miR-29a基因敲除对C57BL/6小鼠肾小球结构和功能的影响

目的：观察微小RNA-29a(miR-29a)基因敲除对小鼠肾小球功能和结构的影响。方法：应用CRISPR/Cas9技术,选择C57BL/6 miR-29a基因敲除型(miR-29a knockout,miR-29a KO)小鼠作为实验组,未敲除型小鼠作为野生型(wild-type,WT)对照组(n=30)。分别在第3、12和24周收集小鼠24 h尿液。采用考马斯亮蓝染色法进行尿蛋白测定;ELISA测定尿白蛋白和尿肌酐水平,并计算尿白蛋白/肌酐比值(urinary albumin/creatinine ratio,UACR)。选取3、12和24周的小鼠,采用过碘酸雪夫氏(periodic acid-schiff,PAS)染色法观察肾脏组织的病理变化;通过透射电镜以及冷冻蚀刻电镜观察肾小球超微结构。另取2组24周的小鼠,一组小鼠腹腔麻醉后用Dynabeads^TMM-450 Tosylactivated微磁珠经心脏灌流后分离肾小球,用于RNA和蛋白的提取;另一组小鼠肾脏用于免疫荧光染色。采用RT-qPCR、免疫荧光染色以及Western blot检测小鼠肾小球足细胞标...     

宫颈癌组织细胞分化抑制因子-1表达及其意义

目的 了解细胞分化抑制因子-1 (Id-1) mRNA和蛋白在人宫颈癌组织中的表达及其意义.方法 分别应用荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应和免疫组织化学方法,检测Id-1 mRNA和蛋白在6例人正常宫颈、6例宫颈上皮内瘤样变(CIN)和24例宫颈癌组织中的相对表达定量,分析Id-1表达与宫颈癌病理参数间的相关性.结果 Id-1蛋白在正常宫颈组织未见阳性表达,在CIN组织中有少量表达,在宫颈浸润癌组织中呈明显的阳性表达,宫颈浸润癌组织Id-1蛋白阳性面积百分比和阳性染色吸光度均显著高于CIN组织(t=7.80、3.15,P＜0.05).正常宫颈组织、CIN组织和宫颈癌组织Id-1 mRNA相对定量依次增高,差异有显著性(F=3 030.30,q=17.78、95.04,P＜0.01).宫颈癌组织中Id-1 mRNA和蛋白表达呈正相关(r=0.89,P＜0.01).Id-1表达和宫颈癌组织分级及FIGO分期呈正相关(r=0.67、0.58,P＜0.01、0.05).结论 检测Id-1表达有助于宫颈癌的辅助诊断.     

前列腺癌组织BMP2表达及其与DIF-1的相关性

目的 探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)在前列腺癌(PCa)及前列腺增生(BPH)组织中的表达及其与细胞分化的关系,并进一步分析其与分化抑制因子1(DIF-1)的相关性.方法 采用免疫组化SP法,分别检测PCa和BPH组织中BMP2和DIF-1的表达.采用图像分析软件分析阳性表达的灰度和面积,并采用直线相关方法分析BMP2和DIF-1的相关性.结果 BPH组织中BMP2和DIF-1呈阴性或弱阳性表达;PCa组织中BMP2和DIF-1均呈阳性表达.在PCa组织中.BMP2和DIF-1的表达水平与Gleason评分呈正相关(r<,s>=0.61、0.63,P<0.01);BMP2与DIF-1的表达也呈正相关(r=0.92,P<0.01).结论 在PCa组织中BMP2与DIF-1的表达存在相关性,且二者的表达均与PCa的恶性程度密切相关,提示二者可能与PCa的发生发展有关.     

Flap-free LASEK和Flap-free Epi.LASIK治疗中、低度近视临床效果比较

目的比较Flap-free LASEK（去上皮瓣的准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术）和Flap-free Epi.LASIK（去上皮瓣的机械法准分子激光角膜上皮辦下磨镶术）治疗中、低度近视的临床效果。方法将78位患者143只眼（-1.50D～-6.00D）,随机分为2组A组和B组,A组行Flap-free LASEK,B组行Flap-free Epi.LASIK术式。观察术后眼球疼痛症状、角膜上皮愈合时间和术后1、3、6个月裸眼视力及haze情况。结果 A、B2组术后3d眼球疼痛刺激症状1、2、3级例数的差异无统计学意义。A组平均角膜上皮愈合时间为（3.81±0.07）d,B组平均为（4.15±0.12）d,2者差异有统计学意义（t=2.42,P〈0.05）,术后1、3、6个月时视力和haze2组比较无统计学意义。结论 Flap-free LASEK矫正中、低度近视与Flap-free Epi.LASIK相比较,角膜上皮愈合更快,术后疼痛刺激、视力恢复和haze的形成二者无明显差异。     

冠心病左房大小的探讨

应用超声心动图对46例冠心病病人心脏各房室内径及功能测定,并与42例正常人做了对比,其结果表明冠心病病人左房增大显著,而且左房增大者心功能降低显著,并提示左房增大与心功能降低有关。     

败血症大鼠促炎症细胞因子变化及其干预研究

目的 :探讨败血症大鼠不同时间血浆促炎症细胞因子 (IL - 8、TNF -α)、外周血液和腹腔渗出液中炎性细胞的变化规律以及山莨菪碱 (6 5 4 - 2 )干预的影响。方法 :采用盲肠结扎加穿刺法复制大鼠败血症模型 ,分别在 0h、8h、16h取血和腹腔渗出液 ,采用酶联免疫吸附试验 (ELISA法 )测定血浆IL - 8、TNF -α含量 ;常规进行外周血和腹腔渗出液中白细胞计数。结果 :败血症组和 6 5 4 - 2干预组 8h、16h血浆IL - 8、TNF -α水平均较 0h明显增高 (P <0 .0 1) ;败血症组大鼠在 8h、16h血浆IL - 8、TNF -α均高于假手术对照组 (P <0 .0 5 ) ;6 5 4 - 2干预组上述 2种细胞因子水平在 8h、16h均低于败血症组 (P <0 .0 5 )。败血症组和 6 5 4 - 2干预组外周血白细胞计数 8h、16h均较 0h明显降低 (P <0 .0 1或 0 .0 5 ) ,且均明显低于假手术对照组 ;而败血症组和 6 5 4 - 2干预组大鼠腹腔渗出液中白细胞计数 8h、16h均较 0h显著增高 (P <0 .0 1) ,且均明显高于假手术对照组。结论 :IL - 8、TNF -α在大鼠败血症发生发展过程中可能起重要作用 ;败血症大鼠外周血和腹腔渗出液中炎性细胞的异常分布现象可能与IL - 8、TNF -α有关。 6 5 4 - 2可能有抑制IL - 8、TNF -α过度产生或释放作用。     

肾缺血再灌注损伤时血清及肾组织中促炎症细胞因子的变化与意义

目的:探讨促炎症细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肾缺血-再灌注损伤(IRI)中的变化和意义。方法:采用夹闭大鼠肾动静脉的方法复制大鼠IRI模型,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定肾缺血及再灌注1 h、4 h和24 h时血清和肾组织中IL-6、IL-8和TNF-α含量,并对肾系数、血清尿素氮、肌酐等指标进行检测。结果:单纯缺血组和再灌注4 h、24 h组'肾组织中IL-6水平明显低于假手术组(P<0.05),血清中IL-6水平仅在缺血组低于假手术组;血清与肾组织中的IL-6含量在不同时间内其变化呈直线正相关(r=0.89,P<0.(J5)。肾组织中IL-8、TNF-α水平在单纯缺血和再灌注早期(1 h、4 h组)明显高于假手术组(P<0.01.0.05),随再灌注时间延长两者逐渐下降至对照组水平;血清IL-8在单纯缺血和再灌注1 h组明显低于假手术组(P<0.01),随再灌注时间延长,逐渐接近对照组水平。血清SUN、Scr水平和肾系数在IRI各组均高于对照组。结论:IL-8、TNF-α可能参与了早期肾IRI过程,IL-6在肾IRI中可能起一定保护作用。     

姜黄素对小鼠胃肠蠕动的影响及其作用机制

目的探讨姜黄素灌胃对小鼠胃肠运动的影响及其相关机制。方法将昆明种小鼠随机分为对照组、姜黄索组、阿托品组、姜黄素＋阿托品组、L-氨酸组与姜黄素＋L精氨酸组。墨汁灌胃法检测小鼠小肠推进率。结果姜黄素组小鼠与对照组比较小肠推进率无显著变化（P〉0．05）,阿托品组和L-精氨酸组小鼠小肠推进率显著下降,而姜黄素＋阿托品组和姜黄素＋L精氨酸组小鼠的小肠推进率分别与阿托品组和L精氨酸组比较有显著提高（F=9．50、21．31,t=3．93、10．51,P％0．01）。结论姜黄素并不影响正常小鼠的胃肠蠕动;姜黄素可明显对抗阿托品和L-精氨酸所致小鼠胃肠蠕动减弱;姜黄素可能通过激动M-胆碱受体和阻止NANC神经的抑制性神经递质NO的作用来促进胃肠蠕动。     

败血症大鼠促炎性细胞因子与炎性细胞变化的实验研究

目的:探讨败血症大鼠不同时间血浆促炎性细胞因子(IL-8、TNF-α)及外周血液和腹腔渗出液中炎性细胞的变化规律.方法:采用盲肠结扎加穿刺法复制大鼠败血症模型,分别在0、8、16 h取血和腹腔渗出液,用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血浆IL-8、TNF-α含量;用光镜计数外周血和腹腔渗出液中的白细胞数.结果:败血症组大鼠8、16 h血浆IL-8、TNF-α水平均较0 h明显增高(P＜0.01),且以8 h增高更为显著,败血症组大鼠血浆IL-8、TNF-α在8、16 h均明显高于假手术对照组8 h和16 h水平(P＜0.05);败血症组大鼠8、16 h外周血白细胞计数均较0 h明显降低(P＜0.01),且呈递减趋势,败血症组大鼠8、16 h外周血白细胞计数均明显低于假手术对照组;败血症大鼠腹腔渗出液中白细胞计数8、16 h较0 h明显增高(P＜0.01),且呈递增趋势;败血症组大鼠8、16 h腹腔渗出液中白细胞计数均明显高于假手术对照组.结论:IL-8、TNF-α在大鼠败血症发生发展过程中可能起重要作用,败血症大鼠外周血和腹腔渗出液中炎性细胞异常分布与IL-8、TNF-α密切相关.