应用激光显微分离技术在骨肉瘤组织原位筛选噬菌体肽库

目的将激光显微分离(laser capture microdissection, LCM) 技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选过程,建立一种可以直接在天然组织中筛选肽库的方法。方法将新鲜人骨肉瘤组织块在噬菌体肽库溶液振荡孵育后制成组织冰冻切片,免疫组化染色检测噬菌体在组织中的浸润扩散。改进常规LCM切片处理方法,以冻干法替代酒精/二甲苯法脱水,以期在LCM操作过程中提高切片上噬菌体的存活率。LCM法分离摄取骨肉瘤切片上的肿瘤靶细胞,转染回收这些细胞上特异结合的噬菌体。滴定法检测所筛选的噬菌体对特异性细胞的亲和力。结果利用LCM技术,可以由肿瘤冰冻切片上收集到足够的与特异性噬菌体短肽,应用于噬菌体表面呈现肽库筛选。经过3轮筛选后所获得的噬菌体与人骨肉瘤组织的特异性亲和力提高16倍。结论本研究首次将LCM技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选,可以使我们直接在新鲜人肿瘤组织中筛选与特定细胞群甚至单个细胞亲合的短肽;同时又避免了天然组织中其他杂质细胞的污染,为研制细胞特异性导向载体提供了一个新的途径。     

集装箱卫生处理中对两种蒸熏剂效果比较

本文报道了硫酰氟，灭菌气对集装箱内蟑螂的蒸熏效果。箱体内温度32℃，相对湿度70％、应用5g／m^3和10g／m^3，15g／m^3的硫酰氟三种浓度，经4小时密封后开箱，试虫全都死亡，经试验室观察也无发现复苏现象。灭菌气(又称虫菌畏)，箱内部温度34℃，相对湿度76%、施药后密闭4小时，应用40g／m^3、50g／m^3尚未死亡，密闭24小时才全部死亡，不再复苏。而对照组箱内放置24小时无死亡。     

人α干扰素诱导骨肉瘤细胞Anoikis凋亡

目的：恶性肿瘤细胞逃避Anoikis凋亡的特性是其原位侵袭和远处转移的一个重要原因。本文旨在研究应用人干扰素（IFN）α2a诱导骨肉瘤细胞出现Anoikis凋亡，并深入探讨其产生机理及信号传导途径。方法：采用抑制接触培养法建立细胞Anoikis凋亡诱导模型。观察IFN－α2a诱导骨肉瘤细胞MG－63产生的Anoikis凋亡。TUNEL法形态学检测MG－细胞凋亡，流式细胞仪定量检测细胞凋亡程度和细胞表面整联蛋白受体表达。特异性底物切开法检测半胱氨酸天门冬氨酸特异性蛋白酶（cysteine aspartate-specific proteases,caspase)信号途径。结果：人IFN－α2a可明显诱导骨肉瘤细胞MG－63产生Anoikis现象，并诱导了MG－63细胞caspase-8和caspase-3的活性，但IFN对整联蛋白亚单位α4，α5及αv无明显影响，上述整联蛋白封闭抗体对IFNα－2a诱导的MG－63细胞Anoikis凋亡无明显影响。结论：人干扰素α2a可以在体外通过调节细胞caspase信号途径，诱导骨肉瘤细胞MG－63产生Anoikis现象，从而抑制骨肉瘤的转移。     

血必净治疗脓毒症随机平行对照研究

目的观察血必净治疗脓毒症疗效。方法使用随机平行对照方法 ,将62例住院患者按随机数字表法分为两组。治疗前及治疗后24h、72h采血检查血浆胱抑素。对照组31例予经验型抗感染治疗,头孢他啶,2 g/次,2次/d。治疗组31例100 ml血必净＋150 ml生理盐水,1次/d,静脉滴注。连续治疗7 d为1疗程。观测临床症状、胱抑素C、不良反应。连续治疗2疗程,判定疗效。结果治疗组痊愈12例,显效8例,有效5例,无效6例,总有效率80.65%。对照组痊愈8例,显效3例,有效6例,无效14例,总有效率54.85%。治疗组疗效优于对照组（P〈0.05）。胱抑素C两组有改善（P〈0.05,P〉0.05）,治疗组改善优于对照组（P〈0.01）。结论血必净治疗脓毒症效果显著,值得推广。     

马尾神经离断再植一例报告

患者女，26岁：因腰部被尖刀刺伤伴头痛、呕吐、大小便失禁10d，腰骶部流液3d入院。患者10d前被尖刀从后方刺入腰骶部，局部剧痛、出血，不久即感头痛、头晕、恶心、呕吐、会阴部麻木，双下肢无感觉、运动障碍，送当地医院行清创缝合：次日，自觉有便意，但不能自行大小便，给予留置尿管处理。2d后，行CT检查示骨质、椎间盘未见异常，     

噬菌体呈现技术研制特异性人抗骨肉瘤干扰素

目的 利用噬菌体表面呈现技术研制高活性、特异性抗骨肉瘤干扰素。方法 将干扰素ＩＦＮａｌｃ／８６Ｄ ＤＮＡ插入噬菌体质粒载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ，并构建噬菌体ＩＦＮａｌｃ／８６Ｄ ＡＢ环变库；通过在ＯＳ７３２细胞上竞争性亲合洗脱、ＭＴＴ法对比检测抗肿瘤活性，筛选针对ＯＳ７３２细胞的高活性噬菌体－ＩＦＮ突变体。结果 获得２个噬菌体－ＩＦＮ突变体，其抗ＯＳ７３２细胞增殖活性较突变母体分别提高４倍和１６倍     

阑尾炎术后下消化道出血三例

阑尾切除术是外科治疗急、慢性阑尾炎的有效方法。一般说来该手术操作简单，术后恢复快，因此被一些医生视力“小”手术。然而正是这个“小”字，使一些医生不重视对手术的规范操作而发生并发症。我院1992～2003年发生阑尾切除术后并发下消化道出血3例，现报告如下：     

自体腓骨移植修复重建肩腕关节肿瘤性骨缺损

目的:观察不带血管蒂的自体腓骨移植在肩腕关节重建中的应用和长期疗效。方法:于1985-12/2003-12对南方医院23例肱骨近端,19例桡骨远端骨肿瘤患者分别进行囊内刮除或瘤段切除,采用不带血管蒂的自体近端腓骨移植重建肩、腕关节,术中采用自体腓骨支撑内固定或4孔钢板螺钉内固定。术后定期随访,X射线片复查,观测患者肩及腕关节活动度。采用国际骨骼肌肉肿瘤协会评分系统进行术后功能评价,满分为30分。结果:①42例术后经平均6年8个月的随访,仅3例患者出现肿瘤原位复发。②术后6个月进行随访功能评价,国际骨骼肌肉肿瘤协会评分系统评分保留关节面的肱骨近段肿瘤切除重建术后为23～30分(均28平分)骨近段移植重建肩关节术后为13～21分(平均16分);腕关节重;腓建为16～28分(平均23分)。结论:①不带血管的腓骨移植在肩、腕关节重建及近关节骨缺损重建中,是一个较理想的选择方案。②对于肱骨近端良性肿瘤,应尽量采用保留肩关节面,自体腓骨支撑重建的方法。③对于桡骨远端的肿瘤,腓骨近段重建腕关节可取得较好的外观和功能,可全部采用瘤段切除,腕关节重建手术。     

胆总管切开取石一期缝合可行性研究

1999年7月-2004年6月，我院共施行胆总管手术88例。其中施行一期缝合40例，传统引流48例，均获治愈。报告如下。     

急性结石嵌顿性胆囊炎行腹腔镜手术的体会

<正>腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)已成为治疗胆囊良性疾病的金标准,但急性结石嵌顿性胆囊炎由于炎症导致解剖结构变化,手术复杂,术者心理压力加大,多以剖腹手术作为首选。随着术者腹腔镜技术地不断成熟及经验地不断积累,急性结石嵌顿性胆囊炎已不再是LC的