芪白平肺胶囊对“肺气虚失治节”慢性阻塞性肺疾病肺血管收缩调节作用临床研究

目的:观察芪白平肺胶囊防治慢性阻塞性肺疾病肺血管收缩的临床疗效。方法:将符合标准的38患者,随机分为治疗组与对照组,治疗组20例每次口服方药芪白平肺胶囊3粒,3次/d,30d为1疗程。对照组18例一般常规基础治疗30d。观察慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证患者中医证候积分、血流动力学及6WMT与Borg评分的变化。结果:治疗组总有效率95%,对照组83%(P0.05);2组FEV1、FEV1/FVC较治疗前均有降低(P0.01),治疗组与对照组治疗后FEV1升高(P0.05);2组6MWT较治疗前均有升高,治疗组治疗后与治疗前比较显著升高(P0.01);2组Borg评分较治疗前均有降低,治疗组治疗后与治疗前比较明显降低(P0.01);2组治疗后与治疗前比较6MWT明显升高(P0.01)。结论:肺气虚失治节是COPD的主要病机,应用益气化痰祛瘀方药芪白平肺胶囊,可以防治慢性阻塞性肺疾病,从而防治肺动脉高压,且早期预防效果更佳。     

芪白平肺胶囊治疗痰瘀阻肺型COPD临床观察

目的:观察芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的疗效。方法:将50例COPD患者随机分为2组各25例,在常规治疗基础上,治疗组加用芪白平肺胶囊,对照组加用安慰剂,30d为1个疗程并观察疗效,观察2组患者肺功能指标。结果:治疗后对照组的肺功能指标较治疗前有所降低(P0.05),治疗组较治疗前下降更为明显(P0.05或P0.01),2组比较有显著性差异(P0.05)。结论:芪白平肺胶囊对COPD患者有较好的疗效。     

NF-κB和诱导型一氧化氮合酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用

目的探讨NF-κB、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病机制中的作用。方法采用两次气管内注入脂多糖（LPS）和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型;采用免疫组织化学法检测NF-κB、iNOS在COPD大鼠支气管肺组织中的表达。结果大鼠模型的病理及病理生理学改变符合人类COPD的特点,模型组肺平均内衬间隔（MLI）、平均肺泡数（MAN）与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,模型组NF-κB、iNOS表达强度明显高于对照组（P〈0.05）。结论NF-κB、iNOS的过量表达引起气道炎症和肺部损伤,导致COPD的发生;同时NF-κB促进炎症细胞合成多种炎症因子,产生大量的iNOS,在COPD气道炎症和肺部损伤的持续和放大中起着重要作用。     

核转录因子-κB抑制剂对慢性阻塞性肺疾病气道、肺血管重构的防治作用

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道、肺血管重构的影响。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为8组。模型制作完成后测定气道阻力、肺血流动力学和右心室肥厚指数,观测气道炎症,气道重构以及肺小动脉的病理改变,免疫组化法检测肺组织中NF-κB蛋白的表达。结果:(1)C、D组RVSP、mPAP、RV/LV+S、MT%、MA%、肌化型动脉百分比高于A组。D组肺小动脉WT%、WA%比值增大。C1、D1组RVSP、mPAP、MT%、MA%、肌化型动脉百分比较C、D组降低。D1组的RV/LV+S、WT%、WA%值较D组降低。(2)C、D组NF-κB蛋白表达强于A组,C1、D1组较C、D组NF-κB蛋白含量下降。NF-κB表达与气道、血管重构指标均呈正相关。结论:COPD早期已出现肺血流动力学变化,随疾病进展逐渐出现进行性加重的肺血管、气道重构,NF-κB的表达与气道、血管重构有一定的相关性,PDTC可抑制NF-κB的表达,部分改善气道、肺动脉重构。     

电针干预对慢性疲劳综合征大鼠海马和下丘脑区 p65及COX-2蛋白表达的影响

目的:探讨电针干预对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠海马和下丘脑区NF-κB p65和COX-2蛋白表达的影响。方法:清洁级SD雄性大鼠36只,随机将大鼠分为正常组、模型组、治疗组各12只,建立CFS动物模型,治疗组选择百会、情感1区、感觉区给予电针治疗,应用免疫组化方法,检测各组大鼠海马、下丘脑区NF-κB p65及COX-2表达的变化情况。结果:模型组大鼠海马和下丘脑区可见NF-κB p65、COX-2蛋白阳性表达显著增加,与正常组比较有显著性差异(P0.01);治疗组大鼠海马和下丘脑的NF-κB p65阳性细胞表达明显减少,与模型组比较有显著性差异(P0.01)。结论:针刺治疗能降低CFS大鼠海马与下丘脑中NF-κB p65、COX-2蛋白表达。     

电针对脑缺血大鼠NF-κB及TNF-α表达的影响

目的:探讨核转录凶子-κB(NF-κB)活性和肿瘤坏死因子(TNF-α)在脑缺血再灌注大鼠海马表达变化的规律和电针干预对其影响.方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针治疗组.采用改良线栓法制备局灶型脑缺血(MCAO)再灌模型,电针"大椎"、双侧"内关"穴.运用免疫组化检测法观察海马组织NF-κB-p65蛋白的表达及核转位:用放射免疫法测定各组大鼠海马组织中TNF-α含量的变化.结果:模型各组大鼠缺血侧海马CA1区NF-κB-p65蛋白表达和海马组织TNF-α含量显著增高(P＜0.01).与模型各组大鼠相比,电针治疗组缺血侧海马组织CA1区NF-κB-p65蛋白表达和TNF-α含量均显著降低.结论:TNF-α的表达上调后可活化NF-KB,参与脑损伤后继发性炎症反应过程,电针能抑制其活化可以减轻脑缺血再灌注时的炎症反应,发挥神经保护作用.     

电针对脑缺血大鼠NF-κB及TNF-?琢表达的影响*

目的：探讨核转录因子-?资B (NF-?资B)活性和肿瘤坏死因子（TNF-α）在脑缺血再灌注大鼠海马表达变化的规律和电针干预对其影响。方法：将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针治疗组。采用改良线栓法制备局灶型脑缺血（MCAO）再灌模型,电针“大椎”、双侧“内关”穴。运用免疫组化检测法观察海马组织NF-κB-p65蛋白的表达及核转位;用放射免疫法测定各组大鼠海马组织中TNF-α含量的变化。结果：模型各组大鼠缺血侧海马CA1区NF-κB-p65蛋白表达和海马组织TNF-α含量显著增高（P＜0.01）。与模型各组大鼠相比,电针治疗组缺血侧海马组织CA1区NF-κB-p65蛋白表达和TNF-α含量均显著降低。结论：TNF-α的表达上调后可活化NF-κB,参与脑损伤后继发性炎症反应过程,电针能抑制其活化可以减轻脑缺血再灌注时的炎症反应,发挥神经保护作用。     

刘云益气化痰祛瘀法治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期经验

慢性阻塞性肺疾病是呼吸科常见病,导师刘云教授总结多年临证经验,认为慢性阻塞性肺疾病稳定期以久病气虚为主,痰瘀阻肺贯穿于慢性阻塞性肺疾病始终,根据这一病机,实践中坚持以补虚泻实、标本同治为原则,从虚、痰瘀论治,运用益气化痰祛瘀法治疗本病,可以改善患者临床肺系症状,从根本上减少急性发作次数,取得满意效果。该文旨在为慢性阻塞性肺疾病稳定期提供更有效的中医治疗方法。     

急性肺损伤大鼠肺组织COX-2、NF-κB表达及其相关性的研究

【目的】观察肺组织NF-κB、COX-2表达及其相关性,探讨NF-κB在感染性急性肺损伤肺组织病理变化中的作用机制。【方法】采用静脉注射LPS诱导大鼠ALI模型,观察大鼠肺湿干重比及动脉血气分析变化;HE染色光镜下了解肺组织病理改变;免疫组织化学法检测肺组织COX-2、NF-κB p65的表达。【结果】急性肺损伤组大鼠氧分压明显下降,存在不同程度的酸血症及过度通气,肺湿干重比明显增加（P〈0.05）。正常大鼠肺组织表达少量COX-2,NF-κB p65仅在胞浆表达,急性肺损伤时大鼠肺组织中COX-2大量表达,同时NF-κB p65表达由细胞浆转移到细胞核,且两者呈高度相关（r=0.924）。【结论】急性肺损伤大鼠肺组织COX-2、NF-κB表达明显增加,且相关性高。     

从TLR4/NF-κB通路探讨芪药鸡金粥对化疗后大鼠肠道紧密连接蛋白的影响

目的:从TLR4/NF-κB信号通路的角度探讨芪药鸡金粥对化疗后大鼠肠道紧密连接蛋白的影响,进一步明确芪药鸡金粥调控化疗后肠黏膜损伤的作用机制;初步明确芪药鸡金粥不同剂量与相关指标变化间的量效关系。方法:将40只SPF级Wistar大鼠随机分为模型组、高剂量药膳组、常规剂量药膳组、低剂量药膳组和空白组,每组各8只。实验第1天对模型组及各剂量药膳组行5-FU150mg/kg一次性腹腔注射,复制化疗所致胃肠黏膜损伤大鼠模型,空白组给予等量生理盐水腹腔注射。实验结束采用ELISA法检测各组大鼠肠道TLR4/NF-κB信号通路蛋白以及大鼠肠道紧密连接蛋白的表达水平。结果:各组大鼠Claudin-1、ZO-1和JAM-1紧密连接蛋白表达水平的差异有统计学意义(P0.05);各组大鼠Occludin紧密连接蛋白表达水平差异无统计学意义;各组大鼠IκBα和TLR4通路蛋白变化水平的差异有统计学意义(P0.05);各组大鼠NF-κBp50及NF-κBp65通路蛋白表达水平差异无统计学意义。结论:芪药鸡金粥可上调化疗后大鼠胃肠道Claudin-1及JAM-1紧密连接蛋白水平,但对Occludin及ZO-1紧密连接蛋白表达的调控作用尚不明确;其对TLR4/NF-κB信号通路中的IκBα蛋白具有一定的抑制作用,但对该通路TLR4、NF-κBp50及NF-κBp65蛋白的调控作用尚不明确;不同剂量芪药鸡金粥与相关指标的量效关系尚不明确,仍需进一步研究探讨。     

玉屏风散对慢性阻塞性肺疾病大鼠核因子κB和γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的干预作用

目的:通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠核因子κB(NF-κB)和γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)水平的变化,探讨玉屏风散治疗COPD的机理。方法:采用改良烟熏加气管滴加脂多糖方法复制COPD模型,并以免疫组化法检测NF-κB和γ-GCS水平。结果:与正常对照组相比,造模组γ-GCS、NF-κB在支气管和肺泡上皮细胞、平滑肌细胞以及炎性细胞等都为高表达(P<0.01),经过治疗后,阳性表达率有明显降低,其差异具显著性(P<0.05)。结论:玉屏风散有着纠正氧化、抗氧化失衡,减少炎性反应的作用,对于肺气虚型COPD疗效确切。     

慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰中β-防御素2水平及其与NF-κB的相关性

目的:测定慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)及治疗后稳定期患者诱导痰中人β-防御素2(hBD-2)的水平及痰巨噬细胞中细胞核因子κB(NF-κBp65)的表达和它们相关性,探讨hBD-2在COPD发病机制中的作用.方法:选择2009年5月至2010年10月我院呼吸内科住院AECOPD及治疗后稳定期患者50例和5...     

纳洛酮与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织核转录因子-κB表达的影响

目的探讨联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮对内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子κB(NFκB)表达的作用。方法建立大鼠LPS吸入性ALI模型(LPS3mg/kg气管内注射)。85只大鼠随机分为5组:生理盐水对照组,LPS损伤组,甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙),纳洛酮组(LPS+纳洛酮),联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+纳洛酮)。采用放射免疫法检测大鼠血清白细胞介素8(IL8)水平,并应用免疫组化法观察肺组织NF-κBp65蛋白表达的变化。结果经气道吸入LPS可致大鼠发生ALI。ALI大鼠肺组织NFκBp65蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01),IL-8水平亦明显增高(P<0.05或P<0.01),单用甲基泼尼松龙或纳洛酮组肺组织NF-κBp65蛋白表达率及IL-8水平均较LPS损伤组明显降低,以联合用药组更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮可降低LPS吸入性ALI大鼠血清IL-8升高,并显著抑制肺组织NF-κBp65蛋白表达。     

细菌诱导大鼠慢性阻塞性肺疾病中结缔组织生长因子的mRNA表达

目的:研究结缔组织生长因子的mRNA在细菌感染导致的慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达。方法:以适量肺炎链球菌反复经气管穿刺注射感染大鼠,制作大鼠慢性阻塞性肺疾病模型,在感染后的不同时间段处死大鼠,采用实时荧光定量PCR,对大鼠肺组织中结缔组织生长因子的mRNA表达情况进行研究。结果:生理盐水对照组结缔组织生长因子mRNA的表达明显低于肺炎链球菌组(P<0.01)。同时,肺炎链球菌组结缔组织生长因子mRNA的表达随着细菌感染时间的增加而升高(P<0.01)。结论:大鼠长期反复细菌感染可诱导慢性阻塞性肺疾病,其机制可能和结缔组织生长因子表达上调有关。     

慢性阻塞性肺疾病分期与中医主证关系分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病分期与中医主证的关系。方法 200例慢性阻塞性肺疾病病例分为急性加重期与稳定期,采用中医望、闻、问、切四诊合参的方法,搜集临床资料,进行证素评分并辨主证,分析分期与主证的关系。结果急性加重期主证为痰热壅肺并血瘀证,稳定期为肺气虚痰阻证。结论说明慢性阻塞性肺疾病的分期与主证有一定的关系,可以为传统中医辨证提供参考,以期指导临床中医药治疗。     

心肌细胞中核因子-κB信号通路在雷米普利治疗心肌梗死大鼠中的作用

目的探讨心肌细胞中核因子-κB(NF-κB)信号通路在雷米普利治疗心肌梗死大鼠中的作用。方法利用Olivette方法进行试验分析,选取40只雄性Wistar大鼠作为研究对象。建立心肌梗死模型,随机将大鼠分为模型组和雷米普利治疗组以及假手术组。术后给予大鼠雷米普利药物灌胃治疗,灌药治疗30 d后处死大鼠,取大鼠心肌组织,然后检测大鼠的NF-κB P50、NF-κB P65、核因子κB抑制蛋白α(P-IκBα)蛋白的表达情况。结果模型组大鼠的NF-κB P50、NF-κB P65蛋白水平表达明显高于假手术组大鼠,模型组P-IκBα蛋白表达明显低于假手术组,差异有统计学意义(P0.05);雷米普利组NF-κB P50、NF-κB P65、P-IκBα蛋白表达明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。与假手术组相比,梗死模型组大鼠血浆ET及AngⅡ含量明显增高(P0.05);与梗死模型组比较,雷米普利可使大鼠血浆ET及AngⅡ含量均明显降低(P0.05)。结论心肌细胞中NF-κB信号通路在雷米普利治疗心肌梗死大鼠中具有重要的作用,NF-κB P50表达水平与心肌梗死进展有一定的相关性。     

身痛逐瘀汤对腰椎退变模型大鼠纤维环细胞p38MAPK信号通路的影响

目的:观察身痛逐瘀汤对腰椎退变模型大鼠纤维环细胞p38MAPK信号通路的影响。方法:24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为身痛逐瘀汤组、模型组、假手术组,每组8只。身痛逐瘀汤组、模型组采用纤维环穿刺法建立大鼠腰椎退变模型,造模1个月后行中药灌胃治疗,身痛逐瘀汤组予身痛逐瘀汤灌胃,模型组及假手术组予等量生理盐水灌胃,每日1次,连续4周。治疗结束后处死大鼠取出椎间盘,采用免疫组化法观察纤维环细胞p-p38、p38和NF-κB蛋白表达,Western Blot法测定p-p38、p38和NF-κB蛋白含量。结果:身痛逐瘀汤组p-p38、NF-κB蛋白表达较模型组明显减少(P0.05),模型组较假手术组明显增加(P0.01),假手术组p-p38、NF-κB蛋白少或无表达;3组间p38蛋白表达差异无统计学差异(P0.05)。结论:身痛逐瘀汤可延缓椎间盘退变,其机制可能与下调p-p38和NF-κB蛋白表达,抑制p38MAPK信号通路激活有关。     

低剂量茶碱对气道黏液高分泌影响的研究

目的探讨低剂量茶碱对大鼠气道黏液高分泌的影响及其作用机制.方法32只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、茶碱自身对照组、茶碱干预组,造模后第21天处死大鼠,采集肺组织标本和血标本,用苏木精-伊红(HE)染色、阿辛兰-过碘酸雪夫染色(AB-PAS),观察气道上皮细胞黏蛋白的分泌;免疫组化检测肺内气道杯状细胞的Muc5ac蛋白表达和肺内气道的核转录因子-κB(NF-κB);实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测肺组织Muc5acmRNA;放射免疫法检测肺组织匀浆cAMP含量;采用高效液相色谱法检测血浆茶碱浓度.结果丙烯醛雾化可导致大鼠出现明显的气道黏液高分泌表现,用低剂量茶碱干预可显著降低气道AB/PAS染色阳性、Muc5ac蛋白及mRNA的表达和NF-κB的入核率,但未能使肺组织cAMP含量恢复.结论低剂量茶碱可抑制丙烯醛所致的气道黏液高分泌,其机制可能与抑制NF-κB的活化有关;未显示通过抑制cAMP起降解作用.     

miRNA-146a-5p对癫痫大鼠海马神经元NF-κB信号转导通路的影响

目的观察miRNA-146a-5p(miR-146a-5p)对癫痫大鼠海马神经元核因子κB(NF-κB)信号转导通路的影响。方法体外培养新生SD大鼠海马神经元,随后制备癫痫海马神经元模型,随机分为三组,空白对照组(control组):转染时添加等体积opti-MEM培养基;阴性对照组(NC组):转染80 n M浓度NC至癫痫大鼠海马神经元; miR-146a-5p组:转染80 n M浓度miR-146a-5p mimics至癫痫大鼠海马神经元。转染后培养24 h,再用200 ng/ml脂多糖(LPS)诱导6 h,采用免疫荧光双染法鉴定体外培养海马神经元,采用膜片钳技术检测正常大鼠海马神经元和癫痫大鼠海马神经元自发性放电频率,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测未经LPS诱导各组海马神经元miR-146a-5p表达水平及经LPS诱导后各组海马神经元核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p IκBα)、NF-κB P65、IKB激酶-β(IKKβ) mRNA表达水平,采用Western blot法检测经LPS诱导后各组海马神经元IκBα、p IκBα、NF-κB P65、IKKβ蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测经LPS诱导后各组细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达水平。结果体外培养7 d的癫痫大鼠海马神经元与正常大鼠海马神经元相比较形态未见明显异常;癫痫大鼠海马神经元自发性放电频率明显较正常大鼠海马神经元明显增加(P 0. 05); miR-146a-5p组海马神经元miR-146a-5p表达水平明显高于control组和NC组(P 0. 05);经LPS诱导后miR-146a-5p组海马神经元p IκBα、NF-κB P65、IKKβmRNA及蛋白表达水平明显低于control组和NC组(P 0. 05),而IκBαmRNA及蛋白表达水平明显高于control组和NC组(P 0. 05);经LPS诱导后miR-146a-5p组细胞培养液中TNF-α、IL-1、IL-6、ICAM-1表达水平明显低于control组和NC组(P 0. 05)。结论miR-146a-5p可抑制LPS诱导的癫痫大鼠海马神经元NF-κB信号转导通路中p IκBα、NF-κB P65、IKKβmRNA及蛋白表达,促进IκBαmRNA及蛋白表达,减少TNF-α、IL-1、IL-6、ICAM-1等炎症因子的释放。     

慢性盆腔炎模型大鼠中miR-29 及炎症信号通路分子的表达水平及其作用机制研究

目的 探究微小核糖核酸(micro RNA,miR)-29 对大鼠慢性盆腔炎模型的作用并探究其作用机制。方法 将80 只SPF 级SD 大鼠随机分为四组,分别为对照组(n=20)、模型组(n=20)、阴性对照组(n=20)和试验组(n=20)。模型组、阴性对照组和试验组通过机械损伤及接种混合菌构建大鼠慢性盆腔炎模型,阴性对照组和试验组造模后通过尾静脉注射5nmol 阴性对照(negative control, NC)antagomiR 和miR-29 antagomiR。HE 染色检测大鼠子宫组织病理特性;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组大鼠外周血炎症相关指标:白细胞介素(interleukin,IL)-1β,白细胞介素(IL)-6,白细胞介素(IL)-8 和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α 水平;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测子宫组织miR-29,Toll 样受体4(Toll-like receptors,TLR)4,核因子κB(nuclear factor,NF-κB)及NK-κB 抑制蛋白α(IκB α)表达水平;WesternBlot 检测子宫组织TLR4,NF-κB 和IκB α 蛋白表达水平。结果 HE 染色结果表明,与对照组相比,模型组、阴性对照组和试验组大鼠出现明显慢性盆腔炎症状,试验组子宫组织损伤显著缓解;ELISA 结果表明:模型组大鼠外周血IL-1β,IL-6,IL-8 和TNF-α 水平显著高于对照组,与模型组和阴性对照组相比,试验组炎症因子IL-1β,IL-6,IL-8 和TNF-α 释放显著降低,差异有统计学意义(t=3.021 ～ 6.878,均P ＜ 0.05);qPCR 结果表明,与对照组相比,模型组miR-29,TLR4,NF-κB 和IκB α 的mRNA 表达显著上升,与模型组和阴性对照组相比,试验组miR-29 ,TLR4,NF-κB 和IκB α的 mRNA 表达显著降低,差异有统计学意义(t=3.917 ～ 8.095,均P ＜ 0.05)。Western Blot 结果表明:与对照组相比,模型组TLR4,NF-κB 和IκB α 蛋白表达显著上升,与模型组和阴性对照组相比,试验组TLR4,NF-κB 和IκBα 蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(t=2.987 ～ 8.045,均P ＜ 0.05)。结论 慢性盆腔炎模型大鼠子宫组织中miR-29 显著高表达,下调miR-29 具有对大鼠子宫的保护作用,其机制可能与抑制炎症因子释放及TLR4/NF-κB 信号通路的调控相关。