手术联合ALA-PDT治疗乳房外Paget's病临床观察

目的观察手术联合5-氨基酮戊酸光动力疗法(aminolevulinic acid photodynamic therapy,ALA-PDT)治疗乳房外Paget's病的临床疗效。方法对5例确诊为乳房外Paget's病的患者行手术切除病灶,拆线后行4次ALA-PDT治疗,每次间隔2周。随访6个月以上,观察其疗效。结果本组5例患者创面愈合良好,随访6~18个月无复发,局部瘢痕较小,无功能受限。结论手术联合ALA-PDT治疗乳房外Paget's病,疗效肯定,不良反应较小,肿瘤复发率较低,患者满意度高。     

乳头乳晕角化过度症1例

患者女,35岁。双侧乳头乳晕变黑10余年,增生1年。患者10余年前妊娠期间发现其乳头、乳晕颜色较深,未引起重视,随着年龄增长,颜色缓慢加深,1年前无明显诱因乳头乳晕出现增生物,渐增多,月经期较明显。自发病来双侧乳头乳晕无不适感,为求进一步诊治,于年月日来我院就诊。既往体健,无鱼鳞病、黑棘皮病、慢性湿疹等皮肤病。家族中无类似病史。体格检查:一般情况良好,心、肺、腹正常。皮肤科检查:双侧乳头、乳晕密集分布菜花状增生物,呈暗褐色,质软,乳晕范围扩大,边界清晰,无鳞屑及渗出物,乳头无溢液及异味(图1A)。     

贵州小型香猪皮肤成纤维细胞库的构建

目的：小型猪与人的皮肤组织结构相似，探索一种贵州小型香猪成纤维细胞的分离、培养、传代、冻存、复苏及鉴定方法为组织工程皮肤的构建奠定基础。方法：采用细胞培养技术和组织工程学方法。结果：采用细胞培养技术将贵州小型香猪成纤维细胞传代至23代，此时的细胞数至少是原代培养的细胞数的1&;#215;10^9倍，经冻存、复苏后，猪成纤维细胞仍具有增殖能力，生长状态与原代培养的猪成纤维细胞相类似。结论：通过细胞培养技术和组织工程学的方法可以成功地构建贵州小型香猪成纤维细胞库。     

皮肤组织工程的基础研究:三磷酸腺苷酶染色法定性及定量观察猪表皮朗格汉斯细胞

目的:观察三磷酸腺苷ATP)酶染色的猪表皮朗格汉斯细胞密度和形(态。方法:用改良的JuhlinATP酶染色法,对小型香猪表皮进行染色,显示朗格汉斯细胞。结果:猪表皮朗格汉斯细胞为棕黑色树突状,测得猪腹部表皮的朗格汉斯细胞平均密度为750个/mm。2结论:ATP酶染色法可以对猪表皮朗格汉斯细胞进行染色,并可以定量、定性观察猪表皮朗格汉斯细胞。     

复合壳多糖人工皮肤生物学功能初步研究

目的 研制一种新型的胶原凝胶类人工皮肤。方法 制备壳多糖－胶原－糖胺聚糖（GAGs)－成纤维2细胞真皮替代物（DE），观察成纤维细胞（FB）在凝胶中的生长情况。研究不同含量壳多糖对FB和角质形成细胞（KC）生长的影响，不同含量壳多糖DE的抗感染能力以及DE裸鼠全层皮肤缺失移植试验，组织学研究其重建情况。随后在DE表面接种KC，先浸没培养，再气液界面培养，构建完善的人工皮肤。对DE和人工皮肤行组织学和电镜分析。结果 FB在凝胶中2－9d呈指数增生。DE基质配方对FB的生长无抑制作用，但可促进KC的生长，对金黄色葡萄球菌的抑制作用随壳多糖含量增大而增强。DE移植后支持早期真皮重建和血管化。扫描电镜示DE有丰富的微孔结构。结论 复合壳多糖人工皮肤是生物相容性好，有一定抗感染能力的新型胶原凝胶类活人工皮肤。     

Tax1结合蛋白1对B细胞功能的抑制作用

目的探讨Tax1结合蛋白1(TAX1BP1)对B细胞增殖、活化、免疫球蛋白分泌等功能的影响。方法利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19~+B细胞,转染siRNA下调TAX1BP1的表达;并利用TAX1BP1慢病毒感染B细胞株Raji细胞系建立稳定下调TAX1BP细胞系。体外用LPS刺激B细胞后通过CCK8、流式细胞术和ELISA法分别评价TAX1BP1对B细胞增殖、B细胞表面共刺激分子表达、细胞周期以及免疫球蛋白分泌的影响。结果与对照组相比,敲低TAX1BP1促进了B细胞的增殖(P=0.008)及Raji细胞的增殖(P0.000 1),上调了B细胞表面活化分子CD69和CD80的表达(P0.001),促进了免疫球蛋白lgG及lgM的生成(P0.05)。结论TAX1BP1可以通过抑制B细胞增殖、活化、抗体产生等多方面调节B细胞功能。     

复合壳多糖人工皮肤生物学功能初步研究

目的研制一种新型的胶原凝胶类人工皮肤。方法制备壳多糖-胶原-糖胺聚糖(GAGs)-成纤维细胞真皮替代物(DE),观察成纤维细胞(FB)在凝胶中的生长情况。研究不同含量壳多糖对FB和角质形成细胞(KC)生长的影响,不同含量壳多糖DE的抗感染能力以及DE裸鼠全层皮肤缺失移植试验,组织学研究其重建情况。随后在DE表面接种KC,先浸没培养,再气液界面培养,构建完整的人工皮肤。对DE和人工皮肤行组织学和电镜分析。结果FB在凝胶中2～9d呈指数增生。DE基质配方对FB的生长无抑制作用,但可促进KC的生长,对金黄色葡萄球菌的抑制作用随壳多糖含量增大而增强。DE移植后支持早期真皮重建和血管化。扫描电镜示DE有丰富的微孔结构。结论复合壳多糖人工皮肤是生物相容性好、有一定抗感染能力的新型胶原凝胶类活人工皮肤。     

复方壳多糖人工皮肤的组织病理制片技术

随着人工皮肤培养模型的建立,人工皮肤的组织病理制片技术已成为人工皮肤研究中所必须的基本技术。我们查阅了有关资料^[1],建立了人工皮肤的组织病理制片技术,现报道如下。     

肝细胞生长因子对体外培养的人外泌汗腺腺上皮细胞迁移、凋亡及p-Akt表达的影响

Objective To investigate the effect of hepatocyte growth factor (HGF) on migration and apoptosis of,as well as phosphorylated-Akt (p-Akt) expression in cultured human eccrine sweat gland epithehal cells (hESGc).Methods The first generation of hESGc were cultured in keratinocyte serum free medium (KSFM) and treated with various concentrations (2,20,40μg/L) of HGF for different durations.Then,cell scratch test was performed to detect cell migration,a double staining flow cytometry assay using annexin VFITC/propidium iodide to detect cell apoptosis.and Western blot to measure the expression of p-Akt.Results HGF of 2μg/L had no effect on the migration of hESGc,while that of 20 μg/L and 40μg/L could promote the migration of hESGc by 33.2% and 228.2%.respectively.The average number of cells migrating into the scrach zone was significantly lower in untreated cell group than that in 20 and 40μg/L HGF-treated cell group (17.3±5.5 vs 23.0±6.3 and 56.7±7.9,t=2.653, 15.858,P<0.05,0.01, respectively).The apoptosis rate was 14.76% in untreated cells,14.16%,13.5% and 8.87% in cells treated with HGF of 2,20 and 40μ/L, respectively;there was a significant difference between untreated cells and 40μg/L HGF-treated cells (t=7.852,P<0.01).HGF could activate the phosphorylation of Akt protein and increase the expression of p-Akt.Conclusion HGF could promote the migration of,inhibit the apoptosis of,and stimulate the p-Akt expression in.hESGc.     

hTERT基因永生化人毛乳头细胞系的生物学特征

目的研究hTERT基因永生化人毛乳头细胞(DPC)系的生物学特征。方法采用脂质体转染法,将hTERT基因导入体外培养的正常人DPC,经G418筛选得到阳性克隆,连续传代培养。检测转染细胞内hTERT mRNA的表达,并分析转染细胞的生物学特征。结果转染后获得1个阳性细胞克隆,扩大培养后细胞生长良好,现已连续传至65代。检测证实转染细胞稳定表达hTERT mRNA,且此转染细胞具有体外培养正常DPC的生物学特征。结论hTERT基因永生化人DPC系保持了正常DPC的生物学特征。