黄芩素对人胆囊癌细胞系SGC996细胞活力及细胞锌指X染色体蛋白表达的干预作用

目的探讨中药黄芩提取物黄芩素对人胆囊癌的生物效应及机制。方法将人胆囊癌细胞系SGC996用黄芩素处理48h,采用MTT法检测治疗后SGC996的细胞活力;通过对透过transwell膜的SGC996细胞进行计数,评估黄芩素对胆囊癌侵袭转移能力的影响;通过流式细胞术检测黄芩素处理后,SGC996细胞的凋亡情况,并用Western blot方法检测细胞锌指X染色体蛋白(ZFX)的表达。结果 40、80、160、320μmol/L黄芩素组对SGC996细胞活力的抑制率与对照组比较,差异有统计学意义[(19.3±3.8)%、(37.9±5.8)%、(61.6±7.8)%、(84.2±10.2)%比0,P0.05]。40、80、160μmol/L黄芩素组对SGC996细胞的凋亡诱导率与对照组比较,差异有统计学意义[(7.5±1.2)%、(16.3±1.9)%、(31.2±2.8)%比(0.5±0.5)%,P0.05]。40、80、160μmol/L黄芩素组对SGC996细胞转移抑制率与对照组比较,差异有统计学意义[(25.6±6.6)%、(57.3±7.9)%、(84.1±11.9)%比0,P0.05]。Western blot结果显示,黄芩素对ZFX有显著的抑制作用。结论黄芩素有良好的抗胆囊癌生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能与下调ZFX蛋白表达有关。     

白藜芦醇通过阻断TGF-b/Smad通路抑制人结肠癌细胞系SW480的侵袭转移

目的：体外探讨中药白藜芦醇对SW480细胞活力及侵袭转移力的影响。方法：将人结肠癌细胞系SW480用白藜芦醇处理48小时,采用MTT法检测白藜芦醇对SW480细胞活力的影响；采用流式细胞术检测白藜芦醇对SW480细胞周期的影响；通过transwell穿膜试验检测白藜芦醇对SW480细胞侵袭转移能力的影响；通过western blot实验检测肿瘤细胞转移相关蛋白E-上皮型细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平；通过western blot实验检测上游磷酸化Smad蛋白(p-Smad)的表达水平。结果：对照组,5μmol/L白藜芦醇组,10μmol/L白藜芦醇组,15μmol/L白藜芦醇组,20μmol/L白藜芦醇组,40μmol/L白藜芦醇组对SW480细胞活力的抑制率分别为0,5.4±1.0,22.5±3.3,36.4±4.4,62.2±6.1,85.1±7.5。对照组,5μmol/L白藜芦醇组,10μmol/L白藜芦醇组,15μmol/L白藜芦醇组,20μmol/L白藜芦醇组,40μmol/L白藜芦醇组对SW480细胞周期G2/M阻滞率分别为2.3±0.3,4.3±0.5,8.9±1.2,15.6±2.3,22.7±2.7,30.4±2.9。对照组,TGF-b组,TGF-b+5μmol/L白藜芦醇组,TGF-b+10μmol/L白藜芦醇组,TGF-b+15μmol/L白藜芦醇组,TGF-b+20μmol/L白藜芦醇组,TGF-b+40μmol/L白藜芦醇组穿过transwell膜的SW480细胞数分别为204.2±19.4,453.5±41.6,411.2±45.2,315.7±32.7,246.3±27.2,197.8±23.5,97.4±11.2。白藜芦醇体外处理置于TGF-b培养体系中的SW480细胞后,E-cadherin表达水平显著上升,Vimentin及MMP-9表达水平显著下降。白藜芦醇显著降低TGF-b诱导的SW480细胞Smad蛋白磷酸化水平。结论： 白藜芦醇有良好的体外抗结肠癌的生物活性,更重要的是它能通过阻断TGF-b/Smad通路抑制结肠癌细胞的侵袭转移。     

欧前胡素体外诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡

目的 探讨欧前胡素对人乳腺癌细胞的抑制作用及机制。方法 将人乳腺癌细胞系MCF-7用浓度为10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,80μmol/L,160μmol/L的欧前胡素处理48小时,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测欧前胡素处理后MCF-7的细胞活力;通过流式细胞术和western blot方法检测欧前胡素对MCF-7细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1的表达;在MCF-7细胞中转染外源性Mcl-1后再用欧前胡素处理,检测欧前胡素对MCF-7细胞活力和凋亡程度的影响。结果 10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,80μmol/L,160μmol/L欧前胡素细胞活力抑制率分别为(3.4±1.2)%,(9.5±2.4)%,(24.5±4.4)%,(48.7±5.9)%,(74.7±6.4)%。20μmol/L,40μmol/L,80μmol/L欧前胡素凋亡诱导率分别为(4.9±0.9)%,(12.9±1.7)%,(22.1±3.1)%。MCF-7细胞用欧前胡素处理48小时后,细胞的Mcl-1表达水平显著下降。当用pc DNA3.1-Mcl-1质粒转染MCF-7细胞后,80μmol/L欧前胡素对MCF-7细胞的凋亡诱导率(8.8±1.5)%相比于用空pc DNA3.1质粒转染组凋亡诱导率(24.2±3.3)%显著下降(P<0.05)。结论 欧前胡素具有体外抗乳腺癌的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白的表达,从而诱导肿瘤细胞发生凋亡。     

黄芩素对多发性骨髓瘤细胞系凋亡及Cereblon基因和蛋白表达的影响

目的 观察黄芩素对多发性骨髓瘤(MM)细胞系凋亡及Cereblon(CRBN)基因和蛋白表达的影响,探讨CRBN在黄芩素诱导MM细胞凋亡中的作用.方法 应用Annexin-V染色,流式细胞术分析黄芩素和黄芩素联合来那度胺对MM细胞系凋亡的作用;应用RT-PCR技术检测MM细胞系CRBN基因的表达;应用蛋白印迹检测MM细胞系CRBN蛋白的表达,并设置空白对照.结果 黄芩素能够诱导U266细胞凋亡,在黄芩素浓度为40μmol/L时,随着处理细胞时间的延长(24、48、72 h),凋亡率分别为6.11%、11.9%、16.7%;在处理RPMI 8226细胞72 h后,与单用黄芩素或来那度胺相比,黄芩素(40μmol/L)与来那度胺(40μmol/L)联合应用,对MM细胞系的増殖具有更强的抑制作用,来那度胺诱导的细胞凋亡率为4.27%,黄芩素诱导的细胞凋亡率为15.9%,两者联合应用,细胞凋亡率为57.5%;RT-PCR检测结果显示:黄芩素能诱导U266细胞CRBN基因表达,且呈浓度和时间依赖性,在24 h时,与对照组相比,黄芩素浓度分别为10、20和40μmol/L时,CRBN基因的上调倍数分别为(2.246±0.068)、(2.399±0.178)和(3.591±0.061)(P值分别为0.003、0.009和0.001);在浓度为40μmol/L时,与对照组相比,黄芩素在不同的作用时间(6、12和24 h),诱导CRBN上调倍数分别为(2.372±0.079)、(2.494±0.189)和(3.228±0.151)倍(P值分别为0.002、0.008和0.002);蛋白印迹结果表明,黄芩素还能诱导U266和RPMI 8226两细胞系CRBN蛋白的表达.结论 黄芩素通过上调CRBN的基因和蛋白表达,増强MM细胞对来那度胺诱导凋亡的敏感性,为黄芩素将来应用于临床克服MM患者对来那度胺的耐药性提供依据.     

中药活性成分雷公藤红素通过抑制Bcl-w的表达逆转宫颈癌细胞的顺铂耐药

目的：研究中药活性成分雷公藤红素是否能逆转耐药宫颈癌细胞株Hela/R对顺铂的耐药性并探讨其机制。方法：采用顺铂梯度暴露法构建顺铂耐药宫颈癌细胞株Hela/R;采用MTT法检测雷公藤红素是否能增强顺铂对Hela/R的杀伤活性;Western blot试验检测常规Hela细胞及Hela/R细胞Bcl-2, Bcl-w及Bcl-xl的表达水平;采用流式细胞术检测雷公藤红素联合顺铂对Hela/R细胞的凋亡诱导效应及对线粒体膜电位的影响。结果：不同浓度顺铂对Hela及Hela/R细胞的细胞活力抑制率如下：1μmol/L顺铂组: 18.6±1.5 (Hela), 1.9±1.0 (Hela/R); 2μmol/L顺铂组: 23.9±2.4 (Hela), 3.1±1.2 (Hela/R); 4μmol/L顺铂组: 47.8±3.9 (Hela), 6.8±1.5 (Hela/R); 8μmol/L顺铂组: 63.4±5.4 (Hela), 11.6±1.8 (Hela/R); 16μmol/L顺铂组: 72.7±5.9 (Hela), 20.4±2.0 (Hela/R); 32μmol/L顺铂组: 85.7±6.7 (Hela), 41.2±3.3 (Hela/R); 64μmol/L顺铂组: 91.8±7.9 (Hela), 55.8±4.3 (Hela/R)。雷公藤红素联合顺铂对Hela/R细胞的细胞活力抑制率如下: 雷公藤红素组: 6.6±1.1; 10μmol/L顺铂组: 12.4±1.2; 20μmol/L顺铂组: 27.8±1.9; 40μmol/L顺铂组: 45.2±3.1; 10μmol/L顺铂+雷公藤红素组: 57.2±3.9; 20μmol/L顺铂+雷公藤红素组: 71.4±5.1; 40μmol/L顺铂+雷公藤红素组: 84.8±6.8。Hela及Hela/R细胞Bcl-2抗凋亡蛋白家族成员的相对表达水平如下: Bcl-2/β-actin: 37.9±1.8 (Hela), 41.4±2.1 (Hela/R); Bcl-xl/β-actin: 32.1±1.9 (Hela), 30.2±1.7 (Hela/R); Bcl-w/β-actin: 22.1±1.3 (Hela), 70.9±4.9 (Hela/R)。雷公藤红素显著增强顺铂对Hela/R细胞线粒体膜电位的损伤,促进细胞色素C的释放,进而诱导Hela/R细胞发生凋亡。结论：雷公藤红素通过抑制Bcl-w的功能促进顺铂对耐药宫颈癌细胞的凋亡诱导效应。     

吉西他滨联合索拉非尼对胆囊癌细胞生长侵袭的抑制作用

目的评估吉西他滨和索拉非尼联合用药对胆囊癌细胞株SGC996,生长、凋亡、辽移和侵袭的影响、方法 采用吉西他滨和索托非尼单独或联合处理SGC996细胞,吉西他滨雌独处坪组浓度分别为0．1、1．0、2．0、4．0和10．0μg/mL;索拉非尼单独处理组浓度分别为0．1、1．0、2．5、5．0、10．0和20．0μmol／1．;两药联合处理组：索拉非尼浓度分别为2．5、5．0、10,0和20．0μmol／L,吉西他滨浓度分别为2．0、4．0和10．0μg／mL。未经药物处理的SGC996细胞作为空白对照组。采用MTT法检测SGC996细胞的生长状况;应用Transwell实验检测SGC996细胞的迁移和侵袭能力应用FITC—AnnexinV／PI双染法检测SGC996细胞的凋亡率。结果 索拉非尼可抑制SGC996细胞生长,并且这种抑制作用具有浓度和时间依赖性（P〈0．05）;同时还可抑制SGC996细胞的迁移和侵袭（P〈0．05）,但不诱导细胞凋亡（P〉0．05）。吉西他滨对SGC996细胞的生长和辽移并无显著抑制作用（P〉0．05）．但可以抑制细胞的侵袭,并诱导细胞凋亡（P〈0．05）,索托非尼和吉西他滨联合用药可以抑制SGC996细胞的生长、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡（P〈0．05）、结论 吉西他滨和索托非尼联合用药对胆囊癌细胞的抑制作用显著强于单独用药,可能成为治疗胆囊癌的有效化疗方案。     

雷公藤红素通过抑制肝癌细胞的糖代谢增强多柔比星对Huh7细胞的杀伤活性

目的:研究雷公藤红素是否能增强多柔比星对肝癌细胞的杀伤活性及机制。方法: MTT法检测多柔比星单独治疗及联合雷公藤红素治疗对肝癌细胞系Huh7的杀伤活性。用荧光定量PCR方法检测人正常胎肝细胞系L-O2及肝癌细胞系Huh7、HepG2和PLC的PKM2表达水平。将Huh7细胞用雷公藤红素和多柔比星处理后,用荧光定量PCR方法检测Huh7细胞PKM2的表达水平。将Huh7细胞用雷公藤红素和多柔比星处理后,检测Huh7细胞葡萄糖的摄取能力和乳酸生成能力。构建PKM2真核表达载体,MTT法检测PKM2表达载体转染对雷公藤红素联合多柔比星杀伤Huh7细胞疗效的影响。结果: 0.5μmol/L 雷公藤红素组对Huh7的细胞活力抑制率为2.6±0.9,1μmol/L雷公藤红素组为4.7±1.3,2μmol/L雷公藤红素组为8.8±1.9,0.1μg/mL多柔比星单治疗组为7.5±1.9,1μg/mL多柔比星单治疗组为61.4±4.2,1μmol/L雷公藤红素+0.1mg/mL多柔比星治疗组为58.7±3.8,1μmol/L雷公藤红素+1mg/mL多柔比星治疗组为89.7±6.7。L-O2细胞系的PKM2相对表达水平为1.0±0.05,Huh7细胞系为15.2±0.6,HepG2细胞系为11.8±0.5,PLC细胞系为13.4±0.7。雷公藤红素下调Huh7细胞的PKM2表达水平并减弱Huh7细胞对葡萄糖的摄取和乳酸的生成,0.5μmol/L 雷公藤红素组的PKM2相对表达水平为0.70±0.05,1μmol/L 雷公藤红素组为0.42±0.04,2μmol/L 雷公藤红素组为0.31±0.03,0.1μg/mL多柔比星单治疗组为0.98±0.07,1μg/mL多柔比星单治疗组为1.01±0.07,1μmol/L雷公藤红素+0.1mg/mL多柔比星治疗组为0.44±0.04,1μmol/L雷公藤红素+1mg/mL多柔比星治疗组为0.41±0.03。转染PKM2表达载体后,雷公藤红素对多柔比星的协同抗肿瘤作用受到抑制,1μmol/L雷公藤红素+0.1mg/mL多柔比星治疗组对Huh7的细胞活力抑制率为60.5±4.3,1μmol/L雷公藤红素+1mg/mL多柔比星治疗组为91.6±6.9,1μmol/L雷公藤红素+0.1mg/mL多柔比星+pcDNA3.1-PKM2组为19.3±2.0,1μmol/L雷公藤红素+1mg/mL多柔比星+pcDNA3.1-PKM2组为69.6±4.5。结论:雷公藤红素通过下调PKM2的表达抑制肿瘤细胞的糖代谢增强多柔比星对肝癌细胞系Huh7的杀伤活性。     

欧前胡素抑制人肾癌786-O细胞增殖并促进其凋亡

目的 探究欧前胡素(imperatorin)对人肾癌细胞786-O增殖及凋亡的影响，初步研究其作用机制。方法 分别使用0,20,40,60,80,100,120,140,160,180,200μmol/L的欧前胡素处理786-O细胞24,48,72 h后，CCK-8法检测786-O细胞增殖，并计算IC₅₀,筛选最佳干预浓度进行后续实验。生物显微镜观察细胞形态变化；CCK-8实验和克隆形成实验检测各组细胞增殖能力的变化；流式细胞术检测各组细胞凋亡的情况；RT-qPCR和Western blot方法检测各组Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bcl-2的表达情况。从TCMSP和HERB数据库收集欧前胡素作用靶点。由GeneCards数据库获取肾癌疾病靶点，使用STRING数据库构建蛋白互作网络，并筛选欧前胡素治疗肾癌的核心靶点。结果 欧前胡素作用786-O细胞24 h和48 h的IC₅₀分别为94.36μmol/和65.66μmol/L。与0μmol/L组相比，40μmol/L组786-O细胞体积减小，细胞密度略减少，增殖能力受到抑制...     

五味子乙素逆转乳腺癌细胞多柔比星耐药的机制研究

目的 探讨五味子乙素逆转乳腺癌细胞MCF7多柔比星耐药的作用及其机制。方法 采用MTT法检测多柔比星(Doxorubicin, DOX)及DOX联合五味子乙素(Schisandrin B, Sch B)对乳腺癌细胞MCF7及耐药细胞MCF7/ADR的增殖抑制效果,计算IC₅₀以及耐药倍数;将MCF7/ADR建立DOX组、Sch B组及联用组,用集落实验检测细胞集落数情况,用流式凋亡术检测细胞凋亡情况,用细胞划痕实验检测细胞划痕愈合情况; Western blot检测P-gp、MRP1、p-STAT3、STAT3和c-Myc的蛋白相对表达水平。结果 MCF7及耐药细胞MCF7/ARD对DOX的IC₅₀值分别为(4.01 ± 0.15)μmol/L和(50.78 ± 0.67)μmol/L,耐药倍数为12.67;DOX联合SchB后对MCF7及MCF7/AD的IC₅₀值分别为(2.28 ± 0.34)μmol/L和(13.24 ± 0.58)μmol/L,耐药倍数为5.81。相对于DOX组,联用组的细胞集落数明显被抑制,细胞凋亡率增加,细胞划痕愈合率降低(P＜0.05)。同时,联用组下调P-gp、MRP1、p-STAT3以及c-Myc的蛋白表达水平(P＜0.05)。结论 五味子乙素通过抑制P-gp蛋白上调及STAT3信号通路逆转乳腺癌细胞MCF7多柔比星耐药。     

芹菜素诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的实验研究

目的:探讨芹菜素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡作用及相关机制。方法:常规培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞,取对数期生长细胞分为芹菜素40、80、160μmol/L组和空白对照组,分别用芹菜素40、80、160μmol/L和生理盐水进行处理。处理24、48h后,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测处理48h后凋亡和细胞周期情况,Western blot方法检测处理48h后,Pro-Caspase-3、Caspase-3和Caspase-6蛋白的表达情况。结果:MTT和流式结果显示,芹菜素80、160μmol/L处理组在24、48h均可显著抑制MDA-MB-231细胞的生长,且160μmol/L处理组比80μmol/L处理组的抑制作用更强。40μmol/L处理组在24h显示对MDAMB-231细胞的生长有一定作用,但与对照组相比无统计学差异。Western blot结果显示,芹菜素40、80、160μmol/L组和空白对照组处理细胞48h后,Caspase-3和Caspase-6蛋白表达水平随着芹菜素浓度的增高而依次上调,同时Pro-Caspase-3蛋白表达逐次降低。结论:芹菜素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞的凋亡,其作用机制可能与Caspase-3、6信号通路的激活有关。     

汉黄芩素体外对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的实验性研究

目的探讨汉黄芩素对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及可能分子机制。方法不同浓度(20、50、100μmol/L)汉黄芩素分别作用于人胃癌SGC7901细胞24、48、72 h,空白对照不进行任何处理。采用MTT法检测细胞增殖能力;采用划痕实验观察细胞迁移能力;采用Transwell法观察细胞侵袭能力;采用流式细胞仪检测细胞周期与凋亡情况; RT-qPCR和Western blot分别对细胞基质金属蛋白酶2、9(MMP2、MMP9)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)以及金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)的mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果 MTT实验结果显示,不同浓度的汉黄芩素抑制人胃癌SGC7901细胞呈浓度和时间依赖性;作用48 h后,汉黄芩素s期比例上升,诱导细胞凋亡(P0. 05); Transwell实验结果显示,汉黄芩素呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC7901细胞侵袭; RTq PCR和Western blot检测结果显示,汉黄芩素能够抑制SGC7901细胞中ICAM-1、MMP9、MMP2的mRNA和蛋白表达水平,但上调TIMP2 mRNA和蛋白表达(P0. 05)。结论汉黄芩素能够抑制人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞在S周期,诱导其凋亡。     

姜黄素影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的机制研究

目的：研究姜黄素（Curcumin）对N2a/APP695swe细胞钙调神经磷酸酶（Calcineurin,CaN）活性和三磷酸腺苷结合转运子A1（ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1）表达的影响;探讨Curcumin影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的可能机制。方法：MTT法分别检测1、5、10、20、40 μmol/L Curcumin或0.1、0.5、1、2、4 μmol/L CaN活性抑制剂环孢素A（Cyclospo－rinA,CsA）对N2a/APP695swe细胞存活率的影响;依据MTT筛选结果,分为正常对照组、模型组、Curcumin组：5 μmol/L Cur－cumin处理24 h的N2a/APP695swe细胞、CsA组：0.5 μmol/L CsA处理48 h的N2a/APP695swe细胞。酶底物显色法检测CaN活性,real-time PCR、Western blot检测ABCA1表达水平的变化。结果：与未处理组比较,5 μmol/L Curcumin组细胞存活率[（110.495±4.005）%]最高（P=0.023）;0.1、0.5、1、2、4 μmol/L CsA组细胞存活率依次为（105.532±4.292）%、（115.211±4.826）%、（76.317±4.475）%、（69.177±5.267）%、（54.687±3.912）%,与未处理组比较,0.5、1、2、4 μmol/L CsA组差异均有统计学意义（P值依次为0.001、0.000、0.000、0.000）;酶底物显色法显示与正常对照组[（18.519±1.664） nmol/mg]比较,模型组CaN活性[（24.488±3.041） nmol/mg]增加（P=0.007）,Curcumin组[（16.717±2.055） nmol/mg]、CsA组[（4.928±1.232）nmol/mg] CaN活性明显受到抑制（P值依次为0.002、0.000）;real-time PCR和Western blot显示Curcumin组ABCA1表达量（real-time PCR：1.988±0.355;West－ern blot：0.294±0.015）高于模型组（real-time PCR：1.000±0.000;Western blot：0.175±0.008）,差异有统计学意义（real-time PCR：P=0.009;Western blot：P=0.000）;与模型组比较,CsA组（real-time PCR：4.000±0.464;Western blot：0.470±0.016）的ABCA1表达水平增加（real-time PCR：P=0.000;Western blot：P=0.000）。结论：Curcumin能上调N2a/APP695swe细胞中ABCA1的表达,其机理可能与抑制CaN活性有关。     

COX-2选择性抑制剂西乐葆对IL-1β诱导下A549细胞COX-2表达的影响

目的研究西乐葆对A549细胞COX-2表达的影响。方法分别使用5、10和15μmol/mL的西乐葆对IL-1β诱导下A549细胞COX-2的表达进行干预,收集上清-20℃冻存用于检测PGE2,细胞用PBS洗两次提取RNA。不加西乐葆为对照组。实验重复4次。结果5、10和15μmol/mL的西乐葆干预组COX-2OD值/β-actinOD值分别为(1.4362±0.1061),(1.0142±0.079),(0.6896±0.097)与空白组(1.8058±0.132)相比较有明显降低,差异有显著性(P<0.05)。5μmol/mL组分别与10μmol/mL、15μmol/mL组相比,10μmol/mL组与15μmol/mL组相比都有统计学意义(P<0.05);5、10和15μmol/mL的西乐葆干预组PGE2分别为(17.25±0.98)×10-6mg/L,(11.33±1.49)×10-6mg/L和(10.23±2.00)×10-6mg/L较空白对照组(22.36±1.49)×10-6mg/L明显降低,差异有显著性(P<0.05)。5μmol/mL组分别与10μmol/mL、15μmol/mL组相比,10μmol/mL组与15μmol/mL组相比都有统计学意义(P<0.05)。结论西乐葆抑制人肺上皮细胞COX-2表达,其对IL-1β诱导下人肺上皮细胞COX-2mRNA表达和PGE2的分泌的影响是浓度依赖性的     

黄芩素对雷公藤甲素诱导的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用

目的:探讨黄芩素对雷公藤甲素诱导的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用。方法:收集大鼠卵巢颗粒细胞,经原代培养24 h后,用雷公藤甲素损伤大鼠卵巢颗粒细胞;干预组添加终浓度分别为50、100、200μmol/L的黄芩素,对照组添加相同体积的二甲基亚砜(DMSO)溶液,继续培养24 h(或以上)。采用MTT法测定卵巢颗粒细胞活力,流式细胞术Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡,Western blot法检测与细胞凋亡相关蛋白的表达情况;测定各组卵巢颗粒细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,评价抗氧化能力。结果:雷公藤甲素可显著降低大鼠卵巢颗粒细胞活力,诱导细胞凋亡,并使SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量增加;雷公藤甲素处理细胞的同时添加黄芩素干预后,卵巢颗粒细胞相对活力增加,细胞凋亡减弱,胞内SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低。Western blot结果显示,经过雷公藤甲素处理,卵巢颗粒细胞中促凋亡蛋白Bax表达量显著上升,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显降低;黄芩素干预后可以显著下调Bax表达量,上调Bcl-2表达量。结论:黄芩素可明显改变卵巢颗粒细胞的抗凋亡及抗氧化能力,对雷公藤甲素诱导的细胞凋亡起保护作用。     

血清同型半胱氨酸与进展性脑梗死的相关性研究

目的:探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)与进展性脑梗死的关系。方法:收集进展性脑梗死患者和正常对照血清,采用日立Hitachi7600-020型全自动生化分析仪测定血糖、血脂和Hcy水平,比较进展性脑梗死患者与对照组血糖、血脂、Hcy水平和高Hcy血症发生率。结果:进展性脑梗死患者中GLU、TC、TG、LDL-C、apoA、apoB水平均高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。进展性脑梗死患者和对照组血清Hcy水平分别为(26.9±6.2)μmol/L和(9.6±3.4)μmol/L,高Hcy血症发生率分别为93.1%和4.3%,两组比较差异有统计学意义(p<0.05)。男性和女性进展性脑梗死患者血清Hcy水平分别为(29.2±7.1)μmol/L和(25.5±5.6)μmol/L,两组比较差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:进展性脑梗死患者血清Hcy水平和高Hcy血症发生率明显增高,Hcy是进展性脑梗死的危险因素。     

微粒体NADPH-ADP/Fe~(2+)体系中耗氧量氧电极法的测定及铁、铜、锌对耗氧量的影响

作者用自制的反应池与国产测氧仪等配套建立了微粒体脂质过氧化体系中耗氧量的测定方法,并观察了铁、铜、锌对耗氧量的影响.玻璃反应池的内池置反应液并接氧电极与CY-2型测氧仪相连,外池充满循环恒温水.方法精密度测定,加入5μmol/L铜时重复7次测耗氧量,x±S为0.975±0.030μmol/(gprotein.min),CV为3.01％.实验结果表明:在大鼠肝微粒体NADPH-ADP/Fe~(2+)系统中,铁呈现对脂质过氧化的刺激作用,而锌、铜则表现为抗氧化作用,即对耗氧量的抑制作用.0,0.5、1.0,1.5mmol/L铁的刺激率(％)分别为1.7±1.1,89.1±3.3,108.7±7.5;而50,200.500μmol/L锌的抑制率(％)分别为20.8±4.5,40.6±6.3、59.2±1.4;5,50,100μmol/L铜的抑制率(%)分别为27.6±14.9.39.8±0.8、6.6±3.4     

豚鼠膀胱中ICCs样细胞与逼尿肌自主兴奋收缩性的关系探讨

目的:观察在体外环境中使用ICCs(Interstitial cells of Cajal,ICCs)样细胞表面c-kit受体抑制剂Glivec后,豚鼠逼尿肌自主收缩活动的变化,探讨逼尿肌中ICCs样细胞的作用。方法:制作豚鼠膀胱逼尿肌肌条,并在Kreb液中孵育,在体外环境中添加c-kit受体抑制剂Glivec,通过张力换能器输入生理记录仪记录逼尿肌肌条自主收缩活动的变化。结果:与对照组比较,不同剂量Glivec孵育逼尿肌肌条后,逼尿肌肌条收缩幅度明显下降(100μmol/L:547.87±43.00mg,p<0.01,n=15;300μmol/L:197.47±39.20mg,p<0.01,n=15),逼尿肌肌条收缩频率也明显下降(100μmol/L:2.44±0.16次/分,p<0.05,n=15;300μmol/L:1.11±0.17次/分,p<0.01,n=15)。结论:ICCs样细胞在逼尿肌自发收缩中可能充当起搏细胞的角色。     

五味子乙素通过抑制NF-κB/ COX-2活化来抑制CCl 4诱导的肝损伤

目的：探讨五味子乙素对CCl 4诱导的肝损伤的影响及其可能机制。方法：不同浓度五味子乙素处理HepG2细胞,CCK-8测定细胞活力,DPPH自由基清除活性测量五味子乙素的抗氧化活性。18只Wistar大鼠根据随机数字表法分为对照组、模型组和五味子乙素组,腹腔注射20％CCl4（2 mL / kg）诱导肝损伤,五味子乙素组以50 mg / kg 五味子乙素灌胃,对照组灌胃等量0.9%氯化钠溶液,检测血清碱性磷酸酶（ALP）、天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）,苏木精-伊红（HE）染色进行组织学分析,蛋白印迹检测肝组织和肝癌细胞NF-κB和COX-2的蛋白表达。结果：五味子乙素的抗氧化活性随浓度的增加而增加[50、100、150和200 μM 五味子乙素的DPPH自由基清除率分别为(72.29±0.54)%、(82.81±0.45)%、(91.74±0.98)%和(98.63±1.15)%,P<0.05],以剂量依赖性方式降低了HepG2细胞的活力[5、10、20、40和80μM 五味子乙素的细胞活力分别为(94.81±3.07) %、(88.21±3.67) %、(78.09±5.73) %、(59.23±13.35) %和(27.57±13.94) %,P<0.05]。与模型组相比,五味子乙素组体重[(297.89±13.47)g比(374.31±15.77)g]显著升高,肝脏重量[(14.84±1.73)g比(12.72±1.18)g]和肝指数（0.05±0.007比0.03±0.002）显著降低（P<0.05）。五味子乙素组ALP[(630.81±53.71)U/L比(146.42±6.48)U/L]、AST[(143.05±13.60)U/L比(69.92±8.49) U/L]和ALT[(153.82±16.34)U/L比(47.81±9.97)U/L]较模型组均显著降低（P<0.05）,五味子乙素处理可明显减轻CCl 4引起的肝组织损害,五味子乙素处理可在体内和体外抑制NF-κB和COX-2的活化（P<0.05）。结论：五味子乙素可能通过抑制NF-κB/ COX-2活化来抑制CCl 4诱导的肝损伤。     

异甘草素在体内外抑制喉癌细胞生长的作用及其机制

目的 探究异甘草素(ISL)在体内外抑制喉癌细胞生长的作用机制。方法 采用MTT法检测人喉癌细胞系Hep-2和TU212用不同浓度的异甘草素(0,20,40,80,160μmol/L)培养24 h以及20μmol/L的异甘草素培养12,24,48 h的细胞存活率。将喉癌细胞分为对照组(未处理)和ISL 20μmol/L组(20μmol/L异甘草素处理24 h),通过Hoechst 33258染色观察细胞形态。通过细胞划痕实验检测细胞迁移，通过Transwell实验检测细胞侵袭，通过流式细胞仪检测细胞凋亡。Western blot检测Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、信号转导和转录激活因子3(STAT3)和p53的蛋白表达水平。将接种Hep-2细胞的裸鼠随机分为2组：对照组(注射0.2 ml DMEM培养基)和异甘草素组(注射0.2 ml含有25 mg/kg异甘草素的DMEM培养基),每组5只裸鼠，均连续给药7 d,末次给药21 d后测量肿瘤体积。结果 与0μmol/L异甘草素相比，当异甘草素浓度≥20μmol/L时，Hep-2和TU212细胞存活率均显著降低(P&...     

硬膜外阻滞中寒战与利多卡因全身吸收作用的研究

硬膜外阻滞下择期手术13例.分两组,Ⅰ组8例,按常规硬膜外注入2％利多卡因15ml,注药后5、15、和30min抽静脉血测定血浆利多卡因浓度,结果分别为14.001±4.628μmol/L、15.413±5.236μmol/L和14.039±4.082μmol/L;Ⅱ组5例,均为硬膜外阻滞中发生寒战者,于出现寒战后3、10、20min抽静脉血测定血浆利多卡因浓度,结果分别为10.606±7.123μmol/L、9.720±4.260μmol/L和7.846±2.182μmol/L.结果表明两组病例血浆利多卡因浓度均低于中毒血药浓度,提示硬膜外阻滞下寒战反应主要不是利多卡因中毒所致.