弱电场对博来霉素诱导裸鼠移植瘤凋亡的影响

目的 弱电场下探索电穿孔促进博来霉素诱导头颈部肿瘤凋亡的效果。方法 采用免疫组化的方法对人头颈部癌裸鼠移植瘤的肿瘤组织切片(40张)进行TUNEL检测。其中A,B为电化学组A：50v(E),20μg(B);B：100v(E),20μg(B);C药物组：20μg(B);D,E电压组D：50v,E：100v;F：为对照组予以PBS。结果 A、B两组调亡明显,C组凋亡极少,D,E两组无凋亡细胞。结论 弱电场下电穿孔促进了博来霉素对头颈部肿瘤的诱导凋亡效果。     

野生型p53基因转染对人肺腺癌细胞系A549 VEGF表达和肿瘤生长的影响

目的:研究外源性野生型p53(wtp53)基因对人肺腺癌细胞系A549血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响. 方法:将含有wtp53基因的pcDNA3.1-wtp53和空载体pcDNA3.1-neo质粒,通过阳离子脂质体转染A549细胞,应用半定量RT-PCR和ELISA技术检测其对VEGF表达情况的影响;将A549,A549/pcDNA3.1-neo和A549/ pcDNA3.1-wtp53细胞分别接种至裸鼠皮下,观察成瘤时间及瘤块大小;免疫组化法计数VEGF阳性细胞百分数并进行半定量分级. 结果:pcDNA3.1-wtp53转染组VEGF mRNA和蛋白表达均明显低于其他2组. pcDNA3.1-wtp53转染后裸鼠成瘤时间延长,瘤块生长缓慢. 结论:wtp53基因转染可抑制VEGF表达和肿瘤的生长.     

多西紫杉醇在肝癌细胞裸鼠肝脏移植瘤中对P53、VEGF作用的研究

目的探讨多西紫杉醇在肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤中与血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤抑制蛋白(p53)表达的研究.方法建立肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,建模成功后,将20只裸鼠分成两组,多西紫杉醇组及肿瘤对照组.3周后处理裸鼠,应用免疫组化Envision法检测实验组与对照组肝癌组织中p53、VEGF表达情况.结果实验组肝癌组织中p53表达阳性率41.26%,显著低于对照组肝癌组织的p53表达阳性率87.16%,两者间差异有统计学意义(P<0.05).实验组肝癌组织中VEGF表达阳性率为36.79%,显著低于对照组肝癌组织的VEGF表达阳性率68.27%,两者间差异有统计学意义(P<0.05).结论p53在诱导肝癌细胞凋亡中起到重要作用,VEGF过度表达在肝癌微血管生成过程中起重要作用,多西紫杉醇可降低p53、VEGF的表达,从而起到移植肿瘤生长及转移的作用.     

腺病毒介导VEGF-siRNA抑制骨肉瘤组织中VEGF表达的实验研究

目的探讨腺病毒介导的VEGF-siRNA对荷人骨肉瘤裸鼠肿瘤组织中VEGF表达的影响,为靶向骨肉瘤肿瘤血管治疗提供研究基础。方法以MG63细胞悬液(1×106/ml)皮下接种于30只裸鼠,随机分为A、B、C3组;各组于细胞接种后的第7天开始自尾静脉给药。A组注射Ad-VEGF-siRNA100μl,隔日注射,每周注射3次,共注射9次,总量为2×109pfu。B组注射Ad-EGFP100μl,隔日注射,每周注射3次,共注射9次,总量为2×109pfu。C组注射PBS 100μl,隔日注射,每周注射3次,共注射9次。各组分别于接种的14 d和26 d取瘤,以荧光实时定量PCR(real time PCR)各组裸鼠肿瘤组织中VEGF-mRNA的含量。结果14 d和26 d A组裸鼠肿瘤组织中VEGF-mRNA的RQ(relative quantity)平均值分别为(0.088±0.094),(0.075±0.086);B组RQ平均值分别为(0.179±0.103)和(0.167±0.265);C组RQ平均值分别为(0.185±0.085)和(0.183±0.128)。A组RQ平均值与B、C组的差别有统计学意义(P<0.05),而B、C组无差异(P>0.05)。结论腺病毒介导的VEGF-siRNA能够抑制骨肉瘤组织中VEGF的表达,为RNA干扰技术靶向血管治疗骨肉瘤提供了理论可能。     

外源p53基因和抗血管生成小肽F56联合对小鼠乳腺癌移植瘤生长和转移的抑制作用

目的:观察腺病毒介导的野生型p53基因联合抗血管生成小肽 F56对乳腺癌移植瘤及其肺转移灶的抑制作用.方法:将人乳腺癌BICR-H1细胞接种于裸鼠或NOD/SCID小鼠乳垫内.成瘤后,裸鼠随机分成Adp53+F56组、 Adp53组、F56组和空白对照组,NOD/SCID小鼠则随机分成Adp53+F56组、Adp53组、F56组、Adlacz组和空白对照组,分别采用腺病毒p53、F56或二者联合治疗,以小肽溶剂作对照,NOD/SCID小鼠还加用腺病毒空载体(Adlacz)作对照.观察裸鼠移植肿瘤体积、组织病理学改变,用免疫组织化学方法检测肿瘤p53、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的表达及微血管密度(microrascular density, MVD);观察NOD/SCID小鼠移植瘤的肺转移情况.结果:p53基因、F56及二者联合治疗均能明显抑制裸鼠移植瘤生长,但以联合治疗组最显著,Adp53+F56组、Adp53组、F56组和空白对照组肿瘤最终的相对生长体积分别为2.47、4.37、4.69和12.49 ;免疫组织化学检测发现,Adp53+F56组和Adp53组肿瘤内p53表达增高,P53阳性率分别增高了9.4%、6.3%,但与空白对照组比较,差异无统计学意义(P=0.693);Adp53+F56组、Adp53组、F56组VEGF表达下降, VEGF阳性率分别下降21.9%、9.4%和3.1%,但与空白对照组比较,差异亦无统计学意义(P=0.284);Adp53+F56组、Adp53组、F56组MVD分别为14.50±2.54、16.28±3.44和18.06±7.66,与空白对照组(24.93±6.53)比较,差异有统计学意义(P=0.000), 且Adp53+F56组、Adp53组、F56组瘤内出现坏死,并以Adp53+F56组最为明显.NOD/SCID小鼠Adp53+F56组、Adp53组、F56组肺转移灶平均数目分别为1.143±0.378, 2.750±0.886, 3.375±0.518,较Adlacz组(5.000±0.816)和空白对照组(5.670±0.817 )都显著减少(P=0.000),尤以Adp53+F56组最少.结论:p53基因联合抗肿瘤血管生成小肽F56可显著抑制肿瘤的生长和转移.p53基因影响肿瘤生长与转移的因素之一可能与p53对VEGF的抑制作用有一定关系.     

人卵巢癌细胞系HO-8910裸鼠皮下移植瘤的建立

目的:探讨建立卵巢癌细胞系HO8910的裸鼠皮下移植瘤模型的适宜条件。方法:分别用2.5×106/100μL(A组),3.5×106/100μL(B组)和4.5×106/100μL(C组)的细胞接种浓度,注入裸鼠后项中间皮下,观察成瘤情况;用4.5×106/100μL的细胞接种浓度,分别接种于裸鼠后项中间(C组),背部(D组)和前肢腋窝皮下(E组),观察成瘤情况;分别用第38代(F组),第25代(G组)和第10代(C组)的肿瘤细胞4.5×106/100μL,注入裸鼠后项中间,观察各组成瘤情况。结果:A组成瘤率为60%,B组和C组的成瘤率均为100%,但C组的成瘤速度明显高于B组;C组,D组和E组的成瘤率均为100%,注射肿瘤细胞后第2周,C组,D组和E组的肿瘤生长平均相对体积分别为3.0593±0.6851,2.4348±0.4862和2.4039±0.3631,各组间差异无显著性;注射肿瘤细胞后第4周,C组,D组和E组的肿瘤生长平均相对体积分别为13.4832±2.2639,9.3437±1.0986和8.9537±1.0041,C组显著高于D组和E组(P<0.01);G组的成瘤率为30%,F组的成瘤率为50%,与C组相比,差异有显著性(P<0.01)。结论:使用HO8910细胞株,接种浓度为4.5×106/100μL,接种部位为后项中间,接种时尽量使用传代次数少,细胞活性高的细胞,能获得较理想的裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。     

血管内皮生长因子、p53与肺癌的关系研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)是一种与肿瘤关系最为密切的血管生成因子。VEGF对肺癌组织的生长和扩散有重要影响。p53是一种重要的抑癌基因。已有研究表明,野生型p53可以抑制VEGF的表达,并通过旁观效应抑制肿瘤的生长和转移,而突变型p53则可以上调VEGF的表达,促进血管生成并促进肿瘤的生长和转移,但也有相反的报道。本文就VEGF、p53蛋白与肺癌关系研究的进展简要综述。     

反义血管内皮生长因子(VEGF)转染体内抑制胆囊癌VEGF及其受体表达的研究

目的:探讨Oligofectamine介导的血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)转染对人胆囊癌GBC-SD细胞裸鼠移植瘤的生长及VEGF、Flt-1和KDR表达的影响。方法:通过裸鼠皮下接种体外培养的人胆囊癌GBC-SD细胞建立人胆囊癌裸鼠移植瘤模型,并将裸鼠分为对照组(A组)、VEGF SODN Oligifectamine组(B组)和VEGF ASODN Oligifectamine组(C组),各组裸鼠在接种后24h内,在接种部位皮下分别缓慢注射200μl磷酸缓冲液(PBS)、VEGF SODN100μg Oligofectamine0.5μl(总体积为200μl)及VEGF ASODN100μg Oligofectamine0.5μl(总体积为200μl),每3天1次,连续治疗5周,观察各组裸鼠的成瘤性、体积及瘤重的变化,并运用免疫组化技术检测胆囊癌裸鼠移植瘤中VEGF、Flt-1和KDR的表达变化。结果:A、B、C组裸鼠2周时的成瘤率分别为87.5%、87.5%和37.5%,C组显著低于A、B组(P<0.05),5周时各组的成瘤率均为100%。各组裸鼠移植瘤5周时的体积和瘤重分别为:A组(253.49±27.11)mm3和(1.96±0.17)g,B组(255.84±26.51)mm3和(1.86±0.21)g,C组(125.45±17.49)mm3和(0.97±0.13)g,C组显著低于A、B组(P<0.05),C组的抑瘤率为(50.79±9.19)%。A、B组裸鼠移植瘤VEGF、Flt-1和KDR的表达均无统计学差异(P>0.05),而C组裸鼠移植瘤VEGF、Flt-1和KDR的表达较A、B组明显减弱(P<0.05)。结论:VEGF ASODN在体内能显著抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的增殖,降低其在裸鼠体内的成瘤性,抑制VEGF、Flt-1和KDR在蛋白水平的表达,抑制裸鼠移植瘤的生长及血管的形成。     

马钱子碱经皮给药对乳腺癌种植瘤中VEGF和COX-2蛋白表达的影响

目的:探讨马钱子碱经皮给药对乳腺癌种植瘤的抑制机制,为乳腺癌的治疗提供新的途径。方法 :培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,取对数生长期细胞制成单细胞悬液。20只雌性Balb/c-nu/nu裸鼠麻醉后,无菌条件下,局部肌肉注射乳腺癌单细胞悬液0.2 mL,复制乳腺癌肿瘤模型。20只荷瘤裸鼠随机分为4组:马钱子碱高剂量组(A组)、中剂量组(B组)、低剂量组(C组)和模型组(D组),分别给予20%、10%、5%浓度的马钱子碱膏(经腹腔给药,每日总剂量不超过LD50)和凡士林经皮给药,涂抹裸鼠的整个腹部和造模的部位,每次1 g,每日4次,连续15 d。观察各组裸鼠生存状态和肿瘤生长情况,评价抑瘤率;检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达。结果:①肿瘤大小和抑瘤率:A组和B组裸鼠生存状态良好,肿瘤引起的活动障碍较轻,肿瘤生长均受到不同程度的抑制,肿瘤生长较C组和D组迟缓,各组的抑瘤率分别为A组53%、B组45%、C组27%(P<0.05);而C组和D组裸鼠出现活动障碍、瘫痪、消瘦和精神萎靡,肿瘤体积较大。②免疫组化结果:VEGF和COX-2马钱子碱A组分别为0.22±0.01和0.15±0.02,B组分别为0.25±0.01和0.18±0.01,C组分别为0.26±0.02和0.20±0.01,D组分别为0.42±0.02和0.35±0.03。VEGF和COX-2蛋白在肿瘤组织中表达的程度与模型组比较是随马钱子碱剂量的增加而逐渐减弱,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:马钱子碱经皮给药能抑制乳腺癌种植瘤中VEGF和COX-2的蛋白表达。     

阿司匹林调节小鼠移植性肝癌的基因表达

目的:观察阿司匹林调节小鼠H22 移植性肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)和p53的表达,探讨该药抑制肿瘤的作用机制.方法:昆明种雄性小鼠60 只,按随机分组为A～ F 6 组;A ～E 组于前肢右腋皮下接种H22 肿瘤细胞悬液(1×1010/L)0.12 mL, 24 h 后灌胃给药.A～C组分别给予80 g/L, 40 g/L, 20 g/L阿司匹林1 mL,D 组予20 g/L 5-FU 1 mL,E组予生理盐水1 mL,每日1 次,连续用药10 d,停药24 h ,称质量并处死动物,剥取瘤块称质量,计算出肿瘤生长抑制率,用免疫组化法检测癌细胞中VEGF和p53蛋白的表达.F 组予饲料及水分正常饲养.结果:A,B,C,D组均有明显的抑瘤作用(分别为49.84%, 23.89%, 29.07%, 54.63%),其中以A组和D组的抑瘤作用最明显(与B,C组比较P＜0.05) .造模各组动物的肝癌细胞中均见VEGF 和p53阳性染色,但阳性表达程度不同,与B,C,E 组比较, 阿司匹林大剂量(A)组和5-FU(D)组可降低肝癌细胞中VEGF,p53的阳性表达(P＜0.05).结论:阿司匹林对小鼠H22 移植性肝癌有抑瘤作用,抑制肿瘤生长的机制可能与下调VEGF和p53的水平有关.     

南京地区冬季蔬菜中NO_2~－、NO_3~－含量及卫生学对策

测定南京地区冬季２８种蔬菜中ＮＯ２－、ＮＯ３－含量的结果表明：腌制蔬莱中ＮＯ２－含量平均为新鲜蔬菜中的１６倍；南京地区居民冬季大量食用的大品种蔬菜中ＮＯ２－、ＮＯ３－含量远高于其它蔬菜；ＮＯ２－的ＡＤＩ超出ＷＨＯ规定。鉴此，本文提出了卫生学对策。     

老老年高血压的特殊性及诊疗新进展

高血压是老老年群体中常见的慢性病,患病率高,并发症多,危害性大,是心血管疾病重要的危险因素。它的临床表现和治疗标准与中青年高血压患者不同,不同个体的治疗方案也不相同。通过对近几年老老年高血压的诊断和治疗新进展的了解,重点探讨了老年高血压的治疗特点,坚持个体化用药,从整体考虑,根据老年人用药的特殊性和复杂性,选择最优化的治疗方案,降低药源性损害,最大程度地降低高血压的危害。     

青少年儿童近视成因及防控进展

众所周知,近视可由遗传、外界环境、不良用眼习惯等综合性因素导致,主要预防措施为定期进行视力筛查,并及时对症治疗,与此同时养成良好用眼习惯,保持充足睡眠,保证一定运动量及营养均衡。若判定为近视,可通过光学镜片、西药治疗及中医治疗等方式延缓度数增加,若以上方式均无效,还可通过手术方式进行矫正。目前,近视给青少年的健康及成长带来的重大影响已成为公论,故我国近视低龄化问题也越发受到社会各界的关注。针对社会人群而言,了解近视成因,对精准预防与有效控制格外重要。本文对近年来文献报道进行总结,从近视形成原因、预防、筛查及控制措施等方面进行综述。     

转型国家和地区的腐败与反腐败现象研究

腐败是一国政治、经济、文化、司法情况的侧面反映.俄罗斯、韩国、台湾等转型国家和地区民主政治发展中腐败放量增加,既有腐败的一般性原因.更有转型期制度约束缺失下政治分权导致腐败切入点分散化、政府主导型市场经济下权力设租和寻租恶性循环、传统政治道德体系解体下公职人员从政心理发生裂变等特定因素的推助.我们必须看到导致腐败的因素会随着问题被暴露以及社会寻求完善的民主与法制而发生改变.民众的民主监督技能也会因民主的教育而大大提高.对于转型国家和地区民主化发展中不断上演的政治腐败和社会动乱,我们不能在一种幸灾乐祸的心态下固步自封,停止民主政治发展的探索,更不能背离民主.需要借鉴当代民主理论的研究成果和民主实践的经验与教训.顺应本国的国情和社会发展的客观需要.正确制定我国民主政治发展的方略.有效遏制权力腐败.     

澳大利亚GMP与我国GMP的比较分析

目的:对澳大利亚和我国GMP管理进行对比分析和探讨.方法:借鉴澳大利亚TGA的药品质量监管经验,对GMP体系、现场检查和跟踪检查进行全面阐述,并与我国情况的比较分析.结果与结论:我国GMP管理体系存在严重缺陷,必须进行改进以适应GMP管理国际一体化的发展趋势,促进我国医药企业进入国际市场.     

昆明小鼠完成放射状水迷宫和嗅觉辨别任务时年龄和性别的差异

目的 探讨昆明鼠的空间和非空间学习记忆能力在年龄和性别上的差异。方法 应用放射状水迷宫试验和嗅觉辨别记忆试验，分别记录小鼠寻找逃生平台的错误数和发现被掩埋巧克力的时间。结果 在放射状水迷宫试验中，成年鼠的空间学习记忆能力较幼鼠好，进入衰老进程后，小鼠空间学习记忆能力逐渐衰退；在嗅觉辨别记忆试验中，幼鼠的嗅觉辨别功能较成年与老年鼠好，其中幼年雄鼠的嗅觉功能最好。成年鼠及老年鼠之间无年龄差异，而有明显的性别差异，表现为雌鼠的嗅觉功能优于雄鼠。结论 在发育和衰老过程中，昆明小鼠的空间性和非空间性学习记忆能力存在非同步性年龄、性别差异。