跑台训练对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力和突触可塑性的影响

目的:观察8周跑台运动对阿尔茨海默病模型大鼠记忆能力和突触可塑性的影响及内在机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、AD模型对照组(AC组)、AD模型训练组(AE组)。通过向大鼠两侧海马区注射Aβ25-35制造AD模型,Morris水迷宫实验检测各组大鼠记忆能力,Golgi法检测海马神经元树突密度;Western blot法检测海马组织中BDNF、SYP、PSD-95、P-Akt、P-CREB的表达。结果:与AC组比较,AE组大鼠逃避潜伏期明显减少,穿越平台区域次数明显增加(P0.01);Golgi染色结果表明,AE组海马神经元侧树突密度明显增加(P0.01);Western blot检测结果表明,与AC组相比,AE组BDNF、SYP、PSD-95、P-Akt表达都明显增强(P0.01),但P-CREB表达无显著性变化(P0.05)。结论:8周跑台训练可增加AD模型大鼠海马组织BDNF、SYP、PSD-95、P-Akt的蛋白表达,可能与海马神经元树突密度增加有关,或许是AD模型大鼠的记忆能力改善和突触可塑性变化的基础。     

电针长强穴对FMR1基因敲除小鼠海马CA1区PSD-95、CREB蛋白表达的影响

目的:探讨电针长强穴对FMR1基因敲除小鼠海马CA1区突触后膜致密物(PSD-95)及环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(CREB)表达的影响。方法:选取28日龄FMR1基因敲除小鼠30只,随机分为长强组、非穴组、模型组,每组10只,长强组针刺长强穴后连接电针仪,连续波,每次20 min,每日1次,每周6次,治疗2周;非穴组选取小鼠右侧胁下固定非经非穴点,电针操作同长强组;模型组在同等条件下饲养,不予任何干预。应用Morris水迷宫试验观察小鼠学习记忆能力,免疫组化法检测小鼠海马CA1区PSD-95、CREB蛋白的表达。结果:与模型组、非穴组比较,长强组治疗后逃避潜伏期明显降低(P0.05),原平台象限游泳路程/总路程比值明显增高(P0.05),海马CA1区PSD-95、CREB蛋白表达明显增高(P0.05)。结论:电针"长强"穴能提高FMR1基因敲除小鼠的学习和记忆能力,其机制可能与调控海马CA1区PSD-95、CREB蛋白表达有关。     

电针百会、大椎、肾俞穴对SAMP8小鼠学习记忆与海马CA1区神经元突触的影响北大核心CSCD

目的观察电针百会、大椎、肾俞穴对SAMP8小鼠学习记忆与海马CA1区神经元突触的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的机制。方法 7月龄SAMP8小鼠24只随机分为模型组和电针组,同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组。电针组电针百会、大椎、肾俞穴30 d。Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,免疫组织化学观察小鼠海马CA1区突触素(SYN)及突触后致密区蛋白95(PSD95)的表达,透射电镜观察小鼠海马CA1区突触超微结构的变化。结果与模型组相比,电针组逃避潜伏期缩短(P<0.05),原平台象限停留时间延长(P<0.05),穿越原平台次数增加(P<0.05),海马CA1区SYN与PSD95表达显著提高(P<0.001),突触结构较完整,数量增加。结论电针能提高小鼠海马CA1区神经元突触蛋白的表达,改善突触的超微结构,从而有效改善SAMP8小鼠的学习记忆能力。     

轻型脑外伤对大鼠空间学习记忆的影响及机制研究

目的:探讨轻型脑外伤对大鼠空间学习记忆功能的影响及可能的机制。方法:成年SD大鼠120只,雌雄各半,随机分为雌性对照组、雌性实验组、雄性对照组及雄性实验组,各30只;实验组建立侧位液压冲击轻型颅脑外伤模型;术后8d,水迷宫测试大鼠学习记忆能力;水迷宫测试结束后,放射免疫法检测血清皮质醇(COR)水平;免疫组化法检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)及酪氨酸激酶受体(TrkB)的表达。结果:水迷宫定位航行实验第4天,同性别大鼠实验组逃逸潜伏期较对照组显著延长(P<0.01);空间探索实验中,同性别大鼠实验组寻找平台潜伏期长于对照组(P<0.05),穿越平台次数少于对照组(P<0.05);同性别大鼠实验组血清COR水平显著高于对照组(P<0.01),海马BDNF及TrkB平均灰度值均低于对照组(P<0.05)。结论:轻型脑外伤导致大鼠认知功能缺损,可能与海马BDNF及TtkB表达减少,BDNF-TrkB通路受损有关。     

针灸对SAMP8小鼠学习记忆能力及主要病理特征的影响

目的：观察针灸对SAMP8小鼠行为学及海马区β淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）、细胞内微管相关蛋白Tau（Tau）以及神经元特异性核蛋白（NeuN）三大主要病理特征的影响。方法：6月龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组（n=6）和针灸治疗组（n=6）,以SAMR1雄性小鼠作为对照组（n=6）。对针灸治疗组针刺百会和双侧神门，艾灸双侧肾俞共28d。治疗后，采用Morris 水迷宫评价动物的学习记忆能力，免疫组化法检测Aβ1-42和NeuN蛋白表达水平，免疫蛋白印迹法检测Tau蛋白水平。结果：治疗结束24 h后，与模型组相比，从第2天开始，针灸治疗组逃避潜伏期明显缩短（P<0.01），原平台象限停留时间增加（P<0.05），穿越平台次数增加（P<0.05），海马Aβ1-42阳性表达减弱（P<0.01），海马NeuN阳性表达增强（P<0.05）,海马Tau蛋白表达量降低（P＜0.05)。结论：针灸百会、神门、肾俞穴能明显提高SAMP8小鼠学习记忆能力，可能与减少Aβ1-42沉积、降低Tau蛋白水平、抑制神经元数量减少有关。     

七氟醚对新生大鼠发育期学习记忆功能的影响及其可能的机制

目的观察七氟醚对新生大鼠发育期学习记忆功能的影响,并初步探讨其可能的机制。方法将72只出生7 d的SD大鼠随机分为3组,每组24只,雌雄各半。其中:A组,吸入3%七氟醚6 h;B组吸入2 h;C组为空白对照。8 d时,每组处死12只大鼠,分离血清待用。待大鼠发育至28~36 d时依次采用Morris水迷宫实验与Y型迷宫实验观察其学习记忆功能。并于37 d时,处死剩余大鼠,分离血清,同8 d时分离的血清一起检测S100β蛋白的表达量。结果 Morris水迷宫实验表明:发育至29~32 d时,A、B组平均逃避时间明显高于C组(P0.001),其中31 d、32 d时,A组显著高于B组(P0.001);而发育至33 d时,A、B、C各组间120 s内原平台象限活动时间和穿越原平台次数均无显著差异(P0.05)。Y型迷宫实验结果表明:34 d时A、B组大鼠全天总反应时间(TRT)和错误次数(EN)均显著高于C组,差异具有统计学意义(P0.05),而35 d、36 d时各组间TRT和EN无显著差异(P0.05)。8 d时,A、B组大鼠血清中S100β蛋白含量均显著高于C组,差异具有统计学意义(P0.001),且A组血清中S100β蛋白含量显著高于B组(P0.001)。但37 d时,各组间无显著差异(P0.05)。结论暴露于3%七氟醚,可一过性降低发育期SD大鼠的学习记忆能力,且这种影响与暴露时间长短呈正相关,其机制可能与七氟醚一过性增加大脑中S100β蛋白的表达有关。     

电针对血管性痴呆大鼠记忆力及海马BDNF、PSD-95蛋白表达的影响

目的:观察电针对血管性痴呆(VD)大鼠记忆力的影响,以及其对大鼠海马组织脑源性神经生长因子(BDNF)与突触后致密蛋白-95(PSD-95)蛋白表达的影响,探讨电针治疗血管性痴呆的可能分子机制。方法:将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组8只。假手术组暴露双侧颈总动脉,但不结扎;模型组和电针组采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD大鼠模型。治疗过程中3组大鼠均采用柔软型大鼠固定器固定。电针组选取百会、足三里穴,接通电流,每天1次,每次留针30min,连续治疗14天;模型组与假手术组只给予固定。治疗前后采用新事物识别实验对3组大鼠进行记忆力的检测。治疗结束后采用免疫印迹法检测大鼠海马组织BDNF与PSD-95的蛋白质表达情况,采用Image J图像分析系统对蛋白表达水平进行分析。结果:经过14天的治疗后,电针组大鼠对新物体的探索指数高于治疗前(P0.05),高于模型组大鼠(P0.05)。电针组大鼠海马组织的BDNF、PSD-95的蛋白质表达均高于模型组,差异有显著性意义(P0.05)。结论:电针血管性痴呆模型大鼠的百会穴、足三里穴能有效改善血管性痴呆大鼠的记忆能力,提高大鼠海马组织中PSD-95、BDNF蛋白的表达,电针对记忆力的改善可能与PSD-95、BDNF表达增加相关,有可能是通过影响BDNFGluA1-PSD95信号传导通路而发挥效用。     

重复经颅磁刺激对血管性痴呆大鼠学习记忆功能及海马胆碱能系统的影响

目的:观察重复经颅磁刺激(rTMS)对血管性痴呆(VaD)大鼠学习记忆功能及海马胆碱能系统的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:雄性SD大鼠54只,随机分为对照组、模型组、rTMS组,每组18只。采用两血管阻断法制作VaD模型,对照组仅分离暴露双侧颈总动脉而不结扎。rTMS组于制模成功后给予rTMS治疗,模型组模拟rTMS固定大鼠头部放置线圈但不给予脉冲磁刺激。各组在造模第30天应用Morris水迷宫试验检测学习记忆能力,测定海马内乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活性,行海马CA1区胆碱酯酶阳性纤维染色及密度测定,应用免疫组化技术检测海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果:与模型组相比,rTMS组水迷宫逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),相同时间内在原平台象限跨越相应平台次数明显增多(P<0.05);与对照组相比,模型组及rTMS组AChE及ChAT的活性均明显降低(P<0.05);与模型组相比,rTMS组AChE及ChAT的活性均明显增加(P<0.05);rTMS组海马CA1区乙酰胆碱酯酶阳性纤维的密度及BDNF的表达均较模型组明显增强(P<0.05)。结论:rTMS能改善VaD大鼠学习记忆功能,机制可能与rTMS治疗能促进海马CA1区BDNF的表达、恢复海马胆碱能系统活性有关。     

N-甲基-D-天冬氨酸受体在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑海马中的远期表达

目的:观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后,海马发育过程中N-甲基-D-天冬氨酸受体的远期表达变化。方法:实验于2006-03/06在解放军第三军医大学新桥医院中心实验室完成。选用新生7日龄SD大鼠72只,按随机数字表法分为缺氧缺血性脑损伤组和假手术组,每组36只。各组又分为生后15d(n=6)、22d(n=6)、29d(n=6)、36d(n=12)及43d(n=6)5个时相点。①参照Rice法通过结扎7日龄大鼠左侧颈总动脉,吸入氧气体积分数为0.08的氮氧混合气,制成缺氧缺血性脑损伤模型,出现自发或夹尾左旋则证明模型制作成功。假手术组仅切开颈部皮肤,暴露左侧颈总动脉。②应用免疫组织化学法检测缺氧缺血后不同时点两组大鼠脑海马CA1区N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚单位的表达(n=6),测量平均灰度值,灰度值越低,蛋白表达越强;生后36d时相点大鼠(n=6)利用Morris水迷宫测定学习记忆能力;最后应用电镜观察生后36d大鼠海马突触结构。结果:72只大鼠,全部进入结果分析,无脱失。①生后22-43d缺氧缺血性脑损伤组大鼠(缺氧缺血后15-36d)脑海马CA1区NR1平均灰度值分别为167.69±6.48,174.57±4.81,179.30±5.92,176.50±5.93,均显著高于同日龄假手术组148.96±4.91,151.17±6.37,152.06±9.86,156.32±6.86(P均<0.01)。②Morris水迷宫实验中,缺氧缺血性脑损伤组大鼠逃避潜伏期显著长于假手术组(48.87±9.47)s,(11.97±2.20)s,(P<0.01);原平台象限游泳距离/总游泳距离的百分比显著低于假手术组(14.45±3.85)%,(62.20±8.74)%(P<0.01)。③生后36d(缺氧缺血后29d),透射电镜下缺氧缺血性脑损伤组大鼠患侧海马突触后膜致密物较假手术组明显减少。结论:新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后期存在海马N-甲基-D-天冬氨酸受体的表达下调,可能对大鼠远期空间学习记忆产生一定影响。     

电针百会、大椎、肾俞穴对SAMP8小鼠学习记忆与海马CA1区神经元突触的影响

目的观察电针百会、大椎、肾俞穴对SAMP8小鼠学习记忆与海马CA1区神经元突触的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的机制。方法 7月龄SAMP8小鼠24只随机分为模型组和电针组,同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组。电针组电针百会、大椎、肾俞穴30 d。Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,免疫组织化学观察小鼠海马CA1区突触素(SYN)及突触后致密区蛋白95(PSD95)的表达,透射电镜观察小鼠海马CA1区突触超微结构的变化。结果与模型组相比,电针组逃避潜伏期缩短(P0.05),原平台象限停留时间延长(P0.05),穿越原平台次数增加(P0.05),海马CA1区SYN与PSD95表达显著提高(P0.001),突触结构较完整,数量增加。结论电针能提高小鼠海马CA1区神经元突触蛋白的表达,改善突触的超微结构,从而有效改善SAMP8小鼠的学习记忆能力。     

七氟醚对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元ATP酶活性的影响及其机制分析

目的探讨七氟醚对脑缺血再灌注损伤(IRI)大鼠海马神经元三磷酸腺苷(ATP)酶活性的影响,并分析其机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组,模型组(建立局灶性脑IRI大鼠模型)和七氟醚组(脑IRI模型+七氟醚吸入治疗),每组各10只。电镜观察各组大鼠海马组织的超微结构,免疫荧光检测海马神经元含量,免疫组化检测海马环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)蛋白表达,试剂盒法检测海马ATP酶活性,荧光定量-聚合酶链锁反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测海马cAMP、PKA、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA和蛋白表达。结果正常组海马神经元细胞膜结构完整,模型组海马神经元胞体萎缩,染色质浓缩并聚集在细胞核边缘,七氟醚组海马神经元形态明显改善。与对照组相比,模型组大鼠海马组织微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性细胞占比显著降低(P<0.05),七氟醚组显著高于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠海马组织cAMP和PKA阳性表达、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05),七氟醚组显著高于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠海马组织cAMP、PKA、CREB、BDNF mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),七氟醚组显著高于模型组(P<0.05)。结论七氟醚可通过激活cAMP-PKA-CREB-BDNF信号通路来促进脑IRI大鼠海马神经元的ATP酶活性,进一步改善脑IRI。     

运动对老龄脑缺血再灌注大鼠空间学习记忆能力的影响及其机制

目的探讨运动对老龄脑缺血再灌注大鼠空间觉学习记忆的影响及其相关机制。方法20 月龄SD脑缺血再灌注大鼠随机分为试验组和对照组各10 只。试验组接受规律的运动训练,对照组在跑台上自由活动。两组在试验1 周后分别进行Morris 水迷宫测试,检测大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF) mRNA表达。结果与对照组比较,试验组大鼠在第2 天的潜伏期缩短(P<0.05),平台周围活动轨迹延长(P<0.05);试验组大鼠海马缺血侧BDNF mRNA表达明显增加(P<0.01)。结论一定强度的规律性运动可提高老龄脑缺血再灌注大鼠空间学习和记忆能力,可能与海马内BDNF mRNA表达增加有关。     

反复丙泊酚麻醉对成年鼠海马突触可塑性和学习记忆行为的影响

目的探讨反复丙泊酚麻醉对成年鼠海马突触可塑性和学习记忆的影响。方法45只SD雄性大鼠按随机数字表法分为对照组(n=15)、丙泊酚1组(n=15)与丙泊酚2组(n=15),3组分别在特制的麻醉箱中给予腹腔注射0.9%氯化钠溶液、25 mg/kg与50 mg/kg丙泊酚,1次/d,持续10 d。检测与记录实验第5、10天3组大鼠的120 s内穿越原平台位置的次数与逃避潜伏期;实验第5、10天采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组大鼠白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实验第10天采用TUNEL法检测海马组织CA1区细胞凋亡水平;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测大鼠的海马组织Caspases-3、Bax、海马突触后致密物(PSD-95)、突触素(SYN)蛋白相对表达水平。结果丙泊酚1组与丙泊酚2组实验第5、10天的穿越平台次数少于对照组,逃避潜伏期多于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),丙泊酚2组穿越平台次数少于丙泊酚1组,逃避潜伏期多于丙泊酚1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。丙泊酚1组与丙泊酚2组实验第5、10天的血清IL-1β、TNF-α水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);丙泊酚2组血清IL-1β、TNF-α水平高于丙泊酚1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。丙泊酚1组与丙泊酚2组实验第10天的海马组织细胞凋亡指数、Caspases-3、Bax蛋白相对表达水平高于对照组,PSD-95、SYN蛋白相对表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);丙泊酚2组较丙泊酚1组细胞凋亡指数和以上蛋白表达水平变化更显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论反复丙泊酚麻醉可促进成年鼠海马组织Caspases-3和Bax蛋白的表达,降低PSD-95、SYN蛋白表达,促进神经元细胞凋亡,诱发机体出现炎症反应,从而影响大鼠的突触可塑性和学习记忆能力。     

槲皮素对颞叶癫痫大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨槲皮素对颞叶癫痫大鼠学习记忆能力的作用及其机制。 方法45只成年雄性SD大鼠,应用随机数字表法完全随机分为健康组、癫痫组和槲皮素干预组(40 mg/kg),采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射法建立颞叶癫痫模型。Morris水迷宫试验检测大鼠定位航行能力和空间探索能力;试剂盒测定大鼠海马组织总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测大鼠海马组织转录因子NF-E₂相关因子2(Nrf2)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA的相对表达量。采用SPSS 18.0统计软件对数据进行统计分析,平台象限潜伏期时间、停留时间、海马组织各酶活性多组间比较采用单因素方差分析,若P<0.05,进一步用最小差值显著法(LSD)进行两两比较。 结果各组大鼠水迷宫实验第3,4,5天寻找平台的潜伏期时间分别为,癫痫组(41.4±1.8)s、(41.7±1.9)s、(40.6±2.1)s,健康组(29.5±1.2)s、(22.8±0.4)s、(18.3±1.4)s,槲皮素干预组(31.7±2.6)s、(31.1±1.4)s、(30.2±1.5)s,各组差异有统计学意义(F＝123.49,162.49,98.01;P<0.05);各组大鼠在平台所在象限的游泳时间分别为,癫痫组(32.5±5.9)s,健康组(54.3±6.1)s,槲皮素干预组(45.8±5.9)s,差异有统计学意义(F＝107.58,P<0.05)。槲皮素干预组大鼠海马组织T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px水平均高于癫痫组[(5.5±1.4)U/mg, (3.3±1.1)U/mg;(58.7±13.9)U/mg,(35.3±12.4)U/mg;(15.3±4.6)U/mg, (10.2±4.2)U/mg;(38.7±11.6)U/mg,(23.9±10.3)U/mg],差异有统计学意义(F＝99.21,205.37,20.06,92.97;均P<0.05)。抗氧化关键基因Nrf2 mRNA相对表达量分别为,癫痫组(0.25±0.11),健康组(1.00±0.13),槲皮素干预组(0.82±0.15),差异有统计学意义(F＝374.74,P<0.05)。BDNF mRNA相对表达量,癫痫组(1.82±0.22),健康组(1.00±0.18),而槲皮素干预组(1.22±0.19),差异有统计学意义(F＝323.34,P<0.05)。 结论槲皮素干预可提高癫痫大鼠学习认知能力,海马组织抗氧化能力的提升可能是槲皮素减轻癫痫大鼠认知功能障碍的可能机制之一。     

不同强度训练负荷对大鼠认知情绪变化及NMDA受体、PSD-95和KIF-17mRNA和蛋白表达的影响

目的:建立SD大鼠中等和高强度持续训练运动模型,探究不同训练负荷下,大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDARs)、突触后致密物质-95(PSD-95)和驱动蛋白家族蛋白17(KIF-17)表达及认知和情绪功能的变化。方法:实验建立SD大鼠跑台运动模型,分别进行中等和高强度持续训练4周,中等强度运动时采用递增负荷训练,高强度运动时采用高速训练,并设立正常对照组。测量运动后大鼠体质量减轻程度的变化,real-time PCR和Western blotting分别检测不同训练负荷对大鼠海马NMDA受体,PSD-95和KIF-17 m RNA和蛋白表达的影响。结果:相比对照组,中等强度持续运动精神状态明显更佳,高强度持续运动状态萎靡。中等强度持续训练组PSD-95、KIF-17和NMDA受体的m RNA和蛋白的表达显著上升(P0.05),而高强度持续训练组m RNA和蛋白的表达则受到抑制(P0.05)。结论:不同训练负荷对大鼠认知情绪及精神状态有较大影响,可以影响大鼠NMDA受体、PSD-95和KIF-17 m RNA和蛋白的表达。适量的运动训练不仅可以减轻缺氧对海马的损害,更可以有效地改善海马的功能。     

氯胺酮对子鼠学习记忆能力的影响及其机制研究

目的 探究氯胺酮对子鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法 选取60只子鼠,使用跳台实验将子鼠分为智力及记忆能力相近的4组,每组各15只,分别为:空白组、低剂量氯胺酮组(25 mg/kg)、中剂量氯胺酮组(50 mg/kg)和高剂量氯胺酮组(100 mg/kg),氯胺酮各组腹腔注射对应剂量的氯胺酮,空白组腹腔注射等量生理盐水,每日1次,连续7 d。使用跳台法和Morris水迷宫法测定子鼠的学习记忆能力;采用HE染色观察子鼠海马体内神经细胞的变化;采用比色法测定子鼠脑组织中乙酰胆碱(Ach)、5-HT含量和乙酰胆碱酯酶(TCh E)活力;使用Western blot检测子鼠海马体内环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)及脑源性神经营养因子(BDNF)的表达情况。结果 相比空白组,使用氯胺酮组处理各组子鼠逃避潜伏时间、出现逃避错误次数、每个象限内停留时间、TCh E活力均显著升高(P <0. 05),120 s内穿台次数、Ach水平、CREB、p-CREB及BDNF表达水平、pCREB/CREB值显著降低(P <0. 05);相比低剂量氯胺酮组,中剂量氯胺酮组和高剂量氯胺酮组子鼠逃避潜伏时间、出现逃避错误次数、每个象限内停留时间、TCh E活力均显著升高(P <0. 05),120 s内穿台次数、Ach水平、CREB、pCREB及BDNF表达水平、p-CREB/CREB值显著降低(P <0. 05);HE染色结果显示,使用氯胺酮处理后子鼠海马区细胞间隙明显增宽,结构组织松散,细胞水肿,以条索状为主,并存在大量的细胞坏死。结论 氯胺酮会损害子鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与调控神经递质、减少BDNF表达并抑制CREB信号传导通路相关,并呈剂量依赖性。     

甘麦大枣汤对慢性应激抑郁模型大鼠学习记忆及海马突触可塑性的影响

[目的]探讨甘麦大枣汤对慢性应激抑郁模型大鼠行为活动、学习记忆及海马突触可塑性的影响.[方法]将Wistar大鼠随机分为4组,即空白组、抑郁模型组、氟西汀组(5.4 mg/kg)、甘麦大枣汤组(3.84 g/kg),采用慢性温和不可预见性应激加孤养的方式建立抑郁模型,造模同时灌胃(ig)给药,连续21 d,观察甘麦大枣汤对模型大鼠水迷宫测试的影响,采用免疫组化、Western-Blotting的方法检测各组大鼠海马突触素I(SYNⅠ)、突触素(SYNA)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达水平并比较.[结果]与正常组比较,模型组大鼠水平及垂直活动的得分明显下降(P<0.01),逃避潜伏期(EL)、目标象限潜伏时间显著增长(P<0.05),SYNⅠ、SYNA、BDNF的表达显著下降;与模型组的结果比较,甘麦大枣汤能缩短模型大鼠的EL(P<0.05),并能缩短目标象限潜伏时间(P<0.05),增加模型大鼠海马SYNⅠ和SYNA的表达(P<0.01或P<0.05),促进BDNF的含量增加.[结论]甘麦大枣汤能显著改善抑郁模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能是通过提升其海马突触可塑性而发挥作用.     

银杏叶提取物上调海马脑源性营养因子和神经肽2受体表达、增强突触重建而改善发育期癫痫大鼠认知功能的研究

目的 观察银杏叶提取物(EGb)对发育期点燃癫痫大鼠治疗前后学习记忆及脑组织海马中脑源性营养因子(BDNF)、神经肽2受体(NPY2R)、突触素P38、突触后致密蛋白95(PSD95)表达及突触超微结构的影响,探讨EGb改善认知功能的可能作用机制.方法 戊四氮(PTZ)诱导大鼠慢性点燃模型,Morris水迷宫观察干预治疗前后大鼠学习记忆变化,Western blot和免疫组化分别检测海马中BDNF、NPY2R、P38、PSD95蛋白的含量分布情况,电镜观察突触超微结构.结果 (1)Morris水迷宫测试结果显示PTZ点燃大鼠的潜伏期长于NS组(P<0.05),经EGb治疗后的大鼠潜伏期较点燃组明显下降(P<0.05).相应地点燃大鼠的跨越平台次数明显少于NS组(P<0.05),经EGb治疗后大鼠的跨越平台次数则多于相应的未治疗组(P<0.05).(2)点燃大鼠海马中BDNF蛋白含量明显高于NS组(P<0.05),EGb的治疗进一步提高了大鼠BDNF蛋白含量(P<0.05),BDNF免疫阳性细胞分布以皮质区最高,其次分别为海马CA3区、CA2区和DG.相应地点燃大鼠海马内NPY2R蛋白含量也显著高于NS组(P<0.05),但是,EGb的治疗可以降低大鼠的NPY2R蛋白含量(P<0.05),NPY2R免疫阳性细胞主要分布于海马DG区,皮质区次之.(3)点燃大鼠脑内P38和PSD95蛋白含量均低于NS组(P<0.05),EGb的治疗使得P38和PSD95表达量明显高于点燃组、甚至超过NS组(P<0.05).(4)在透射电镜下点燃大鼠海马神经元胞体固缩浓染,细胞水肿,突起膜发生断裂,突触前后膜结构模糊,突触小泡减少,突触后致密物变薄,而EGb的治疗可以减轻细胞水肿、致密物稍增厚.结论 EGb治疗后发育期癫痫大鼠海马BDNF、NPY2R、P38和PSD95表达增强,受损的突触结构得到改善,可能参与了EGb改善点燃大鼠的学习记忆过程.     

重复经颅磁刺激对脑梗死后海马PSD-95和GAP-43表达的影响及其机制研究

目的:观察高频重复经颅磁刺激(rTMS)对脑梗死大鼠缺血侧海马突触后致密物质-95(PSD-95)和生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响及其可能机制。方法:SD雄性成年大鼠20只,分为模型组(A组)和rTMS组(B组)各6只,rTMS+NS(normal saline)组(C组)和rTMS+阻滞剂H89组(D组)各4只,建立脑梗死模型,给予7d的20Hz rTMS治疗,应用Western Blot方法检测A、B组缺血侧海马PSD-95和GAP-43表达并观察超微结构,进一步研究给予C、D组间蛋白激酶A-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)、PSD-95和GAP-43表达变化。结果:与A组相比,B组PSD-95和GAP-43表达增加(P0.01),电镜下突触体积增大,突触前后膜电子致密区增宽,电子密度和突触囊泡数量增加。D组pCREB、PSD-95、GAP-43表达较C组均减少(P0.01)。结论:rTMS有可能通过对PKA-CREB信号通路调节来促进脑梗死后海马PSD-95、GAP-43的表达。