白细胞间介素1(IL_1)和白细胞间介素2(IL_2)在人类T克隆形成中的作用

测定 T 克隆的形成对研究 T 细胞分化具有重要意义。作者用 PHA 刺激人外周血淋巴细胞(PBL),研究了 IL_1千日 IL_2对这种活化后的 PBL 形成 T 克隆的作用.实验材料来自健康供血者的PBL。首先制备纯化的T细胞,     

植物凝集素刺激下人外周血淋巴细胞端粒酶催化亚单位(hTERT)表达上调

目的通过测定正常人外周血淋巴细胞中hTERT在植物凝聚素(PHA)刺激前后的表达水平的变化,评估正常人淋巴细胞对PHA刺激的反应能力。方法采集40例正常人外周血,分离淋巴细胞后,一部分在含0.5%PHA的培养液中培养,分别于24h、48h收集细胞,提取总RNA后,用RT-PCR法测定其hTERT合成水平的相对含量。结果淋巴细胞受到PHA刺激前hTERT的表达相对水平为0.575±0.231。刺激后24h、48hhTERT的表达相对水平分别为0.723±0.294,0.931±0.342,刺激后较刺激前明显升高(P<0.01)。结论正常人外周淋巴细胞活化时,hTERT的表达水平随时间延长明显升高。     

肿瘤可溶性抗原实验研究

目的　探讨肿瘤可溶性抗原免疫原性,为肿瘤疫苗的研制和肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法　提取卵巢癌细胞的可溶性成分作为肿瘤可溶性抗原(tumorsolubleantigen,TSA),单独用TSA或联合IL-2,CD-3单抗诱导外周血单个核细胞(PBMC),检测PBMC活化、增殖、分泌细胞因子以及活化的细胞对肿瘤的杀伤特性。结果　TSA能刺激正常人PBMC增殖和分泌细胞因子(TNF,IFN)。用TSA联合IL-2和抗CD3单抗诱导正常人PBMC产生杀瘤性效应细胞,对TSA来源的肿瘤细胞具有选择性杀伤作用,证实TSA具有免疫原性。肿瘤细胞提取物中细胞多肽是主要活性成分,但细胞膜成分也具有免疫活性。结论　用该实验方法提取TSA具有免疫原性,可用于肿瘤疫苗的研制和肿瘤过继免疫治疗,该实验方法和结果可为检测和评价肿瘤提取物是否具有免疫原性提供参考。     

人胚胸腺素(HET)对正常人外周血淋巴细胞转化的影响

用~3H—TdR 掺入法淋巴细胞转化试验表明,0.1ml 不同稀释度的人胚胸腺素(HET)与正常人外周血淋巴细胞(PBL)一起孵育后,10~(-3)(原液含氮量0.23mg/ml)浓度的 HET,无论对正常淋巴细胞转化,还是 PHA 诱导的淋巴细胞转化,都有促进作用。原液对PHA 诱导的淋巴细胞转化具有明显的抑制作用,而对正常淋巴细胞转化没有影响。     

淋巴母细胞分离的简易方法

作者应用Percoll对PHA体外刺激的正常人外周血淋巴细胞活化后的淋巴母细胞进行分离,并用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化技术对纯化后细胞的表型和干扰素-γ(IFN-γ)的表达进行了检测。结果表明:淋巴母细胞收获率约为80％,纯度约达90％。通过对纯化后细胞的各种活化抗原(Tac,A1,T9,Ia)和IFN-γ的表达进行检测表明纯化的细胞主要为淋巴母细胞。本实验所建立的淋巴母细胞分离方法具有母细胞得率高,纯度好和方法简便等优点,为研究某些传染病患者外周血中出现的异型淋巴细胞提供了较理想的分离方法。     

原发性血小板减少性紫癜患者淋巴细胞表型与功能的研究

对25例原发性血小板减少性紫癜(ITP)患者进行了T、B淋巴细胞表型、PAIgG含量、血清干扰素(IFN)浓度与性质及PHA诱生外周血淋巴细胞(PBL)IFN水平的测定,分析了这些指标与血小板数的关系。并设25例正常人对照。结果显示:ITP患者外周血B淋巴细胞百分值与PAIgG值升高,二者与血小板数呈负相关关系;患者外周血CD_4~ 细胞百分值下降,CD_8~ 细胞百分值升高。CD_4~ /CD_8~ 下降,CD_4~ /CD_8~ 与血小板数呈正相关关系;患者血清IFN浓度升高,与血小板数呈负相关关系;PHA刺激患者PBL IFN诱生水平无明显改变。提示淋巴细胞数目与功能异常及免疫细胞调节紊乱在ITP发病中可能起一定作用。     

哮喘儿童外周血淋巴细胞CD21、CD23及血清IgE测定

目的:研究哮喘儿童外周血淋巴细胞CD21、CD23表达与哮喘发病的关系。方法:采用流式细胞分析技术及免疫化学发光法检测48例哮喘发作期儿童和29例哮喘缓解期儿童外周血CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率和血清IgE水平,并以30例健康儿童作对照。结果:哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率及血清IgE水平均高于哮喘缓解组和正常对照组(P<0.05)。哮喘缓解组CD23+淋巴细胞百分率和IgE水平明显高于正常对照组(P<0.05);哮喘发作组CD21+、CD23+、CD21+CD23+淋巴细胞百分率与血清IgE水平呈正相关(r=0.726,0.739,0.714,P均<0.05)。哮喘缓解组和正常对照组上述指标与血清IgE水平不相关。结论:CD21、CD23的表达在哮喘发病过程中发挥重要作用。     

鼻咽癌细胞培养上清对正常人淋巴细胞钙调蛋白、白细胞介素-2、白细胞介素-2受体活性及T淋巴细胞增殖的影响

观察鼻咽癌低分化细胞株(CNE-2)培养上清(CNE-2S)对正常人外周血淋巴细胞(PBL)的作用,结果表明:CNE-2S可明显抑制正常人T淋巴细胞的增殖,白细胞介素-2(IL-2)的产生及钙调蛋白(CaM)的活性。但对IL-2受体活性无明显影响。提示CNE-2S有可能是通过抑制淋巴细胞内CaM的活性,使细胞代谢改变,而阻碍T淋巴细胞增殖。     

用重组白细胞介素2诱导人LAK细胞活性及外周血中LAK前体细胞频率的测定

本文应用人重组IL-2(rIL-2)来诱导正常人外周血淋巴细胞(PBL)的LAK细胞活性,探讨其诱导规律,观察体外抗肿瘤特性,并测定正常人外周血中的LAK前体细胞(LAK-P)的频率,旨在为有关人LAK细胞的实验和临床研究打下基础。观察结果表明,培养中仅添加rIL-2就可诱导出明显的     

特应性皮炎患儿CD23与血清IgE的相关性研究

目的了解特应性皮炎（AD）患儿外周血淋巴细胞CD23与血清IgE的相关关系。方法采用流式细胞术检测56例AD患儿和35例正常儿童外周血淋巴细胞CD23的阳性细胞百分率（percentage of positive cell,PPC）,同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IgE水平,并进行相关性分析。结果两组外周血淋巴细胞CD23的PPC和血清IgE水平差异有统计学意义（P〈0．01）,AD患儿高于正常对照组。进一步分析显示,CD23与血清IgE水平呈显著正相关（r=0．380,P〈0．01）。结论AD患儿CD23和血清IgE水平有明显升高,并且CD23和血清IgE关系密切,可能参与了AD的发生发展过程。     

TRAIL基因在白血病原代细胞中的表达

目的：检测白血病原代细胞和正常人外周血淋巴细胞中TRAIL基因的表达情况，探讨TRAIL凋亡途径在肿瘤免疫中的作用。方法：通过RT-PCR检测TRAIL基因的表达。结果：83％（10/12)淋巴系白血病和80％(16／20)髓系白血病患者TRAIL基因表达阳性，正常人外周血淋巴细胞TRAIL基因表达阴性，IL-2能诱导PBL的TRAIL基因表达。结论：大多数白血病原代细胞TRAIL基因表达阳性，可能在肿瘤的自发坏死和凋亡以及免疫逃逸中发挥作用。另外，活化的T细胞表达TRAIL基因，TRAIL可能参与CD95非依赖性激活诱导的细胞凋亡。     

强直性脊柱炎患者的细胞免疫功能研究

对12例强直性脊柱炎(AS)患者进行外周血淋巴细胞(PBL)亚群、体外培养产生IL-2的能力以及自然杀伤(NK)细胞活性测定。结果表明,AS患者PBLT_4、T_8阳性细胞百分率及T_4/T_8比值与正常人相比无显著差异;PBL体外培养产生的IL-2明显增多,但细胞膜IL-2受体表达无明显增多;NK细胞活性明显降低,且对IL-2刺激无反应。本结果提示,AS患者存在明显的细胞免疫功能紊乱,并在导致体液免疫异常中起重要作用。     

SLE病人外周血淋巴细胞早期凋亡状态的检测

①目的　探讨淋巴细胞凋亡在系统性红斑狼疮 (SLE)发病机制中的作用。②方法　应用AnnexinⅤ试剂盒及流式细胞仪 (FCM)对SLE病人及正常人外周血淋巴细胞 (PBL)进行早期凋亡状态的检测 ,并采用免疫比浊法检测SLE病人补体C3含量。③结果　SLE活动期病人PBL早期凋亡率明显高于稳定期病人及正常人 (F =3 6.68,q =3 .17、3 .63 ,P <0 .0 1) ;稳定期病人与正常人相比无显著性差异 ( q =0 .15 ,P >0 .0 5 ) ;活动期病人中初发病组与已用糖皮质激素或免疫抑制剂治疗组相比无差异 (t=0 .2 1,P >0 .0 5 )。活动期病人PBL凋亡率与补体C3含量呈高度负相关 (r =- 0 .85 9,P <0 .0 1)。④结论　SLE病人外周血大量凋亡淋巴细胞可能通过释放过量自身抗原的方式诱导一系列自身抗体的产生 ,从而参与SLE发生     

大鼠脾内微量免疫法制备sIL-2R抗血清

将少量可溶性白细胞介素-2受体(Soluble interleukin 2 receptor,sIL-2R)吸附于葡聚糖Sephadex G-75和硝酸纤维薄膜,分别对两只大鼠进行脾内免疫,由此获得大鼠抗SIL-2R的多克隆抗体,此抗体对激活正常人外周血淋巴细胞的增殖、淋巴细胞转化具有抑制作用。     

乳腺癌患者外周血与肿瘤浸润淋巴细胞Fas表达的意义

目的　探讨 Fas受体与配体参与肿瘤与机体免疫系统相互作用的机制 .方法　用流式细胞仪对 2 1例乳腺癌患者外周血淋巴细胞 (PBL )与肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL )的 Fas分子进行定性及定量分析 .结果　乳腺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞的 Fas分子表达率为 0 .1 56,乳腺癌患者外周血淋巴细胞Fas分子表达率 0 .0 6,正常人外周血淋巴细胞 Fas分子表达率为 0 .1 1 4 ,前者明显高于后二者 (P<0 .0 5) ;乳腺癌患者外周血淋巴细胞的 Fas分子表达明显低于正常人外周血淋巴细胞 (P<0 .0 5) .结论　 Fas分子在乳腺癌患者外周血淋巴细胞与肿瘤浸润淋巴细胞的不同分布说明 :Fas不仅在肿瘤浸润区域 ,而且在全身参与了免疫系统与肿瘤的相互斗争     

PHA激活的人外周血单个核细胞对丝裂原应答反应的特性

我们用植物血凝素(PHA)体外激活正常人外周血单个核细胞(PBMC)作应答细胞,研究丝裂原再刺激时淋巴细胞增生反应和分泌功能的变化。PHA激活3～6d的PBMC对丝裂原再刺激的应答反应与初刺激的应答相比,结果显示:①对PHA再刺激的增生反应强度变化很大,从明显高于到显著低于初次反应,决定于激活的淋巴细胞在体外休止时间的长短;②再次激活的淋巴细胞产生白细胞介素2(IL-2)的量显著高于初次激活的淋巴细胞,尤以体止1d的细胞为最高;③再次激活的淋巴细胞中膜IL-2受体(mIL-2R),又称Tac阳性细胞百分率显著降低和培养上清液中可溶性IL-2受体(sIL-2R)含量明显增高;④美州商陆有丝分裂原(PWM)不能诱导已激活的PBMC分泌IgG。     

胃泌素拮抗剂和活化T淋巴细胞联合应用对结肠癌细胞的杀伤作用

目的:探讨联合应用胃泌素拮抗剂和CD28/CD80单克隆抗体共刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的杀伤作用.方法:分离与体外培养外周血PBLs,并用CD28/CD80共刺激活化PBLs;用含活化的PBLs和(或)胃泌素拮抗剂CI-988的RPMI 1640培养基培养HT-29细胞.MTT法检测2者对HT-29细胞的杀伤率,并用电镜观察效应细胞杀伤结肠癌细胞株HT-29的超微结构及HT-29细胞的凋亡情况.结果:胃泌素拮抗剂与活化PBLs合用,对结肠癌细胞株HT-29的杀伤率((95.81±1.99)%)大于单用胃泌素拮抗剂((66.36±1.31)%)(P＜0.05).电镜结果显示,效应细胞作用12 h肿瘤细胞就发生部分坏死,部分肿瘤细胞可见凋亡.结论:联合应用活化的PBLs和胃泌素拮抗剂CI-988可以提高对结肠癌细胞株HT-29 杀伤作用.活化的淋巴细胞杀伤结肠癌细胞可能是通过诱导肿瘤细胞坏死及凋亡2条途径来实现.     

结核杆菌抗原活化的γδT细胞的抗肿瘤活性

目的：探讨经结核杆菌抗原特异性活化的γδＴ细胞的抗肿瘤活性。方法：结核杆菌抗原（Ｍｔｂ－Ａｇ）、ＩＬ－２、ＰＨＡ做为刺激原,活化正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,用流式细胞仪分析活化后淋巴细胞的表型,用ＭＴＴ法测定活化淋巴细胞的杀伤活性。结果：Ｍｔｂ体外活化ＰＢＭＣ可于１８天获得大量淋巴细胞,且γδＴ细胞占有较高比例,对肿瘤细胞有较高杀伤活性。结论：用Ｍｔｂ为刺激原可获得大量γδＴ细胞,且在体外     

人外周血淋巴细胞化学发光的研究(Ⅰ)检测方法的建立

本文采用正交试验设计优选ConA 诱导的人外周血淋巴细胞化学发光(PBL—CL)测定体系中PBL、Luminol 及ConA 等三个主要因素的最佳组合。结果表明,PBL—CL 测定的最优实验条件为:0.5ml PBL 悬液(1×10~6/ml)、0.2ml Luminol 溶液(5×10~(-4)M)及0.2ml ConA 溶液(500μg/ml),反应液总量为1.0m。PBL—CL 测定是一种简便、怏速、敏感的检测淋巴细胞早期活化及功能的新方法。     

乳腺癌患者免疫功能的检测分析

笔者对23例乳腺癌患者及37例正常人的外周血T淋巴细胞亚群、淋巴细胞总数、淋巴细胞增殖试验及白细胞介素-2(IL-2)活性进行检测.结果表明,乳腺癌患者与正常人的各项指标均有显著性差异(P<0.01),反映了乳腺癌患者的自身免疫功能明显低于正常人.