α2a或α2b基因工程干扰素对CD4^＋／CD8^＋的比值和NK活？…

目的 研究不同品牌ＩＦＮα２ａ或ＩＦＮα２ｂ的免疫调节作用。方法 采用ＭＴＴ法进行ＮＫ细胞的细胞毒试验和用流式细胞仪测定淋巴细胞ＣＤ抗原表达。结果 ２００ＩＵ／ｍｌ不同品牌的ＩＦＮα２ａ或ＩＦＮα２ｂ能促进ＮＫ细胞杀伤Ｋ５６２细胞,其杀伤效率可达３５％左右,比不加干扰素对照组ＮＫ细胞杀伤效率约１４％均提高了近２．５倍（Ｐ〈０．０５）,可使ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋的比值升高（Ｐ〈０．０５）。结论 进品     

哮喘患儿自然杀伤细胞及γ—干扰素水平的变化

目的：探讨哮喘患儿自然杀伤细胞及γ－干扰素水平的变化及意义。方法：应用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色法、流式细胞术（ＦＣＭ）及生物素－亲合素双抗体夹心酶联免疫吸附分析术（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）检测哮喘患儿外周血自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性、ＣＤ５６＾＋细胞数及单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）诱生γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）水平。结果：哮喘发作期及缓解期ＮＫＣ活性与正常对照比较均无显著差异（Ｐ〉０．０５）；发作期ＣＤ     

应用Percoll分离纯化NK细胞

目的：从人外周血中分离纯化高纯度、高纯度及活性良好的静息状态ＮＫ细胞,为进一步研究其特性打下基础。方法：应用Ｐｅｒｃｏｌｌ非连续密度梯度离心法结合ｐａｎｎｉｎｇ负分离法获得所需ＮＫ细胞,并用免疫组化Ｅｎｖｉｓｉｏｎ二步法,ＭＴＴ还原法分别对ＮＫ细胞的纯度,酶活性及细胞毒活性进行全面鉴定。     

几种重组干扰素单独及联用阿霉素对骨肉瘤细胞的毒性研究

目的 体外评价几种国产干扰素联合阿霉素的抗骨肉瘤活性及其协同效应。方法 采用ＭＴＴ比色法，体外对比检测阿霉素及几种国内临床常用重组干扰素（ｒｈＩＦＮａ２ａ、ｒｈＩＦＮａｌｂ、ｒｈＩＦＮａｌｃ、ｒｈＩＦＮβ和ｒｈＩＦＮγ）的抗骨肉瘤细胞增殖活性。分别将几种干扰素与阿霉素联合用药，对比检测其抗骨肉瘤的协同作用。结果 ｒｈＩＦＮａ２ａ为５×１０＾４ＩＵ／Ｌ、ｅｈＩＦＮａｌｂ为３．７５×１０＾５ＩＵ／Ｌ、     

CD3AK细胞的生物学特性及其抗肿瘤作用

用人的外周血单核（ＰＢＭＣ）与抗ＣＤ３单克隆抗体和基因重组的人ＩＬ－２共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ ａｃｔｉｖａｔｉｖｅｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ），并系统地研究ＣＤ３ＡＫ细胞的生物学特性及其体外抗肿瘤作用。结果表明，ＣＤ３ＡＫ细胞是异质细胞群，前体细胞来源丰富，主要是Ｔ细胞；经期内大量扩增，体外可长期存活，广谱杀瘤活性较低的ＩＬ－２依赖性。ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖机制与其表面高表达Ｉ     

MTT比色法检测慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞的活性

自然杀伤细胞（ＮＫ）是抗病毒免疫第一线细胞。本文应用ＭＴＴ比色方法检测２４例乙肝病毒（ＨＢＶ）感染者外周血ＮＫ细胞活性，现将临床检测结果报告如下。１材料和方法１．１研究对象：２４例慢性乙型肝炎患者。男性２３例，女性１例，平均年龄４３岁。全部病例符合１...     

脐血LAK细胞生物学特性影响因素的研究

采集２３名产妇的脐带血和８名正常成人的外周血制备ＬＡＫ细胞，随机分为４组，在培养第３，５，７，１４天，分别利用ＭＴＴ法和＾１２５Ｉ－ＵｄＲ释放法对４组ＬＡＫ细胞的增殖力和杀伤活性进行了测定，同时用细胞毒方法测定培养７天的ＬＡＫ细胞的免疫表型。结果发现，在不同培养时间，脐血来源的ＬＡＫ细胞增殖力显著高于成人血ＬＡＫ细胞（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１），成人血清组，脐血血清组，红细胞组ＬＡＫ细胞增殖力有     

改良MTT法检测自然杀伤细胞的活性

采用经作者改良的ＭＴＴ比色测定自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性。结果显示：在效应细胞（ＥＣ）和靶细胞（ＴＣ）活性均≥９５％，ＥＣ≥３．０×１０２／Ｗｅｌ、ＴＣ≥１．６×１０２／Ｗｅｌ时，细胞还原ＭＴＴ产生的甲瓒溶解后的ＯＤ５７０ｎｍ值与细胞数成线性相关（ｒｅ＝０．９４，ｒｔ＝０．９７，Ｐ＜０．００１）。本法在测得ＥＣ∶ＴＣ为４０∶１时，正常人外周血ＮＫＣ活性为４５．６４％。用本法和３Ｈ－ＴｄＲ掺入抑制试验同时测定１０份白血病患者外周血ＮＫＣ活性，分别为３４．８６±７．８０％和３５．１６±８．４０％，两者呈良好的正相关（ｒ＝０．８７６，Ｐ＜０．００１）。本法简便、稳定可靠，是一种很有价值的测定ＮＫＣ活性的方法。     

灵芝多糖对NK细胞活性影响的研究

灵芝具有滋补强壮 ,扶正固本之功效 ,是祖国医药宝库的精华之一。灵芝多糖 (ｇａｎｏｄｅｒｍａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅＧＰＳ )作为灵芝的有效成分 ,具有多种生理活性与药理作用。近年来 ,对其研究已进入细胞、分子乃至基因水平。我们就灵芝多糖对ＮＫ细胞活性的影响进行了实验研究 ,探讨不同浓度灵芝多糖下ＮＫ细胞活性的变化 ,进而指导临床科学用药。1　材料和方法1 1　材料1 1 1　灵芝多糖 :以泰山赤灵芝为原料 ,提取灵芝多糖 ,由泰山医学院药理教研室提供。1 1 2　Ｋ5 6 2 :对数生长期的Ｋ5 6 2 ,由山东省医科院免疫室提供。1 1 …     

CD3AK细胞的诱导及其体外抗肿瘤活性的实验研究

本研究采用抗ＣＤ３单克隆抗体辅以少量的基因重组人白细胞介素２和植物血凝素诱导外周血淋巴细胞，成功地研制出具有抗瘤活性的ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞。     

哮喘患儿自然杀伤细胞及γ-干扰素水平的变化

目的：探讨哮喘患儿自然杀伤细胞及γ干扰素水平的变化及意义。方法：应用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色法、流式细胞术（ＦＣＭ）及生物素亲合素双抗体夹心酶联免疫吸附分析术（ＡＢＣＥＬＩＳＡ）检测哮喘患儿外周血自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性、ＣＤ５６＋细胞数及单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）诱生γ干扰素（ＩＦＮγ）水平。结果：哮喘发作期及缓解期ＮＫＣ活性与正常对照比较均无显著差异（Ｐ＞０．０５）；发作期ＣＤ５６＋细胞数明显低于正常对照（Ｐ＜００１），后者与缓解期无显著性差异（Ｐ＞００５）；ＰＢＭＮＣ诱生ＩＦＮγ水平发作期及缓解期均显著低于正常对照（Ｐ＜０．０１）。结论：ＩＦＮγ产生减少可能与哮喘的发生和易诱发病毒反复感染有一定关系；而ＮＫ细胞活性在发病过程中变化不大。     

改良的MTT比色法测定NK细胞杀伤活性

目的：为提高ＭＴＴ比色法检测自然杀伤（ＮＫ）细胞活性的稳定性。方法：用改良的ＭＴＴ比色法对ＮＫ细胞的杀伤活性进行了测定,同时与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法相比较。结果：改良的ＭＴＴ法在保留了简单、敏感,可重复及安全等特性的同时,其稳定性大大提高。相关性研究表明,改良的ＭＴＴ法与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法具有高度的相关性（γ＞０９４）。结论：改良的ＭＴＴ比色法在免疫学、肿瘤学及临床研究方面极具实用价值,便于推广应用     

经尿道电切加丝裂霉素C联合干扰素α—2b膀胱灌注治疗浅表性膀胱癌

本科自 1 994年至 1 999年对 5 2例浅表性膀胱癌患者采用经尿道膀胱肿瘤电切术(ＴｒａｎｓｕｒｅｔｈｒａｌｒｅｓｅｃｔｉｏｎｏｆｂｌａｄｄｅｒｔｕｍｏｒＴＵＲＢＴ) ,术后使用丝裂霉素Ｃ(ＭＭＣ)加重组人干扰素α- 2ｂ(ＩＦＮα - 2ｂ)膀胱内灌注预防肿瘤复发 ,取得满意疗效。现报告如下。1　临床资料本组 5 2例 ,男 49例 ,女 3例 ,年龄 2 8～81岁 ,平均 5 1 3岁。因无痛性肉眼血尿或镜下血尿就诊 ,Ｂ超检查 5 2例 ,ＣＴ检查 36例 ;所有病例术前均经膀胱镜检查及活检确诊。单个肿瘤 46例 ,多发肿瘤 6例 ,肿瘤直径0 5～ 2 7ｃｍ ,以 …     

切割bcr/abl核酶的逆转录病毒载体的构建及其对K562细胞的影响

目的进一步研究ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因在慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）中作用以及探索ＣＭＬ基因治疗的可能性。方法利用ＤＮＡ重组技术将所设计、合成的针对ｂｃｒ／ａｂｌ融合转录本ｂ３ａ２断裂点“锤头型”核酶的基因用ＨＩｎｄⅢ、ｐｓｔⅠ酶切后克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ±质粒相应酶切位点获得ｐＢＲＺ重组子。测定ＲＺ基因序列与设计的一致。用ＢａｍＨＩ和ＸｈｏＩ从ｐＢＲＺ上切下ＲＺ基因，定向克隆到逆转录病毒载体ＰＬＸＳＮ，得到携带ＲＺ基因的重组逆转录病毒载体ＰＬＲＺＸＳＮ。通过脂质体介导的ＤＮＡ转染法，将ＰＬＲＺＸＳＮ导入慢性粒细胞白血病细胞株Ｋ５６２细胞，通过克隆分析法、ＲＴ－ＰＣＲ、流式细胞仪、ＤＮＡ电泳及电镜观察等方法检测核酶对Ｋ５６２细胞的影响。结果（１）核酶转染４８ｈ后，Ｋ５６２细胞克隆抑制率达８５％；（２）核酶转染７２ｈ后Ｋ５６２细胞Ｐ２１０ｂｃｒ—ａｂｌ蛋白表达率比未转染组低５２％；（３）核酶转染４８ｈ后，Ｋ５６２细胞ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ表达水平比未转染组低７３％；（４）核酶处理的Ｋ５６２细胞发生凋亡，表现为核酶转染Ｋ５６２细胞７２ｈ后，用流式细胞仪可检测到明显凋亡峰，凋亡率为３７．１％，而空载体及脂     

烧冲复合伤早期肺微血管内皮细胞与PMN粘附的变化

烧冲复合伤早期肺微血管通透性损伤与肺内白细胞尤其是多形核白细胞 (ＰＭＮ)的聚集有关 ,而此时肺ＩＣＡＭ 1、外周血ＰＭＮ的ＣＤ11ｂ表达明显上调并与ＰＭＮ在肺内聚集有关[1] 。1　材料与方法1.1　动物分组及致伤、处理　　Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 0只 ,分为正常对照及烧冲复合伤组 ,各 10只 ,每组各 5只用于分离培养肺微血管内皮细胞 (ＭＶＥＣ) ,另一半用于分离外周血ＰＭＮ。烧冲复合伤为 2 5 %体表面积Ⅲ度烫伤复合中度冲击伤 ,于伤后 12ｈ取标本。1.2　肺ＭＶＥＣ的分离及培养　　参照文献 [2 ]方法稍加改进 ,培养的ＭＶＥＣ的鉴定以ｖ…     

干扰素在皮肤病的临床应用

干扰素 (ＩＦＮｓ)是一族有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节特性的自然产生的内源性细胞因子的总称。是机体天然防御系统的组成部分。在皮肤病治疗中 ,干扰素可以各种各样的剂量和途径外用、静脉内、皮损内、腹膜内、肌肉内和皮下方式给药。ＩＦＮ-α是临床应用最广泛的干扰素 ,美国食品与药物管理局(ＦＤＡ)认可的有重组ＩＦＮ -α2ａ和ＩＦＮ -α2ｂ及诱生的ＩＦＮ -αｎ3。ＩＦＮｓ影响病毒复制的机制是复杂的 ,它能削弱病毒侵入、转录、翻译、装配及从被感染细胞的释放。它也通过调节Ｔ淋巴细胞趋化性、抗体依赖的细胞细胞毒和自然杀伤活性等…     

IFNα2b诱导MxA蛋白的表达及其抗病毒活性研究

研究ＭｘＡ抗病毒蛋白的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ处理ＷＩ－３８细胞或人外周血单核细胞１２ｈ或２４ｈ,并用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法或或ＦＡＣＳ法分别进行了ＭｘＡ蛋白表达的检测及微量细胞病变抑制法对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果（１）低浓度ＩＦＮα２ｂ（〉１１Ｕ／ｍｌ）可诱导ＷＩ－３８细胞达ＭｘＡ;（２）１０ｎｇ／ｍｌＭｘＡ可以抵抗２０ＴＣＩＤ５０的ＨＳＶ－１、Ｐｏｌｉｏ。     

慢性粒细胞白血病的研究进展

慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ)是一种起源于多能造血干细胞的恶性增殖性疾病。近年来由于积极开展恶性血液病的生物学研究 ,对ＣＭＬ的发病机制有了进一步的认识 ,对其诊断和治疗也取得显著进展。1　ＣＭＬ的发病机制ＣＭＬ最主要的细胞遗传学特点是存在特异的Ｐｈ染色体 ,即ｔ ( 9;2 2 ) ,这一易位使正常位于 9ｑ34的ｃ ａｂｌ基因与 2 2 ｑ11上的ｂｃｒ基因发生融合 ,形成ｂｃｒ/ａｂｌ融合基因是恶性克隆的基因标志 ,它表达具有高酪氨酸激酶 (ＰＴＫ)活性的ｂｃｒ/ａｂｌ融合蛋白。过去一直认为ＣＭＬ髓系扩增是由于Ｐｈ克隆的高度增殖引起 …     

反义bcr／abl寡核苷酸诱导K562细胞凋亡时Caspase3表达及？…

用反义ｂｃｒ／ａｂｌ寡核苷酸片段诱导Ｋ５６２细胞凋亡,观察Ｃａｓｐａｓｅ３表达及活性变化,以阐明Ｃａｓｐａｓｅ在慢性髓性白血病（ＣＭＬ）发病机制中的作用。方法：用反义ｂｃｒ／ａｂｌ寡核苷酸片段ＡＳ和对照无义片段ＮＳ自理５６２,ＳＷＩＭＸＬＥＱＵＭＦ ＹＮＶ ＥＹ display status     

INF—α,TAE方案治疗难治性急性非淋巴细胞白血病11例临床观察

我院从 1995年 6月至 1997年 2月 ,应用吡喃阿霉素 (ＴＨＰ)、阿糖胞苷 (Ａｒａ ｃ)、足叶乙甙 (ＶＰ16 )组成的ＴＡＥ方案联合精制人白细胞干扰素 (ＩＮＦ -α)治疗难治性急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 11例 ,现报告如下。1　材料和方法1 1　病例选择 :11例难治性ＡＮＬＬ均为住院患者 ,男8例 ,女 3例 ,年龄 2 3～ 59岁、中位年龄 4 1岁 ,均经临床、骨髓检查确诊。按ＦＡＢ分类法分型、Ｍ11例 ,Ｍ2ａ4例 ,Ｍ2 ｂ1例 ,Ｍ3ｂ1例 ,Ｍ4 1例 ,Ｍ6 2例。其中难治性 8例 (Ｍ11例 ,Ｍ2 ａ3例 ,Ｍ2 ｂ1例 ,Ｍ4 1例 ,Ｍ51例 ,Ｍ6 1例 )全部病例符…