Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织TGF-β1mRNA与蛋白表达的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达的影响.方法 采用腹腔内一次性注射STZ 55 ms/kg复制糖尿病大鼠模型.各组分别给予相应药物灌胃治疗;每周测体重,于第4、8、12周末用考马斯亮蓝法测24 h尿蛋白.12周后检测BUN、Scr、TG,计算肾重体重比,肾组织进行HE、Mallory染色,观察大鼠肾脏病理学变化.用免疫组化、原位杂交方法 分别检测肾组织TGF-β1mRNA及其蛋白的表达.结果 Rg1、Rb1组大鼠体重各周均高于模型组,但没有统计学差异.Rb1组大鼠肾重体重比具有极显著性差异(P<0.01),Rg1大剂量组、Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05).与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组大鼠在第4周、第8周,可以降低24 h尿蛋白含量,有极显著性差异(P<0.01),第12周,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组有显著性差异(P<0.05).血液生化方面与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组可以降低大鼠BUN,均有极显著性差异(P<0.01);可以降低Scr,Rg1大剂量组及Rb1组有极显著性差异(P<0.01),而Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05);同时Rg1、Rb1可以减轻肾脏病理学改变.与模型组比较,Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组可以减少肾组织TGF-β1蛋白的表达,均有极显著减少(P<0.01);Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组TGF-β1mRNA表达,具有有极显著性差异(P<0.01).结论 Rg1、Rb1通过抑制DN大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达,进而保护DN大鼠肾脏功能,这可能是Rg1、Rb1防治糖尿病肾病进展的机制之一.     

海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾保护及对肾MCP-1蛋白和mRNA表达的影响

目的:探讨海昆肾喜对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白(MCP)-1蛋白及mRNA表达的影响.方法:60只大鼠随机分为2组,正常组10只,造模组50只.造模组采用空腹一次性腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病模型.将造模成功的大鼠按血糖高低随机分组,分为模型组、厄贝沙坦组、海昆小剂量组和海昆大剂量组,给药12周.第4、8、12周末收集大鼠24小时尿量及检测尿蛋白量.12周末处死大鼠,取血并分离血清检测Scr、BUN和TG等,取肾后固定包埋切片,采用HE染色,Mallory染色及六胺银染色观察肾组织病理改变,并应用免疫组化检测肾组织MCP-1蛋白的表达及用原位杂交的方法检测肾组织MCP-1mRNA的表达.结果:海昆肾喜能够降低糖尿病大鼠的蛋白尿,增加体重,降低Scr和BUN,改善肾功能,调节TG,改善脂代谢紊乱,并且能够降低糖尿病大鼠肾小管上皮细胞、肾间质细胞内的MCP-1及mRNA在细胞浆内的表达(P＜0.01).结论:海昆肾喜可能抑制MCP-1蛋白及mRNA的过度表达,进而减缓DN的病程进展.     

芪术胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1和CTGF表达的影响

目的 观察芪术胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏保护作用.方法 采用单侧肾脏切除和腹腔注射链脲佐菌素的方法来建立大鼠糖尿病肾病模型,随机分为正常（NC）组、模型组（DM）、芪术胶囊（QZ）组、氯沙坦钾（LSTJ）组;成模1周后,QZ组按 1 g·kg-1给药,LSTJ组按 1.67 mg·kg-1给药.实验8周末观察各组大鼠血尿素氮BUN、血肌酐（Scr）、糖化血红蛋白（HbAlc）、胱抑素（CysC）以及24 h尿蛋白定量,并进行肾组织病理形态学观察以及免疫组化法检测肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）与结缔组织生长因子（CTGF）的蛋白表达.结果 与DM组相比：QZ组大鼠血清 BUN、Scr、HbAlc、Cys-c和24 h尿蛋白定量明显减低,肾组织病理形态学改变程度均明显改善,大鼠肾小球TGF-β1和CTGF表达均减弱.结论 芪术胶囊可以减少尿蛋白,降低血糖,改善肾功能,下调肾组织TGF-β1和CTGF表达,起到保护肾脏,延缓DN进展的作用.     

Beclin1在糖尿病肾病模型大鼠肾组织的表达变化研究

目的 探讨beclin1在糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾组织中的表达及在DN发病机制中的作用.方法 通过腹腔注射链脲佐菌素(50 mg/kg)制作DN大鼠动物模型,以造模后72 h血糖≥16 mmol/L,1周后纸片法检测尿蛋白阳性认为DN造模成功.免疫比浊法检测大鼠尿白蛋白(ALb)24 h排泄率以及尿白蛋白与肌酐比值...     

姜黄素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制

目的： 探讨姜黄素对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏结缔组织生长因子( CTGF ) 表达和肾脏排泄功能的影响,阐明姜黄素对DN大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法：40只雄性SD大鼠分为正常对照组(n=12)和模型组(n=28),采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立DN大鼠模型,24只造模成功的大鼠随机分为模型组(n=12)和姜黄素组(n=12)。于用药8周末检测大鼠血糖水平、体质量、肾质量、肾质量/体质量、24 h尿微量蛋白清除率(UAER)和血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）水平;HE染色观察大鼠肾组织病理学变化;免疫组织化学法检测肾皮质CTGF蛋白表达强度。结果： 与模型组比较,姜黄素组大鼠一般情况明显改善,空腹血糖降低（P<0.01),体质量明显增加(P<0.01);与模型组比较,姜黄素组大鼠肾质量、肾质量／体质量、UAER、BUN和Scr明显降低（P<0.01）;与模型组比较,姜黄素组大鼠肾组织着色程度明显减轻,CTGF表达显著下降（P<0.01）;与模型组比较,姜黄素组大鼠肾小球肥大、系膜细胞增生、肾小球变形病变明显减轻。结论：姜黄素能明显改善大鼠肾脏功能,其机制可能与抑制肾脏CTGF表达有关。     

海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾保护及对肾单核细胞趋化蛋白-1及其mRNA表达的影响

目的:探讨海昆肾喜对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及mRNA表达的影响。方法:60只大鼠随机分为正常组10只和造模组50只。造模组采用空腹一次性腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型。将造模成功的大鼠按血糖高低随机分为模型组、厄贝沙坦组、海昆小剂量组和海昆大剂量组,给药12周。第4、8、12周末收集大鼠24h尿量并检测尿蛋白量。12周末处死大鼠,取血并分离血清检测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和甘油三酯(TG);取肾脏采用苏木精-伊红染色、Mallory染色及六胺银染色观察肾组织病理改变,并应用免疫组织化学方法及原位杂交方法检测肾组织MCP-1及mRNA的表达。结果:海昆肾喜能够减少糖尿病大鼠的蛋白尿,增加体重,降低Scr和BUN,改善肾功能,调节TG,改善脂代谢紊乱,并且能够降低糖尿病大鼠肾小管上皮细胞、肾间质细胞内的MCP-1及其mRNA在细胞质内的表达(P < 0.01)。结论:海昆肾喜可能抑制MCP-1及mRNA的过表达,进而减缓DN的病程进展。     

山药多糖对糖尿病肾病大鼠肾功能及肾MCP-1表达的影响

目的探讨山药多糖（Chineseyampolysaccharides,CYP）对糖尿病肾病（Diabeticnephropathy,DN）大鼠肾功能及肾脏单核细胞趋化蛋白-1（Monocytechemptacticprotein-1,MCP-1）mRNA表达的影响。方法70只wistar大鼠随机分为对照组和糖尿病模型组,后者以链脲佐菌素（sTZ）60mg·kg-’诱导糖尿病肾病大鼠模型,成模大鼠按干预方法分为糖尿病肾病模型组（DN组）、氯沙坦（LsT组）和CYP低、中、高剂量（cYP_L、CYP-M、cYP-H）5组,给药后6周及8周末,采用放射性免疫法观察大鼠24h尿蛋白水平;采用自动生化仪检测血清中血糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）水平;采用Real—timePCR法观察肾组织CMP-1 mRNA表达。结果与DN组比较,LST组及CYP中、高剂量组24h尿蛋白、血糖、尿素氮、肌酐水平均显著降低;同时下调大鼠肾组织CMP-1 mRNA的表达。结论CYP能降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白、尿素氮和肌酐水平,并下调肾组织CMP-1 mRNA的表达,提示早期应用CYP有预防和减轻肾损伤的可能。     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对糖尿病肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:大鼠随机分成治疗组、模型组、正常组(n=9)。治疗组、模型组大鼠用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,均造模成功7只。治疗组大鼠于造模前24h行RGZ灌胃,模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃。12周后处死动物,观察肾小球病理学变化及细胞外基质(ECM)相对面积,用免疫组织化学法检测肾皮质CTGF的表达。结果:治疗组及模型组肾小球ECM相对面积及肾皮质CTGF表达水平均较正常组升高,但治疗组2指标均较模型组低(P<0.01);治疗组肾脏病理学改变较模型组减轻。结论:RGZ能改善糖尿病时肾脏的病理变化,延缓肾纤维化的发生,其作用可能与抑制肾组织中CTGF的表达有关。     

维生素D对2型糖尿病肾病大鼠肾脏中转化生长因子-β1、重组人胶原蛋白-1 和结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨维生素D对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1（TGF—β1）、结缔组织生长因子（CTGF）和重组人胶原蛋白-1（collagen-1）表达的影响,进一步探讨以上3个基因在糖尿病肾病中相互作用以及维生素D对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法将54只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组（18只）、模型组（18只）、治疗组（18只）。其中,模型组及治疗组大鼠均行糖尿病肾病造模,饲以高脂高糖饲料6周,空腹12h后给予小剂量链腺佐菌素腹腔注射。注射1周后,不同日期测随机血糖（GLU）3次,若3次GLU均≥16．7mmol／L为2型糖尿病大鼠。2型糖尿病成模后的大鼠在6周和7周时用尿微量蛋白试纸连续测大鼠晨尿3次以上,若为阳性,则为2型糖尿病肾病的大鼠。治疗组给予骨化三醇溶于0．05mL花生油以0．03μg／（kg·d）灌胃37d,模型组给予花生油灌胃37d。处死大鼠,取肾脏,采用HE、电镜技术观测。肾脏组织的形态学变化,采用实时荧光定量PCR技术（RT—PCR）评价肾脏TGF—β1、collagen-1及CTGF基因表达的变化。结果①模型组TGF—β1、collagen-1及CTGF基因表达高于正常对照组（P〈0．05）,治疗组TGF—β1、collagen-1及CTGF基因表达明显低于模型组（P〈0．05）。②采用HE、电镜技术可以看出治疗组病理组织形态学,尤其是组织结构完整性明显优于模型组。结论糖尿病。肾病大鼠中,维生素D可以通过下调TGF—β1、collagen-1及CTGF基因的表达,对糖尿病肾病起保护作用。     

山楂总黄酮对糖尿病肾病大鼠TGF-β1、CTGF表达的影响

目的 观察山楂总黄酮（HLF）对2型糖尿病肾病大鼠TGF-β₁、CTGF表达量的影响,并探讨其对2型糖尿病肾病的保护作用及可能机制。方法 常规复制2型糖尿病肾病大鼠模型,并随机分成四组:正常组、模型组、山楂总黄酮干预组和阳性对照药组。药物干预12周后测血糖及肾脏功能相关指标,并采用免疫组化方法检测大鼠肾脏TGF-β₁和CTGF表达情况。结果 山楂总黄酮显著降低STZDN大鼠的血糖,改善肾功能并下调肾组织中TGF-β₁和CTGF的表达。结论 山楂总黄酮可通过抑制肾组织TGF-β₁和CTGF的过度表达,从而对2型糖尿病肾病具有保护作用。     

ALA对STZ诱导的DN大鼠肾组织中TGF-β1和CTGF表达的影响

目的探讨抗氧化剂α-硫辛酸（α-lipoic acid,ALA）对糖尿病肾病（DN）的肾保护作用及其对肾组织转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）和结缔组织生长因子（connective tissue growth factorCTGF）表达的影响。方法建立STZ诱导的DN大鼠模型,给予ALA（35 mg/kg·d~（-1））腹腔注射预防性治疗,分别于第12周和第20周处死动物。检测血糖、肾功能、24 h尿蛋白定量,PAS染色观察肾组织结构改变,分光光度仪检测肾组织和血清中还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,GSH/GSSG比值。免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1和CTGF表达。结果与对照组相比,第12周和20周DN大鼠血糖明显升高,24 h尿蛋白定量增高,肾小球滤过率增加。病理组织PAS染色显示肾小球系膜增生、肾小管上皮空泡变性等改变。肾组织匀浆及血清中GSH水平下降,GSSG水平增高,GSH/GSSG比值降低,肾组织中TGF-β1和CTGF表达明显上调。而ALA组24 h尿蛋白定量减少,病理改变减轻,GSH水平上升,GSH/GSSG比值增高,肾组织中TGF-Bl和CTGF表达较DN组明显下调。结论 ALA可通过增强谷胱甘肽活性,减少氧化应激而下调肾组织TGF-Bl和CTGF表达,进而改善DN大鼠肾组织结构和肾功能,在防治DN方面有良好的应用前景。     

川芎嗪对糖尿病大鼠肾保护作用及肾间质结缔组织因子及骨桥蛋白表达的影响

目的 观察川芎嗪对糖尿病大鼠肾保护作用及肾小管间质结缔组织生长因子(CTGF)、骨桥蛋白(OPN)表达水平的影响.方法 选用Wistar大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法诱发糖尿病大鼠模型.成模后随机分为5组,每组12只,分别为模型组、空白对照组、贝那普利组、川芎嗪高、低剂量组,除空白组和模型组外,其余各组按组别分别予贝那普利1.7mg/(kg·d)、川芎嗪150mg、50mg/(kg·d)灌胃,共12周.实验第8周和第12周,测定24h尿蛋白定量;治疗期间检测血糖变化.治疗12周后,检测各组大鼠空腹血糖,全自动生化分析仪检测BUN、Scr.RT-PCR测肾小管间质OPNmRNA表达,免疫组化检测肾小管间质CTGF表达.结果 治疗后,各治疗组与模型组比较,血糖水平均明显下降(P<0.05),以川芎嗪高剂量组最为明显;与正常手术组比较,造模后第8周、第12周模型组尿蛋白明显升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组尿蛋白定量均有下降(P<0.05,P<0.01);治疗各组与模型组血清Scr、BUN比较均显著降低,其中以川芎嗪高剂组下降最为明显(P<0.01);与模型组比较,各药物治疗组大鼠肾间质组织CTGF、OPN表达均明显减少(P<0.05).结论 川芎嗪能通过减少模型大鼠蛋白尿排泄,降低肾间质中CTGF、OPN表达,从而发挥减轻肾间质损害,保护肾功能的作用.     

通络泄浊方对糖尿病肾病大鼠TGF-β1和CTGF的影响

目的：观察通络泄浊方对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGr）的影响。方法：采用随机数字表法将实验动物分为正常组、模型组、通络泄浊方组（中药组）、氯沙坦组（西药组）和通络泄浊方＋氯沙坦组（中西药组）。采用链脲菌素（STZ）法制作DN大鼠模型,药物干预后以免疫组织化学法和荧光定量PCR分别检测肾组织TGF-β1,和CTGF蛋白及其mRNA的表达。结果：中药组、西药组和中西药组大鼠TGF-β1和CTGF蛋白及其mRNA表达均显著低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）,且中西药组CTGF蛋白及其mRNA水平较中药组和西药组均明显降低（P〈0．01）。结论：通络泄浊方和氯沙坦均能抑制DN大鼠肾组织TGF-1与CTGF表达,而且联合使用对CTGF表达作用更明显。     

结缔组织生长因子在糖尿病大鼠肾脏中的表达及其意义

目的 :研究结缔组织生长因子 (CTGF)在链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏中的表达及其与肾小球肥大的关系。方法 :将SD大鼠随机分为正常对照 (N)组与糖尿病肾病(DN)组。大鼠单侧肾切除后 ,腹腔注射STZ诱导糖尿病模型 ,观察第 4、8、12周血糖、体重、尿白蛋白排泄 (Ualb)和 2 4h尿蛋白定量 (2 4hUpro)的变化 ,同时观察 12周时肌酐清除率(Ccr)、肾小球面积及体积、肾重、肾组织总蛋白含量和肾皮质CTGF表达的改变。结果 :DN组 2 4hUpro、Ualb和Ccr较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,肾小球面积及体积、肾重和肾组织总蛋白含量均较N组显著增加 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。免疫组织化学半定量检测结果显示 ,DN组肾皮质CTGF表达较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,CTGF表达与肾小球体积及 2 4hUalb呈显著正相关关系 (均为P <0 .0 5 )。结论 :糖尿病大鼠早期肾脏CTGF表达增加可能是DN发生的重要机制     

糖尿病大鼠肾组织TGF-β阻和CTGF的表达及来氟米特的干预作用

目的研究糖尿病肾损伤大鼠模型TGF—β1、CTGF的表达及来氟米特的干预作用,进一步探讨来氟米特对糖尿病大鼠的保护作用及可能机制。方法36只健康雄性Wistar大鼠随机分为3组：①对照组;②模型组;③来氟米特干预组。摘除右肾后,模型组与来氟米特组分别以链脲佐菌素（STZ）：40mg／kg腹腔注射,对照组腹腔注射等量柠檬酸缓冲液。来氟米特组在成模后以5mg／kg每日灌胃。于8周、12周末测24h尿量及24h尿蛋白定量、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;HE、PAS染色光镜观察肾组织病理改变,免疫组化法检测肾组织TGF—β1、CTGF蛋白的表达。结果免疫组化结果显示：模型组大鼠肾组织TGF—β1、CTGF的表达明显增加,而经来氟米特治疗后表达显著减少,与同期模型组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论来氟米特对糖尿病大鼠具有一定肾脏保护作用及抗。肾小球纤维化的作用,其作用机制可能是通过下调TGF-β1、CTGF的表达而实现的。     

糖尿病肾病大鼠CTGF异常表达及药物干预研究

目的 探讨缬沙坦和雷公藤多甙对糖尿病肾病大鼠结缔组织生长因子(CTGF)异常表达的干预作用.方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病组(DN组)、糖尿病肾病缬沙坦干预组(VAL组)和雷公藤多甙干预组(TG组).DN组、VAL组和TG组大鼠经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病肾病模型.于实验2、4、8、12周后分别处死大鼠,测定大鼠体质量、血糖、肾功能、尿白蛋白排泄率(UAER);RT-PCR检测肾脏CTGF mRNA表达.结果 与正常对照组相比,DN组大鼠血糖、血尿素氮、血清肌酐和UAER显著增高(P＜0.05或P＜0.01),肾脏CTGFmRNA表达增加(P＜0.01).VAL组和TG组除血糖外的各项检测指标均较DN组明显改善(P＜0.05或P＜0.01),而VAL组与TG组组间比较无显著性差异.结论 缬沙坦和雷公藤多甙对DN模型的干预效果相似,两者对糖尿病大鼠肾脏保护作用可能与减少肾脏CTGF表达相关.     

厄贝沙坦对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏CTGF、p27kip1表达的影响

目的:观察厄贝沙坦(Irb)对大鼠糖尿病模型肾脏结缔组织生长因子(CTGF)、p27k ip1表达的影响。方法:将SD大鼠分为健康对照组(C组)、糖尿病肾病组(DN组)和糖尿病肾病Irb治疗组(DNI组),DN组和DNI组大鼠制成糖尿病模型,DNI组予以50 mg.kg-1伊贝沙坦灌胃。各组大鼠再分为4个亚组,分别于成模后1、2、4、8周时处死,观察各组大鼠的血糖、体重、24 h尿白蛋白、内生肌酐清除率(Ccr)、肾重、肾脏肥大指数、肾小球面积(AG)和体积(VG)、肾小管面积(AT)、肾小球基底膜(GBM)厚度、肾小管基底膜(TBM)厚度的改变,通过免疫组化观察肾CTGF和p27k ip1的表达。结果:DN组和DNI组大鼠血糖较C组明显升高且维持在一个较高水平(P<0.01)。C组体重增长迅速,DN组和DNI组大鼠体重增长缓慢(P<0.01)。DN组大鼠的24 h尿白蛋白、Ccr、肾重、肾脏肥大指数、AT和VG在糖尿病早期即呈时间依赖性增加(P<0.01或P<0.05)。免疫组化半定量分析显示,各期DN组大鼠肾小球和肾小管的CTGF、p27k ip1表达均高于C组(P<0.01或P<0.05)。8周时DN组大鼠GBM和TBM均较C组明显增厚(P<0.01),而Irb可显著抑制上述参数的增加。CTGF与p27k ip1的表达、24 h尿白蛋白、AT、AG、VG呈显著正相关关系(P<0.05)。结论:早期应用Irb可抑制糖尿病大鼠早期肾脏肥大和CT-GF与p27k ip1的表达,此为早期使用该药预防DN肾脏肥大的发生提供了新的理论依据。