玻璃化冷冻对乳鼠卵巢Dnmt1和Grb10的影响研究

目的探索玻璃化冷冻对乳鼠卵巢Dnmt1和Grb10 mRNA和蛋白表达的影响。方法 26只出生10 d的C57BL/6雌性小鼠,每只乳鼠双侧卵巢均分成新鲜组和玻璃化冷冻组。免疫组织化学法检测Dnmt1蛋白在玻璃化冻融前、后卵巢组织卵泡中的表达变化;通过qRT-PCR检测Dnmt1和Grb10 mRNA在玻璃化冻融前、后卵巢组织中的表达变化;通过Western blotting方法检测Dnmt1和Grb10蛋白在玻璃化冻融前后卵巢组织中的表达变化。结果 Dnmt1在玻璃化冻融前、后的乳鼠卵巢组织各级卵泡的颗粒细胞及卵母细胞胞核表达。与新鲜组相比,玻璃化冷冻组卵巢内Dnmt1蛋白和mRNA表达水平均显著下调(P0.05);Grb10蛋白和mRNA表达水平均显著上调(P0.05)。结论玻璃化冷冻复苏过程导致卵巢内Dnmt1表达降低,使印记基因Grb10过表达,可能使配子糖代谢性表观遗传信息紊乱的的风险增加。     

RHO/ROCK信号通路在精子抗冷冻损伤中的作用

目的:探讨RHO/ROCK信号通路在人精子抗冷冻损伤中的作用,为高效精液冷冻保护剂的研制提供理论依据。方法:选取健康精液25份,每份精液分为新鲜组、对照组与RHO通路抑制剂组(抑制剂组)。检测冷冻前后各组精液精子活力、精子存活率、精子膜完整率、正常形态精子百分率、精子DNA碎片指数(DFI)、精子顶体酶活性及精子线粒体膜电位变化;免疫荧光染色检测RHOa/ROCK蛋白在精子中的表达。结果:抑制剂组精液冷冻复苏后精子活力[(57.50±6.83)%vs(51.20±7.70)%,P=0.002]、精子存活率[(60.24±5.53)%vs(52.87±5.07)%,P=0.001]、精子膜完整率[(67.10±4.43)%vs(59.78±5.56)%,P=0.001]、正常形态精子百分率[(7.46±1.28)%vs(4.83±1.11)%,P=0.001]、精子DFI[(18.87±4.07)%vs(27.64±6.64)%,P=0.001]、精子线粒体膜电位(63.11±2.97 vs 56.30±4.28,P=0.001)指标均明显优于对照组;抑制剂组冷冻后精子顶体酶活性与对照组差异无统计学意义(98.30±11.33 vs 97.65±9.31,P0.05)。免疫荧光染色显示RHOa/ROCK蛋白在精子头、颈部广泛表达。结论:RHO/ROCK信号通路在精子冷冻损伤中具有一定作用,抑制其通路活性可明显提高精子抗冷冻损伤的能力。     

高温热应激构建小鼠精原干细胞移植受体模型

目的:探讨高温热应激方法构建小鼠精原干细胞(SSCs)移植受体的可行性。方法:将4周龄的C57BL/6雄鼠和B6(Cg)-Tyrc-2J/J毛色基因纯合突变雄鼠置于恒温箱内,43℃热应激处理1 h,通过HE染色、免疫组化染色和TUNEL凋亡检测,寻找最佳移植时间;随后将SSCs移植入小鼠生精小管,定期观察移植后受体小鼠睾丸内SSCs增殖、分化及形成精子的情况,并将受体小鼠与正常同周龄雌鼠交配,观察其后代表观遗传学特征。结果:高温热应激3～5 d后受体小鼠睾丸生精小管内生精细胞层数减少,排列紊乱、疏松且大量缺失,间质细胞数量明显减少,生精细胞凋亡明显,自噬水平升高,12 d左右基本恢复。在分离纯化后的SSCs移植8周后,受体小鼠睾丸生精小管内分化形成生精细胞及具有遗传功能的精子,经过自然交配产生正常的后代。结论:高温热应激方法可快速、高效构建小鼠精原干细胞移植受体模型。     

超声引导下经皮肾镜碎石术治疗肾结石

目的探讨治疗肾结石的有效方法。方法采用超声引导下标准通道经皮肾镜碎石术治疗肾结石180例,对其临床资料进行回顾性分析。结果 180例均成功建立皮肾通道并一期手术,其中单通道清除结石174例,双通道5例,三通道1例。总手术时间50-132 min,建立通道时间15-25min,一期手术结石清除率为98.3%（177/180）,无大出血、感染性休克等严重并发症。结论 B超引导下标准通道经皮肾镜碎石术治疗肾结石安全有效。     

膀胱癌预后标记物研究进展

准确判断膀胱癌预后对治疗有重要意义 ,近年来飞速发展的分子生物学对确定膀胱癌的恶性程度及预后有重要价值。本文主要介绍一些相关性较强标记物 ,以期能找到评价膀胱癌预后更敏感、特异、实用的肿瘤标记物。     

膀胱癌预后标记物研究进展

准确判断膀胱癌预后对治疗有重要意义，近年来飞速发展的分子生物学对确定膀胱癌的恶性程度及预后有重要价值。本文主要介绍一些相关性较强标记物，以期能找到评价膀胱癌预后更敏感、特异、实用的肿瘤标记物。     

硅胶管持续尿道扩张治疗小儿骨盆骨折后尿道断裂及狭窄

198 5年 5月以来 ,我科在尿道会师术后应用 3根直径 2 .0～ 3 .0ｍｍ硅胶管置入尿道内持续扩张治疗小儿骨盆骨折后尿道断裂 2 3例 ,尿道狭窄 9例 ,取得了满意的临床效果 ,现报告如下。1　临床资料1 .1　对象　本组 32例 ,均为男性 ,年龄 3～ 1 3岁 ,骨盆骨折后尿道断裂 2 3例 (其中车祸 2 0例 ,挤压伤 2例 ,重物砸伤 1例 ) ,多发骨盆骨折 6例 ,其余为单发骨折 ;均伴有不同程度休克。 7例合并其它脏器损伤 (膀胱损伤 4例 ,肾损伤 2例 ,直肠损伤 1例 )。伤后不能排尿 ,尿管不能插入 ,会阴部多有血肿或尿外渗。入院后经积极抗休克治疗 ,分别在 …     

EMA、Vimtin、CD34、Ki-67蛋白在肾细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨EMA、Vimtin、CD34蛋白、Ki-67指数在肾细胞癌中的表达及其临床意义。方法回顾性分析50例肾细胞癌、10例肾脏血管平滑肌脂肪瘤患者Ki-67指数、EMA、Vimtin、CD34蛋白免疫组织化学检测资料,探讨其与临床分期间的关系。结果肾细胞癌与肾脏血管平滑肌脂肪瘤、肾细胞癌不同Robson分期间EMA、Vimtin蛋白表达差异无统计学意义,而CD34、Ki-67蛋白在肾细胞癌中表达阳性率显著高于肾血管平滑肌脂肪瘤,且高分期肾细胞癌阳性表达率显著高于低分期肾细胞癌。肾细胞癌患者有40例获得随访,共随访2年,死亡病例9例,尚存活病例31例,2年内死亡病例组CD34、Ki-67蛋白表达阳性率显著高于2年内尚存活病例组(P<0.01)。结论肾细胞癌中CD34、Ki-67指数与肿瘤分期密切相关,提示CD34、Ki-67指数可作为临床判定预后的重要分子指标。     

中晚期肾结核临床检验及影像学分析

目的探讨中晚期肾结核的临床表现、诊断和治疗方法。方法回顾性分析收治的中晚期肾结核89例临床资料。结果男性36例（40.5%）,女性53例（59.5%）;尿常规异常率48.3%,血沉检查阳性率为41.1%,尿抗酸杆菌阳性率为11.1%;B超、IVP、CT和CTU诊断符合率分别为31.2%、40.0%、62.5%、73.9%。结论中晚期肾结核CT和CTU的诊断率较高,怀疑有肾结核的患者应建议行CT检查。     

Survivin和VEGF在肾细胞癌中的表达及意义

目的 探讨Suvrivin、VEGF蛋白在肾细胞癌发生和进展中的作用.方法 采用免疫组化SP法和蛋白印记法检测10例正常肾脏组织,32例肾癌组织中Survivni、VEGF蛋白的表达.结果 Survivin和VEGF 在肾癌组织中的阳性表达率为53.1%和34.4,在正常肾组织中均不表达,其表达随肿瘤的临床分期、病理分级的增高而增强,两者表达水平间呈正相关关系(P=0.018).RCC组织经Western-blot技术检测后均表现为包含有1条相对分子量约为16.5 kD及21 kD的特异性条带,而正常肾组织经Western- blot技术检测后呈低表达或不表达状态.结论 肾癌组织中Survivin与VEGF的表达均上调,共同参与肾癌的发生和发展,联合检测肾癌组织Survivin和VEGF的表达对判定预后和指导治疗有一定意义.