达于肝细胞质中,CD34选择性表达于血管内皮细胞,术前TACE组和未行TACE组VEGF的表达(6.9±4.7vs5.1±4.4)和MVD值(62.0±35.4vs45.6±29.0)差异有统计学意义(P0.05)。术前TACE后根治性二期切除患者,复发组(45例)与未复发组(17例)肿瘤组织中VEGF阳性率分别为82.2%和41.2%,差异有统计学意义(P0.05)。VEGF阳性组1、3、5年无瘤生存率分别为50.9%、%、22.5%,VEGF阴性组分别为88.5%、68.2%、28.153.0%,差异有统计学意义(P0.05)。多因素分析表明治疗前存在播散结节及VEGF的表达水平是影响TACE后二期切除患者复发的独立危险因素。结论 TACE后残癌组织血管生成增多,术前TACE后二期根治性切除肝癌VEGF的表达与患者术后复发转移密切相关。     

索拉菲尼对大鼠Walker-256移植性肝癌的治疗作用

目的探讨索拉菲尼(Sorafenib)对大鼠Walker-256移植性肝癌的治疗作用及机制。方法 Walker-256移植性肝癌大鼠随机分为4组(n=16):A组(对照组);B组(索拉菲尼低剂量组);C组(索拉菲尼中剂量组);D组(索拉菲尼高剂量组),另设E组(正常组,n=8)。所有大鼠于术后20d取静脉血,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆红素(TB)含量;分离出肝内瘤块,称量其质量、测量其体积,计算出肿瘤的质量抑制率、体积抑制率;采用免疫组织化学方法检测瘤旁组织血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)水平,并对VEGF及MVD行双变量相关性分析;对索拉菲尼各组剩余8只大鼠,观察其生存时间。结果索拉菲尼各剂量组大鼠血清ALT、AST、TB普遍低于对照组(P0.05);C、D组大鼠瘤块体积、质量均小于A组,生存时间长于A组(P0.05);索拉菲尼各剂量组大鼠瘤旁组织肿瘤细胞坏死程度较A组明显,癌灶周边肝脏细胞受累坏死程度较A组轻;各剂量组瘤旁组织VEGF阳性率、MVD计数小于A组(P0.01);大鼠瘤旁组织VEGF与MVD高度相关(P0.01),相关系数rp=0.843。结论索拉菲尼通过抑制肝癌大鼠瘤旁组织VEGF合成,降低瘤旁组织微血管密度、抑制瘤旁组织微血管生成,从而抑制肿瘤生长,减轻肿瘤对正常肝细胞的损害作用及肝功损害,延长大鼠生存期限,对大鼠移植性肝癌具有积极的治疗作用。     

术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌组织微血管计数及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨术前区域动脉灌注化疗对血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及肿瘤血管生成的影响.方法通过免疫组织化学方法,检测术前区域动脉灌注化疗及根治手术的结直肠癌病例癌组织中微血管密度(MVD)和VEGF蛋白表达水平,并与同期未行术前动脉化疗而直接手术的31例病例作比较.结果术前动脉化疗组的MVD值为19 2±5 2,而对照组为42.4±1 8.4,两组间差异有显著性意义(P＜001).术前动脉化疗组VEGF表达亦明显低于非化疗组(P＜0.01).术前化疗组肿瘤的MVD与VEGF表达相关分析表明两者间存在正相关(r=0.788,P＜005),VEGF的表达与肿瘤Dukes分期相关且有统计学意义.结论结直肠癌术前区域动脉化疗可以通过抑制肿瘤细胞分泌VEGF蛋白,或直接作用于肿瘤血管,减少肿瘤的血管生成,减少肿瘤细胞的血供.从而改善结直肠癌患者的治疗效果和预后     

二氧化锆纳米颗粒荷载阿霉素经不同途径给药治疗兔VX2肝移植瘤

目的比较经不同途径给药后载阿霉素(DOX)的二氧化锆纳米颗粒及游离DOX兔VX2肝移植瘤生长情况及药物靶向性。方法建立兔VX2肝移植瘤模型25只,随机分为5组,A组经肝动脉给予载DOX二氧化锆纳米颗粒,B组外周静脉给予载DOX二氧化锆纳米颗粒,C组经肝动脉给予游离DOX,D组经外周静脉给予游离DOX,E组为空白对照组。通过CT检查测量给药后1、3、6天各组同期肿瘤体积,分别计算各组3天与1天、6天与3天、6天与1天肿瘤体积比。多组间肿瘤体积比比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法或SNK法。对给药后各组模型的离体心脏标本进行组织学观察,评价药物的心脏毒性。结果各组间给药后3天与1天肿瘤体积比、6天与3天肿瘤体积比差异均无统计学意义(F=2.056、1.906,P=0.125、0.149);而各组间给药后6天与1天肿瘤体积比差异有统计学意义(F=4.230,P=0.012),A组明显低于其他组(P均0.05),且除B组与E组外,B、C、D、E组间两两比较差异均无统计学意义(P均0.05)。组织学检查显示,A组及B组心肌几乎无损伤或损伤较轻,而C组及D组心肌损伤均较重。结论纳米药物载体与传统介入超选择性肝动脉化疗相结合,可更好地延缓兔VX2肝移植瘤生长,提高药物靶向性,且有助于降低DOX造成的心脏毒性。     

射频消融对兔肝癌肿瘤微血管密度及血管内皮细胞生长因子的影响

目的　探讨射频消融术对兔肝肿瘤模型的肿瘤微血管密度、血管内皮细胞生长因子的影响。方法　用 32只新西兰白兔制成VX2 细胞肝癌模型 ,分为对照组 (4只 )和射频组 (2 8只 ) ,即术后即时、2、6、12、2 4、4 8、16 8h取材 ,用免疫组织化学SP法观察并测量肿瘤组织的微血管密度 (mir crovesseldensity ,MVD)和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达。 结果　射频治疗后肿瘤组织MVD和VEGF的表达较术前明显降低 (P <0 .0 1) ,射频组内不同时间点间无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论　射频消融可以有效地破坏肿瘤组织的微血管 ,有效的抑制血管形成并减少肿瘤组织的血液供应。     

兔肝VX2肿瘤射频消融后不同区带VEGF的表达和细胞凋亡

目的分析兔肝VX2肿瘤射频消融(RFA)后不同区带血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达和肿瘤细胞凋亡情况。方法将48只兔肝移植VX2肿瘤,建立动物模型,分为实验组(n=42)和对照组(n=6)。对实验组行RFA,分别在术后即刻、1天、2天、1周、2周、3周各处死7只实验兔,留存肿瘤标本,进行HE染色、VEGF检测、Annexin V-FITC/PI标记和流式细胞仪检测,观察不同时间段、不同区带的VEGF变化及细胞凋亡情况。结果实验组RFA术后针道炭化区、热凝固区和消融边界区平均VEGF值差异均有统计学意义(P均0.05);针道炭化区、热凝固区及边界区术后即刻与其他时间点间两两比较差异均有统计学意义(P均0.05);针道炭化区及热凝固区VEGF在术后即刻达高峰,术后1天~3周呈整体下降趋势,消融边界区VEGF在术后即刻到1周呈上升趋势,2周后下降。术后针道炭化区、热凝固区和消融边界区平均肿瘤细胞凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P均0.05),各区带细胞凋亡率均在术后1天达高峰,后呈下降趋势。结论 RFA后针道区和热凝固区内肿瘤细胞VEGF下降和肿瘤凋亡显著,而消融交界区仍可能有存活的肿瘤细胞;在RFA后第3周时,残留肿瘤细胞的增殖能力可恢复到术前状态,此时宜进一步采取相应的治疗措施。     

超声空化联合乙醇消融治疗兔VX2肿瘤

目的探讨超声空化阻断兔VX2皮下肿瘤血供对无水乙醇消融肿瘤的增强作用。方法将32只VX2皮下肿瘤兔随机分为4组:超声空化组、乙醇消融组、超声空化联合乙醇消融组、对照组。对各组肿瘤治疗前、治疗后即刻及24h均行CEUS检查,分析肿瘤造影峰值强度及曲线下面积,最后获取肿瘤标本估算肿瘤坏死率。结果超声空化联合乙醇消融组治疗后24h,肿瘤CEUS峰值强度和曲线下面积均低于其余各组(P均0.05);超声空化联合乙醇消融组肿瘤坏死率显著高于其余各组(P0.05)。结论超声空化治疗可显著提高无水乙醇对兔VX2肿瘤的消融效果。     

As2O3碘油栓塞对兔VX2肝癌移植瘤凋亡、 增生及血管形成的影响

目的观察肝动脉As2O3碘油栓塞对兔肝移植瘤凋亡及增生细胞核抗原表达及微血管密度(MVD)的影响.方法 32只家兔肝内肿瘤种植后2周,随机分4组,经肝动脉插管分别给予不同处理,实验设生理盐水灌注组(A组)、单纯碘油栓塞组(B组)、阿霉素碘油栓塞组(C组)及As2O3碘油栓塞组(D组).治疗后1周,免疫组化方法测定肿瘤区的MVD值及增生细胞核抗原的表达,原位末端标记法检测肿瘤的凋亡指数.结果治疗后1周,单纯碘油栓塞及阿霉素碘油栓塞组,残余肿瘤区的MVD略有升高,与生理盐水对照组相比,统计学无显著性意义;As2O3碘油栓塞组残余瘤区MVD减低,与其他组相比差异具有显著性意义.各组凋亡指数和增殖指数分别为1.53±0.42、2.66±0.54、2.91±0.32、3.44±0.65和60.8±15.5、42.4±11.2、40.6±8.8、28.5±5.7,两者存在负相关.结论 As2O3碘油栓塞可以通过诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增生发挥抗肿瘤效应,As2O3碘油栓塞可以抑制残余肿瘤的血管新生.     

经导管栓塞联合射频消融对兔VX2肝肿瘤的干预效果

目的 探讨经导管动脉栓塞术（TAE）联合射频消融（RFA）对兔VX2肝肿瘤的干预效果。方法 将兔VX2肝肿瘤模型分为4组,每组15只。对TACE+RFA组于TACE治疗15 min后行RFA,TAE+RFA组TAE治疗15 min后行RFA,RFA组仅给予RFA,TACE组仅给予TACE。分别于术前1天及术后3、7天检测血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）,术后7天检测肿瘤生长率、肿瘤坏死率及Suzuki评分;术后1、3、7天采用免疫组织化学法检测坏死区或凝固区周围肝组织热休克蛋白70（HSP70）表达,计算肝细胞凋亡指数及增殖指数。结果 TACE+RFA组术后3、7天血清ALT、AST水平均高于其他3组（P均<0.05）。术后7天,TACE+RFA组Suzuki评分高于其他3组,TACE+RFA组、TAE+RFA组肿瘤生长率低于RFA组和TACE组、肿瘤坏死率高于RFA组和TACE组（P均<0.05）。4组术后1、3、7天坏死区或凝固区周围肝组织HSP70表达均逐渐升高,TACE+RFA组术后1、3、7天均高于其他3组,术后1、3天TAE+RFA组均高于TACE组和RFA组（P均<0.05）。4组术后1、3、7天坏死区或凝固区周围肝细胞凋亡指数均逐渐降低,TACE+RFA组术后1、3、7天均高于其他3组,TACE组术后1、3天均高于TAE+RFA组、RFA组（P均<0.05）。4组术后3天肝细胞增殖指数均高于术后1、7天,TAE+RFA组术后1、3、7天均高于其他3组,RFA组术后1、3天均高于TACE+RFA组和TACE组（P均<0.05）。结论 TACE+RFA、TAE+RFA抑制兔VX2肝肿瘤生长效果优于单独应用TACE、RFA;TAE+RFA对肝损伤更小,促进肝细胞增殖、抑制其凋亡的效果更好。     

射频消融联合亚砷酸治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究

目的:探讨射频消融联合亚砷酸局部治疗对兔肝VX2肿瘤的有效性和安全性，并探讨其机制。方法:建立新西兰兔肝VX2肿瘤模型28只，随机分为4组，每组7只，分别进行亚砷酸（亚砷酸组）、射频消融（射频组）、射频消融加亚砷酸（联合组）和生理盐水（对照组）治疗。于术前、术后1，3，7d和14d耳缘静脉抽血检查丙氨酸转氨酶（ALT），同时行超声学检查。治疗后第14天处死所有实验动物，通过免疫组织化学方法检测VEGF，并分析其与肿瘤体积的相关性。结果:联合组治疗后仅第1天ALT与术前差异有显著性（P<0.05）,第3天下降至接近术前水平;联合治疗能更好地抑制肿瘤生长;亚砷酸组、射频组及联合组肿瘤组织VEGF水平均低于对照组（P<0.05），射频组低于亚砷酸组（P<0.05），联合组低于其余2组，VEGF表达强度与肿瘤体积呈显著正相关（r=0.78,P<0.01）。结论:联合治疗能通过抑制肿瘤新生血管生成而抑制肿瘤生长，且对肝脏无明显损害     

肝癌射频消融术后残留癌的肿瘤血管生成作用

目的 探讨肝癌射频消融(radiofrequency ablation,RFA)术后肿瘤血管生成在残留癌进展中的作用.方法 建立兔VX2肝癌模型,以不同温度(55℃、70℃和85 ℃)行RFA,建立肝癌RFA后残留癌模型,对照组未行RFA.通过大体病理观察不同消融温度对残留癌局部生长和肺转移的影响.采用免疫组化法检测残留癌组织MVD、VEGF的表达,Western blot法检测残留癌组织VEGF 蛋白表达,RT-PCR法检测残留癌组织VEGF mRNA表达.结果 肝癌射频消融术后与对照组(9.91±0.98)cm3比较,各RFA处理组局部肿瘤体积明显增大(分别t=-17.43,-10.11,-8.79,均P<0.05);与70℃组(17.08±2.28)cm3和85℃组(15.95±4.95)cm3比较,55℃组残留癌体积(21.26±2.32)cm3增大更为明显(分别t=4.69,6.78,均P<0.05).各RFA处理组肺转移程度较对照组显著增强,并以55℃处理组最为显著(分别t=-21.65,-30.15,均P<0.05).免疫组化法显示,与对照组比较,各RFA处理组残留癌组织MVD、VEGF表达均明显增强(MVD分别t=-13.01,-5.46,-5.63,均P<0.05),(VEGF分别t=8.00,4.92,4.21,均P<0.05);其中,与70℃组和85℃组比较,55℃组更为显著(MVD分别t=5.41,6.15,均P<0.05)(VEGF分别t=2.45,4.10,均P<0.05).各RFA处理组残留癌组织VEGF蛋白和VEGF mRNA表达水平均高于对照组.结论 VEGF过表达,加速肿瘤血管生成是肝癌RFA后残留癌快速进展的机制之一.

Abstract：

Objective To explore experimently the effect of tumor angiogenesis on rapid progression of residual tumor of liver cancer after radiofrequency ablation ( RFA). Methods A rabbit VX2 hepatoma model was established. Inoculated tumors were treated by using RFA at 55 ℃ , 70 ℃ and 85 ℃ respectively to establish the residual VX2 hepatoma model. Rabbits implanted with VX2 hepatoma but receiving no RFA treatment served as controls. The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF)was determined in tumors to assess the relationship between VEGF and the focal tumor volume and distant metastasis. The expression of VEGF and microvessel density ( MVD) in tumor tissues was assessed by immunohistochemistry. The protein expression of VEGF was assessed by Western blot. The expression of VEGF mRNA was detected by RT-PCR. Results There were significant differences of the local tumor volume between the control group (9.91 ±0.98) cm3 and the other groups (respectively t = -17.43,-10.11, -8.79,all P<0. 05). Compared with the 70 ℃ group (17. 08 ±2. 28 ) cm3 and the 85 ℃ group (15.95 ±4.95) cm3, the focal tumor volume of 55 ℃ group was the largest (21.26 ±2.32) cm3,( respectively t = 4. 69,6. 78, all P<0. 05). Much more metastatic lesions of lung were observed in the RFA treated groups in comparison to the control group. Moreover, the lung metastasis in 55 ℃ group was the most serious among the three RFA treated groups (respectively t = -21.65, -30. 15, all P<0. 05 ).Immunohistochemical staining indicated that the expression of VEGF and MVD in the RFA treated groups was much higher than those in control group ( MVD respectively t = -13.01, -5. 46, -5. 63, all P<0. 05), ( VEGF respectively t = 8. 00,4. 92,4. 21, all P<0. 05 ). Furthermore, the expression of both VEGF protein and VEGF mRNA in 55 ℃ group was the highest among the three RFA treated groups.Conclusions The over-expression of VEGF accelerating the tumor angiogenesis may be one of the mechanisms inducing rapid progression of residual liver tumor after RFA.