白介素-4受体信号转导研究进展

白介素 4 (IL 4 )是Th2型的多效性细胞因子 ,其生物活性的发挥是通过白IL 4受体 (IL 4R)完成的。IL 4胞内信号转导途径主要有 4条 :IRS 1 2途径、PI3K途径、Ras途径以及Jak STAT途径。本文主要就IL 4R的信号转导及调节机制的研究进展作一综述     

IL—2信号转导中JAK／STAT途径的负调节机制

IL－2是一个多效的刺激因子，通过与IL－2R的相互作用，引发多条IL－2信号转导途径，其中Jak/Stat途径代表了一条极为快速的、从膜到核的信号转导系统。Jak/Stat途径的活化，对介导IL－2诱导的细胞生长、增殖、抗凋亡有重要作用，但Jak/Stat的下调、失活机制在相当程度仍不清楚。本文主要对近几年来发现的一些负调节机制，尤其蛋白酪氨酸磷酸酶的去磷酸化作用以及CIS、PIAS家族蛋白的负调节作用作一综述。     

两条IL-6信号转导途径在人骨髓瘤细胞系U266中的相互拮抗作用

目的 研究人骨髓瘤细胞系U266中白细胞介素6（IL－6）信号转导途径及彼此之间的相互调控方式。方法 首先采用凝胶阻滞电泳（electrophoretic mobility shift assay,EMSA)方法观察分别参与两条IL－6信号转导途径的转录因子STAT3和NF－IL－6在U266细胞中的诱导激活状态并确定该细胞中的IL－6信号转导通路;继而采用转基因或化学试剂处理方法,特异性上调或下调其中一条IL－6信号途径的化,并同时观察另外一信号途径的激活状态。结果 1、以上两种转录因子分别参与的IL－6信号转导途径－－JAK／STAT和Ras/NF-IL-6,它们都能够在U266细胞中诱导激活;2、在高剂量IL－6（1－100ng/ml）刺激范围之内,一条IL－6信号途径活化水平的升高可同时导致另一条信号途径活化水平的下降。结论 在一定IL－6刺激剂量范围内,U266细胞中两条IL－6信号途径的诱导激活存在着相互拮抗作用。     

山莨菪碱预处置对大鼠肾脏缺血/再灌注损伤的影响

目的：观察山莨菪碱（654－2）对大鼠肾脏缺血－再灌注（I／R）损伤的影响及与IL－6和TNF－α的关系。方法：采用大鼠肾脏I／R损伤＋654－2预处置模型，分别观测再灌注不同时期SUN、Scr、肾系数变化及IL－6和TNF－α的含量。结果：用654－2预处理后再灌注4h（R4h）组的SUN、Scr和肾系数均高于未处置组（P＜0．01或P＜0．05），再灌注24h(R24h）组的Scr低于其对照组；654－2同时使R4h组血液和肾组织中的IL－6含量也高于其对照组（P＜0．01），使R24h组肾组织中IL－6高于其对照组。结论：654－2预处理加重早期肾I／R损伤，这种作用可能与IL－6增加有关；再灌注24h后才显示其治疗作用。     

IL—6在人骨髓瘤细胞U266中的信号转导途径与细胞增殖促进效应之间的关系

目的：研究人骨髓瘤细胞U266中IL－6信号转导途径激活与细胞增殖促进效应之间的关系。方法：首先分别采用MTT、凝胶阻滞电泳（electrwophoretic mobility shift assay, EMSA）和免疫沉淀（immunoprecipitation,IP）方法观察IL－6对U266细胞生长的影响及两条IL－6信号转导途径在U266细胞中的诱导激活状态;然后采用化学试剂处理或转基因方法观察信号途径活化状态变化与IL－6效应变化之间的关系。结果：IL－6可明显促进U266细胞增殖,并在不同剂量下诱导JAK／STAT和Ras/NF-IL-6途径活化;Ras途径活化被特异性上调和下调时,IL－6对U266细胞的生长促进效应分别得以增强和减弱;而JAK／STAT途径活化受抑时,IL－6的促细胞生长效应反而加强。结论：Ras途径的诱导激活介导了IL－6对U266细胞的增殖促进效应;而JAK／STAT途径活化介导了与IL－6促细胞增殖相反的生物学效应。     

大鼠垂体前叶中一些免疫内分泌物质的共存

目的 研究白细胞介素2（IL－2）以及其受体和雌激素受体（ERα或β）在大鼠垂体前叶的共存。方法 用种属特异性抗体（兔抗大鼠ERα蔌IL－2Rβ,羊抗大鼠ERβ或IL－2抗体）进行免疫细胞化学双重染色。结果 在大鼠垂体前叶有ERα、ERβ、IL－2和IL2Rβ免疫反应细胞,REα位于胞核内,IL－2和ERβ免疫反应物质位于胞浆内,IL－2Rβ位于胞膜,ERα或β和IL－2共存于同一细胞,ERα和IL－2Rβ无共存,而ERβ和IL－2Rβ共存。结论 在大鼠垂体前叶ER和IL－2以及膜受体IL－2Rβ和核受体ERβ共存于同一细胞,表明在大鼠垂体前叶存在免疫内分泌网络。     

雷公藤多甙对哮喘患者TH1/TH2细胞因子平衡状态的调节作用

目的：探讨雷公藤多甙（GTT）对哮喘患者的抗炎、平喘作用的机理。方法：选择60例过敏性哮喘患者随机分为GTT治疗组和对照组，治疗前后分别采用ELISA法检测PBMC培养液上清液中白细胞介素4（IL－4）、γ干扰素（IFN－γ）、可溶性白细胞介素2受体（sIL－2R）、可溶性IgE低亲和力受体（sCD23)含量，采用逆转录PCR检测IL－4mRNA表达量，采用嗜碱粒细胞脱颗粒试验检测嗜碱粒细胞释放能力（BRA）。结果：哮喘患者上清液中IL－4、sIL-2R、sCD23含量、IL－4mRNA表达量及BRA均显著增高，而IFN－γ含量显著减少。治疗组经GTT治疗后，上清液IL－4、sIL-2R、sCD23含量、IL－4mRNA表达量及BRA均显著降低，而INF－γ含量显著增高。对照组治疗前后上述指标差异均无显著性。结论：GTT能显著抑制哮喘患者T细胞和B细胞的活化，能纠正体内TH1和TH2细胞因子的失衡状态，并能降低BRA。这可能是GTT抗炎、平喘作用的重要机理之一。     

IL-2信号转导中JAK/STAT途径的负调节机制

IL 2是一个多效的刺激因子 ,通过与IL 2R的相互作用 ,引发多条IL 2信号转导途径 ,其中Jak Stat途径代表了一条极为快速的、从膜到核的信号转导系统。Jak Stat途径的活化 ,对介导IL 2诱导的细胞生长、增殖、抗凋亡有重要作用 ,但Jak Stat的下调、失活机制在相当程度仍不清楚。本文主要对近几年来发现的一些负调节机制 ,尤其蛋白酪氨酸磷酸酶的去磷酸化作用以及CIS、PIAS家族蛋白的负调节作用作一综述     

白介素2受体及其与肿瘤免疫逃逸

白介素 2 (IL 2 ) /白介素 2受体 (IL 2R )在细胞因子网络调节中起关键作用。至少有三种IL 2R亚基 :α、β和γ链 ,β链和γ链是形成功能性IL 2R的必需亚基。IL 2与IL 2R结合激活多种信号转导途径 ,其中Jak STAT最为重要。IL 2R及其下游信号分子缺陷可能是肿瘤免疫逃逸的重要原因 ,纠正这种缺陷可用于肿瘤治疗的尝试。     

酪氨酸蛋白激酶JAK1 在IL-6诱导JAK/STAT 途径活化中的作用

目的 酪氨酸蛋白激酶JAK1和转录因子STAT3为参与IL－6诱导的JAK／STAT信号转导途径的两种主要的信号蛋白分子。本研究试图揭示JAK1在JAK／STAT途径诱导活化中的作用。方法 分别采用凝胶阻滞电泳（EMSA）和免疫沉淀（IP）法观察IL－6刺激作用下STAT3和JAK1在3种骨髓瘤细胞系（XG－7，KM－3和Sko-007)中的诱导活化状态。采用RTPCR和Western-blot法检测这两种信号蛋白分子在以上3株靶细胞中的表达情况。结果 尽管SAT3在3株靶细胞中都能够正常表达，但只有Sko-007细胞中出现IL－6刺激作用下STAT3的诱导活化。在XG－7细胞中，既没有检测到JAK1的表达，也没有观察到JAK1的活化。尽管JAK1在KM－3细胞中能够正常表达，但不能被IL－6诱导激活。Sko-007细胞中则同时出现JAK1的表达及IL－6刺激后的诱导活化。结论 JAK1的正常表达和激活是IL－6刺激作用下JAK／STAT信号转导途径在骨髓瘤细胞中诱导活化的前提条件。     

IL—4、IL—12、IL／6STAT／SOCS途径对Th细胞分化调节机制的研究进展

Th细胞分化为Th1和Th2细胞是受多种细胞因子调控的。已有研究:IL－4、IL－12和IL／6通过STAT／SOCS信号途径经对Th细胞的分化进行调节。IL－12／STAT4／SOCS3使CD4^ 和Th2和Th1分化和极化，IL－4／STAT6／SOCS1使Th0B向Th2分化。IL－6则通过STAT3可以上调CD4^ T细胞SOCS－1的表达，这是由于IL－6干扰IFN－γ受体的信号转导，阻断了IFN－γ对IFN－γ基因的自我调节，因此实现了IL－6对Th1细胞的负性调控。据此认为IL－6启动CD4^ T细胞分化与抑制CD4^ T分化为Th1细胞是两种独立的分子机制，它在平衡Th1/Th2的免疫反应中起着重要的调节作用。     

IL—6诱导人骨髓瘤细胞表达CD45

目的：研究髓瘤细胞系Sko-007中IL－6信号途径活化与CD45诱导表达之间的关系。方法：首先采用凝胶阻滞电泳（electrophoretic mobility shift assay,EMSA)方法检测参与IL－6信号转导功能的转录因子STAT3和NF－IL－6在Sko-007细胞中的诱导活化情况并确定该细胞中IL－6信号转导途径;进而采用RT－PCR和FACS方法检测CD45mRNA和蛋白在IL－6刺激作用下的诱导表达情况;最后采用以上两种方法观察CD45诱导表达与I－6信号途径活化之间的关系。结果：①两种主要的IL－6信号转导途径JAK／STAT和Ras/NF-IL-6都能够在Sko-007细胞中诱导激活;②CD45mRNA和蛋白的表达量在IL－6刺激作用下明显增加;③STAT3反义表达质粒导入Sko-007细胞后JAK／STAT途径活化信号减弱,同时CD45mRNA诱导表达量下降。结论：Sko－007细胞中JAK／STAT途径的诱导激活介导了CD45的诱导表达。     

123白介素-4受体信号转导研究进展

白介素4(IL-4)是Th2型的多效性细胞因子,其生物活性的发挥是通过白IL-4受体(IL-4R)完成的.IL-4胞内信号转导途径主要有4条IRS-1/2途径、PI3K途径、Ras途径以及Jak-STAT途径.本文主要就IL-4R的信号转导及调节机制的研究进展作一综述.     

白细胞介素2受体α亚基参与Jurkat细胞凋亡的调节

T淋巴细胞表面的高亲和力白细胞介素2受体（IL－2R）由α,β及γ三种亚基组成,其中只有IL－2Rα具有特异结合IL－2的活性,目前对IL－2Rα亚基的确切的功能尚水清楚。我们将IL－2Rα cDNA反意表达质粒转染Jurkat细胞后,经Wewtern印迹－ECL分析发现,细胞内出现了细胞凋亡早期特异的多聚二磷酸腺核糖聚合酶[Poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的89kD断裂片段,此结果提示,IL－2Ra亚基参与调节淋巴细胞凋亡。     

肺癌患者外周血单个核细胞Th2／Th2反应状态及黄芪的调节作用

目的：探讨肺癌患者外周血单个核细胞（PBMC）Th1/Th2免疫反应状态，观察中药黄芪（AG）对其作用。方法：采用并分离肺癌患者和健康志愿者的PBMCs，各分为4组：其中1组即刻冻存待测，其余3组分别为不加药对照组、加10％AG、20％AG组，培养48h，收集细胞。以IL－2、IFN－γ代表Th1型细胞因子，IL－4、IL－6、IL－10代表Th2型细胞因子，用RT-PCR 患者PBMC中Th1/Th2型细胞因子mRNA的表达。结果：肺癌患者PBMC中，IL－4、IL－6和IL－10表达阳性率显著高于正常对照（P＜0.05），而IL－2无1例表达（0／23），IFN－γ仅1例表达；经与黄芪培养后（2种浓度），肺癌患者Th2型因子与未加AG培养组相比，IL－4、IL－6和IL－10的表达率下降（P＜0.05）；而IL－2的表达率显著提高（P＜0.05）。结论：肺癌患者外周血的免疫细胞呈现Th2型免疫反应优势状态；黄芪对于肺癌宿主PBMCs Th1/Th2的状态有良好的调节作用，可使肺癌患者PBMCs的Th2型优势免疫反应向Th1方向逆转。     

4—1BB（CD137／ILA）与免疫细胞相互关系研究进展

4－1BB（CD137／ILA）是神经生长因子受体（NGF－R）／肿瘤坏死因子受体（TNF－R）家族的成员之一，它介导的协同刺激信号能促进T细胞活化、增殖、分化，也能诱导T细胞凋亡。4－1BB既能协同CD28对T细胞的共刺激作用，也能不依赖于CD28而发挥共刺激效应。4－1BB通过胞浆末尾区的聚集，与肿瘤坏死因子受体相关因子2（TRAF2）交联，依次活化ASK－1、JNK／SAPK或p38 MAP，启动级联放大效应。活化B细胞表达4－1BB配体（4－1BB L）。4－1BB单抗调高NK细胞杀伤肿瘤的活性。4－1BB通过双向信号转导，使单核细胞活化、增殖，并促进单核细胞的粘附作用。     

人IL-4基因修饰增强瘤细胞特异性CTL杀伤活性机制初探

目的 探讨IL－4基因修饰瘤苗增强细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤活性的机制。方法 通过逆转录病毒载体pL-IL-4-SN将人IL－4基因导入肝癌细胞系HepG2细胞,以IL－4基因修饰瘤苗和野生型瘤细胞作刺激细胞诱导CTL反应,通过流式细胞仪检查肿瘤细胞表面分子表达。结果 IL－4基因修饰诱导瘤细胞表达MHCⅡ类抗原、B7－1及ICAM－1等细胞表面分子,对MHCⅠ类抗原表达无影响,其瘤苗诱导的CTL杀伤活性为罢生型瘤细胞的7倍（P＜0.01）,加入抗IL－4单克隆抗体（McAb）可完全阻断IL－4诱导的细胞表面分子表达,IL－4基因修饰瘤苗诱导CTL反应时培养上清可测及大量IL－2产生,抗IL－4或抗细胞表面分子的McAb可降低IL－2产生及抑制CTL反应。结论 IL－4基因修饰可能是通过诱导MHCⅡ类抗原等表达分子表达,促进IL－2产生而增强CTL杀伤活性。     

急性特发性血小板减少性紫癜免疫功能的观察

目的：探讨急性特发性血小板减少性紫（ITP）患儿细胞因子：血清可溶性白介素－2受体（sIL-2R)、白介素－6（IL－6）,免疫球蛋白轻链,心磷脂抗体（ACA）及淋巴细胞亚群的变化。方法：应用化学发光法,速率散射比浊法,ELISA法及AKP－ABC。结果：急性ITP患儿治疗前sIL-2R、IL－6升高,轻链κλ降低与正常对照P＜0．01,3个月后恢复至对照组近似水平（P均＞0．05）。ACA阳性率占70．37％。CD^ 4细胞减少,CD^ 8细胞增多,CD^ 4/CD^ 8比值下降（P均＜0．01）。结论：为临床提供判断疗效及估计预后较血小板（BPC）计数更可靠的依据,也为免疫调节剂治疗提供理论依据。     

肺癌患者化疗前后IL—2、SIL—2R、T细胞亚群和红细免指标的动态观察及临床评估

目的：探讨原发性肺癌患者化疗前后血清IL－2、SIL－2R水平,外周血T细胞亚群和红细胞免疫的变化及在肺癌发生、发展的临床意义,方法：对病理确诊的25例肺癌患者进行了TNM分期,对NSCLC患者用MEP方案,对SCLC患者用EP方案化疗,治疗前后用抗体夹心法检测IL－2、SIL－2R水平,采用SPA菌体花环双标记法检测T细胞亚群,按郭峰法检测红细胞免疫指标。并以20例健康献血员为对照以探讨上述指标动态变化与肺癌发生发展的关系。结果：（1）化疗前肺癌患者IL－2水平显著低于对照,SIL－2R表达显著高于对照,化疗后IL－2明显回升,SIL－2R明显下降;但仍与对照有显著差异,进而分析IL－2水平与SIL－2R含量之间存在高度负相关。（2）化疗前肺癌患者CD3、CD4、CD4／CD8显著低于对照,CD8则显著高于对照,化疗后上述指标改善呈相对应负性改善,CD4／CD8较化疗前有显著差异。但除CD8外,余均仍低于对照。红免指标RBC－C3bRR与RBC－ICR分别显著低于与高于对照,化疗后虽有改善,但与对照相比,仍有显著差异,进而分析显示CD4／CD8比值与RBC－C3bRR间呈高度正相关性。结论：肺癌患者有多种免疫功能紊乱,化疗前后的动态检测有助于对肺癌的发生、发展、疗效、预后作出参考性评价,也为将重组IL－2、研究基因重组可溶性C3b受体、提纯NR细胞激活因子应用于肺癌临床疗效提供了依据。