效应面法优化蒙花苷水解工艺及其水解物的醛糖还原酶抑制活性研究

目的：用效应面法对蒙花苷的水解工艺进行优化,通过醛糖还原酶模型研究其水解物金合欢素醛糖还原酶的抑制活性。方法：建立水解物金合欢素体外生物酶模型,通过测定NADPH的荧光吸收,计算水解物金合欢素对醛糖还原酶的抑制率,从而得到水解物的醛糖还原酶抑制活性的IC₅₀的平均值。在蒙花苷水解工艺中采用效应面法优化水解工艺,并对结果进行预测分析。结果：水解物金合欢素醛糖还原酶抑制活性,其IC₅₀的平均值为2.74 mg·L^-1。优选的水解工艺为水解时间7.4 h,硫酸甲醇0.54 mol·L^-1,固液比3：1。结论：水解物金合欢素具有比蒙花苷较好的醛糖还原酶抑制活性。优选的蒙花苷水解工艺简便,预测性良好。     

As2O3 不同给药方式对 NB4 细胞侵袭力和 MMPs 活性的影响

 目的 对比 As₂O₃ 不同干预方式对白血病细胞株 NB4 的侵袭力和基质金属蛋白酶 2,9(MMP-2 、 MMP-9) 活性的影响。 方法 噻唑蓝（ MTT ）法检测 As₂O₃ 恒定和变化两种体系体外干预对 NB4 细胞的增殖抑制， ELISA 检测 2 种体系中处理的 NB4 细胞的 MMP-2 和 MMP-9 蛋白含量的变化。明胶酶谱法检测 2 种 As₂O₃ 处理前后 NB4 细胞 MMP-2 活性变化， Westen blot 检测活性 MMP-9 蛋白表达， Transwell 小室穿透实验检测两种 As₂O₃ 处理方式对 NB4 细胞穿透力的影响。 结果 ①与平行对照组比较 0.1 μmol·L^-1 As₂O₃ 恒定浓度体系中持续作用 72 h ，对 MMP-2 、 MMP-9 的活性和 NB4 细胞侵袭力影响不显著。 0.5 μmol·L^-1 As₂O₃ 持续作用 24 h 与对照组比较无明显差异， 48 h 以后 MMP-2 、 MMP-9 的活性和 NB4 侵袭力降低，与对照组比较差异显著。 1.0 μmol·L^-1 以上浓度 As₂O₃ 处理 24 h ， MMP-2 、 MMP-9 活性和 NB4 细胞侵袭力下降，并呈时间依赖性。② 2.0 μmol·L^-1 As₂O₃ 恒定浓度体系与峰浓度为 5.0 μmol·L^-1 ，终质量浓度为 0 μmol·L^-1 的变化浓度体系比较，前者对 NB4 的侵袭力和 MMPs 活性的抑制程度比后者更显著。 结论 NB4 细胞的侵袭力与其 MMP-2 、 MMP-9 活性有关，促分化有效的低浓度 As₂O₃ 对 NB4 细胞侵袭力和 MMP-2 、 MMP-9 活性抑制作用不明显。在干预时间相同的情况下，促凋亡有效的恒定浓度 As₂O₃ 持续作用，对 NB4 细胞侵袭力和 MMP-2 、 MMP-9 活性的抑制强度大于峰浓度很高但持续时间很短的变化浓度体系 , 这可能是临床上 As₂O₃ 持续缓慢输注法较常规给药法更能有效降低急性早幼粒细胞白血病（ APL ）中枢神经系统浸润和早期的致死性脑出血发生率的机制之一。     

苦楝子多糖的提取工艺及其抗氧化活性的研究

目的 探讨苦楝子多糖的提取工艺及体外抗氧活性。方法 对影响苦楝子多糖提取的温度、时间和乙醇体积分数进行L₉(3⁴)正交试验优化，并采用超氧阴离子自由基(O^÷₂)和1，1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基的反应体系，以维生素C为对比，研究该多糖的抗氧清除作用。结果 提取时间显著影响多糖得率，最佳工艺条件为提取温度85 ℃、醇沉体积分数70%，时间2 h。在此条件下，当料液比为1∶1，提取1次时，多糖得率可达5.89%。苦楝子多糖对O^÷₂和DPPH具有较好的清除能力，对O^÷₂的EC₅₀为2.21 mg/mL；当苦楝子多糖质量浓度为5.02 mg/mL时，其对DPPH的抑制率可超过50%。结论 由最佳提取工艺获得的苦楝子多糖具有明显的抗氧化活性。     

利用一种耐热耐糖β-葡萄糖苷酶制备黄芩素的研究

对利用一种耐热耐糖β-葡萄糖苷酶水解黄芩苷制备黄芩素进行了研究。该酶催化黄芩苷转化为黄芩素的反应能在醋酸-醋酸钠缓冲液中良好地进行,酶的最适pH 5.5,最适反应温度85 ℃,温度在85 ℃以下,pH 5~7.5酶的稳定性良好。酶的最大反应速率V_max为0.41 mmol·L^-1·min^-1,米氏常数K_m为3.31 mmol·L^-1。不同的金属离子对酶的活性有不同的影响,醋酸-醋酸钠缓冲液中的Na⁺对酶有活化作用。反应体系中葡萄糖醛酸浓度低于0.6 mol·L^-1时,对酶有活化作用,当单糖浓度大于0.6 mol·L^-1时,对酶有抑制作用,当单糖浓度达到1.2 mol·L^-1时,酶活抑制率为50%,糖耐受性较好。通过实验得出较佳反应条件为黄芩苷-酶液1 g : 0.2 mL,pH 5.5的醋酸-醋酸钠缓冲液,反应时间为10 h时,反应温度为85 ℃,酶解率可达97%。     

不同分子量硫酸皮肤素的抗血栓活性

 目的 研究不同相对分子质量硫酸皮肤素（DS)的抗血栓活性。方法 采用美国药典的羊血浆法测定不同相对分子质量的DS的抗凝血活性，电刺激大鼠动脉血栓形成法测定其体内抗血栓活性，以及生色底物法测定其激活肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)抗凝血酶活性。结果相对分子质量分别为27.5×10³,8.0×10³,5.3×10³和4.0×10³的DS和低分子硫酸皮肤素(LMWDS₁，LMWDS₂和LMWDS₃)的抗凝效价分别为4.00，2.25，0.94和0.54 u·mg^-1；体内抗血栓活性的血栓堵塞时间（OT)值分别为58.12,50.58,123.90和133.53 min，均较生理盐水组19.79 min显著延长；体外激活HCⅡ抗凝血酶活性分别为223.23,123.71,89.29和58.00u·mg^-1。结论 随着LMWDS相对分子质量的降低，其抗凝血活性降低,体外激活HCII抗凝血酶活性也降低，但体内抗血栓活性增强。     

纤维素酶转化朝藿定B制备箭藿苷B的研究

该实验采用纤维素酶水解朝藿定B以制备箭藿苷B。以转化率为指标,通过单因素考察pH、温度、反应时间、酶用量、底物的浓度对转化率的影响,L₉（3⁴）正交试验优化制备工艺;采用MS,¹H-NMR,¹³C-NMR鉴定水解产物。结果表明,酶解反应的最适条件为温度50 ℃,反应介质（pH 5.6）醋酸-醋酸钠缓冲液,底物质量浓度20 g·L^-1,酶与底物质量比3：5,反应时间24 h,反应产物相对分子质量646.23,核磁图谱证实产物为箭藿苷B。该工艺简单可靠,反应条件温和,适合工业化生产。     

双氯芬酸选择性抑制表达环氧合酶-2的肝癌细胞的增殖

 目的检测体外培养的人肝细胞癌HepG2,Hep3B细胞和正常肝细胞系QSG7701细胞内环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,观察环氧酶抑制剂双氯芬酸(diclofenac)对上述细胞增殖的作用,并检测前列腺素E₂(PGE₂)对双氯芬酸作用的影响,以探讨双氯芬酸抗增殖作用与细胞内COX-2的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA的表达水平,免疫印迹技术检测细胞内蛋白水平,cellcounting kit-8(CCK-8)细胞计数法测定细胞增殖活性。结果肝细胞癌HepG2和Hep3B细胞均高表达COX-2 mRNA和COX-2蛋白,正常肝细胞系QSG7701微弱表达COX-2。10～200μmol·L^-1的双氯芬酸浓度依赖性地抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖(P<0.01),作用72h的半数抑制浓度(IC₅₀)分别为76.41和35.21μmol·L^-1。双氯芬酸对QSG7701的抑制作用较弱,IC₅₀值为170.23μmol·L^-1。20μmol·L^-1 PGE2与50μmol·L^-1双氯芬酸共同孵育能显著削弱后者抗HepG2和Hep3B细胞增殖的作用(P<0.01)。结论双氯芬酸通过抑制COX-2活性和PGE₂的生成,特异性地抑制表达COX-2的肝癌细胞的增殖。     

香菇多糖LNT2的提取分离纯化、结构及体外抗肿瘤活性研究

目的 从香菇子实体中分离纯化得到精制香菇多糖,并对其结构和体外抗肿瘤活性进行研究。方法 采用碱提-醇沉法提取香菇粗多糖,并通过脱色、超滤分离纯化得到精制香菇多糖,命名为LNT₂。苯酚-硫酸法测定总糖量,高效凝胶色谱法测定相对分子质量,紫外光谱检测蛋白质和核酸,旋光度实验测定比旋光度。综合运用酸水解、高碘酸氧化、甲基化等化学分析法和傅里叶红外光谱、核磁共振光谱等光谱分析法对LNT₂的化学结构进行分析;通过刚果红实验对LNT₂的糖链构象进行考察;采用四甲偶氮唑盐（MTT）比色法测定LNT₂对小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞增殖的抑制率。结果 经测定香菇多糖LNT₂为均一组分多糖,其相对分子质量（M_W）为1.852×10⁵、含糖量为94.99%,比旋光度为+8.03°;紫外光谱显示LNT₂在280和260 nm处无吸收峰。综合化学分析和光谱分析推出LNT₂为β构型的葡聚糖,其主链由1-3连接的葡聚糖组成,分支点位于糖的6位,侧链由末端葡萄糖残基组成;刚果红实验表明LNT₂分子在较低浓度NaOH溶液中呈三螺旋构象。体外抗肿瘤实验表明LNT₂能显著抑制小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞的增殖,且呈量效依赖性。结论 精制香菇多糖LNT₂为均一相对分子质量的多糖组分,其结构为β构型1-3连接葡聚糖;初步表明LNT₂为三股螺旋结构,且具有一定的抗肿瘤活性,为其进一步的开发利用奠定了一定的基础。     

克湿灵治疗类风湿性关节炎的作用机制研究

目的:了解克湿灵(KSL)对大鼠佐剂性关节炎动物模型的作用机制。方法:氟氏完全佐剂诱发大鼠佐剂性关节炎;以炎性肿胀足的前列腺素E₂含量、细胞因子、淋巴细胞的功能变化作为观察指标;用紫外分光光度法测定炎性肿胀足的前列腺素E₂含量,采用MTT法检测胸腺、脾淋巴细胞增殖反应;用活化的小鼠脾淋巴细胞MTT比色法检测胸腺淋巴细胞产生的IL-2的活性。结果:克湿灵高(540 mg.kg^-1)、中(270 mg.kg^-1)、低(135 mg.kg^-1)3个剂量均能降低炎性肿胀足前列腺素E2的含量,其降低的量分别为25.6,16.1,10.0(A×1 000);克湿灵高、中2个剂量组可明显抑制刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞增殖反应和IL-2的生成,体内给药对T淋巴细胞增殖反应的抑制率分别为32.1%,31.0%,对IL-2生成的抑制率分别为17.5%,14.0%;体外给药对T淋巴细胞增殖反应的抑制率分别为39.0%,22.1%,对IL-2生成的抑制率分别为27.3%,18.2%;脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞增殖无明显变化。结论:克湿灵对类风湿性关节炎具有抗炎作用。     

构树叶总黄酮对人肝癌HepG-2细胞增殖及其细胞周期的影响

目的： 研究构树叶总黄酮（total flavonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP）对人肝癌细胞HepG-2的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。 方法： 取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,药物组用3,6,9,12 g·L^-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细胞24,48,72 h后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;Hoechst 33342荧光染色法荧光显微镜观察细胞的形态变化并用流式细胞仪检测细胞的周期及细胞凋亡率。 结果： MTT结果显示,各质量浓度3,6,9,12 g·L^-1的TFBP对HepG-2有增殖抑制作用,并存在浓度和时间依赖关系,3,6,9,12 g·L^-1不同质量浓度TFBP作用人肝癌HepG-2细48 h后,细胞增殖抑制率分别为20.2%,29.44%,39.21%,43.96%;9 g·L^-1的TFBP作用HepG-2细胞72 h后,细胞增殖抑制率可达52.46%,与对照组具有显著性差异（P<0.05）;Hoechst 33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,随着TFBP作用浓度的增加,加药组细胞凋亡率加药组凋亡率与对照组相,有显著差异（P < 0.01）,G₀/G₁期细胞逐渐减少,G₂/M期细胞数逐渐增多,与对照组比较差异有显著性（P < 0.05）,细胞周期被阻滞在G₂/M期。 结论： TFBP在体外对肝癌细胞HepG-2有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用,其抑制机制可能和诱导细胞凋亡与阻滞细胞周期有关。     

Isolation and partial characterization of biologically active polysaccharides from Plantago major L.

Polysaccharide fractions were isolated from Plantago Major L. leaves by extraction with cold water, hot water and with dimethylsulphoxide (DMSO). Each of the three crude extracts obtained was further separated by ionexchange chromatography. Only the two acidic fractions from the 50°C crude extract were biologically active, demonstrated by in vitro testing of activation of the complement system and induction of tumour necrosis factor alpha (TNF-α) production from human monocytes. One of the fractions, PM I₅₀, contains polysaccharide material comprising arabinose, galactose and xylose with smaller proportions of galacturonic acid, glucose, mannose and rhamnose. This fraction was further fractionated by size exclusion chromatography to give three fractions PM I_a, PM I_b and PM I_c. PM I_a is probably an arabinogalactan and PM I_b is mainly a 1,4-linked xylan. The other biologically active fraction, PM II₅₀ is composed of 75% galacturonic acid, 3% rhamnose, 6% arabinose and 8% galactose. Structure analysis indicates that PM II₅₀ is a pectin type polysaccharide.     

基于HPLC-DAD-MS~n的柴胡皂苷A的体外生物转化研究

目的对柴胡皂苷A进行体外生物转化,分析其体外代谢产物。方法用人工胃液模拟胃酸环境,厌氧状态下与大鼠肠内容物共温孵模拟肠道环境,分别进行柴胡皂苷A的体外生物转化,采用HPLC-DAD-MS~n方法,分析鉴定代谢产物。结果在人工胃液中,柴胡皂苷A可转化为柴胡皂苷b1、柴胡皂苷g,在肠道菌群环境下,柴胡皂苷A可先转化为柴胡次皂苷F,进一步转化为柴胡皂苷元F。结论模拟体内环境,柴胡皂苷A可转化成其次生苷和苷元,采用HPLC-DAD-MS~n可以指认并鉴定其产物。柴胡皂苷A的药物分布与浓度不能全面反映其体内过程,应同时考察其次生代谢产物。     

不同相对分子质量猪牙皂多糖的体外抗氧化活性

目的:研究水溶性猪牙皂多糖的抗氧化活性.方法:用水提醇分级沉降法和中空纤维素膜分离法制备不同相对分子质量的猪牙皂多糖.采用体外化学体系,以维生素C(Vit C)为阳性对照,测定猪牙皂多糖对羟自由基(·OH)、超氧自由基(O2-·)和过氧化氢(H2O2)的清除作用.结果:50％醇沉且相对分子质量在5 000～100000的猪牙皂多糖对O2-·的清除活性高于Vit C.30％醇沉且相对分子质量大于10 000的猪牙皂多糖、50％醇沉且相对分子质量5 000～10000的猪牙皂多糖、74％醇沉且相对分子质量大于5 000的猪牙皂多糖以及88％醇沉得到的猪牙皂多糖在0～1.00 g·L-1,随浓度的增加对·OH的清除作用逐渐增强,最大清除作用都可超过90％.不同醇沉不同浓度得到的猪牙皂多糖对H2O2有一定的清除活性,74％醇沉且相对分子质量大于5 000的猪牙皂多糖在0.07 g·L-1时,对H2O2的清除率为20.18％.结论:猪牙皂多糖具有良好的对·OH,O2-·和H2O2清除活性,猪牙皂多糖的抗氧化活性与醇沉浓度及其相对分子质量相关.     

铁皮石斛花多糖相对分子质量及其单糖组成的研究

为了明确铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及其单糖组成,该研究采用高效凝胶色谱和柱前衍生UPLC对11个铁皮石斛花样品的多糖进行了相对分子质量及其单糖组成分析,并利用SPSS 19.0软件根据组成的单糖峰面积进行聚类分析,结果表明11个杂交家系铁皮石斛花的粗多糖均分离为三部分(DOP-1,DOP-2和DOP-3),其平均相对分子质量分别为5.53×10~5,3.49×10~5和2.12×10~5。铁皮石斛花多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖5种单糖组成,其中甘露糖组成比例最高,其与葡萄糖比值为0.302~3.335;不同家系样品多糖中各单糖的相对含量存在一定差异,11个家系按单糖组成及相对含量划分为4类,该研究基本明确了铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及单糖构成,为其资源利用打下基础。     

载木犀草素纳米胶束的制备及其大鼠体内药动学研究

目的:制备木犀草素纳米胶束(LUT-NMs),以提高药物的口服生物利用度。方法:以聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物Pluronic F127和Pluronic P123作为纳米胶束载体材料,使用溶剂蒸发-薄膜水化分散法将木犀草素制备成聚合物胶束;以LUT-NMs处方中的聚合物与药物质量比、Pluronic F127与Pluronic P123质量比作为考察因素,以包封率、粒径分布和多聚分散系数(PDI)作为评价指标,采用二因素三水平中心复合响应面法优化了LUT-NMs的处方;通过透射电镜、稀释稳定性和体外药物释放对LUT-NMs的理化性质进行了评价;考察了大鼠口服LUT-NMs的相对生物利用度。结果:实验设计获得LUT-NMs的最佳处方为聚合物与药物质量比为45∶1,Pluronic F127与Pluronic P123质量比为5∶1;在透射电镜下可观察到LUT-NMs呈圆整球形,LUT-NMs的稀释稳定性良好,在不同pH介质溶液中释药速率缓慢且释药速率之间无差异;大鼠体内药动学结果显示,LUT-NMs可显著提高药物的达峰浓度,增加药物口服生物利用度。结论:将木犀草素制备成纳米胶束,可显著提高药物的口服生物利用度。     

Inhibition of arachidonic acid metabolism by the Andean crude drug Parastrephia lucida (Meyen) Cabrera

Ethnopharmacological relevance

Parastrephia lucida (Meyen) Cabrera is used in the traditional medicine of Argentinean highlands as an antiseptic and anti-inflammatory medicinal plant. To give scientific support to the ethnopharmacological claim of Parastrephia lucida as an anti-inflammatory crude drug the effect of Parastrephia lucida extracts and fractions was assessed on key enzymes of the biosynthesis of pro-inflammatory eicosanoids mediators from arachidonic acid (AA).

Materials and methods

A bio-guided fractionation of the plant extract was carried out to find out the compounds or mixtures responsible for the anti-inflammatory effect. The extracts and fractions were tested in vitro for their ability to inhibit the enzymes cyclooxygenase (COX)-1 and COX-2, lipoxygenase (LOX) and phospholipase (sPLA2). Fractions were analyzed by HPLC–MS, HPLC–ESI-MS/MS and NMR to relate the effect with groups of secondary metabolites.

Results

Parastrephia lucida was more effective inhibiting COX and sPLA₂ than LOX. Assay-guided isolation led to the active fractions C and F which showed different effect on the selected enzymes. The fraction C was more effective inhibiting LOX while fraction F showed better activity against sPLA₂ and COX-2. Both fractions were further worked-up following the isolation of the anti-inflammatory agents with the selected enzyme assays. The main compounds identified in the most active fractions were 5,4′-dihydroxi-7-methoxyflavanone, apigenin, apigenin methyl ether and apigenin trimethyl ether, methyl and dimethyl ethers from quercetin, kaempferol and luteolin methyl ether, ferulic acid esters, cinnamic acid and vanillin.

Conclusions

Parastrephia lucida extract inhibit AA metabolism via several enzymes. The results give support to the traditional use of this plant for the treatment of inflammatory disorders.     

猪血源抗高血压活性肽考察

目的:获取猪血中具有抗高血压活性的多肽成分.方法:通过体外模拟体内代谢,采用酶解法、超滤法、凝胶柱色谱法进行分离,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行结构鉴定.检测猪血源抗高血压活性肽对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制作用,并进行体外活性跟踪;检测其对自发性高血压大鼠(SHR)尾动脉收缩压(SBP)的影响,并进行体内活性验证.结果:获得活性多肽pep4,氨基酸序列VVLLGDV,相对分子质量714 Da,具有较强的体外ACE抑制活性,IC50=0.325 g·L-1;多肽pep4在1～36 h内对SHR具有显著的降血压作用(P＜0.05),给药后15 h抗高血压效果最为明显,SBP降低10 ～ 25 mmHg,(P＜0.05).结论:从猪血中分离多肽pep4,具有明显抗高血压作用,以猪血源寻找抗高血压活性肽,具有新型降压药物的开发前景,值得进一步研究.     

霍山石斛糖蛋白的分离纯化和毒活性研究

霍山石斛是名贵中药材,其多糖的抗肿瘤活性是中药资源领域的研究热点,该研究旨在探究霍山石斛多糖抗肿瘤活性的物质基础。实验以霍山石斛为原料,通过低盐溶液浸提和硫酸铵分级沉淀得到不同的霍山石斛蛋白组分,经SDS-PAGE电泳染色确定糖蛋白组分,再经DEAE离子柱和Sephadex凝胶柱进一步分离纯化糖蛋白组分,同时采用MTT比色法检测不同产物对人肝癌细胞Hep G2的毒活性;结果获得3种相对分子质量为22.5,19.8,15.6 k Da的糖蛋白组分RG1,RG2,RG3,测得三者复合物对Hep G2的IC50为534.23 mg·L-1,而组分RG1,RG2的IC50分别为432.96,413.91 mg·L-1,组分RG3对Hep G2无毒活性。总之,实验结果提示霍山石斛多糖抗肿瘤活性的物质基础之一是相对分子质量为22.5,19.8 k Da的2种糖蛋白组分,且具有协同效用。     

金花茶体外抗肿瘤活性及物质基础的初步研究

目的:观察金花茶3种不同萃取部位对5种不同人肿瘤细胞株体外增殖的作用,寻找其活性部位及物质基础。方法:采用噻唑蓝染色法(MTT法),检测金花茶不同萃取部位体外对人胃腺癌细胞株(SGC-7901)、人大细胞肺癌细胞株(H460)、人肝癌细胞株(SMMC-7721和BEL-7404)、人高分化鼻咽癌细胞株(CNE-1)作用48 h后的增殖抑制率,并计算相应的半数生长抑制浓度(IC50),其中,细胞密度分别为:SGC-7901(7×104/mL),H460(4×104/mL),SMMC-7721(6×104/mL),BEL-7404(6×104/mL),CNE-1(4×104/mL),不同提取部位的浓度分别为:正丁醇层(50,100,150,200 mg·L-1)、乙酸乙酯层(50,100,200,300 mg·L-1)、水层(25,50,75,100,150 mg·L-1);采用液质联用方法初步分析水层萃取部分的可能活性成分。结果:金花茶正丁醇、乙酸乙酯、水层部位对5种肿瘤均有抑制作用(P<0.05或P<0.01),且呈现一定的浓度依赖性,各部分对5种肿瘤细胞的抑制作用强弱为:水层>正丁醇层>乙酸乙酯层,水层部位对上述5种细胞株的IC50分别为:81.72,73.47,95.98,73.41,61.25 mg·L-1;水层萃取部分检测到的物质有24个,初步鉴定了其中的11个成分[分别为:(1R,3R,4R,5R)-1,3,4,5-tetrahydroxycyclohexanecarboxylic acid;daucic acid;二羟基-6-甲氧基-四氢-2H-吡喃-3-氧基-四氢-2H-吡喃-3,4,5-三醇;coumaroylquinic acid;1,3,4-tri-O-acetyl-alpha-D-fructofuranosyl,3,6-tri-O-acetyl-alpha-D-glucopyranoside;2S,3aR,4’S,5’S,6R,6’R,7R,7aS)-6,6’-bis[(acetyloxy)methyl]tetrahydro-4H,4’H-spiro[1,3-dioxolo[4,5-c]pyran-2,3’-pyran]-3a,4’,5’,7(6H)-tetrayl tetraacetate;(2S,3R,4R,5R,6S)-2-(2S,3R,4S,5S,6R)-4,5-二羟基-2-(5-羟基-7-甲氧基-2-(4-甲氧苯基)-4-羰基-4H-色烯-6-基)-6-(羟甲基)-四氢-2H-吡喃-3-氧基-4,5-二羟基-6-甲基-四氢-2H-吡喃-3-基乙酸酯;vitexin-7-glucoside;luteolin-7-diglucoside;7-O-β-D-glucopyranosyl-kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside;ilexside II],同时表征了另外13个未鉴定成分的质谱信息。结论:金花茶不同萃取部位体外实验有抗肿瘤活性,水层部分可能是金花茶抗肿瘤作用的主要活性部位;需要进一步对水层部分的这些可能活性物质进行分离纯化鉴定以及定量分析。     

Biological activities of xanthatin from Xanthium strumarium leaves

The objective of the present work was to evaluate the biological activities of the major bioactive compound, xanthatin, and other compounds from Xanthium strumarium (Asteraceae) leaves. Inhibition of bloodstream forms of Trypanosoma brucei brucei and leukaemia HL‐60 cell proliferation was assessed using resazurin as a vital stain. Xanthatin was found to be the major and most active compound against T. b. brucei with an IC₅₀ value of 2.63 µg/mL and a selectivity index of 20. The possible mode of action of xanthatin was further evaluated. Xanthatin showed antiinflammatory activity by inhibiting both PGE₂ synthesis (24% inhibition) and 5‐lipoxygenase activity (92% inhibition) at concentrations of 100 µg/mL and 97 µg/mL, respectively. Xanthatin exhibited weak irreversible inhibition of parasite specific trypanothione reductase. Unlike xanthatin, diminazene aceturate and ethidium bromide showed strong DNA intercalation with IC₅₀ values of 26.04 µg/mL and 44.70 µg/mL, respectively. Substantial induction of caspase 3/7 activity in MIA PaCa‐2 cells was observed after 6 h of treatment with 100 µg/mL of xanthatin. All these data taken together suggest that xanthatin exerts its biological activity by inducing apoptosis and inhibiting both PGE₂ synthesis and 5‐lipoxygenase activity thereby avoiding unwanted inflammation commonly observed in diseases such as trypanosomiasis. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.