NGAL在急性白血病患者骨髓中的表达及意义

目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在不同类型急性白血病患者骨髓中的表达,这对深入研究NGAL在急性白血病发生发展过程中所发挥的功能具有重要的科研和实践意义.方法 运用免疫组化技术对132例急性白血病患者骨髓及健康对照组骨髓中的NGAL表达情况进行检测.结果 NGAL在急性白血病患者骨髓中仅有极少数细胞可见阳性表达,健康对照组骨髓在中幼粒细胞及以下各阶段细胞均可见阳性表达,在18例急性粒细胞性白血病细胞(AML-M1)中未见阳性表达;在26例急性粒细胞性白血病(AML-M2)中仅有2%粒细胞可见阳性表达;在17例急性粒细胞性白血病(AML-M3)中仅有4%粒细胞可见阳性表达;在23例急性粒-单细胞性白血病(AML-M4)中仅有2%粒-单细胞可见阳性表达;在19例急性单核细胞性白血病细胞(AML-M5)中来见阳性表达,在25例急性淋巴细胞性白血病细胞(ALL)中来见阳性表达.绪论急性白血病组NGAL表达量明显低于健康对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).NGAL在急性白血病的发生发展过程中起到重要的作用.     

垂体瘤转化基因在急性髓系白血病患者中表达的研究

本研究探讨垂体瘤转化基因（pituitarytumor-transforming gene,pttg）在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者中的表达及其与AML发生的关系,以及pttg基因在FAB亚型中的表达是否存在差异性。采用实时荧光定量PCR方法检测47例AML患者及28例正常对照者骨髓中pttg基因的表达水平。结果表明：AML患者pttg基因的表达水平[（1.1323±1.3934）×105]明显高于正常对照组[（4.5766±1.1817）×103]（p〈0.05）,急性早幼粒细胞细胞白血病（M3）患者中pttg基因的表达水平高于其他FAB亚型,其中包括急性髓系白血病未分化型（M1）、急性粒细胞白血病部分分化型（M2）、急性粒细胞单核细胞白血病（M4）、急性单核细胞白血病（M5）。结论：pttg基因的过度表达可能与AML的发生发展有关,其中可能与M3发生的关系更加密切,本研究为AML的发病机制及其基因靶向治疗的研究提供了新的思路。     

AML1/ETO9a异构体在M2型急性髓系白血病中表达的研究

目的研究AML1／ETO9a异构体在急性髓系白血病M2型（AML—M2）中的表达。方法应用R带染色体核型分析，结合RT—PCR技术检测各型白血病、骨髓增生异常综合征（MDS）、白血病细胞系及正常人骨髓中AML1／ETO融合基因和AML1／ETO9a异构体的表达。结果在30例初诊AML-M2中有15例AML1／ETO9a异构体表达阳性，同时在20例AML—M2完全缓解患者、18例非M2型急性白血病患者、5例慢性粒细胞白血病（CML）患者、3例MDS患者、3个白血病细胞系（NB4、KG-1、K562）及5份正常骨髓标本中均未检测到AML1／ETO9a异构体。15例AML1／ETO9a异构体阳性患者中有13例同时具有AML1／ETO融合基因及t（8；21），2例仅表达AML1／ETO9a异构体，AML1／ETO融合基因及t（8；21）均未检测到。结论AML1／ETO9a异构体可能与AML—M2相关，并可能与AMLI／ETO融合基因共同参与白血病的发生。     

NGAL在慢性粒细胞性白血病中的表达及其诊断意义

目的探讨NGAL在慢性粒细胞性白血病(下称慢粒)患者骨髓中的表达及其临床意义,为深入研究NGAL在慢粒发生、发展过程中所发挥的作用提供科学依据。方法运用免疫组化技术,对42例慢粒患者及健康对照组骨髓样品中的NGAL表达情况进行检测,并结合ELISA分析方法检测慢粒患者和健康对照组血清中NGAL的表达。结果通过免疫组化染色,NGAL在42例慢粒患者及健康对照组骨髓中表达皆为阳性,但是慢粒组NGAL表达量明显高于健康对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。同时,通过ELISA分析方法测出慢粒患者血清中NGAL含量明显高于健康对照组,差异具有统计学意义(P=0.001)。结论 NGAL在慢粒的发生、发展过程中起着重要作用。     

分化抑制因子nm23基因在急性白血病细胞中的表达及临床意义

目的 探讨分化抑制因子nm23在急性白血病细胞中的表达水平及临床意义。方法 应用RT-PCR半定量分析34例初诊急性白血病[22例急性髓系白血病(AML)，12例急性淋巴细胞白血病(ALL)]，9例临床完全缓解AML(AML-CR)，4例慢性粒细胞白血病(CML)患的骨髓标本中nm23-H1、nm23-H2的mRNA表达水平，并分析了其与一些临床指标的关系。结果 nm23-H1基因在急性白血病，尤其是粒-单核细胞及单核细胞白血病(M4,M5)中的表达水平明显增高；经化疗完全缓解后的AML患nm23基因表达显低于初诊AML患；在AML中，nm23-Hl的高表达与外周血白细胞计数、乳酸脱氢酶、CD7及髓外浸润等预后较差指标呈正相关性，而与特征性染色体异常如t(8；21)和t(15；17)呈负相关性。结论 nm23-Hl基因在急性白血病特别是粒．单核细胞白血病(M4,M5)中表达较正常人明显增高，可能是AML预后较差的一种标志。     

CD7在急性白血病中的表达及临床意义的探讨

目的　探讨CD7在急性白血病中的表达及临床意义。方法　采用流式细胞术微量全血直接标记法测定32例急性白血病患者细胞表面抗原,分析 CD7 分子在其中的表达。结果　CD7分子在急性淋巴细胞性白血病(ALL)和急性髓细胞性白血病(AML)均可表达,两者阳性数无显著性差异(P<0.01);20例AML中有5例可见CD7 、CD34共表达,主要分布于M0、M1、M4和 M5;CD7阳性AML、CD7阳性ALL的外周血白细胞数均高于CD7阴性AML和CD7阴性ALL (P<0.01)。结论　CD7在AML 、ALL中均可表达,对CD7阳性AML应结合CD34、CD79a等指标综合考虑。     

混合表型急性白血病细胞Chediak-Higashi包涵体的观察

急性白血病细胞胞质内常可见大小不一的紫红色嗜苯胺蓝颗粒或Auer小体,而巨大包涵体十分罕见,近年对急性白血病伴Chediak-Higashi(PCH)包涵体有较多病例报道[1-4],这种PCH颗粒在急性髓系白血病(AML)[1-4]、慢性粒细胞白血病(CML)[5]、骨髓增生异常综合征(MDS)[6]中均有描述,主要出现在早期的粒细胞和单核细胞中.我们曾对203例急性白血病患者进行细胞形态学观察,结果表明,在AML细胞中可见到多少不一的PCH颗粒[7].     

干细胞因子受体在急性白血病病人中的表达及其临床意义

目的：探讨干细胞因子受体（c-kit R)在急性白血病病人中的表达及其临床意义。方法：采用流式细胞仪（FCM）分别检测24例急性淋巴细胞白血病（ALL）和47例急性髓细胞白血病（AML）病人骨髓单个核细胞（MNC）跨膜c-kit R表达的阳性率及阳性水平。结果：ALL病人c-kit R表达的阳性率及阳性水平与正常人相比差异无显著性（P＞0．05），而AML病人的c-kit R水平则显著高于对照组和ALL病人（P＜0．01）。AML病人的c-kit R表达率及阳性水平以M1、M2最高，M4、M5最低，两者间差异有显著性（P＜0．05）；染色体核型分析显示，c-kit R阳性表达的AML病人，大多数出现染色体核型异常。结论：c-kit R检测有助于ALL和AML的鉴别及AML的FAB亚型分型。     

急性白血病类胰蛋白酶与血管内皮生长因子的相关性研究

为了探讨类胰蛋白酶在急性白血病血管新生中的作用,应用免疫细胞化学方法检测了61例急性白血病患者白血病细胞的类胰蛋白酶及血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况,并对二者之间的关系进行了分析.结果表明：51例急性髓细胞白血病中（M13例,M215例,M320例,M45例,M58例）有15例患者的白血病细胞类胰蛋白酶表达为阳性,阳性率为29.4%,其中包括M11例,M2 7例,M3 5例,M52例.10例急性淋巴细胞白血病患者类胰蛋白酶表达均为阴性.急性髓细胞白血病患者类胰蛋白酶阳性的细胞数与其年龄、外周血白细胞数、外周血和骨髓原始细胞数以及中性粒细胞过氧化物酶之间没有相关性.急性髓细胞白血病患者中有41例VEGF表达阳性（80.4%）;急性淋巴白血病患者有3例VEGF表达阳性（30%）.急性髓细胞白血病M2亚型的患者中,类胰蛋白酶与VEGF的表达均明显增高且二者之间具有显著相关性（r=0.65,P＜0.05）.结论：类胰蛋白酶可以作为急性髓系白血病的特异性标记物,它可能参与了急性髓细胞白血病M2亚型的血管新生.     

恶性血液病患者骨髓AnnexinⅡ基因的表达

本研究探讨恶性血液病患者骨髓细胞annexinⅡ基因的表达水平及其在恶性血液病发生发展中的作用。用实时定量PCR方法检测了81例初治急性白血病患者、6例多发性骨髓瘤患者（MM）及20例缺铁性贫血患者（对照）骨髓annexinⅡmRNA的表达水平。结果显示：annexinⅡ在初治AML—M3患者骨髓中的表达显著高于其它类型恶性血液病患者和对照者,此外在初治AML—M5、AML—M4、MM患者骨髓中也有较高表达,而在初治AML—M,以及AML—M,患者中表达量与对照者相比无统计学差异。结论：annexinⅡ除在AML—M,中高表达外,在临床观察具有高度侵袭浸润能力的类型M5、M4、MM中也有较高表达,推测annexinⅡ可能通过增强恶性血液病细胞降解细胞外基质等机制参与恶性血液病侵袭、浸润过程。     

CD56在急性白血病细胞中的表达及临床意义

为了探讨CD56在急性白血病中的表达情况及意义。采用多色流式细胞术（FCM）对70例急性白血病患细胞表面CD56及其它白细胞分化抗原表达进行了分析，结果表明，70例中有16例（22．86％）表CD56，急性髓性白血病（AML）的CD56阳性表达率（15／31，48．39％）明显高于急性淋巴细胞白血病（ALL）（1／35，2．86％）（P＜0．01），CD56在AML各亚型中表达也有差异，AML－M0，－M1和－M2中阳性率（11／15）明显高于AML－M3，－M4和－M5（4／16）P＝0．013）。15例CD56^ 的AML病例中表达HLA－DR13例（41．94％），两呈明显正相关（r=0.439,n=31,P=0.014,结论：CD56主要在AML中表达，对AML的诊断，预后判断及微小残留病的检测具有重要意义。     

伴特异性融合基因急性髓细胞白血病的探讨与分析

急性白血病是一种常见的血液系统恶性疾病,发病率约为2.76/10万。在全国恶性肿瘤死亡率中,白血病占第六位（男性）和第八位（女性）,在儿童至35岁以下的人群中占第一位。急性白血病最常见的是急性髓系白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）。现对我院45例伴特异性融合基因的急性原始粒细胞白血病部分分化型（M2b）、急性早幼粒细胞白血病（M3）、急性粒单核细胞白血病伴嗜酸性粒细胞增多亚型（M4EO）3种急性髓细胞白血病的细胞形态学特征及临床表现进行分析。     

BP1基因在成人急性白血病中的表达

目的　研究 β蛋白 1(BP1)基因在成人急性白血病中的表达并分析与急性白血病的关系。方法　用RT PCR方法分别检测 70例急性白血病患者、10名健康对照者及HEL细胞系中BP1基因的表达。结果　在正常人外周血、骨髓和完全缓解的患者骨髓中均没有检测到BP1基因的表达 ;在急性髓系白血病 (AML)中BP1表达阳性率为 5 7% (35例中 2 0例 ) ,在AML M5中阳性率高达 80 % (10例中 8例 ) ;在急性淋巴细胞白血病中无表达。结论　BP1与AML有一定的相关性 ,可作为AML的一种分子标志。     

CD56在急性白血病细胞上的表达及其意义简

目的 探讨CD56在急性白血病（AL）中的表达情况,分析CD56阳性急性髓系白血病（AML）和急性淋系白血病（ALL）患者的免疫表型特点.方法 应用流式细胞术（FCM）检测76例急性白血病患者CD56的表达情况,分析CD56＋AML和CD56＋ALL的免疫表型特点.结果 CD56在AML患者中表达的比例为32.1％（18/56）;在AML亚型中,CD56阳性患者在M1、M2、M3及M5中所占比例分别为33.3％（3/9）、47.6％（10/21）、9.1％（1/11）及28.6％（4/14）.CD56在ALL患者中表达的比例为30.0％（6/20）;在T-ALL中,CD56阳性患者的比例为44.4％（4/9）;10例B-ALL患者中有1例表达CD56,比例为10.0％;1例NK细胞白血病表达CD56.此外,与对照组相比,CD56＋AML患者中CD33的表达率明显增加（P=0.021）,而CD56＋ALL患者中CD7的表达率亦明显增加（P=0.024）.结论 伴CD56阳性的急性白血病细胞,其在各型白血病细胞中的免疫表型各有特点,多见于M2和T-ALL.且CD56＋AML患者中CD33的表达率较高,CD56＋ALL患者中CD7的表达率较高,研究结果将为CD56＋AL患者的治疗和预后分析提供重要的指导意义.     

白血病Smad4表达的初步分析

目的：探讨细胞浆信息传递介质Smad4在白血病细胞中的定位及表达。方法：分离白血病患者骨髓单个核细胞,镜下鉴定白血病细胞数量达90%以上,应用免疫组织化学技术检测白血病细胞中Smad4蛋白表达。结果：50例白血病患者中,7例急性淋巴细胞白血病（ALL）患者、10例急性非淋巴细胞白血病（AML）患者及1例慢性粒细胞白血病（CML）患者白血病细胞中无Smad4表达,其余患者白血病细胞中均表达Smad4。结论：Smad4蛋白主要表达于细胞核中,部分表达于胞浆中,在部分白血病细胞中无表达,Smad4基因或功能的改变可能与人类AML的发生有关。     

六种少见伴嗜酸粒细胞增多血液病的嗜酸粒细胞形态学观察及相关分析

目的分析六种少见伴嗜酸粒细胞增多的血液病嗜酸细胞的形态学特征。方法回顾性观察61例伴嗜酸粒细胞增多血液病患者骨髓及外周血涂片嗜酸粒细胞形态,其中急性髓系白血病（AML）伴嗜酸粒细胞增多23例,包括：AML伴inv（16）t（16;16）,（CBFB／MYH11）10例;AML伴t（8;21）（q22;q22）,（AML／ETO）13例;慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）伴嗜酸粒细胞增多18例;慢性粒．单细胞白血病（CMML）伴嗜酸粒细胞增多6例;骨髓增生异常综合征（MDS）伴嗜酸粒细胞增多8例,急性淋巴细胞白血病（ALL）伴嗜酸粒细胞增多6例。每组计数200个骨髓嗜酸粒细胞,分析各阶段嗜酸粒细胞比例以及形态特征。结果AML伴inv（16）t（16;16）骨髓嗜酸粒细胞,以嗜酸中晚幼粒细胞为主,形态异常特点为颗粒增多而细小,有少量细小的嗜碱颗粒散在嗜酸颗粒上;AML伴t（8;21）（q22;q22）骨髓嗜酸粒细胞以嗜酸晚幼粒细胞为主,形态异常特点为颗粒增多,多数胞核和胞质上覆盖粗大紫红色嗜碱性颗粒;CML—CP骨髓以嗜酸晚幼粒及杆状核粒细胞为主,形态异常为颗粒多、细小、密集,少量金黄色颗粒覆盖在胞核上,少数为灰黑色嗜碱颗粒;CMML骨髓嗜酸细胞以嗜酸分叶核粒细胞为主,形态异常特点为颗粒虽少但颗粒粗大,易见双核畸形;MDS骨髓嗜酸粒细胞以中晚幼粒细胞为主,形态异常特点为颗粒粗大,分布不均匀,折光性强,呈多色性改变;ALL骨髓嗜酸粒细胞以杆状核和分叶核粒细胞为主,形态轻度异常,特点为嗜酸颗粒减少,浆内颗粒分布不均匀,有明显无颗粒间隙。结论六种少见伴嗜酸粒细胞增多血液病,除各自原发病形态特点外,嗜酸粒细胞数量和异常形态特征各不相同,通过形态学初步筛查可为遗传学检查和治疗提供初步依据。     

急性髓系白血病亚型5’-核苷酸酶超微结构分析

5’-核苷酸酶（5’NT）为嘌呤代谢酶，能水解核苷酸为核苷与磷酸，兼有磷酸转移酶活性，对维持核苷酸代谢平衡有重要作用。本研究主要探讨急性髓系白血病不同亚型患者及正常人粒细胞5’NT膜表达特点。用白细胞分离液分离33例急性粒细胞白血病患者和5例正常人骨髓有核细胞，以胞苷-5’-单磷酸（CMP）为底物进行电子显微镜和细胞组织化学染色，在观察细胞结构基础上分析粒细胞阳性率和阳性指数。结果表明，阳性反应产物主要分布于粒细胞膜，正常人大部分粒细胞呈阴性反_应，或反应很弱；急性髓系白血病M0、M1、M2和t（8；21）各型粒细胞阳性率和阳性指数升高，但M。、M．＋M2和t（8；21）三组之间差别不明显。t（15；17）细胞阳性率和阳性指数低于其它亚型；与正常人相比无统计学差别。结论：5’NT表达强弱可能与急性白血病粒细胞分化程度有关，t（15；17）白血病可能属于高分化性髓系向血病。     

白血病患者Flt-3基因突变及其与白血病发生、预后的关系

背景：Flt3基因是近年来发现的早期造血生长因子受体基因。Flt3与其配体结合后能通过信号传导途径对造血干，祖细胞的增殖和分化起调节作用。Flt3近膜区的内部串联重复（FLT3／ITD）与多种白血病的发生，发展密切相关，且为预后不良的独立指标。目的：探讨Flt-3基因内部串联重复（ITD）突变与急性白血病发生的关系及其预后判断的临床意义。设计：重复测量。单位：沈阳医学院生物化学及分子生物教研室。对象：147例样本均来自于1999—01／2004—12沈阳医学院附属医院住院及门诊收治的白血病患者，均经形态学及骨髓活检确诊。其中男95例，女52例；年龄5—23岁。参照FAB分型标准诊断：急性髓性白血病62例患者分别为AML（M1，M2）33例，AMMOL（M4）3例，AMOL（M5）18例，AMKL（M7）8例，急性淋巴细胞白血病43例，幼年型慢性粒细胞白血病13例，骨髓增生异常综合征29例。纳入对象均对检测项目知情同意。方法：采用聚合酶链反应联合序列检测147例白血病患者中的Flt-3／ITD。主要观察指标：观察伴有Flt-3，ITD急性髓性白血病患者的临床表现及预后，检测各类急性白血病中Flt-3的表达水平及Flt-3／ITD阳性率，发生的区间和长度。结果：①Flt-3／ITD：急性髓性白血病患者62例中有5例除Flt-3表达产物之外，伴有异常扩增产物，其中急性髓性白血病（M1，M2）3例、AM-MOL1例、AMOL1例。测序及Blast比对分析显示，伴有异常产物的患者在外显子11区均有ITD，各例ITD的复制区域不同，长短不等（33—72bp）。43例急性淋巴细胞白血病、29例骨髓增生异常综合征和13例幼年型慢性粒细胞白血病患者中均未检测到Flt-3／ITD。②预后：5例Flt-3，ITD阳性患者确诊后均在短期内死亡，平均生存期10．8个月。结论：①Flt-3／ITD仅发现于急性髓性白血病患者，其存在可能与急性髓性白血病发生及进展有关。②Flt-3／ITD是急性髓性白血病患者预后判断的重要标志。     

Smad4在白血病细胞中表达的初步研究

TGF-β信号的缺失与许多组织的恶性增生有关，Smad4是该通路的重要蛋白，其缺失或突变与多种癌症相关。本研究目的主要是探讨细胞浆信息传递介质Smad4在白血病细胞中的定位及表达。分离白血病病人骨髓单个核细胞，镜下鉴定白血病细胞数量达90％以上，应用免疫组织化学技术检测白血病细胞中Smad4蛋白的表达。结果表明：Smad4蛋白主要表达于细胞核中，部分表达于胞浆中，35例白血病病人中6例急性淋巴细胞性白血病患者Smad4无表达，包括L11例，L31例，k4例；7例急性非淋巴细胞性白血病（1例M0，1例M1，2例M21，1例M3a，1例M4b，1例M6）和1例慢性粒细胞性白血病患者白血病细胞中也无Smad4表达，其余病人白血病细胞中均表达Smad4。结论：Smad4主要定位于细胞核中，在部分白血病细胞中无表达，Smad4基因或功能的改变可能与人类AML的发生有关。     

染色质组装因子1,b亚单位在急性髓系白血病细胞中的表达研究

目的 探讨染色质组装因子1,b亚单位（chromatin assembly factor 1,subunit b,CAF1b）在急性髓系白血病（AML）中的表达情况及其特异性.方法 建立流式细胞术检测胞内蛋白的方法,测定AML细胞株KG1a及正常人、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、AML、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）、多发性骨髓瘤（MM）患者的骨髓单个核细胞中CAF1b的表达情况,利用WinMDI 2.9软件分析流式数据,并行统计分析,比较之间的差异.结果 AML患者骨髓单个核细胞和KG1a细胞CAF1b的表达率分别为（21.40±2.91）％、（27.87±1.48）％,均明显高于正常人、ITP、ALL、CML-CP、MM患者（P均＜0.05）.结论 CAF1b在AML有核细胞中表达特异性增高,提示其可能为AML特异性肿瘤抗原.