过量氟对小鼠睾丸中骨钙素表达的影响

目的:观察过量氟对小鼠睾丸中骨钙素(OCN)的影响及睾酮(T)水平的变化。方法:选取24只C57 black 6J(C57BL/6J)雄性小鼠,随机分为两组(正常组12只,氟干预组12只),正常组饮用蒸馏水,氟干预组饮用100 mg/L氟化钠溶液,自由饮用3个月,制备氟中毒模型,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP),定位检测小鼠睾丸组织中OCN的表达采用酶联免疫吸附法(ELISA),检测血清中OCN及T水平的变化。结果:氟干预组小鼠血清中OCN水平明显高于对照组(F=11.901,P=0.008),氟干预组小鼠T分泌量明显低于对照组睾酮(F=2.313,P=0.006),免疫组化结果显示氟干预组OCN表达在细胞膜和细胞质,且阳性表达强于对照组。结论:饮用100 mg/L含氟水3个月能够导致雄性小鼠的T降低,睾丸中OCN水平表达升高。     

高脂饮食诱导C57BL/6小鼠睾丸微血管损伤导致非感染性睾丸炎症反应

目的探讨高脂饮食诱导雄性C57BL/6小鼠睾丸微血管损伤与高脂诱导的睾丸非感染性炎症反应的关系。方法雄性C57BL/6小鼠,完全随机法分为高脂组(high fat diet,HFD,n=20)和对照组(control,n=20)。对照组普通喂养,高脂组小鼠高脂饮食喂养,共喂养20周,每周检测体质量及血糖。激光多普勒血流灌注监测系统检测两组小鼠睾丸微血管血流灌注量。HE染色观察生精细胞及睾丸微血管形态学变化;免疫组化法检测睾丸微血管内皮细胞CD31、炎症因子TNFα及巨噬细胞特异性标志物F4/80的表达水平;ELISA法检测血清及睾丸组织匀浆中炎症因子TNFα和MCP-1的含量;TUNEL染色法检测小鼠睾丸生精细胞凋亡水平。结果高脂组小鼠体质量及血糖水平均显著增加与对照组比较,差异具统计学意义(P0.01);睾丸微血管平均血流灌注水平显著低于对照组(P0.001);HE染色显示高脂组小鼠成熟生精细胞减少,睾丸间质膨大,结构松散;高脂组睾丸微血管CD31表达低于对照组(P0.05),TNFα及F4/80表达水平高于对照组(P0.01);TNFα和MCP-1在血及睾丸蛋白中的表达量显著高于对照组(P0.001);TUNEL染色结果显示生精细胞凋亡水平高于对照组(P0.01)。结论高脂饮食诱导C57BL/6小鼠血糖增高致睾丸微血管损伤并发非感染性睾丸炎症反应。     

磷酸甘油酸变位酶1在单次热应激小鼠睾丸中的表达变化

目的:探讨磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)在单次热应激致小鼠睾丸中的表达变化。方法:C57雄性小鼠32只,随机分为对照组(n=16)和热应激组(n=16)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别置于43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7 d取睾丸组织。HE检测睾丸组织细胞形态改变,免疫组化染色检测PGAM1蛋白定位及表达,Western印迹检测PGAM1蛋白表达水平。结果:HE结果显示,在热应激后小鼠睾丸体积显著减小,生精小管结构紊乱,细胞数量减少,第7天后细胞基本消失。免疫组化显示,PGAM1蛋白在睾丸生精小管广泛表达,热应激1天后睾丸组织中PGAM1的表达显著高于对照组,第7天睾丸组织中PGAM1表达较第1天下调,但仍显著高于对照组。Western印迹检测显示,与对照组相比,热应激后PGAM1蛋白表达明显增加。结论:小鼠睾丸热应激处理后PGAM1蛋白表达量在睾丸中出现动态变化,这种变化与热应激后睾丸生精细胞的增殖分裂相关。     

大黄总蒽醌含药血清对NRK细胞AQP2与AQP4表达的调节效应

目的：探讨大黄总蒽醌含药血清对体外培养NRK细胞水通道蛋白2（AOP2）、水通道蛋白4（AOP4）表达的调节效应。方法：16只SD大鼠随机分为正常组、大黄总蒽醌低、中、高剂量组（0,1400,2500,4500mg·kg^-1·d^-1灌胃）,7d后麻醉处死取血制备含药血清。体外培养NRK细胞并给予不同浓度大黄含药血清培养液24h处理,采用免疫荧光检测AQP2、AQP4的定位,Westem blot及半定量RT—FCR检测AQP2、AQP4蛋白及mRNA的表达。结果：AOP2、AQP4主要表达在NRK细胞膜上,2500,4500mg·kg^-14·d^-1大黄总蒽醌含药血清培养液可抑制NRK细胞的AQP2、AQP4蛋白及mRNA的表达,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：大黄总蒽醌含药血清可抑制NRK细胞AQP2、AQP4基因转录与翻译,提示犬黄的利尿作用可能与调节AQP2、AQP4表达有关。     

单次热应激处理对小鼠睾丸生精细胞的影响

目的:探讨单次热应激对小鼠睾丸生精功能可复性研究。方法:C57雄性小鼠36只,随机按1、7、14 d各分为对照组(n=6)和热应激组(n=6)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别在43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取材。计算睾丸器官指数,HE染色观察睾丸组织结构变化,免疫组化染色检测早幼粒白血病锌指蛋白(PLZF)和联会复合体蛋白3(SCP-3)在睾丸组织中的定位及表达,Western印迹检测PLZF蛋白表达水平。结果:热应激组小鼠睾丸器官指数明显低于对照组(P0.01)。HE染色可见,热应激组与对照组相比,热应激后第1天生精细胞排列松散,散落在生精小管中;第7天生精小管萎缩,排列疏松,生精细胞明显减少;第14天生精小管排列较为紧密,生精细胞数量增加,生精细胞层数增多。与对照组相比第1、7天热应激组SCP-3标记的精母细胞明显减少,第14天精母细胞数量开始恢复。Western印迹检测结果显示,PLZF蛋白在热应激处理后1 d表达量显著降低(0.19±0.02 vs 0.64±0.03,P0.01),第7、14天又迅速增加(0.77±0.02、0.77±0.02),且显著高于对照组(P0.01)。结论:小鼠睾丸热应激处理后可致生精功能发生障碍,随着时间的推移,这种损伤具有可复性。     

pH2AX蛋白在单次热应激致小鼠睾丸生殖功能可逆性中的表达变化

目的:探讨pH2AX在单次热应激致小鼠睾丸生殖功能可逆性中的表达变化。方法:C57雄性小鼠24只,随机按1、7、14 d分为对照组(n=6)和热应激组(n=6)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别置于43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取睾丸组织。TUNEL检测睾丸细胞凋亡情况,免疫组化染色检测pH2AX蛋白定位及表达,Western印迹检测pH2AX蛋白表达水平。结果:TUNEL结果显示,在热应激后的第1天生精小管中的凋亡细胞数量最多,第7、14天细胞凋亡基本消失。免疫组化显示,pH2AX蛋白在睾丸生精小管基底膜处细胞核表达。Western印迹检测显示,与对照组相比,热应激后的第1天,pH2AX蛋白表达明显增加(0.47±0.02 vs 1.61±0.04,P0.01);第7天(0.85±0.03)与热应激处理第1天相比pH2AX蛋白表达显著减少(P0.01);第14天(1.72±0.02)与热应激处理第1、7天及对照组相比pH2AX蛋白表达显著增加(P均0.01)。结论:小鼠睾丸热应激处理后pH2AX蛋白表达量在睾丸中出现动态变化,这种变化与热应激后睾丸生精细胞的增殖分裂相关。     

绿色荧光蛋白和大鼠睾丸AQP7融合蛋白表达载体构建及其表达

目的 :构建真核表达的pEGFP C1与大鼠睾丸AQP7的融合蛋白表达载体。　方法 :RT PCR的方法扩增Wistar大鼠睾丸AQP7cDNA编码区全长序列 ,测序鉴定 ,将AQP7cDNA融合于pEGFP C1基因的下游。以脂质体转染方法将pEGFP C1 AQP7融合蛋白转入中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞 ,应用免疫细胞化学方法和Western印迹技术对转染细胞株进行鉴定。　结果 :①Wistar大鼠AQP7cDNA序列登录到GenBank ,登录号 :AY15 7737;②通过鉴定证明CHO细胞已经稳定表达了pEGFP C1 AQP7融合蛋白 ,其相对分子质量为 5 30 0 0 ;③绿色荧光蛋白作为标记物观察到AQP7在CHO细胞的定位。　结论 :稳定表达pEGFP C1 AQP7融合蛋白的CHO细胞株的建立 ,为AQP7在细胞内定位与功能研究奠定了基础。     

高温热应激构建小鼠精原干细胞移植受体模型

目的:探讨高温热应激方法构建小鼠精原干细胞(SSCs)移植受体的可行性。方法:将4周龄的C57BL/6雄鼠和B6(Cg)-Tyrc-2J/J毛色基因纯合突变雄鼠置于恒温箱内,43℃热应激处理1 h,通过HE染色、免疫组化染色和TUNEL凋亡检测,寻找最佳移植时间;随后将SSCs移植入小鼠生精小管,定期观察移植后受体小鼠睾丸内SSCs增殖、分化及形成精子的情况,并将受体小鼠与正常同周龄雌鼠交配,观察其后代表观遗传学特征。结果:高温热应激3～5 d后受体小鼠睾丸生精小管内生精细胞层数减少,排列紊乱、疏松且大量缺失,间质细胞数量明显减少,生精细胞凋亡明显,自噬水平升高,12 d左右基本恢复。在分离纯化后的SSCs移植8周后,受体小鼠睾丸生精小管内分化形成生精细胞及具有遗传功能的精子,经过自然交配产生正常的后代。结论:高温热应激方法可快速、高效构建小鼠精原干细胞移植受体模型。     

JQ1对脂多糖所致小鼠生精功能障碍的影响

目的 探讨JQ1对脂多糖(LPS)所致小鼠生精功能障碍的影响及相关机制。方法 40只8周龄雄性C57BL/6J小鼠，随机分为溶媒对照组(DMSO+NS)、模型组(DMSO+LPS)和药物干预组(JQ1+LPS),每组小鼠的数量分别为n=13、n=15和n=12,单次腹腔注射LPS诱导炎症动物模型。取材后，称量睾丸、附睾尾的重量，采用精子计数法检测小鼠精子数量，伊红染色检测精子的畸形率，苏木精-伊红(HE)染色检测睾丸形态变化；TUNEL试剂盒检测睾丸生殖细胞凋亡情况；Western blot检测凋亡基因(Bax和Bcl2)的表达情况；生化试剂盒检测睾丸丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)表达情况。结果 LPS导致小鼠附睾尾重量显著下降(P<0.05),精子数量显著下降(P<0.001);精子畸形率显著升高(P<0.01);睾丸形态结构破坏，生精小管萎缩，管腔直径变小，各级生精细胞排列紊乱，管腔内精子数量减少；睾丸中凋亡细胞数量显著上调(P<0.01);Bax/Bcl2的比值显著上升(P<0.01);MDA含量显著增加(P<...     

AQP1在骨巨细胞瘤中的表达和意义

目的研究水通道蛋白1（aquaporin 1,AQP1）在骨巨细胞瘤中的分布及在骨巨细胞瘤组和对照组中的表达差别,并确定AQP1在骨巨细胞瘤各级中的表达差别,从而确定AQP1在骨巨细胞瘤中的作用。方法对42例骨巨细胞瘤标本和24例对照组标本,采用免疫组织化学方法,镜下观察AQP1在组织中的分布,应用自动图像分析检测AQP1在两组中表达情况。结果a）本免疫组化染色显示：AQP1表达于所有标本的肿瘤微血管和小血管内皮细胞上;AQP1表达于大多数骨巨细胞瘤的肿瘤细胞上,AQP1在对照组中无表达或表达很微弱;b）自动图像分析系统所得平均光密度在两组中差别显著（P〈0.01）,AQP1在骨巨细胞瘤中高表达;c）AQP1的表达在骨巨细胞瘤级和骨巨细胞瘤级差别显著（P〈0.01）,而AQP1的表达在骨巨细胞瘤其他各级之间无差别（P〉0.05）。结论大多数骨巨细胞瘤的肿瘤细胞高表达AQP1的原因不明;AQP1在骨巨细胞瘤中高表达,预示其在骨巨细胞瘤的生物学行为中的作用;AQP1的表达在骨巨细胞瘤级和骨巨细胞瘤级差别显著,提示AQP1可能有区分骨巨细胞瘤级和骨巨细胞瘤级的作用。     

自噬在镉致小鼠睾丸血-睾屏障损伤中的作用

目的:探究自噬在氯化镉致小鼠睾丸血-睾屏障(BTB)损伤中的作用。方法:将20只4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组[0 mg/(kg·d)]、低剂量组[0.5 mg/(kg·d)]、中剂量组[1.0 mg/(kg·d)]和高剂量组[2.0 mg/(kg·d)],腹腔注射氯化镉，连续28 d。采用HE染色法分析睾丸组织形态学变化，生物示踪法观察BTB的完整性，Western印迹检测BTB组分ZO-1和N-Cadherin蛋白的表达。采用0、2.5、5和10μmol/L CdCl₂处理睾丸支持细胞株(TM4细胞)24 h, Western印迹检测ZO-1和N-Cadherin蛋白，以及自噬相关蛋白LC3II和p62的变化情况。在含CdCl₂(10μmol/L)的细胞培养液中分别加入自噬抑制剂氯喹(CQ)(5μmol/L)或自噬激动剂雷帕霉素(Rap)(50 nmol/L)处理细胞24 h, Western印迹检测LC3II、p62、ZO-1和N-Cadherin蛋白表达。结果:与对照组小鼠相比，镉染毒组小鼠的生精小管间隙增大、生精细胞内空...     

SET在不同发育阶段小鼠睾丸的表达及其功能

SET蛋白是一个多功能蛋白，在调节包括DNA复制、核小体装配、染色体修饰、DNA转录、细胞周期、细胞凋亡等细胞生物学过程中起重要作用。前期研究发现，SET在卵巢中调节雄激素合成。然而，SET在睾丸组织中的表达及其功能仍然不明确。在此，我们检测不同年龄段小鼠睾丸组织中SET表达，探讨其在精子发生及睾酮生成方面的潜在功能。48只不同年龄段的雄性小鼠（1周龄的ICR雄性小鼠作为幼年期组，4周龄小鼠作为性发育前组，12周龄小鼠作为性成熟期组，12月龄作为老年组）。免疫组织化学方法观察SET各年龄段小鼠的定位表达；qRT-PCR和Western Blot分别检测睾丸中SET mRNA和蛋白水平表达。SET表达定位于生精小管中的精原细胞、精母细胞，在青春期前及成熟期的单倍体和四倍体生殖细胞中高表达；成熟期及老年期的睾丸间质细胞中也有SET的表达；支持细胞中很少量表达。青春期前SET的mRNA与成熟期相比表达量最高（P〈0．05），而SET蛋白在性成熟期小鼠睾丸中表达最高（P〈O．05）。SET主要表达于精原细胞和精母细胞，少量表达于支持细胞，表明SET可能与精子发生有关。SET还表达于睾丸间质细胞，则与睾酮生成有关。     

乌司他丁对单肺通气患者血浆IL-8、IL-10及肺AQP1、AQP4的影响

目的观察肺癌根治术患者单肺通气(OLV)时白细胞介素(IL)-8、IL-10及肺水通道蛋白(AQP)1、AQP4的变化及乌司他丁对其影响。方法择期行肺癌根治术,且术中OLV2h患者30例,ASA Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法,将患者随机均分为三组。OLV前10min A、B组分别泵注乌司他丁5 000U/kg及10 000U/kg,用生理盐水稀释至20ml;C组泵注生理盐水20ml,10min泵完。于麻醉诱导后给药前1min(T1)、OLV 30min(T2)、60min(T3)、90min(T4)、120min(T5)和恢复双肺通气(TLV)30min(T6)时抽取桡动脉血行IL-8、IL-10浓度测定,以及于开胸OLV时、肺叶离体时取肺组织测定肺AQP1、AQP4表达。结果与T1时比较,三组T4～T6时IL-8浓度、T2～T6时IL-10浓度明显升高(P0.05)。与C组比较,A、B组T3、T4时IL-8浓度明显降低、T2～T5时IL-10浓度明显升高(P0.05)。与B组比较,A组T4、T5时IL-8浓度明显升高、而T3～T5时IL-10浓度明显降低(P0.05)。与开胸OLV时比较,肺叶离体时A组和C组肺组织AQP1表达和C组AQP4表达明显降低(P0.05)。与C组比较,肺叶离体时B组肺组织AQP1表达和A、B组肺组织AQP4表达明显升高 (P0.05)。与B组比较,肺叶离体时A组肺组织AQP1表达明显降低(P0.05)。结论乌司他丁能降低IL-8浓度,升高IL-10的浓度,促使AQP1、AQP4的表达增强,且呈剂量依赖性。从而表明了乌司他丁对单肺通气所致的肺损伤有保护作用。     

小鼠无精子症动物模型的构建

目的:建立一种稳定的小鼠无精子症动物模型。方法:60只清洁级C5BL/6小鼠,分为化疗组(1次性腹腔注射白消安10mg/kg体重、环磷酰胺120mg/kg体重)、激素组(每日皮下注射苯甲酸雌二醇40mg/kg,连续注射15d),每组30只。注射后4、12、20周,观察小鼠睾丸生精小管结构的变化以及终止干预后生精功能恢复的情况。结果:化疗组化疗后第4周,睾丸生精小管内精子及精子细胞消失,20周时仍保持无生精状态;激素组连续注射苯甲酸雌二醇后第4周,生精小管内精子及精子细胞消失,但20周时部分生精小管内可以找到精子细胞和精子。化疗组小鼠睾丸重量明显低于激素组(P<0.05)。结论:经过化疗处理的小鼠无精子症模型稳定,雌二醇皮下注射的无精子症模型形成慢而不稳定。相对于雌激素注射方法,化疗是构建小鼠无精子症动物模型比较可靠的方法。     

精索静脉曲张大鼠睾丸AQP7mRNA表达与组织学变化的研究

不全结扎大鼠左肾静脉诱发左侧精索静脉曲张,观察精索静脉曲张对ＡＱＰ７ｍＲＮＡ表达的影响以及睾丸结构和功能的变化。结果显示：（１）与对照线相比,精索静脉曲张组大鼠左侧睾丸ＡＱＰ７ｍＲＮＡ的表达强度减弱,而右侧睾丸ＡＱＰ７ｍＲＮＡ的表达强度则明显增强。（２）精索静脉曲张组大鼠睾丸曲细精管轻中度萎缩,细胞层次减少,生精细胞脱落,间质水肿。左侧睾丸的损害性变化较右侧严重;（３）精索静脉曲张大鼠睾丸ＡＱＰ７的表达减弱可能意味着在精子成熟的晚期,水代谢的变化可能成为精子成熟障碍。精细胞脱落的原因之一。右侧睾丸水通道表达增强可能是一种代偿反应,这种变化或许为精索静脉曲张治疗后生精功能的恢复提供可能。     

睾丸肿瘤的病因、分类及诊断

睾丸既是男性的生殖腺，又具有内分泌功能。睾丸由生精小管及其周围的间质组成。生精小管内衬生精上皮，由不同发育阶段的生殖细胞和支持细胞组成。间质中有血管、巨噬细胞、肥大细胞及间质细胞。睾丸的生精功能和产生雄激素的功能受到垂体促性腺激素的调控。促滤泡激素（FSH）促使睾丸生成精于，促黄体激素（LH）促使睾丸合成雄激素。而FSH发挥效应的靶细胞即睾丸的支持细胞，LH的靶细胞是睾丸间质中的间质细胞。睾丸生殖细胞肿瘤是源于生精小管中的一些异形细胞，其属全能的未分化细胞，可以发展为复杂的多样化的肿瘤。因此，睾丸肿瘤…     

不同单肺通气时间对大鼠肺组织中水通道蛋白1、4表达的影响

目的研究不同单肺通气(OLV)时间对大鼠肺组织水通道蛋白1、4(AQP1、AQP4)表达的影响,探讨AQP1、AQP4与OLV致急性肺损伤的关系。方法将30只SD大鼠随机均分成五组,实验组(OLV1、OLV2、OLV3、OLV4组)麻醉后使用小动物呼吸机行机械通气,对照组(C组)行双肺通气,实验组采用插管过深法将气管导管插入右肺,分别行右肺OLV 0.5h(OLV1组)、1h(OLV2组)、2h(OLV3组)、4h(OLV4组),确定左肺萎陷。实验结束后取左下肺组织,采用实时定量PCR测定各组大鼠AQP1、AQP4 mRNA表达,免疫组化观察AQP1、AQP4蛋白表达。结果 OLV4组AQP1 mRNA的表达明显低于C组(P<0.01)。肺组织免疫组化观察到随着OLV时间的延长,AQP1蛋白表达逐渐减少,OLV3和OLV4组明显低于C组(P<0.01),五组AQP4 mRNA表达和AQP4蛋白差异无统计学意义。结论长时间的OLV后,AQP1在调节肺内液体平衡中起到明显作用,可能参与了OLV致急性肺损伤的发病过程,而AQP4与其无明显关系。     

JMY蛋白在小鼠睾丸中的定位和作用研究

目的研究JMY蛋白在小鼠睾丸组织中的表达与定位,探索JMY在小鼠生精上皮中的功能。方法通过免疫荧光技术和免疫印迹技术确定JMY在小鼠睾丸中的表达和定位情况。随后,分别建立支持细胞和原始生殖细胞特异性的Jmy条件基因敲除小鼠模型,并利用形态学分析、生殖能力评估和血睾屏障功能分析探索JMY缺失对精子发生的影响。结果 JMY在睾丸支持细胞和精子细胞表达。支持细胞特异性的Jmy条件基因敲除可导致雄鼠生育力、精子运动力和精子数量显著下降(P0.05),且生精小管中细胞排列紊乱,生精细胞大量脱落,血睾屏障完整性受损;另一方面,原始生殖细胞特异性的Jmy条件基因敲除雄鼠与野生型小鼠相比,其生育力、精子质量、睾丸结构无显著差异。结论在生精小管支持细胞中,JMY参与维持血睾屏障功能,进而对生精上皮结构和精子发生具有重要作用。     

烫伤早期脑水肿家兔脑组织水通道蛋白4表达与磁共振成像结果相关性研究

目的 观察水通道蛋白4(AQP4)在严重烫伤早期合并脑水肿家兔脑组织中的表达规律以及与磁共振成像(MRI)信号变化的联系,探讨严重烫伤早期脑水肿水的跨膜转运特征. 方法 将35只健康新西兰大白兔按照随机数字表法分为正常对照组(5只)及烫伤组(30只),其中烫伤组家兔均造成50％TBSAⅢ度烫伤(经病理切片证实存在脑水肿).伤后1、2 3、4、5、6h,烫伤组家兔(每时相点5只)行MRI颅脑检查并动态检测表观弥散系数(ADC)值；烫伤组家兔取额叶、顳叶及顶叶皮质,基底节区及小脑组织,采用免疫组织化学法及RT-PCR分别检测AQP4蛋白和AQP4 mRNA的表达.正常对照组家兔同上进行检测.对数据进行单因素方差分析,对AQP4蛋白与ADC值进行一元线性相关分析和Pearson线性相关分析. 结果 与正常对照组比较,伤后6h内烫伤组家兔MRI图像(T1加权像、T2加权像、扩散加权成像)未见明显改变,伤后4～6 h烫伤组家兔脑组织各部位中ADC值均明显降低(F值为0.492～2 271,P值均小于0.05).烫伤组家兔伤后2～6 h脑组织各部位中AQP4蛋白表达趋势大体一致,均明显高于正常对照组(0.164±0.022 -0.247±0.018),其中伤后3 h或4 h达高峰(0.237±0.042-0.306±0.026),F值为2.420～11.439,P值均小于0.05.AQP4蛋白在脑组织各部位的表达均与相应ADC值变化呈显著负相关,其r值为-0.489 - -0.337P ＜0.05或P ＜0.01.烫伤组家兔伤后各时相点脑组织各部位中AQP4 mRNA表达均明显高于正常对照组(F值为39.992～238.584,P值均小于0.05),伤后2h达高峰,且在脑组织各部位表达趋势大体一致. 结论 家兔严重烫伤后早期脑水肿(伤后6h以内)以细胞毒性脑水肿为主,AQP4可能在其形成过程中发挥重要作用.ADC值对于反映AQP4变化,进而无创、便捷评估脑水肿发展状况可能具有重要参考价值.     

苯甲酸雌二醇诱导不育小鼠睾丸中生精细胞增殖紊乱的研究

目的:探讨外源性雌激素苯甲酸雌二醇(EB)对诱导雄性不育小鼠中生精细胞增殖紊乱的影响。方法:60只雄性昆明小鼠随机分为3组,对照组肌肉注射150μl玉米油,EB处理组注射浓度分别为5、10 mg/kg的EB,隔天1次,持续4周。实验结束后取睾丸称其质量并计算睾丸指数;睾丸、附睾尾常规石蜡切片,HE染色;附睾尾制备精子悬液进行精子计数;免疫组化检测睾丸PCNA表达;qRT-PCR分析睾丸细胞周期蛋白A1、细胞周期蛋白B1、VASA、p53的表达变化;Western印迹检测p53及磷酸化p53蛋白表达。结果:与对照组相比,EB处理组小鼠睾丸指数显著下降[(0.56±0.09)%vs(0.43±0.08)%、(0.38±0.10)%,P0.05],精子悬液镜下观察未见精子,HE染色附睾管内未见精子;生精小管中精原细胞、初级精母细胞及支持细胞数量显著下降(P0.05)。免疫组化结果显示,与对照组相比,EB处理组生精小管中细胞PCNA阳性表达细胞数量显著下降(P0.05)。qRTPCR结果表明EB处理组PCNA、细胞周期蛋白A1、细胞周期蛋白B1、VASA mRNA表达与对照组相比显著下降(P0.05);p53表达随EB剂量升高而显著升高(P0.05)。Western印迹结果显示,与对照组相比,EB处理组p53及磷酸化p53蛋白表达水平显著升高,且存在剂量依赖效应,10 mg/kg组显著高于5 mg/kg组(P0.05)。结论:EB以剂量依赖的方式下调细胞周期相关因子表达抑制生精细胞的增殖,是导致雄性不育小鼠睾丸中生精细胞增殖紊乱的重要原因。