B7-H1基因表达水平预测急性髓系白血病患者的诱导治疗反应

为了探讨急性髓系白血病（AML）患者白血病细胞BT-H1基因表达的临床意义,本研究应用SYBRGreenI实时定量RT-PCR法检测了40例初治AML患者骨髓单个核细胞（BMMNC）B7-H1 mRNA的表达情况,跟踪检测了10例复发患者BMMNCB7-H1 mRNA的表达情况,并对40例AML患者的临床特征与B7-H1基因表达水平进行相关性分析。结果表明：初治AML患者BMMNCB7-H1 mRNA表达阳性,但表达水平低于正常人。复发时B7-H1 mRNA表达水平较初诊时明显升高。B7-H1基因表达水平与患者性别、年龄、外周血白细胞计数、骨髓中幼稚细胞比例、CD34抗原阳性与否均无相关性,但与治疗反应有显著相关性。诱导化疗后未获完全缓解（CR）的患者,其治疗前B7-H1 mRNA表达水平明显高于化疗后获得CR的患者。结论：初诊AML患者BMMNCB7-H1基因表达水平与患者在诱导化疗后是否获得缓解呈负相关。B7-H1基因表达水平有可能用于预测AML患者的预后。     

CD200在急性髓系白血病中的表达特点及其临床意义

本研究探讨急性髓系白血病（acute myelocytic leukemia,AML）中CD200的表达率与临床特征的关系,分析CD200在AML预后判断中的价值。应用流式细胞术检测CD200及免疫表型,用R显带技术分析染色体核型,FISH技术检测AM L1/ETO、PM L/RARa和inv（16）,PCR方法检测AM L1/ETO和PM L/RARa融合基因。结果表明：在54例初诊患者中CD200抗原表达阳性率为57.41%（31/54）;CD200抗原表达在性别与年龄方面差异无统计学意义（P〉0.05）;CD200抗原表达在CD34和CD117之间具有显著的统计学意义（P〈0.05）;CD200抗原表达在染色体核型差异方面无统计学意义（P〉0.05）;核心结合因子（core binding factor,CBF）阴性的AML中CD200抗原表达在CD34和CD117表达方面均具有显著的统计学意义（P〈0.05）。结论：CD200的表达与AML预后不良相关。     

PRAME基因在成人急性白血病的表达及其与预后的相关性

本研究探讨黑色素瘤特异性抗原（preferentially expressed antigen of melanoma，PRAME）基因在成人急性白血病中的表达及其与预后的相关性。应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测73例初发、3例复发成人急性白血病患者、7例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者和8例正常人骨髓单个核细胞（BMMNC）以及K562和U937二个白血病细胞株PRAME mRNA的表达水平，分析其在成人急性白血病中的表达规律及其在判断疗效及预后、监测微小残留病（MRO）和在特异性免疫治疗中的意义。结果表明：PRAME基因在成人急性白血病中的表达率为36．8％（n=28），急性髓系白血病（AML）为42．9％（n=24），急性淋巴细胞白血病（ALL）为20％（n=4）。AML的表达率显著高于ALL（P〈0．01）。在K562和U937细胞都有PRAME基因表达，它们的表达水平分别为0．57和0．46。在15例对照（正常人、ITP患者）未检出PRAME基因表达。AML各亚型之间（除去病例数为0例的M7，M1及M6各1例）、ALL各亚型（L1，L2）之间PRAME mRNA的表达水平无显著性差异。患者的年龄、初诊或者复发时白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、骨髓中原始细胞、幼稚细胞比例以及脾脏厚度对PRAME mRNA的表达无相关性。完全缓解组PRAME mRNA的表达水平与部分缓解组和死亡组有显著性差异，并且随着PRAME mRNA的表达水平升高，治疗效果越好。对1例病人动态监测发现，在复发之前PRAMEmRNA的表达会升高。结论：PRAME基因在成人急性白血病中存在高表达，其表达水平与预后密切相关，并可以作为监测MRD的标志基因。PRAME在白血病特异性免疫治疗中是潜在的靶抗原。     

热休克蛋白70及pim-1基因在白血病骨髓单个核细胞的表达特点及临床意义

本研究观察热休克蛋白70（HSP70）基因／蛋白，pim-1基因在白血病患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中的表达，确定其表达是否与白血病类型、肿瘤负荷程度及预后有规律性联系。用RT—PCR技术检测40例白血病患者和10例对照BMMNCHSPT0mRNA及pim-1mRNA的表达并半定量；用Westernblot检测34例白血病患者和10例对照BMMNCHSP70蛋白表达并半定量，并结合白血病类型、肿瘤负荷程度及对治疗的反应进行分析。结果表明：白血病组与对照组BMMNC均存在HSP70mRNA和蛋白表达，在白血病组显著高于对照组；CML组、AML组HSP70mRNA／蛋白表达的平均ODR值均显著高于ALL组；肿瘤重度负荷的急性白血病患者组HSP70mRNA／蛋白表达显著高于肿瘤轻度负荷组；白血病患者化疗后HSP70mRNA／蛋白表达显著高于化疗前；白血病组及对照组BMMNC均表达pim-1mRNA，在白血病组显著高于对照组；ALL组pim-1mRNA表达显著高于AML组和CML组：经相关性分析，白血病患者HSP70mRNA表达与pim-1mRNA表达成正相关（r=0．327，P〈0．05）。结论：白血病患者BMMNC存在HSP70、pim-1高表达，其中pim-1mRNA表达与HSP70mRNA表达呈正相关，HSP70与pim-1基因／蛋白过表达亦与白血病肿瘤负荷程度有关。     

核磷素与急性髓系白血病

核磷素（NPM）是一种多功能磷蛋白。核磷素基因杂合子变异（NPM1）是正常染色体核型成人急性髓系白血病（AML）患者最常见的基因异常。CD34-、正常染色体核型、NPM1突变／FLT3阴性，提示预后良好。通过检测NPM1基因突变可以将具有正常染色体核型的AML患者进一步分组。本文就核磷素在AML中的作用机制、临床特征、预后分层等方面作一综述。     

再生障碍性贫血和骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34^＋细胞及其G-CSFR、GM-CSFR的表达和意义

本研究探讨再生障碍性贫血（AA）和骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓CD34^＋细胞表面粒细胞集落刺激因子受体（G—CSFR）和粒-巨噬细胞集落刺激因子受体（GM—CSFR）的表达。分离27例AA患者、45例MDS患者和20例正常对照者的骨髓单个核细胞（BMMNC），用流式细胞术观察BMMNC中CD34^＋细胞比率和CD34^＋细胞表面G—CSFR、GM—CSFR表达率与外周血中性粒细胞数的关系。结果发现，CD34^＋细胞比率在AA组显著低于对照组，MDS组显著高于对照组，AA组显著低于MDS组，骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多（MDS—RAEB）组显著高于骨髓增生异常综合征-难治性贫血（MDS—RA）组或对照组，MDSr-RA组显著高于AA组（P均〈0．05）；MDS—RA组与对照组无显著性差异（P〉0．05）。各组BMMNC中CD34^＋细胞表面G—CSFR表达率在AA组、对照组、MDS组、MDS—RA组及MDS—RAEB组均无显著性差异（P均〉0．05）。各组BMMNC中CD34^＋细胞表面的GM—CSFR的表达率在AA组与对照组无显著性差异（P〉0．05），MDS组显著高于对照组或AA组（P均〈0．05），MDS—RA组与MDS—RAEB组无显著性差异（P均〉0．05）。SAA患者BMMNC中CD34^＋细胞的比率显著低于CAA患者（P〈0．05），AA患者CD34^＋细胞表面的G—CSFR和GM—CSFR表达率与诊断时外周血中性粒细胞计数均无相关性（r=0．058和r=0．044）；MDS患者BMMNC中的CD34^＋细胞的比率与诊断时外周血中性粒细胞数没有相关性（r=-0．335），其CD34^＋细胞表面的G—CSFR和GM—CSFR表达率与诊断时外周血中性粒细胞数亦无相关性（r=0．064和r=0．051）。结论：AA及MDS患者骨髓CD34^＋细胞占BMMNC的比率及其表面G—CSFR、GM—CSFR的表达率的测定有助于二者的诊断和鉴别诊断。     

急性髓系白血病初诊患者β-连环蛋白和周期蛋白D1mRNA的表达及其意义

本研究旨在检测急性髓系白血病（AML）患者β-连环蛋白（beta—catenin）及周期蛋白D1（cyclinD1）mRNA的表达变化，分析其相关性，为探讨Wnt／β联蛋白（Wnt／beta—catenin）通路在AML发病机制中的作用提供理论依据。采用实时荧光定量RT—PCR的方法检测beta—catenin及cyclin D1 mRNA的相对表达水平，分析两者在AML不同亚型及良性血液病患者中的表达变化及相关性。结果表明，AML骨髓单个核细胞（BMMNC）中beta-cateninmRNA的表达水平明显高于良性血液病患者（P〈0．05），但在AML各亚型之间其表达量无统计学差异（P〉0．05，在AML中存在cyclinD1 mRNA的过度表达，其表达水平明显高于良性血液病组（P〈0．05），在各亚型间其表达量无统计学差异（P〉0．05）。Beta-catenin与cyclinD1的表达水平在AML-M1、M2、M4中存在显著正相关性（r值分别为0．822，0．627，0．712，P值分别为0．001，0．020，0．002）。结论：在AML患者中存在beta—catenin及cyclin D1的过度表达，且在部分亚型中存在显著相关性；Wnt／beta-catenin通路在AML中被异常激活，很可能是通过该通路下游靶基因cyclinD1的激活，参与白血病细胞的周期紊乱和异常增殖的调节。     

急性和慢性髓系白血病患者SALL4基因的表达

本研究旨在探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)和慢性髓系白血病(chronic myeloidleukemia,CML)患者中SALL4基因的水平状态及其临床意义。应用RQ-PCR方法检测35例AML、12例CML患者和24例缺铁性贫血患者(作为对照)骨髓单个核细胞(BMMNC)SALL4 mRNA表达水平。结果表明,AML患者SALL4表达水平(0%-14%,中位1.43%)明显高于对照组(0%-1%,中位0%)(P<0.001),65.7%(23/35)AML患者中SALL4转录本呈阳性,SALL4表达频率依次为M2(86.7%,13/15)、M3(75.0%,6/8)、M1(60.0%,3/5)、M4(14.3%,1/7),4组间的差异有显著性(P=0.008);SALL4表达频率与AML患者年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数和染色体异常均无相关性(P>0.05)。13例CML患者中SALL4转录本均为阳性表达,相对含量为1%-128%(中位19.39%),明显高于对照组(P<0.001)。采用接收者操作特征曲线(receiver operatingcharacteristic curve,ROC曲线)分析显示,AML和CML曲线下面积(AUC)分别为0.983(95%可信区间0.95-1.017)和0.997(95%可信区间0.986-1.007)。结论:SALL4基因表达是AML和CML中常见的分子事件并且可考虑作为AML和CML辅助诊断的分子标记。     

白血病患者可溶性耐药相关钙结合蛋白基因的表达及其临床意义

目的：探讨白血病患者可溶性耐药相关钙结合蛋白（Sorcin)基因的表达及其与临床耐药和疗效的关系。方法：应用半定量RT－PCR检测95例急性白血病患者、27例非白血病患者和健康人的Sorcin基因表达水平，并分析了Sorcin基因表达的临床意义。结果：白血病患者Sorcin基因表达高于对照组，差异有显著性（P＜0．001）；急性髓系白血病（AML）复发难治组高于初诊组和完全缓解（CR）组；临床耐药组Sorcin基因表达显著高于非临床耐药性（P＜0．001）；Sorcin基因阳性表达的CR率为20．0％，Sorcin基因阴性表达的CR率为80．0％，差异有显著性（P＜0．001）；AML各亚型Sorcin基因过度表达存在差异，以M5的阳性表达率最高。结论：Sorcin基因过度表达与白血病患者临床耐药密切相关，是影响预后的重要因素，可作为检测临床耐药和判断预后的指标之一。     

急性髓系白血病中MN1基因的研究进展

MN1基因编码转录共激活因子,在某些急性髓系白血病（AML）中高表达。MN1在正常核型AML患者中的高表达与预后差和生存时间短相关;在全部inv（16）AML中高表达,其高表达在非M3的AML中被认为与对维甲酸的耐药有关。本文就MN1基因的结构和作用机制、MN1-TEL与急性髓系白血病,MN1与正常核型AML,MN1与inv（16）AML,MN1与维甲酸耐药等作一综述。     

Survivin在急性髓系白血病患者中的表达

本研究通过检测Survivin在急性髓系白血病（AML）患者骨髓中的表达,探讨其表达水平与临床变量之间的关系及其与BCL-2、Bcl-xL和MCL-1之间的相关性.应用免疫组织化学染色技术检测63例初诊AML患者的Survivin表达水平,比较其表达量与正常对照者的差别,并分析其与年龄、性别、白细胞计数、诊断分型、预后分型以及治疗疗效等临床参数之间关系,特别是与AML1/ETO融合蛋白之间的联系;描绘患者的生存曲线;分析Survivin表达与BCL-2、Bcl-xL和MCL-1表达之间的相关性.结果表明：AML患者骨髓中Survivin的表达量显著高于对照组（P＜0.01）,其表达量与患者的年龄、性别、白细胞计数等无关;在不同NCCN预后分组中表达量无显著差异;伴AML1/ETO阳性以及FLT3-ITD突变的患者,其Survivin表达水平与其他类型患者无明显差异;Survivin阳性患者,其CR率低于阴性患者而复发率高于阴性患者,但无统计学差异;Survivin阳性患者的累积生存率低于阴性患者（P=0.04）;Survivin表达水平与MCL-1呈明显正相关（R=0.639,P=0.000）.结论：Survivin的表达与白血病发生、发展密切相关,有可能用作为预后分析的参考指标;Survivin与MCL-1可能相互作用或协同作用.     

Musashi-2在急性髓系白血病干细胞中的表达研究

本研究旨在探讨检测AML患者Musashi-2（Msi2）的表达与其他临床参数特别是CD34表达的相关性.提取临床初诊确诊为急性髓系白血病（AML）患者骨髓标本的总RNA,荧光定量RT-PCR检测患者Msi2的表达水平;流式细胞术检测上述病人的CD34表达水平;综合分析其他实验室检查资料和患者的临床表现,分析初诊AML患者Msi2表达情况以及Msi2表达与CD34表达的相关性.结果表明：①初诊AML患者骨髓Msi2表达显著高于正常对照骨髓（P＜0.05）,各亚型中Msi2表达以M1、M4和M5中表达较高,显著高于AML其他亚型中的表达（P＜0.05）;②Msi2的表达与患者年龄、性别、初诊时外周血白细胞数、AML1/ ETO融合基因、PML/ RARa融合基因均无关（P＞0.05）;③CD34＋组AML患者Msi2表达显著高于CD34-AML患者（P＜0.05）.结论：Msi2表达于白血病干细胞,Msi2在初诊AML中高表达,以M1、M4和M5亚型中表达尤为显著,在CD34＋ AML患者中Msi2高表达.     

骨髓DNA甲基转移酶基因在急性髓系白血病患者的表达及意义

本研究旨在探讨DNMT1基因在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达及其意义。应用实时定量PCR方法检测30名正常人和126例AML患者骨髓中DNMT1基因的表达。结果表明,30例正常人骨髓中检测到较低水平的DNMT1基因表达;DNMT1基因在AML患者骨髓中的表达水平增高,AML缓解后DNMT1基因的表达水平较初诊时明显降低;DNMT1基因表达水平与AML患者的年龄、性别及初诊白细胞数等临床特征无关;治疗后DN-MT1基因高表达组完全缓解率高于低表达组。结论:骨髓DNMT1基因表达水平在AML发病中可能起重要作用,可作为判断AML预后的指标之一。     

凋亡抑制基因aven在急性髓系白血病的表达及其临床意义

本研究旨在探讨AML患者凋亡抑制基因avertmRNA的表达情况,分析其临床意义,为预后评估提供实验依据。应用实时荧光定量PCR方法检测69例初诊AML患者外周血白细胞avenmRNA的表达水平,分析avenmRNA的表达水平与患者的年龄、性别、白细胞数,血小板计数、血红蛋白和LDH水平、外周血和骨髓的原始细胞比例、FAB分型、患者的疗效和复发的关系,21名正常人的外周血作为对照。结果表明：69例初诊AML患者avenmRNA表达水平的中位值为37．2（11．72—178．93）％,正常人外周血白细胞aven mRNA表达水平中位值为28．81（10．81-50．98）％,AML患者avenmRNA表达水平明显高于正常人（p=0．006）。avenmRNA的表达水平与患者的年龄具有明显的相关性（r=0．25,P=0．039）,以AML患者中位年龄（44岁）为界分为2组,年龄大于／等于44岁组aven mRNA表达水平[中位值50．08％,（18．88—152．02）％]明显高于年龄小于44岁组[中位值32．41％,（11．72—178．93）％],（P=0．018）。aven mRNA的表达水平与患者Hb水平和FAB分型具有明显的相关性（r=0．29,P=0．019;r=0．253,P=0．036）。2个化疗疗程后avenmRNA表达水平低于中位值组的完全缓解率（25／30,83．33％）高于avenmRNA表达水平高于中位值组（21／30,70％）,但差别无统计学意义（P=0．22）。复发患者avenmRNA的表达水平与无复发者相比无明显升高（P=0．076）。结论：初诊AML患者凋亡抑制基因avenmRNA的表达水平明显升高,可能与AML的发病有关,但尚未发现基因avcilmRNA的表达情况与疾病的疗效和复发之间的关系。     

PDLIM4基因低表达与急性髓系白血病患者预后良好相关

本实验旨在研究急性髓系白血病（AML）患者中PDLIM4基因表达模型,并分析其临床相关性.运用EvaGreen实时定量PCR（RQ-PCR）方法检测AML患者中PDLIM4基因表达量.结果表明,与21例对照相比,94例AML患者PDLIM4转录本水平降低非常显著（P＜0.01）,共有42例（45％）AML患者为PDLIM4转录本低表达,M1/M2/M3亚型的PDLIM4低表达率非常显著地高于M4/M5/M6亚型（56％对20％,P＜0.01）,AML中PDLIM4低表达患者的总体生存时间（OS）显著长于非低表达者（P＜0.05）；受试者工作特征曲线（ROC）分析显示,ROC曲线下面积为0.865（95％可信区间：0.801-0.930）,表明PDLIM4低表达对AML具有诊断意义.结论：PDLIM4低表达是一个常见事件,且对AML预后具有良性影响,可能成为潜在的诊断肿瘤的分子标记.     

c-MPL在急性髓系白血病患者白血病干细胞中的表达

本研究通过检测c-MPL在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达,探讨c-MPL表达与CD34、CD38的相关性,以确定c-MPL在白血病干细胞的表达。通过流式细胞术检测29例初诊AML患者的c-MPL和CD34、CD38阳性细胞比例;比较患者c-MPL表达水平与正常对照的差别及与临床指标的关系;分析患者的c-MPL表达水平与CD34、CD38各部分细胞分群的关系及它们之间的相关性。结果表明:AML患者骨髓细胞中c-MPL表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);c-MPL的表达与患者的年龄、性别、白细胞计数、AML1-ETO融合基因、化疗后缓解情况无关;c-MPL在M2和M5分型中的表达显著高于正常对照组(P<0.05)。CD34阳性AML患者组的c-MPL表达水平显著高于CD34阴性AML患者组(P<0.01)。AML患者c-MPL在CD34+细胞中的表达显著高于CD34-细胞(P<0.001);AML患者中c-MPL在CD34+CD38+和CD34+CD38-两群细胞中的表达无显著性差异(P>0.05);c-MPL和CD34的表达呈正相关(r=0.380,P=0.042)。结论:c-MPL在AML患者中高表达,且与CD34的表达水平具有一定的正相关性,c-MPL表达于白血病干细胞。     

自体外周造血干细胞移植治疗13例AML1/ETO(+)急性髓系白血病的疗效观察

本研究分析自体外周造血干细胞移植治疗AML1／ETO（＋）急性髓系白血病（AML）的疗效及定量监测融合基因AML1／ETO在治疗中的应用。对2007年8月-2012年11月在本院进行自体移植的AML1／ETO（＋）AML患者13例进行回顾性分析,中位随访26（7．8—75．8）个月,计算总生存率（OS）、无白血病生存率（1eukemia—freesurvival,LFS）和累积复发率（relapserate,RR）,并对生存情况进行单因素分析。结果表明,3年的总体存活率为（70．5±15．3）％,3年的无白血病存活率为（51．3±16．7）％,3年的累积复发率为48．7％。在5例复发患者中对4例进行了A舭J／ETO定量监测,发现形态学复发前AML1／ETO表达量均明显升高。在单因素分析中,患者年龄、性别、初诊时白细胞数量、自确诊白血病到进行移植的时间间隔、回输MNC数量等对总体存活率的影响均差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论：自体造血干细胞移植对AML1／ETO（＋）AML患者具有良好疗效,定期定量监测AML1／ETO表达量可预知早期复发,中高危患者复发后采用异基因移植可再次获得长期生存机会。