PI3K/Akt信号通路介导莱菔硫烷预处理对大鼠供心冷缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路介导莱菔硫烷（SFN）预处理对大鼠心肌冷缺血再灌注损伤（IRI）的作用,阐明其作用机制。方法：64只健康雄性SD大鼠随机分为冷IRI组、SFN组、LY（PI3K抑制剂）+冷IRI组和LY+SFN组,每组供、受体各8只。将冷藏于组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液（HTK液）9 h供心移植到受体大鼠的腹腔,建立同种大鼠异体异位心脏移植模型,术后24 h取供心心肌组织,采用苏木精-伊红（HE）染色观察心肌组织形态表现,免疫组织化学法和Western blotting法检测心肌组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,即蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、Bax、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）的蛋白表达水平。结果：心肌组织形态表现,冷IRI组和LY+冷IRI组大鼠心肌组织损伤最严重,SFN组心肌组织损伤最轻,LY+SFN组心肌组织损伤介于冷IRI组和SFN组之间。免疫组织化学法和Western blotting法,与冷IRI组比较,SFN组p-Akt蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）,Bcl-2蛋白表达水平升高（P < 0.05）,而Bax蛋白表达水平降低（P < 0.05）;应用阻滞剂LY294002后,与LY+冷IRI组比较,LY+SFN组p-Akt蛋白表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）,但Bcl-2蛋白表达水平仍升高（P < 0.05）,Bax蛋白表达水平仍降低（P < 0.05）,Bcl-2/Bax比值升高（P < 0.05）。结论：SFN可能通过PI3K/Akt信号通路减轻心脏移植心肌冷IRI。     

天麻素抗心肌氧化应激损伤的作用机制研究

 摘要：目的  探讨天麻素在大鼠心肌细胞氧化应激损伤时是否通过线粒体机制发挥心脏保护作用。方法  首先使用过氧化氢H2O2 650 μmol/L处理大鼠心脏组织来源的H9c2心肌细胞,复制氧化应激损伤模型。分别使用50.0、10.0、1.0和0.1 μmol/L天麻素预处理,利用共聚焦显微镜成像技术,检测线粒体膜电位的变化,四甲基偶氮唑盐比色法检测天麻素对细胞存活率的影响,Western blot检测天麻素对糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、蛋白激酶-B（Akt）活性的影响。结果  不同浓度的天麻素预处理均能减弱H2O2引起的四甲基罗丹明乙酯荧光强度降低程度,且与模型组（0.30±0.25）比较,10.0 μmol/L天麻素预处理组（0.79±0.08）作用最为明显。天麻素（10.0μmol/L）预处理能提高H9c2细胞的存活率,使p-GSK-3β（Ser9）、p-Akt（Ser473）蛋白水平升高,而磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）抑制剂渥曼青霉素可以阻断其发挥作用。结论  天麻素能够减轻由H2O2引发的H9c2心肌细胞氧化应激损伤,其可能是通过PI3K/Akt途径使GSK-3β失活,抑制mPTP开放以发挥心脏保护作用。

     

大鼠认知障碍对糖代谢的影响及其与肝脏和骨骼肌糖原合成酶激酶-3β表达水平的关系

目的  探讨大鼠认知障碍对糖代谢的影响及其与肝脏和骨骼肌;糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）表达的关系,为糖代谢的神经调节机制研究提供新的实验依据。方法  Aβ1-42大鼠海马内注射构建认知障碍模型,血糖仪检测大鼠空腹血糖（FPG）,半定量反转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测肝脏与骨骼肌GSK-3β mRNA的表达,蛋白印迹法（Western blot）检测肝脏与骨骼肌GSK-3β的表达。结果  ①实验组大鼠FPG为（7.99±0.15）mmol/L,与假手术组和对照组比较显著升高（P <0.05）。②实验组大鼠肝脏和骨骼肌GSK-3β mRNA表达水平分别为（0.47±0.03）和（0.26±0.02）,与假手术组和对照组比较均明显升高（P < 0.05）。③实验组大鼠肝脏和骨骼肌GSK-3β表达水平分别为（0.47±0.04）和（0.26±0.03）,均显著高于假手术组与对照组（P <0.05）。结论  大鼠认知障碍可引起血糖水平的升高,其机制可能与认知障碍大鼠肝脏和骨骼肌GSK-3β表达升高有关。

     

电休克影响抑郁模型大鼠认知功能的机制研究

目的  观察不同电量和不同时程电休克（ECT）对嗅球切除抑郁模型大鼠海马谷氨酸（Glu）浓度和Tau蛋白过度磷酸化的影响以及ECT后学习记忆能力的变化。方法  建立大鼠嗅球切除抑郁模型，采用随机单位组3×3析因设计：将每只大鼠视为1个单位，对每个单位2个处理因素，即电流因子（3水平：25、50和75 mA）和时程因子（3水平：3、6和9次ECT）的所有组合（共9组，n =8）。全部ECT结束24 h内开始Morris水迷宫实验，检测实验大鼠海马区的长时程增强作用，留取海马组织。高效液相色谱法测海马中Glu的含量，免疫印迹法检测p-AT8Ser202、GSK-3β1H8在海马中的表达。结果  ECT引发海马Glu浓度升高及Tau蛋白磷酸化加剧，同时学习记忆能力相应下降，ECT的电流和时程均可影响该过程，两者的作用是相加的；GSK-3β是该过程信号通路的关键蛋白。结论  ECT导致海马中Glu浓度升高，从而加剧海马Tau蛋白的磷酸化程度，导致学习记忆障碍。

     

红景天苷对大鼠缺血再灌注损伤心肌Akt/GSK-3β作用的研究

目的缺血预处理和后处理能够产生一定的心肌保护效应。观察红景天苷对大鼠心肌缺血-再灌损伤的保护作用,并探讨其保护作用的机制。方法将SD大鼠按随机数字表法分为6组,每组6只:假手术组、心肌缺血-再灌注模型组、红景天苷预防组、红景天苷治疗组、红景天苷预防组+磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002组(LY294002预防组)、红景天苷治疗组+PI3K特异性抑制剂LY294002组(简称LY294002治疗组)。红景天苷预防组和LY294002预防组于造模前给予红景天苷12 mg/kg腹腔注射1次/d,连续3 d;LY294002治疗组于再灌注即刻给予红景天苷12 mg/kg腹腔注射;假手术组和心肌缺血-再灌注模型组均给予等量等渗盐水腹腔注射;LY294002预防组和LY294002治疗组于冠状动脉左前降支结扎前35 min腹腔注射0.3 mg/kg体重的PI3K特异性抑制剂LY294002。采用免疫细胞化学法检测细胞内Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β的分布与变化,Western blot测定细胞内Akt、GSK-3β蛋白表达水平变化及磷酸化状态。结果假手术组、心肌缺血-再灌注模型组、LY294002预防组、LY294002治疗组p Akt/Akt值(0.246±0.002、0.457±0.012、0.303±0.005、0.361±0.019)较红景天苷预防组(0.857±0.014)、红景天苷治疗组(0.683±0.009)均明显降低(P<0.05)。假手术组、心肌缺血-再灌注模型组、LY294002预防组、LY294002治疗组p GSK-3β/GSK-3β值(0.137±0.004、0.380±0.026、0.148±0.013、0.267±0.050)较红景天苷预防组(0.944±0.045)、红景天苷治疗组(0.895±0.043)亦明显降低(P<0.05),而红景天苷预防组与红景天苷治疗组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论红景天苷可增加缺血-再灌注心肌中Akt/GSK-3β的蛋白表达及磷酸化,增强对缺血-再灌注损伤心肌保护作用。     

Notch1在肌成纤维细胞转化中的作用及表达变化

目的  探讨在成纤维细胞转化为肌成纤维细胞过程中,Notch1表达的变化规律,以及γ-分泌酶抑制剂（DAPT）抑制Notch信号后,对细胞转化的影响。方法  取新出生2～3 d SD大鼠的肺组织,用胰酶消化法分离肺成纤维细胞,再将培养至第3代的细胞分为3组：对照组、转化生长因子-β1（TGF-β1）组、TGF-β1+ DAPT组。对照组为空白对照,TGF-β1组加入5ng/ml TGF-β1,TGF-β1+DAPT组同时加入5 ng/ml TGF-β1及5μmol/L DAPT。采用免疫细胞化学法对α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化进行检测。同时通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot检测Notch1 mRNA和蛋白的表达变化。结果  α- SMA免疫细胞化学结果表明,对照组大部分细胞无染色,而TGF-β1组则可见大部分细胞内有黄色和棕黄色颗粒及条纹,DAPT组和对照组无明显差异。对照组、TGF-β1组、TGF-β1+DAPT组Notch1 mRNA表达量分别为（0.278±0.022）、（0.783±0.018）和（0.313±0.029）,对照组与TGF-β1组、TGF-β1组与TGF-β1+DAPT组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,对照组与TGF-β1+DAPT组比较差异无统计学意义（P >0.05）。对照组、TGF-β1组、TGF-β1+DAPT组Notch1蛋白表达量分别为（0.312±0.019）、（0.701±0.026）和（0.345±0.022）,组间比较结果同Notch1 mRNA。结论  Notch1可以促进成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化,进而促进肺纤维化。

     

糖原合成酶激酶3β介导心房钠尿肽对H9c2心肌细胞线粒体保护作用的研究

目的  探讨心房钠尿肽（ANP）对H9c2心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法  采用四甲基罗丹明乙酯（TMRE）荧光染料和激光共聚焦显微镜成像技术测定H9c2心肌细胞TMRE荧光强度的变化,即线粒体膜通透性转换孔（mPTP）开放程度。利用双氧水H2O2诱导H9c2心肌细胞线粒体mPTP的开放,预处理不同浓度的ANP后,观察ANP对mPTP开放的影响;同时利用Western blot检测H9c2心肌细胞的糖原合成酶激酶3β（GSK-3β Ser9）磷酸化程度,即失活程度。利用激活型GSK-3β质粒转染的H9c2心肌细胞（GSK-3β-S9A-HA）,来观察ANP对GSK-3β-S9A-HA的线粒体mPTP开放程度。结果  与对照组（600μmol/L H2O2）比较,0.01、0.10、1.00和10.00 nmol/L ANP明显抑制H2O2对TMRE荧光强度的衰减效应（P <0.05）,其中1.00 nmol/L的ANP效应最强。Western blot检测结果显示,0.01、0.10、1.00和10.00 nmol/L ANP明显增强GSK-3β Ser9的磷酸化（P <0.05）,即抑制GSK-3β的活性。利用GSK-3β-S9A-HA后发现,ANP（1.0 nmol/L）不能抑制mPTP开放（与H9c2比较P <0.05）。结论  ANP通过调节GSK-3β活性来抑制H9c2心肌细胞mPTP的开放,从而保护H9c2心肌细胞的缺血再灌注损伤。

     

前列腺素E1后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的  探讨前列腺素E1（PGE1）后处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用及其机制。方法  建立SD大鼠肝移植模型,随机分为3组：IRI组、PGE1后处理组（PGE1组）及假手术组（S组）。检测各组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、超氧化物岐化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量;采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测移植肝组织内肿瘤坏死因子（TNF-α）信使核糖核酸（mRNA）的表达水平;苏木精-伊红染色（HE）观察移植肝病理形态学变化。结果  供肝再灌注后2及6 h,PGE1组的大鼠血清ALT、AST和MDA水平及TNF-α mRNA的表达低于IRI组（P <0.05）,血清SOD水平高于IRI组（P <0.05）,光镜下PGE1组肝组织损伤较IRI组轻。结论  PGE1后处理可通过提高肝组织的抗氧化能力,降低TNF-α来减轻大鼠移植肝IRI。

     

硫化氢通过p38MAPK和TGF-β1影响糖尿病小鼠心肌纤维化的研究

摘要：目的  探讨硫化氢（H2S）对糖尿病小鼠心肌组织中p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、转化生长因子-β1（TGF-β1）及Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）表达的影响,以及对糖尿病心肌纤维化的保护作用。方法  18只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病对照组（ALX组）、H2S治疗组（ALX+H2S组）,每组6只。采用四氧嘧啶（ALX）200 mg/kg腹腔注射复制糖尿病小鼠模型;模型复制成功后,NC组和ALX组每天自由饮用自来水;ALX+H2S组自由饮用浓度为90 μmol/L的NaHS（H2S供体）溶液。8周后取材,监测空腹血糖、血脂;苏木精-伊红染色法观察心肌组织形态学变化;采用Western blot检测p-p38MAPK、TGF-β1及CollagenⅠ蛋白表达;实时定量荧光聚合酶链反应检测p38MAPK和TGF-β1 mRNA的表达。结果  与NC组比较,ALX组血糖、血脂升高（P <0.05）,心肌组织胶原表达量增加,心肌间质出现明显纤维化,p-p38MAPK、TGF-β1及CollagenⅠ蛋白表达增高（P <0.05）,p38MAPK和TGF-β1 mRNA表达增加（P <0.05）;糖尿病小鼠经H2S干预,血糖、血脂改善（P <0.05）,心肌间质胶原纤维明显减少,p-p38MAPK、TGF-β1及CollagenⅠ蛋白表达下降（P <0.05）,p38MAPK和TGF-β1 mRNA表达减少（P <0.05）。结论  H2S可改善糖尿病小鼠血糖、血脂及心肌纤维化,可能与调节p38MAPK和TGF-β1的表达有关。

     

丹参酮ⅡA对大鼠心脏纤维化的作用及机制

目的  观察丹参酮ⅡA（TSN ⅡA）能否抑制血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导的大鼠心肌纤维化;并初步探讨TSN ⅡA抗纤维化作用是否与TSN ⅡA下调转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smads信号通路活性相关。方法  SD大鼠皮下植入渗透给药压力泵缓释Ang Ⅱ,建立心脏纤维化模型。术后随机分为对照组、模型组、TSN ⅡA低和高剂量组,每组8只。持续用药6周后,尾量法检测各组尾动脉压、左心室质量（LVW）,并计算左心室质量指数（LVMI）;Masson染色观察心脏纤维化情况;实时聚合酶链反应（Real-time PCR）检测结缔组织生长因子（CTGF）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）mRNA表达水平;Western blot检测CTGF、PAI-1、TGF-β1和胞内信号蛋白Smad2/3的蛋白水平。结果  TSN ⅡA对大鼠血压无明显影响,抑制Ang Ⅱ诱导的胶原沉积,减少LVW和LVMI,下调CTGF、PAI-1、TGF-β1 mRNA和蛋白表达,抑制TGF-β1蛋白表达及Smad2/3磷酸化水平,并呈浓度依赖性。结论  TSN ⅡA可能通过下调TGF-β1/Smad2/3信号通路活性,有效抑制Ang Ⅱ诱导的胶原沉积,CTGF、PAI-1过表达,改善大鼠心肌纤维化,发挥保护心脏的作用。

     

七氟烷后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤PI3K/Akt通道的影响

目的探讨七氟烷后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤PI3K/Akt通道的影响。方法 SD雄性大鼠40只随机分为5组（n=8）：假手术对照组（C组）、缺血再灌注损伤组（IR组）、2.5%七氟烷后处理组（S组）、2.5%七氟烷＋磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B抑制剂LY294002组（S＋LY组）和溶剂对照组（DMSO组）。采用双侧颈总动脉阻断联合低血压法制备脑缺血再灌注模型。于再灌注结束后处死大鼠取海马,光镜下观察海马病理学变化,采用免疫组化法检测Caspase-3及p-Akt的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果与C组相比,其余4组AI、Caspase-3及p-Akt表达均增加（P〈0.05）。与IR组相比,S组AI及Caspase-3表达显著降低（P〈0.05）,p-Akt表达明显增加（P〈0.05）,S＋LY组及DMSO组各指标表达无明显差异（P〉0.05）。结论七氟烷后处理可能通过激活PI3K/Akt通道,抑制Caspase-3表达,减少大鼠脑缺血再灌注损伤时神经元细胞凋亡,发挥脑保护作用。     

蛋白激酶B激活对脑缺血再灌注海马CA3区神经元的保护作用

目的 探讨丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B（Protein kinase B,Akt）对脑缺血再灌注损伤后海马CA3区神经元的保护作用.方法 采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型,再灌注0 min、30 min、3h、6h、12h、1d和3d各时间点,运用免疫印迹技术检测海马CA3区Akt1的磷酸化水平,采用免疫组化和焦油紫染色分别检测LY294002（PI3K/Akt特异性抑制剂）对缺血再灌注后磷酸化Akt1（p-Akt1）的表达及神经元存活的影响.结果 缺血再灌注后30 min,与假手术（sham）组相比,海马CA3区p-Akt1的表达显著升高（P＜0.05）,再灌后3h至峰值,一直持续至3d仍维持在较高水平（P＜0.05）;与相应的再灌注组相比,给予LY294002后,p-Akt1的蛋白表达明显降低[R6 h组和LY294002＋ R6 h组的阳性细胞数（个/mm^2）分别为（134.6±7.8）和（54.8±5.1）],海马CA3区的神经元大量死亡[R5 d组和LY294002 ＋R5 d组神经元数量（个/mm^2）分别为（152.0±17.4）和（62.7±5.1）]（P＜0.05）.结论 脑缺血再灌注后蛋白激酶Akt的持续激活,是海马CA3区神经元存活的重要因素.     

缺血后处理对肝缺血再灌注损伤后磷脂酰肌醇-3激酶和细胞外信号调节激酶的影响和意义

目的观察缺血后处理对肝缺血再灌注后磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达的影响,探讨肝缺血后处理的作用机制。方法采用大鼠70%肝缺血再灌注损伤模型,进行3次循环的再灌注1 min-阻断1 min的缺血后处理,观察假手术(S)组、LY294002+假手术(LY+S)组、PD98059+假手术(PD+S)组、缺血再灌注(IR)组、缺血后处理(IPO)组、LY294002+缺血后处理(LY+IPO)组和PD98059+IPO(PD+IPO)组的肝功能、细胞凋亡、Akt和ERK1/2磷酸化程度的变化。结果缺血后处理能明显减轻缺血再灌注造成的肝功能损害,增加Akt和ERK1/2的磷酸化程度,应用LY294002或PD98059后都可以取消IPO的作用。结论缺血后处理可能通过激活PI3K和ERK1/2减轻肝缺血再灌注损伤。     

甲状腺功能亢进症模型大鼠心肌细胞PI3K/Akt通路与胰岛素抵抗的关系

目的探讨甲状腺功能亢进症模型大鼠心肌细胞PI3K/Akt通路与胰岛素抵抗的关系。方法建立甲状腺功能亢进症模型大鼠,随机分为模型组、LY294002组（PI3K抑制剂）、740Y-P组（PI3K激动剂）,每组12只;另取12只SD大鼠设为对照组。分组处理后,酶联免疫吸附法（ELISA）检测甲状腺功能指标血清游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、促甲状腺素（TSH）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平;测定空腹血糖水平（FBG）、胰岛素抵抗指数（IRI）;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测大鼠心肌组织PI3K/Akt通路蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清FT3、FT4、TNF-α及IL-6水平、心肌细胞凋亡比例、FBG、IRI显著升高（P<0.05）,TSH、心肌组织p-PI3K/PI3K及p-Akt/Akt显著降低（P<0.05）;与模型组比较,LY294002组大鼠血清FT3、FT4、TNF-α及IL-6水平、心肌细胞凋亡比例、FBG、IRI升高（P<0.05）,TSH、心肌组织p-PI3K/PI3K及p-Akt/Akt降低（P<0.05）;740Y-P组大鼠血清FT3、FT4、TNF-α及IL-6水平、心肌细胞凋亡比例、FBG、IRI降低（P<0.05）,TSH、心肌组织p-PI3K/PI3K及p-Akt/Akt升高（P<0.05）。结论PI3K/Akt通路可调控甲状腺功能亢进症模型大鼠胰岛素抵抗,激活该通路,可使甲状腺功能恢复正常,减轻炎症反应,抑制心肌细胞凋亡,改善胰岛素抵抗。     

止痛努加蜜膏提取物对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其机制研究

[目的]考察止痛努加蜜膏提取物对永久性局灶性脑缺血大鼠脑缺血损伤的保护作用,初步探索其保护作用的机制。[方法] SD大鼠60只,随机分为5组:假手术组、模型组、止痛努加蜜膏提取物高、低剂量组、止痛努加蜜膏提取物高剂量+LY2 94002组,采用大脑中动脉阻塞法构建永久性中动脉梗死(pMCAO)模型。参考Zea-Longa法对各组神经功能进行评分,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定脑梗死百分比,采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测脑组织中p-Akt、NF-κB、Nrf2蛋白表达情况,采用酶联免疫吸附剂测量(ELISA)法检测脑组织中TNF-α和SOD含量。[结果]与假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分,脑梗死百分比明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,止痛努加蜜膏提取物能改善神经功能缺损评分,减小脑梗死百分比,增加脑组织中SOD含量,减少TNF-α含量,上调p-Akt和Nrf2蛋白表达,下调NF-κB蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。且加入PI3K特异性抑制剂LY294002后,提取物对脑缺血损伤的保护作用被抑制。[结论]止痛努加蜜膏提取物具有神经保护作用,能够减轻永久性局灶性脑缺血损伤程度,其机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路,促进Akt的磷酸化,促进Nrf2蛋白表达,抑制NF-κB蛋白表达,发挥抗炎和抗氧化作用,进而产生对脑缺血损伤的保护作用。     

Effect of electroacupuncture at Ximen (PC 4) and Hegu (LI 4) on expression of Akt in rats with myocardial ischemia-reperfusion injury

Objective

To investigate the effect of electroacupuncture (EA) at acupoints on the pericardium meridian on the expression of phosphorylated Akt (p-Akt) protein in rat myocardium after ischemia and reperfusion.

基于 PI3K／A kt信号转导通路探讨电针足三里、曲池对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：观察电针干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用,应用磷脂酰肌醇‐3激酶／丝氨酸‐苏氨酸蛋白激酶（PI3K／Akt）信号转导通路抑制剂LY294002,深入探讨电针的神经保护作用与 PI3K／Akt信号转导通路的关系。方法本研究采用Zealonga线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）缺血再灌注模型。将60只SD大鼠随机分为5组：假手术（SC）组、模型（IC）组、电针（EA）组、电针＋溶剂（DMSO）组,电针＋抑制剂（LY294002）组,每组各12只。术后24 h开始电针治疗30 min ,1次／天,治疗3 d。采用Zealonga 5分评价方法观察神经功能缺损恢复程度;氯化三苯四唑（TTC）法脑组织染色计算脑梗死体积;TUNEL法观察皮质区缺血周围神经细胞凋亡的情况;应用Western blot检测脑组织中PI3K、Akt、p‐Akt、bad、p‐bad蛋白表达水平。结果神经功能评分、TTC染色显示EA组与DMSO组的神经功能恢复及脑缺血改善明显优于IC组和LY294002组（P＜0．05）;EA组与DMSO组凋亡阳性细胞数少于IC组和LY294002组,差异有统计学意义（P＜0．01）;与 IC组及 LY294002组比较,EA组与DMSO组提高了PI3K、p‐Akt及p‐bad的蛋白表达（P＜0．05）。结论 PI3K／Akt信号转导通路参与了电针足三里穴、曲池穴对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。     

肝癌细胞PI3K/Akt信号通路在干扰素2α上调ISG15表达中的作用

目的 探讨肝癌细胞中干扰素2o(IFN-2α)通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路上调ISG15表达的机制.方法 向培养的肝癌细胞HepG2细胞系中加入IFN-2α和/或PI3K抑制剂(LY294002).采用蛋白免疫印迹检测各组Akt、磷酸化-蛋白激酶B(p-Akt)和干扰素刺激基因15(...