ZTC 1+1-Ⅱ型澄清剂处理黄瑞香叶水提液的工艺优选

目的：优选ZTC 1+1-Ⅱ型澄清剂处理黄瑞香叶水提液的工艺条件。方法：以祖师麻甲素保留率和固形物去除率为指标,通过单因素试验考察药液质量浓度、温度、搅拌速度、水浴保温时间、澄清剂组份加入顺序和加入量对澄清效果的影响。采用HPLC测定祖师麻甲素含量,流动相甲醇-0.5%乙酸（25：75）,检测波长327 nm。结果：最佳澄清工艺为药液生药质量浓度0.1 g·mL^-1,温度80 ℃,加入B组份溶液后加入A组份溶液,加入量分别为6%,3%,搅拌速度100 r·min^-1,水浴保温时间10 min;祖师麻甲素保留率74.29%,固形物去除率38.80%。结论：ZTC 1+1-Ⅱ型澄清剂处理黄瑞香叶提取液的澄清效果良好,优选的澄清工艺稳定可行。     

藤三七总皂苷的大孔树脂纯化工艺优选

目的： 优选藤三七总皂苷的大孔树脂分离纯化工艺。 方法： 采用UV测定总皂苷含量。通过静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号;以总皂苷动态吸附量和洗脱率为指标,利用正交试验优选藤三七总皂苷的大孔吸附树脂纯化工艺条件。 结果： 选用D101型大孔吸附树脂分离纯化藤三七总皂苷,最佳工艺条件为上样液质量浓度0.1 g·mL^-1,上样流速1 BV·h^-1,径高比1：10,上样量（药材量-树脂）0.2 g·mL^-1,乙醇体积分数40%,乙醇用量8 BV,洗脱流速2 BV·h^-1;藤三七总皂苷纯度>50%。 结论： 优选的纯化工艺合理可行,可较好地分离纯化藤三七总皂苷。     

测定天王补心丸和归脾丸中细叶远志皂苷的含量

目的：建立含远志中成药中细叶远志皂苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,Alltima C18色谱柱 (4.6 mm × 250 mm,5 μm),流动相甲醇- 0.05%磷酸溶液(65∶35),检测波长202 nm,流速1.0 mL·min^-1。结果：细叶远志皂苷的理论塔板数为2 500。回归方程Y = 5.239 ×10⁶ X-6.247×10⁵（ r² = 0.999 4）,线性范围10～500 μg·mL^-1,平均回收率为97.5% (RSD均小于3.0%),最低检出浓度为5.50 μg·mL^-1。结论：检测含远志中成药中细叶远志皂 苷含量方法简便,结果准确,重现性好,可作为含远志的复方制剂质量控制标准。     

纤维素酶协同超声波法提取复方半边莲注射液的工艺优选

目的：优选纤维素酶协同超声波法提取复方半边莲注射液的工艺条件。方法：在超声波条件固定的情况下,采用正交试验考察酶用量、酶解pH、酶解时间及酶解温度对复方半边莲注射液中野黄芩苷提取率的影响。采用HPLC测定野黄芩苷含量。结果：最佳工艺条件为酶解温度40 ℃,酶解pH 6.0,酶用量1 g（6.7 mg·g^-1）,酶解时间30 min;野黄芩苷质量浓度4.68 g·L^-1,明显高于煎煮法（1.34 g·L^-1）、单一超声波法（3.84 g·L^-1）和单一纤维素酶法（2.26 g·L^-1）。结论：纤维素酶协同超声波法提取复方半边莲注射液具有效率高、生产成本低、生产周期短等优点。     

HPLC测定白头翁总皂苷乳剂指标成分含量及释放度

目的: 建立HPLC测定白头翁总皂苷乳剂中白头翁皂苷B3及白头翁皂苷BD含量的方法,测定该乳剂体外释放度。方法: 采用液液萃取法处理样品,HPLC进行检测。色谱条件为Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),C₁₈保护柱(4.0 mm×3.0 mm),柱温40℃,流动相乙腈-水-四氢呋喃(52:45:3),流速1.0 mL·min^-1,检测波长203 nm,进样量10 μL。采用改良的动态透析法进行白头翁总皂苷乳剂及白头翁总皂苷水溶液的体外释药试验。结果: 白头翁皂苷B3和白头翁皂苷BD的线性范围分别为0.01~1(r=0.999 6),0.01~2(r=0.999 8) g·L^-1,精密度的RSD分别为3.19%,1.17%,重复性RSD分别为1.40%,1.60%,平均回收率分别为99.63%,100.27%。3批白头翁总皂苷乳剂中白头翁皂苷B3质量浓度分别为0.186,0.190,0.191 g·L^-1,白头翁皂苷BD分别为0.069,0.065,0.066 g·L^-1。该乳剂中白头翁皂苷B3及白头翁皂苷BD在pH 7.4磷酸盐缓冲液中12 h的累积释放率分别91.30%,74.97%。结论: 建立的方法准确、灵敏,适用于白头翁乳剂指标成分含量及释放度的测定。     

人参皂苷Rb1，Rg1和Re调控Raf-CREB，Akt-CREB，CaMKⅡ-CREB信号转导通路的体外研究

目的：研究人参皂苷中的主要有效单体Rb₁,Rg₁和Re对神经营养因子细胞信号转导通路的影响。方法：建立以0.6 mmol·L^-1的皮质酮作用于SH-SY5Y细胞24 h的损伤模型,加入Rb₁（120,60,20 μmol·L^-1）,Rg₁（120,80,40 μmol·L^-1）和Re（120,80,40 μmol·L^-1）,CCK试剂盒检测Rb₁,Rg₁和Re对皮质酮诱导SH-SY5Y细胞损伤的存活率;利用脂质体转染的方法将含有CREB-Luc报告基因的质粒分别和含有hRaf,hAkt,hcAMP,hCaMK基因的质粒转染入人胚肾细胞（HEK293细胞）,加入有效浓度人参皂苷Rb₁,Rg₁和Re后,用双荧光素酶报告基因系统和Western blotting方法检测CREB的表达情况。结果：CCK的测试结果表明人参皂苷Rb₁（60 μmol·L^-1）,Rg₁（80 μmol·L^-1）和Re（80 μmol·L^-1）对SH-SY5Y细胞具有明显的保护作用;报告基因检测方法显示加入Rb₁和Rg₁调控后Raf-CREB,Akt-CREB通路中CREB报告基因活性明显增强,加入Re调控后Raf-CREB,CaMKⅡ-CREB通路中CREB报告基因活性明显增强。Western blotting结果显示,Rb₁和Rg₁调控后Raf-CREB,Akt-CREB通路中CREB蛋白表达明显增强,Re调控后Raf-CREB,CaMKⅡ-CREB通路中CREB蛋白表达明显增强。结论：人参皂苷中的主要有效单体Rb₁,Rg₁和Re对皮质酮所致SY5Y细胞受损具有明显保护作用,其作用机制可能与调节神经营养因子细胞信号转导通路上游的Raf-CREB,Akt-CREB,CaMKⅡ-CREB通路有关。     

松杉灵芝29种微量元素分析

目的：分析松杉灵芝微量元素含量,为松杉灵芝用药安全提供依据。方法：采用电感耦合等离子体质谱仪测定松杉灵芝中29种微量元素的含量。结果：松杉灵芝菌盖中重金属元素Pb含量为（4.21±0.29）μg·g^-1,Cu含量为（12.55±1.12）μg·g^-1,As含量为（1.26±0.08）μg·g^-1,Cd未检出。松杉灵芝菌柄中重金属元素Pb含量为（3.63±0.04）μg·g^-1,Cu含量为（16.59±1.24）μg·g^-1,As含量为（1.58±0.05）μg·g^-1,Cd未检出。松杉灵芝菌盖中Al,Fe,Zn,Mn含量比赤芝菌盖高。结论：松杉灵芝中重金属元素Pb<5 μg·g^-1,Cd<0.3 μg·g^-1,Cu<20 μg·g^-1,As<2.0 μg·g^-1,符合药用植物及制剂进出口绿色行业标准的限量标准。     

HPLC测定增液汤中麦冬皂苷D’的含量

目的：建立HPLC测定增液汤中麦冬皂苷D’含量的方法。方法：采用Diamonsil^TM C₁₈色谱柱（4.6 mm×200 mm,5 μm）,柱温33 ℃,流动相水-乙腈（体积比52：48）,流速0.80 mL·min^-1,检测波长208 nm。结果：麦冬皂苷D’的质量浓度在 0.018~0.180 g·L^-1与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为99.4%,RSD 0.73%（n=9）。结论：该方法简便、准确,可用于增液汤的质量控制。     

远志皂苷对β淀粉样蛋白1-40诱导的体外培养皮层神经细胞损伤的保护作用

目的：研究远志皂苷(TEN)对β淀粉样蛋白1-40(Aβ_1-40)诱导的原代培养神经细胞损伤的保护作用。方法：以原代培养大鼠皮层神经细胞,用25 μmol·L^-1聚集状的Aβ_1-40建立神经细胞损伤模型。将培养的神经细胞分为Aβ_1-40模型组和Aβ_1-40＋远志皂苷(50,100,200 μmol·L^-1)处理的低、中、高剂量组,同时设立正常组。在倒置显微镜下观察远志皂苷给药前后神经细胞的形态学变化,用MTT比色法检测神经细胞活性,采用LDH比色法检测神经细胞膜的损伤程度。结果：与正常组相比,25 μmol·L^-1Aβ_1-40处理24 ｈ,可使神经细胞的形态发生改变和活力显著下降,在显微镜下可见神经元失去贴壁能力或易脱落,突起变短。远志皂苷中、高剂量组均能显著降低神经细胞的坏死百分率,减少LDH的释放,明显提高神经细胞的存活率。结论：凝聚态Aβ1-40对培养的皮层神经细胞有一定的毒性效应,而远志皂苷对Aβ_1-40引起的神经细胞毒性有明显的保护作用。     

α-常春藤皂苷的平衡溶解度及表观油水分配系数的测定

目的： 测定α-常春藤皂苷的平衡溶解度及表观油水分配系数（P_app）。 方法： 采用HPLC测定α-常春藤皂苷在水、有机溶剂及缓冲液中平衡溶解度,在正辛醇-水及缓冲盐溶液中表观油水分配系数,流动相乙腈-0.2%磷酸水溶液（45：55）,检测波长203 nm。 结果： 25 ℃时,α-常春藤皂苷在水中平衡溶解度0.011 g·L^-1,P_app=24.73（logP_app=1.39）,在正丁醇和乙醇中平衡溶解度分别为86.10,28.18 g·L^-1。 结论： α-常春藤皂苷的水溶性较差,改善其口服制剂的溶出度有利于提高体内生物利用度。     

新疆鼠尾草总酚酸的体外抗氧化活性

目的：研究新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的体外抗氧化活性。方法：以40%乙醇提取和大孔吸附树脂纯化分别制备得到新疆鼠尾草总酚酸的提取物和纯化物,以维生素C（VC）为对照,通过体外化学模拟方法测定新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的还原能力、对·DPPH自由基、羟基自由基（·OH）和超氧自由基（O₂^-·）的清除能力,研究新疆鼠尾草总酚酸的抗氧化活性。结果：新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物清除·DPPH自由基的作用50%清除浓度（IC₅₀,分别为0.029,0.039 g·L^-1）弱于VC（IC₅₀0.018 g·L^-1）;对羟基自由基（·OH）的清除作用（IC₅₀分别为0.212,0.165 g·L^-1）强于VC（IC₅₀0.356 g·L^-1）;对超氧自由基（O₂^-·）的清除能力（IC₅₀分别为3.735,1.913 g·L^-1）弱于VC（IC₅₀0.390 g·L^-1）,其纯化物还具有一定的还原能力。结论：新疆鼠尾草总酚酸具有较强的抗氧化作用。     

气相色谱法测定人参皂苷Rg1中的有机溶剂残留量

目的： 建立气相色谱法测定人参皂苷Rg₁中有机残留量的方法。方法： 采用气相色谱法,FID检测器, DB-624 （30 m×0.32 mm,0.25 μm）,载气为氮气,柱温为恒温50℃,进样口温度200℃,检测器温度200℃,以水为溶剂配制对照溶液及供试品溶液。结果： 在所考察的浓度范围内具有良好的线性,乙醇的检测限为1.0 μg·L^-1,精密度RSD<1.0%。平均回收率为90%~105% 结论： 经方法学验证,该检测方法简便灵敏,结果准确可靠,适用于人参皂苷Rg₁原料药中有机溶剂残留量的检测。     

UPLC测定参麦注射液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量

目的：采用超高效液相色谱法分离测定参麦注射液中人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁的含量。方法：采用ACQUITY UPLC HSS T3 （2.1 mm×50 mm,1.8 μm）色谱柱,流动相乙腈（A）-0.05%磷酸（B）,梯度洗脱（0~5 min,19%A;5~12 min,19%~28%A;12~18 min,28%~40%A）,流速0.3 mL·min^-1,检测波长203 nm,柱温25 ℃。结果：人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re和人参皂苷Rb₁分别在0.020 96~0.209 6,0.017 64~0.176 4,0.023 88~0.238 8 g·L^-1与相应峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率（n=6）分别为100.12%,100.08%,99.51%,RSD分别为1.60%,2.03%,1.15%。结论：与HPLC相比,UPLC在不影响分离效果的情况下可显著提高参麦注射液中人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁的分析速度,改善分析效果,同时可减少溶剂的消耗。该方法简便、快捷、准确、重复性好,可代替HPLC法用于参麦注射液的多指标质量控制。     

丹参多酚酸盐对早期糖尿病肾病患者炎症细胞因子及肾血管内皮功能的影响

目的： 探讨早期糖尿病肾病（DN）患者炎症细胞因子、肾血管内皮功能的变化及丹参多酚酸盐干预治疗作用。方法： 选择早期DN患者64例,分为常规治疗组、丹参多酚酸盐治疗组,健康对照组30例,检测DN患者治疗前后及健康受检者外周血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、血清可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、血内皮素-1（ET-1）水平,同时利用超声检测肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能（FMD）。结果： 早期DN[JP2]患者组hs-CRP,TNF-α,IL-6,ICAM-1及ET-1均高于对照组（P<0.05）;早期DN患者FMD较对照组降低（P<0.05）;丹参多酚酸盐组治疗后外周血hs-CRP,sICAM-1,ET-1,TNF-α,IL-6[hs-CRP（9.24±2.16）mg·L^-1, sICAM-1（257.72±16.32） μg·L^-1, ET-1（103.78±12.21） ng·L^-1,TNF-α（14.62±7.23） ng·L^-1,IL-6（16.12±5.68） ng·L^-1]较常规治疗组[（14.58±3.32）mg·L^-1, （567.43±16.24） μg·L^-1, （258.5±9.78） ng·L^-1, （36.72±6.23）ng·L^-1, （34.62±7.01）ng·L^-1]下降更明显,FMD升高更明显[（10.12±3.27）% vs （7.17±0.32）%],且差异有统计学意义（P<0.05）。结论： 丹参多酚酸盐能有效的降低早期DN患者炎症反应,并改善肾血管内皮功能。     

丹红注射液中丹参素和原儿茶醛在大鼠体内的药代动力学研究

目的：研究大鼠单剂量静脉注射丹红注射液后丹参素和原儿茶醛的药代动力学。方法：大鼠实施颈静脉插管手术后,单次尾静脉注射丹红注射液（10 mL·kg^-1,含丹参素1.472 9 g·L^-1,原儿茶醛0.229 0 g·L^-1）,用建立的超高效液相色谱法测定大鼠血浆中丹参素和原儿茶醛的浓度,并计算药代动力学参数。结果：丹参素和原儿茶醛的主要药动学参数如下：最大浓度（C_max）分别为（73.73±11.46）,（4.60±3.39）mg·L^-1,消除半衰期（t_1/2）分别为（0.88±0.20）,（1.13±0.61）h,血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0-t）分别为（30.19±5.12）,（2.15±1.56）mg·L^-1·h。结论：丹参素和原儿茶醛在大鼠体内的动力学过程符合二室模型。     

黔产苗药"薄丈达"中不同极性组分DPPH自由基清除活性的研究

为进一步开发贵州药用植物新资源,寻找更多天然抗氧化剂,该实验以黔产苗药"薄丈达"(bod zangd dak)为原料,利用60%乙醇等为溶剂,通过提取分离得到该药材中不同极性组分,以抗坏血酸为阳性对照,采用DPPH自由基(1,1-二苯基-2-苦肼基自由基)清除法评价苗药"薄丈达"中不同极性组分的抗氧化活性。结果黔产苗药"薄丈达"中不同极性组分的IC₅₀依次为抗坏血酸(0.033 4 g·L^-1)<乙酸乙酯部位(0.052 3 g·L^-1)<总鞣质部位(0.054 9 g·L^-1)<60%乙醇提取物部位(0.076 7 g·L^-1)<正丁醇部位(0.110 g·L^-1)<水溶性多糖部位(0.168 g·L^-1)<水提取物部位(0.174 g·L^-1)<萃取后水部位(0.226 g·L^-1)<总多糖部位(0.645 g·L^-1)。研究表明黔产苗药"薄丈达"中不同极性组分均有不同程度的清除DPPH自由基活性,这为进一步寻找其活性成分和研究抗氧化活性机制提供一定的实验依据。     

竹节参总皂苷通过NF-κB通路对LPS致RAW264.7细胞炎症的保护作用研究

目的： 探讨竹节参总皂苷对脂多糖（LPS）刺激的RAW264.7巨噬细胞的抗炎作用。方法：噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度的竹节参总皂苷对RAW264.7细胞活性的影响;一氧化氮（NO）试剂盒法检测竹节参总皂苷对LPS刺激RAW264.7细胞的NO释放量;酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素1-β（IL-1β）分泌;逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）,TNF-α,IL-1β mRNA的表达;免疫印迹法（Western blot）检测胞核内核转录因子-κB p65（NF-κB p65）蛋白表达。结果：竹节参总皂苷的安全用药范围为≤80 mg·L^-1;与LPS模型组相比,竹节参总皂苷各剂量组（0.1,1,10,40 mg·L^-1）均能显著降低LPS刺激下RAW264.7细胞NO,TNF-α和IL-1β分泌;竹节参总皂苷各剂量组（10,40 mg·L^-1）均能抑制iNOS,TNF-α,IL-1β mRNA表达和NF-κB p65蛋白表达。结论：初步证实了竹节参总皂苷对LPS致RAW264.7巨噬细胞炎症的保护作用,作用机制可能与 NF-κB通路有关。     

密闭性中药复合敷料的提取工艺优选

目的： 优选密闭性中药复合敷料的提取工艺。方法： 以人参皂苷Rg₁,Rb₁含量和浸膏得率为评价指标,通过单因素试验优选提取次数,利用正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间对密闭性中药复合敷料提取工艺的影响。采用HPLC测定人参皂苷Rg₁,Rb₁含量,流动相水（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~10 min,81% A;10~38 min,81%~79% A;38~90 min,79%~66% A）,检测波长203 nm。结果： 各因素对提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数>提取时间>乙醇用量。最佳提取工艺条件为加8倍量70%乙醇提取2次,每次2 h;平均浸膏得率25.45%,人参皂苷Rg₁,Rb₁平均质量浓度分别为0.46,0.37 g·L^-1。结论： 建立的含量测定方法准确、重复性好,优选的提取工艺稳定、合理、可行,为民间外伤验方的二次开发提供参考。     

一氧化氮途径介导人参总皂苷对大鼠右室肥厚的抑制作用

目的: 观察人参总皂苷(TG)对野百合碱(MCT)所致大鼠右心室肥厚的影响并探讨其与一氧化氮途径的关系. 方法: 雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、模型组、TG低、中、高剂量组(20,40,60 mg·kg^-1·d^-1)以及L-精氨酸组(L-arg,200 mg·kg^-1·d^-1,L-a组);另外,为探讨TG的作用与NO释放的关系,另设TG+L-N(NOS合酶抑制剂N^G-硝基-L-精氨酸-甲酯,L-NAME)组和L-a+L-N组.在腹腔注射TG 40 mg·kg^-1·d^-1或L-arg 200 mg·kg^-1·d^-1的同时分别灌胃NOS抑制剂L-N 20 mg·kg^-1·d^-1,各组动物均给药18 d.测定各组大鼠的右心室收缩压(RVSP)、右室肥厚指数(RVHI)、右心重/体重(RVW/BW);透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变;硝酸还原法检测心肌组织NO₂^-/ NO₃^-的含量;Real time RT-PCR检测心肌组织心房利钠因子(ANF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达. 结果: TG低、中、高剂量和L-arg预防给药均使RVSP,RVSP,RVHI,RV/BW及ANF mRNA表达明显降低(P<0.05),改善细胞线粒体肿胀、变性,L-N能阻止L-arg对上述指标的影响,而同样剂量的L-N并不能影响TG 40 mg·kg^-1对上述指标的降低作用;TG 20,40 mg· kg^-1不影响eNOS mRNA的表达,但60 mg· kg^-1可提高eNOS mRNA的表达. 结论: TG能明显改善MCT诱导的大鼠右心室肥厚,其抗心肌肥厚作用部分是通过NO途径实现的.     

蝉翼藤根中的皂苷类成分及其肿瘤细胞毒活性

采用硅胶柱色谱、MPLC、制备与半制备HPLC等分离技术从蝉翼藤根的95%乙醇提取物中分离得到7个乙酰化的三萜皂苷类化合物。通过理化性质和MS,NMR等波谱数据鉴定其结构分别为蝉翼藤皂苷A(1),蝉翼藤皂苷B(2),3-O-β-D-glucopyranosyl presenegenin 28-O-β-D-xylopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)]-4-O- [(E)-3,4-dimethoxycinnamoyl]-β-D-fucopyranosyl ester (3), 3-O-β-D-glucopyranosyl presenegenin 28-O-β-D-xylopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D- glucopyranosyl-(1→3)]-4-O- [(E/Z)-3,4-dimethoxycinnamoyl]-β-D-fucopyranosyl ester(3/4),3-O-β-D-glucopyranosyl presenegenin 28-O-α-L-arabinopyranosyl-(1→3)-β-D-xylopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-4-O-[(E)-3,4-dimethoxycinnamoyl]-β-D-fucopyranosyl ester(5),远志皂苷XLV(6),远志皂苷XLVI(7)。其中化合物 5~7 为首次从该属植物中分离得到,化合物 3,3/4 为首次从该种植物中分离获得。采用MTT法对所得化合物进行抗肿瘤活性评价,结果表明化合物 2,3/4,5 对肺癌细胞株LLC具有中等抑制作用,其IC₅₀分别为41.10, 38.17, 48.92 μmol·L^-1;化合物 2对乳腺癌细胞株MCF-7有中等抑制作用,其IC₅₀为47.93 μmol·L^-1。