血型不规则抗体检测的方法学评价

目的寻找简便、快速、敏感的用于红细胞不规则抗体筛选的试验方法。方法收集6例临床疑难病例样本和1份IgG型试剂,采用盐水法、木瓜酶法、凝聚胺法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法平行检测患者血清中不规则抗体的效价,比较5种方法的敏感性、特异性。结果盐水法仅检出IgM类不规则抗体;木瓜酶法、凝聚胺法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法在检测IgG类抗体效价时差异不大,木瓜酶法的敏感性略低,微柱凝胶法对弱阳性IgG抗体检测的敏感性最高,但4种方法间差异无统计学意义(P>0.05),相关性较好(r>0.99)。结论盐水法不能检出IgG抗体;木瓜酶法检测IgG抗体具有一定的局限性;凝聚胺法简便、快速,但为手工操作,不易标准化;抗人球蛋白法需要反复洗涤红细胞,费时,不便于开展大规模筛查;微柱凝胶法操作简便迅速、敏感性高、重复性好、易于标准化,适于临床输血前和孕妇产前大批量抗体筛选,是检测IgG抗体最为敏感的方法。     

预防不规则抗体漏检的实验技术研究

目的 探讨预防不规则抗体漏检的实验技术原因,分析比较四种不同介质对临床样本的应用效果。方法 用盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶卡法和木瓜酶法分别检测倍比稀释的抗-D、抗-Jk^a、抗-Fy^a和抗-M四种抗体,采用效价评分进行比较分析; 并对该四种方法对1 174例临床标本的检出效果进行比较分析。结果 盐水法仅检出IgM类抗体; 凝聚胺法能同时检出IgG和IgM抗体,但对一些低效价低亲和力抗体凝集弱,易导致假阴性; 微柱凝胶卡法检出效果最佳; 木瓜酶法对Rh等血型系统抗体特异性高,但检测效果具有一定局限性。1 174例临床样本,不规则抗体阳性率为1.79%。盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶卡和木瓜酶法对1 174例临床样本不规则抗体检出率分别为0.17%,1.53%,1.79%和1.62%。盐水法完全漏检IgG类抗体,凝聚胺法、微柱凝胶卡法和木瓜酶法对不规则抗体检出率差异无统计学显著性意义(P>0.05)。结论 单一方法不能满足不规则抗体筛查要求,盐水法和微柱凝胶卡法结合具有一定的优越性,能有效预防不规则抗体漏检。     

3种交叉配血方法在新生儿输血安全中的应用

目的探讨盐水介质法、凝聚胺法、微柱凝胶法3种交叉配血法在新生儿输血安全中的应用价值。方法同时用盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶法对174例需要输血的新生儿进行同型交叉配血,常规检测不规则抗体,直接抗人球蛋白试验,不规则抗体阳性者进一步做抗体特异性鉴定。结果盐水法有14例(8.05%)配血不合;凝聚胺法有1例(0.57%)配血不合;微柱凝胶法有62例(35.63%)配血不合,其中31例为直抗阳性引起的次侧不合,1例为抗-D抗体导致的3种方法均不合。凝聚胺法和微柱凝胶法差异有统计学意义(P0.05)。结论微柱凝胶法用于新生儿交叉配血标本用量少,操作简便,易于标准化,结果清晰易判,敏感度高于凝聚胺法,对保障新生儿安全输血具有重要意义。     

微柱凝胶法与抗球蛋白法和凝聚胺法的实验观察

目的观察微柱凝胶法与抗球蛋白法和凝聚胺法的检出率及其抗体效价滴度.方法应用微柱凝胶法与抗球蛋白法和凝聚胺法对17例含不完全抗体的血清标本进行检测.结果微柱凝胶法与凝聚胺法和抗球蛋白法检出率分别为100%、70.6%和52.9%,微柱凝胶法的抗体效价较凝聚胺法和抗球蛋白法高1～5滴度.结论微柱凝胶法优于凝聚胺法和抗球蛋白法,可代替抗球蛋白法和凝聚胺法在临床输血中成为常规项目.     

三种方法检测O型孕妇IgG抗A（B）效价比较

目的比较试管法间接抗人球蛋白试验（以下称试管法）、凝聚胺法和微柱凝胶抗人球蛋白试验（微柱凝胶法）在IgG抗A（B）效价检测的灵敏度。方法对20份O型孕妇血标本同时用3种方法检测IgG抗A（B）效价,采用几何均数计算平均效价并检验。结果试管法所测IgG抗A（B）平均效价分别为11.71和10.56;凝聚胺法的分别为3.14和3.03;微柱凝胶法的分别为147.03和152.23。三种方法之间均有显著性差异（P〈0.01）。结论微柱凝胶法灵敏度高,且易自动化等优点,值得在IgG抗A（B）效价检测中推广。     

国产微柱凝胶抗球蛋白卡在血型血清学试验中的应用

目的探讨国产微柱凝胶抗球蛋白卡（MGAC）常规进行血型血清学试验的应用价值。方法应用微柱凝胶抗球蛋白技术（MGAT）与试管抗球蛋白技术（TAT）平行试验，鉴定不规则抗体的特异性。同时，采用该两种技术检测新生儿溶血病及自身免疫溶血性贫血患者血标本以评价国产MGAC的血型血清学诊断价值；应用前二种技术与凝聚胺技术（MPT）平行试验，检测已知IgG抗体的凝集效价来评价国产MGAC检测IgG抗体的敏感性。结果MGAT与TAT的检测特异性完全一致，其检测敏感性接近TAT，而高于MPTI．2个凝集梯度，在新生儿溶血病及自身免疫溶血性贫血的血型血清学诊断中，MGAT与TAT的结果也基本一致。结论国产MGAC可常规应用于不规则抗体的检测、孕妇产前IgG抗体效价检测、新生儿溶血病及自身免疫溶血性贫血的血型血清学检测。     

三种红细胞不规则抗体筛选试验方法的比较

目的寻找简便、快速、敏感的红细胞不规则抗体筛选的试验方法。方法采用蛋白水解酶法、抗球蛋白法(AGT)及聚凝胺三步法试验(TSPT)平行检测一批Rh、MNSs、Duffy、K idd等系统的不规则抗体效价,观察TSPT等的敏感性。结果在上述3种方法中,TSPT敏感性最高,其次为AGT,TSPT测出了所有IgG和IgM性质的不规则抗体,酶技术未检出抗-M、N、S、s、Fya、Fyb,TSPT和AGT的试剂性能稳定。结论TSPT操作简便迅速,敏感性高,无需特殊设备,TSPT适用于红细胞血型不规则抗体筛选的常规试验。     

探讨微柱凝胶法在检测孕妇ABO血型IgG抗体效价中的应用

目的初步探讨微柱凝胶法技术在检测O型血孕妇血清中IgG抗A（B）血型抗体水平中的应用价值,以预防新生儿溶血病的发生。方法应用微柱凝胶法技术和抗球蛋白法分别测定O型血孕妇IgG抗A（B）抗体效价。结果 1 798例夫妻中,微柱凝胶法和抗球蛋白法检测O-A组合IgG抗A效价≥1∶64者分别为53例、51例;O-B组合IgG抗B效价≥1∶64者分别为32例、29例;O-AB组合IgG抗A抗B效价均≥1∶64者分别为6例、7例,2种方法差异无统计学意义（P〉0.05）。结论微柱凝胶免疫检测法可快捷准确检测O型血孕妇血清IgG抗A（B）抗体的效价,对预防新生儿溶血病的发生具有重要临床意义。     

3种配血方法对含Rh抗体血样本配血效果研究

目的分析3种常用配血方法在低效价Rh抗体存在时配血效果,为临床输血后血红蛋白(Hb)不升寻找技术依据。方法使用3个厂家的凝聚胺、木瓜酶、抗球蛋白试剂对含不同效价IgG抗-D、-C、-c、-E、-e、-B血样进行配血试验。结果不同厂家的凝聚胺试剂敏感性不同,有的厂家凝聚胺试剂弱抗体易漏检,有的厂家凝聚胺试剂与木瓜酶和抗球蛋白的灵敏度基本一致。结论不同厂家的凝聚胺试剂对特异抗体的检测结果不同,而木瓜酶和抗球蛋白的检测结果基本相同,就交叉配血而言,任何一种方法不可能同时满足能检出所有抗体,所以要根据不同的患者情况,选择合适的配血方法,以确保红细胞输注安全有效。     

凝聚胺法在交叉配血和不完全抗体检测中的应用

目的评价凝聚胺法在交叉配血和不完全抗体检测中的应用.方法分别用盐水法、菠萝酶法、抗球蛋白法、凝聚胺法对随机200名受血者标本与其同型献血员标本做交叉配血;IgC抗-D血清按比例进行性稀释与谱细胞反应分别用抗球蛋白法和凝聚胺法测定.结果交叉配血菠萝酶法、抗球蛋白法、凝聚胺法各凝集1例;假凝集盐水法2例、菠萝酶法1例;实验时间凝聚胺法最短.IgG抗-D检测阳性效价抗球蛋白法为1:128,凝聚胺法为1:256.结论凝聚胺法具有简便、快速、敏感性强和排除非免疫细胞聚合引起的假阳性等优点,是目前交叉配血和不完全抗体检测的理想方法.     

凝聚胺法与微柱凝聚法检测不规则抗体的对比分析

目的探讨凝聚胺法与微柱凝聚法在不规则抗体筛选中的价值对比。方法对2010～2011年江门市新会区人民医院6 720例预约输血患者,用凝聚胺法与微柱凝聚法分别进行不规则抗体筛查,阳性结果再用谱细胞通过抗人球蛋白方法进行特异性检测。结果用微柱凝聚法筛查出不规则抗体阳性28例,阳性率为0.42%,而凝聚胺检测阳性26例,阳性率仅为0.39%,两种方法比较差异无统计学意义（P〉0.05）。其中Rh系统占总不规则抗体比例为57.1%,分别为抗-D 5例,抗-E 7例,抗-C 2例,抗-Ec 2例。结论凝聚胺法与微柱凝聚法都适用于临床筛查不规则抗体,微柱凝聚法比凝聚胺法更有利于大规模自动化筛查,对于有条件的大医院更适合临床输血前的应用和相关疾病的诊断,而凝聚胺法在基层或者临床急诊上也可合理开展。     

微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体的对比分析与研究

目的比较微柱凝集和聚凝胺法的灵敏度和重复性,为不规则抗体的检测更新方法。方法使用微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体,对比观察2种方法检出的阴、阳性结果和重复检验的准确性,从而选择灵敏度高和重复性好的方法满足临床输血需要。结果从18 000例住院患者中用微柱凝集筛选出不规则抗体阳性19例,阳性率为0.105%,其中D抗体7例,E抗体5例,C抗体3例,Ec抗体3例,Ce抗体1例;用聚凝胺法检测不规则抗体,仅有阳性为2例,阳性率为0.011%,2种方法比较差异有统计学意义（P〈0.05）;重复性检验：微柱凝集（19/19）和聚凝胺（2/2）均为100%,2种方法差异无统计学意义（P〉0.05）。结论用微柱凝集检测不规则抗体能显著提高抗体的检出率,可避免漏检而降低输血反应的发生率。     

微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体的对比分析与研究

目的比较微柱凝集和聚凝胺法的灵敏度和重复性,为不规则抗体的检测更新方法。方法使用微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体,对比观察2种方法检出的阴、阳性结果和重复检验的准确性,从而选择灵敏度高和重复性好的方法满足临床输血需要。结果从18 000例住院患者中用微柱凝集筛选出不规则抗体阳性19例,阳性率为0.105%,其中D抗体7例,E抗体5例,C抗体3例,Ec抗体3例,Ce抗体1例;用聚凝胺法检测不规则抗体,仅有阳性为2例,阳性率为0.011%,2种方法比较差异有统计学意义(P<0.05);重复性检验:微柱凝集(19/19)和聚凝胺(2/2)均为100%,2种方法差异无统计学意义(P>0.05)。结论用微柱凝集检测不规则抗体能显著提高抗体的检出率,可避免漏检而降低输血反应的发生率。     

临床用血前交叉配血不合104例原因分析

目的分析总结临床输血中遇到的疑难交叉配血病例,探讨输血前交叉配血不合的原因,使临床输血更加的科学、安全、有效。方法回顾性分析合肥市不同医院送到本站进行用血前疑难交叉配血病例104例,疑难交叉配血采用盐水法、MP法和抗人球蛋白法等方法检测。结果 104例疑难交叉配血标本中,ABO血型正、反定型不符1例,受血者不规则抗体阳性28例,冷凝集素凝集5例,红细胞直接抗人球蛋白试验阳性43例。104例疑难交叉配血结果为,盐水法交叉配血主/次出现凝集13例,聚凝胺法交叉配血主/次侧出现凝集34例,抗人球蛋白法交叉配血主/次侧出现凝集44例。结论交叉配血不合的原因主要有：缗钱状假凝集,冷凝集素所致非特异性凝集,红细胞被致敏引起的凝集,不规则抗体引起的凝集等。临床用血前交叉配血应选择能同时检测完全抗体和不完全抗体的方法,确保患者输血安全。     

异基因造血干细胞移植后并发自身免疫性溶血性贫血患者产生类抗体血清学检测方法及输血策略

目的探讨异基因造血干细胞移植（AHSCT）后免疫介导的自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者交叉配血不合的原因,血浆中不规则抗体筛选试验阳性时,不规则抗体鉴定的血清学检测方法的选择,处理措施及输血策略。 方法一例AHSCT后的3岁男性患儿因重度贫血为改善贫血症状需输注红细胞入住四川省人民医院。通过盐水试管法确定了患儿ABO、Rh血型后进行交叉配血试验发现患儿与多个同型供者血液不相合,考虑到患儿贫血严重,于是采用直接抗球蛋白试验来判断红细胞是否被致敏;通过盐水介质试管法、微柱抗球蛋白法和聚凝胺法进行ABO血型系统以外的不规则抗体筛选试验以确定血浆中有无不规则抗体;根据不规则抗体筛选试验结果选择聚凝胺法来确定抗体的特异性;通过盐水介质试管法、经典抗球蛋白法和聚凝胺法进行交叉配血实验,结合抗体鉴定的结果,综合分析选择合适的供者红细胞输注。 结果本例患儿ABO血型为AB型,Rh分型为CCDee,ABO血型已转变为供者血型。直接抗球蛋白试验强阳性,红细胞被抗体致敏。血浆中检出了不规则抗体,红细胞上放散下来的致敏抗体与血清中检出的不规则抗体均为类抗-Ce自身抗体。选择了避开类抗-Ce抗体的Ce抗原阴性的AB型红细胞输注后血色素升高,3 d后复查血常规Hb为79 g/L,输血有效。 结论任何类型的AHSCT后都有可能发展成AIHA,也就是血浆中可能存在某种自身抗体（类抗体）而破坏自身红细胞,若能够明确患者血清中存在的类抗体,即可避开这种抗体而筛选红细胞无相应抗原的供者,也就避免发生溶血性输血反应以安全输血。     

红细胞血型系统IgG型不规则抗体固相凝集法检测试剂盒的研发

目的研发基于固相凝集技术的红细胞血型系统IgG型不规则抗体检测试剂盒并评估其性能。方法采用单克隆抗人-RBC抗体包被96孔微板,按100μL/孔加入红细胞悬液形成细胞单层,经过裂解后形成红细胞膜抗原分子单层,加入保护液冷冻干燥后制备成检测用的反应微板;用梯度倍比稀释的多克隆羊抗球蛋白试剂(IgG+C3d/4)与IgG抗-D致敏的O型红细胞反应,筛选构建最佳指示系统;用不同批次的试剂盒检测低效价的IgG抗-D和抗-E,评估试剂盒在保存期内的抗原稳定性;与微柱凝胶抗球蛋白卡、进口同类试剂盒检测不同效价的抗体以测试3者的灵敏度;与进口同类试剂盒对350例血样标本进行检测,以明确2者的检测效能是否一致。结果 20μg/mL的抗人-RBC抗体溶液能够很好的固定红细胞膜抗原分子单层;稀释16倍的多克隆羊抗球蛋白试剂与致敏红细胞构建的指示系统指示效果最佳;试剂盒中冻干的红细胞膜抗原在6个月的保存期内保持稳定;本研究的试剂盒检测灵敏度高于Capture-R Ready Screen试剂盒和抗球蛋白卡;试剂盒与Capture-R Ready Screen对血样标本检测的阳性一致性百分率为98.0%,阴性一致性百分率为99.66%,总一致性百分率为99.43%。结论成功研发了基于固相凝集技术的用于红细胞IgG型同种免疫性不规则抗体检测的试剂盒,该试剂盒具有灵敏度好、保存期长、性能稳定等优势,与进口同类试剂盒等效。     

抗-HI抗体的筛查和鉴定在临床输血中的应用价值

目的探讨抗-HI抗体的筛查和鉴定在临床输血中的应用价值。方法选取2016年2-11月该院4例抗-HI抗体阳性患者作为研究对象,采用抗人球蛋白法和盐水试管法进行不规则抗体的筛查和鉴定,并对临床输血效果进行评价。结果 4例患者均为ABO血型,其中A型RhD阳性2例,AB型RhD阳性2例。抗人球蛋白法的筛查结果均为弱阳性,盐水试管法的筛查结果均为阳性。在盐水介质条件下,4例患者血清与16系谱细胞反应结果均为阳性,与自身红细胞反应结果均为阴性;在抗人球蛋白介质条件下,4例患者血清与16系谱细胞反应结果除1例弱阳性外均为阴性,与自身红细胞反应结果均为阴性。2例治疗用血患者输血后,血红蛋白上升达到预期效果,无输血不良反应发生。结论为抗-HI抗体阳性患者输血时,应选择ABO同型且盐水试管法及抗人球蛋白法配血结果均相合的血液。     

微柱凝胶法筛查不规则抗体的应用及影响因素分析

目的探讨微柱凝胶免疫技术筛查输血患者不规则抗体的临床应用价值并分析实验的影响因素。方法用微柱凝胶法检测2007年12月至2008年12月期间输血患者不规则抗体，用盐水、酶、抗人球法进行抗体特异性鉴定。结果在6036例输血患者中共检测出抗体阳性13例（0．22％），其中自身抗体4例，确定同种特异性抗体9例，分别为抗-D3例，抗-E2例，抗-A11例，抗-Mur 1例，抗-M2例，非特异性的假阳性反应22例。结论微柱凝胶技术检测不规则抗体，其操作标准化、灵敏度高、重复性好，结果稳定、可靠、准确，值得在临床推广应用。但要注意在实验中会因血清（浆）中含有纤维蛋白、冷抗体等而引起假阳性，当采取离心和置于4℃处理后可消除，能保证检测结果的准确性。