HPV6b VLPs检测尖锐湿疣病人血清和宫颈分泌物抗体的意义

目的 :探讨人乳头瘤病毒 (HPV)感染后尖锐湿疣 (CA)病人机体产生的免疫反应及特异性抗体用于HPV感染的诊断价值。方法 :采用重组杆状病毒 昆虫细胞系统制备HPV 6bL1VLPs抗原 ,以酶联免疫吸附试验 (ELISA)分别检测 4 9例CA病人和 4 5例正常对照的血清抗体、4 6例CA病人和 36例正常对照的宫颈分泌物抗体 ,并用血凝抑制试验检测抗体的中和活性。结果 :CA组HPV6bL1VLPs特异性的血清IgG抗体和分泌物IgA抗体的OD值和阳性率均显著高于正常对照组 (P <0 .0 0 1)。HPV 6型与HPV 11型DNA阳性者的血清IgG和分泌物IgA抗体的阳性率差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。血清IgG和分泌物IgA抗体血凝抑制试验平均效价较正常对照组为高。结论 :生殖道HPV感染后可产生全身和局部生殖道粘膜抗体反应 ,两类抗体均具中和活性。HPV6型与HPV11型感染者的血清和分泌物抗体均存在交叉反应。血清抗体和局部分泌物抗体可能具有用于诊断HPV感染的价值     

抗hMIF单克隆抗体的活性鉴定及其对脓毒症小鼠的保护作用

目的对制备的人巨噬细胞移动抑制因子(anti-human macrophage migration inhibitory factor,hMIF)单克隆抗体进行生物学活性鉴定,并研究其对脓毒症小鼠的保护作用。方法通过ELISA、Western blot、免疫组织化学等方法鉴定抗MIF单克隆抗体F11的亚类、抗体亲和力及特异性;通过一氧化氮(nitric oxide,NO)释放抑制试验和异构酶活性抑制试验,鉴定F11抗体的生物学活性;选用C57BL/6J小鼠构建CLP、LPS诱导脓毒症模型,研究F11抗体对脓毒症小鼠生存率的保护作用及对血清细胞因子TNF-α、IL-6的影响。结果 F11抗体亚类为IgG1型,亲和力为2.5×1010,Western blot及免疫组织化学显示强阳性;F11抗体显著抑制MIF刺激RAW264.7细胞释放NO(P<0.01)及MIF异构酶活性(P<0.01);明显提高脓毒症小鼠生存率(CLP模型:P<0.01,LPS模型:P<0.05)且具有剂量依赖关系,并对CLP术后血清TNF-α和IL-6的升高具有明显抑制作用(P<0.05)。结论成功制备了高特异性、高亲和力、具有异构酶活性抑制作用的抗MIF单克隆抗体,显著提高致脓毒症模型小鼠生存率并降低小鼠血清TNF-α、IL-6水平。     

应用免疫酶法检测宫颈癌病人血清中抗单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型抗体

用免疫酶法对31例宫颈癌病人及53例对照组血清进行了抗HSV抗体检测,结果宫颈癌组的抗HSV—2抗体阳性率及抗体滴度远较对照组高。有15例宫颈癌病人血清并用免疫酶法及中和试验检测抗HSV抗体,二法测得HSV型别完全一致的12例(80%),唯用免疫酶法测得的抗体滴度均较中和试验高出1—4个倍比滴度。     

Bioactivity identification of anti-hMIF monoclonal antibody and its protective effec on sepsis mice

目的 对制备的人巨噬细胞移动抑制因子(anti-human macrophage migration inhibitory factor,hMIF)单克隆抗体进行生物学活性鉴定,并研究其对脓毒症小鼠的保护作用.方法 通过ELISA、Western blot、免疫组织化学等方法鉴定抗MIF单克隆抗体F11的亚类、抗体亲和力及特异性;通过一氧化氮(nitric oxide,NO)释放抑制试验和异构酶活性抑制试验,鉴定F11抗体的生物学活性;选用C57 BL/6J小鼠构建CLP、LPS诱导脓毒症模型,研究F11抗体对脓毒症小鼠生存率的保护作用及对血清细胞因子TNF-α、IL-6的影响.结果 F11抗体亚类为IgG1型,亲和力为2.5×1010,Western blot 及免疫组织化学显示强阳性;F11抗体显著抑制MIF刺激RAW264.7细胞释放NO(P ＜0.01)及MIF异构酶活性(P＜ 0.01);明显提高脓毒症小鼠生存率(CLP模型:P＜0.01,LPS模型:P ＜0.05)且具有剂量依赖关系,并对CLP术后血清TNF-α和IL-6的升高具有明显抑制作用(P＜0.05).结论 成功制备了高特异性、高亲和力、具有异构酶活性抑制作用的抗MIF单克隆抗体,显著提高致脓毒症模型小鼠生存率并降低小鼠血清TNF-α、IL-6水平.     

抗流感病毒血清的制备

目的 :制备抗流感病毒血清为所分离的流感病毒亚型分型和鉴定之用。方法 :用灭活流感病毒免疫家兔 ,使其产生抗体 ,收集兔血清 ,测定抗血清的血凝抑制效价以判定血清的抗体滴度。结果 :抗H5N1 血清和抗H6 N1 血清效价高且与其它病毒抗原不产生交叉反应 ,抗H9N2 (Y2 80 )和抗H9N2 (G1 )两种血清彼此间有较明显的交叉反应 ,可能与两者血凝素结构未发生变化有关 ,故这两种血清均可应用于H9N2 病毒的鉴定。结论 :本方法制备的抗流感病毒血清效价高 ,交叉反应小 ,可作流感病毒的亚型分型及鉴定之用     

O型孕妇产前IgG抗-A(B)抗体效价变化分析

目的:探讨O型孕妇产前IgG抗-A(B)抗体效价的变化及其拐点的出现时间。方法:使用经典抗球蛋白试验检测2 777名O型孕妇血清中IgG抗-A(B)抗体效价,并按妊娠次数、孕周进行结果分析。结果:随着妊娠次数的增加,血清中IgG抗-A(B)抗体水平也不断增高,首次妊娠与2次及以上妊娠孕妇血清IgG抗-A(B)抗体效价相比均存在显著性差异（P＜0.01）;随着孕周的增加,血清中IgG抗-A(B)抗体水平在16～19周时缓慢增高,在妊娠20周时出现一个明显增高的拐点,而后继续增高并在孕24～28周时达到峰值,随后不再增长。结论:O型孕妇在妊娠20周时应进行IgG抗-A(B)抗体效价检测,具有多次妊娠史的O型孕妇,体内可能存在高效价的IgG抗-A(B)抗体,应及时进行抗体检测。     

抗腺病毒载体单克隆抗体的制备及其初步鉴定

目的 研制抗腺病毒载体(Adv)表面蛋白的单克隆抗体(McAb).方法 将Adv以Al(OH)3佐剂化,常规免疫BALB/c小鼠.采用细胞融合技术制备抗Adv McAb;采用ELISA、免疫细胞化学及Western blot法对McAb进行筛选与鉴定.结果 共获得6株可稳定分泌特异性McAb的细胞(A4H11、A8C7、F1H5、G1D2、G4E3、H2G8),其染色体数目为102～106条,所分泌McAb均属IgG1亚类,持续3个月适应培养仍能保持其稳定的抗体分泌能力.腹水抗体的ELISA效价在1∶106～1∶108之间;Western blot结果显示6株McAb均与来自腺病毒载体及野生3、5、7型腺病毒抗原提取物中分子量约为114 kD的多肽反应,据此推测它们均是抗ADV-TK六邻体蛋白的McAb.结论 成功制备出6株抗腺病毒载体六邻体单克隆抗体,为腺病毒载体应用于肿瘤基因治疗的临床前研究提供物质基础.     

预包被抗体结合抗原包被方式酶联免疫吸附试验共系统检测乙型肝炎病毒e抗原结果分析

目的探讨用竞争抑制法检测预包被抗体结合抗原包被方式[抗乙型肝炎病毒(HBe)EIA]商品试剂盒共系统检测乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的可行性及结果判定方法。方法用竞争抑制法检测抗HBe酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒共系统检测1000份随机血清(浆)标本抗HBe与HBeAg,并以常规ELISA双抗体夹心法检测HBeAg试剂盒检测HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测HBeAg,其阳性检测孔显色较抗HBe阴性对照孔(或HBeAg阴性参比对照孔)明显加深,易于目测;其比色判定临界值(COV)易于设定(或使用HBeAg临界值血清),与常规ELISA检测HBeAg比色判定差异无统计学意义(配对计数资料比较的χ2检验:相关检验均为P<0.005,υ=1,a=0.05;优劣检验依次为HBeAg临界值血清①P>0.9000,υ=1,a=0.05、中和(竞争)抑制法检测抗HBeEIA商品试剂盒中抗HBe阴性对照;②0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05、ELISA共系统检测HBeAgCOV;③0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,但χ21<χ22<χ23)。结论用竞争抑制法检测抗HBeELISA商品试剂盒能够检测HBeAg,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA双抗体夹心法检测HBeAg试剂盒,实用价廉,值得推广。     

ELISA间接法检测人轮状病毒血清抗体的研究

本文对ELISA间接法检测人轮状病毒(RV)血清抗体的方法学进行了探讨.结果表明,RV抗原能直接包被酶标反应板,与经免疫血清间接包被者无甚差异;RV抗原经EDTA、硫氰酸钾或盐酸胍预作用后再行包被,可提高抗原的包被效果.以ELISA间接法和间接双抗体夹心法同时检测34份血清标本,两者检出率无差异(P>0.05);进一步检测11份阳性血清的抗体效价,两法GMT分别为755.1和822.1,也无差异(P>0.05).进行ELISA间接法阻断试验,阻断率达95.6%;重复性试验表明变异系数在3.7～8.7%之间.因此,ELISA间接法敏感性高、特异性强和重复性好,可代替ELISA间接双抗体夹心法以检测RV血清抗体.     

单克隆双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫卵抗原

用双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫卵主要血清学抗原。为了在所用的单克隆抗体H6、C12、H7及B2中获得包被抗体与复盖抗体(酶联抗体)的最适组对,我们进行了20组配对试验。实验结果表明,H7单抗最适于作包被抗体而H6单抗最适于作复盖单抗。有兴趣的是最佳的配对组是H7-EH6和混合单抗-EHG组而不是混合单抗-E混合单抗组。上述两个最佳组对在10次试验的OD均值均较任何一组高,有非常显著的意义(P<0.01)。我们还观察到,同一单抗既作包被抗体又作复盖抗体的效果常不理想。     

伤寒杆菌L型与其细菌型抗原性比较

本文用因子血清检查伤寒杆菌H901株细菌型及L型的抗原结构,结果细菌型除Vi抗原缺失外,O和H抗原均完整;L型O_9抗原检测不出,但与AFO多价血清呈弱阳性,可能另有少量其他O抗原,如O_(12)抗原存在,H抗原仍保留不变。以伤寒杆菌L型和细菌型分别免疫家兔,将所获得的免疫血清与其相应的H与O抗原进行试管凝集1试验,结果L型免疫血清的O抗体及H抗体的凝集效价较细菌型的低(P<0.01,P<0.001),表明L型的抗原性降低。用L型抗原与细菌型免疫血清以及用细菌型抗原与L型免疫血清进行交叉凝集试验,两者之间有一定交叉凝集。而交叉凝集吸收,则见细菌型抗原能吸收掉L型免疫血清中全部的抗体,L型抗原却只能吸收细菌型免疫血清中部分抗体。     

The Widal test in a normal healthy population in the Sudan

The Widal test was performed in 114 normal individuals from the Gezira area in Sudan. Salmonella typhi O agglutinins were found at a titre of 1.320 in 12 (10.5%) of them. Salmonella paratyphi A agglutinins were found at 1.160 in 5 (4.3%) and Salmonella paratyphi B "O" agglutinins were found in 6 (5.3%) at a titre of 1.160. None of these individuals had a history of typhoid fever or vaccination with TAB vaccine. The following points emerged: (i) normal healthy people in the Sudan have high antibody titres of Salmonella typhi; (ii) the Widal test in the Sudan should be interpreted against this background; (iii) previous diagnostic titre of 1.160 for S. typhi results in high false positive results; (iv) a titre above 1.320 is suggested as diagnostic for S. typhi; 1.160 for both S. partyphi B and S. paratyphi A.     

大连地区100例健康人肥达氏试验正常值的评价

本文评价了大连市100例健康者肥达氏试验的抗体水平,结果表明绝大多数伤寒杆菌O与H的凝集效价在正常范围内,仅部分乙型与丙型副伤寒的H凝集效价高过正常值(17例乙型副伤寒H≥1:80,5例丙型副伤寒H是1:40)。所以我们认为肥达氏试验的原定标准仍适用于大连地区。     

伤寒沙门菌生化特性分析

目的：了解现在的伤寒沙门菌可能发生的变异。方法：用纯化的伤寒沙门菌检测其抗原性、生化反应性等特性。结果：①与标准菌株的反应模式相比较,现在的菌株的Ｈ２Ｓ、ＭＲ反应、枸橼酸盐、肌醇、山梨醇、阿拉伯糖的反应性发生了改变,其中ＭＲ反应的变异有高度显著性差异（Ｐ〈０．００５）;②Ｈｄ抗原可消失而不丧失动力且很易发生变异（５２．００％）,Ｏ９抗原性亦可消失或减弱;③ＳＳ平板培养时,其菌落可发生侏儒型变异,变     

利用减毒伤寒菌为载体构建稳定的三价抗原菌株

目的：利用减毒伤寒菌为载体构建稳定的三价抗原菌株。方法：以△aroA、△aroC突变的伤寒图为载体,结合宿主—载体平衡致死表达系统[1],将志贺氏毒素B亚单位（StxB）基因、人源肠毒源性大肠杆菌（EnterotoxigenicE．coltETEC）定居因子表面抗原CS6（ColiSurfaceAntigen,CS）基因引入该菌,构成一种潜在的三价抗原菌株。结果：重组质粒pSS64在不带任何抗生素基因的情况下,在asd－减毒沙门氏伤寒菌中能稳定存在。结论：人沙门氏伤寒菌芳香族氨基酸基因缺陷可使野生菌减毒并有可能成为一种良好的的口服活菌苗株     

具有伤寒杆菌和痢疾杆菌抗原的杂交菌株GW_1的构建

以福氏痢疾杆菌２ａ为供体菌，以伤寒沙门菌口服疫苗Ｔｙ_（２１ａ）株为受体菌，通过质粒诱动，将福氏痢疾杆菌的菌体抗原基因转移至伤寒沙门菌口服疫苗灯Ｔｙ_（２１ａ）株中，构建了既表达福氏痢疾杆菌ｏ抗原，又表达伤寒沙门菌Ｏ_９、Ｏ_（１２）和Ｈｄ抗原的杂交子，并将此杂交子命名为ＴＳＧＷ_１株。     

Humoral antibody responses of swine infected experimentally with group E streptococcus. I. Whole cell agglutinin response

Reference streptococcal antisera and sera collected from swine infected experimentally (by intranasal inoculation or contact exposure) with group E Streptococcus (GES) were studied in a tube agglutination system using whole GES cells.Specificity studies revealed common group specific antigen among GES serotypes I and III, GES strains devoid of type specific antigen (untypable by ring precipitin testing) and group P and group U Streptococcus. The group specific antigens were not agglutinated by GES type specific antisera or by group specific antisera against Streptococcus groups A, B, C, D, F, G, H, K, L, M, N, or O. Results of the study suggested that GES serotypes I and III are invalid; i.e., they are devoid of type specific antigen.Groug E Streptococcus type specific antigens II, IV, and V were agglutinated significantly only by their homologous antisera.Experimentally infected swine developed significant titers against both the group and type specific antigen of GES. Antibodies appeared from three to eight weeks postexposure and persisted for the duration of the experiment (six months). The potential utilization of the whole cell agglutination (WCA) test for detection of GES carrier swine is discussed.     

分子信标探针技术检测沙门菌invA基因

目的 研究沙门菌的分子信标基因检测方法。方法 在PCR反应体系中加入分子信标探针，探针的5’端标记6-fluorescine(6-FAM)，3，端标记4-(dimethylaminophenylazo)benzoicacid(DABCYL)，对沙门菌invA基因PCR产物进行荧光检测。结果 肠炎沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌“H”、伤寒沙门菌和肠侵袋型大肠杆菌的荧光值分别为161.6、104．5、85．9、83．1、94．8、46，1，Ax值(样本荧光值-空白对照荧光值)分别为121．3、64．2、45.6、42．8、54．5、5.8,沙门菌的Ax值均大于21，结果阳性，与琼脂糖电泳分析结果一致。结论 分子信标探针技术可以准确、快速、简便进行沙门菌invA基因检测。     

分子信标探针技术检测沙门菌invA基因

目的 研究沙门菌的分子信标基因检测方法。方法 在PCR反应体系中加入分子信标探针,探针的5’端标记6-fluorescine(6-FAM),3’端标记4-(dimethylaminophenylazo)benzoic acid (DABCYL),对沙门菌invA基因PCR产物进行荧光检测。结果 肠炎沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌“H”、伤寒沙门菌和肠侵袭型大肠杆菌的荧光值分别为161.6、104.5、85.9、83.1、94.8、46.1,Ax值(样本荧光值-空白对照荧光值)分别为121.3、64.2、45.6、42.8、54.5、5.8,沙门菌的Ax值均大于21,结果阳性,与琼脂糖电泳分析结果一致。结论 分子信标探针技术可以准确、快速、简便进行沙门菌invA基因检测。