血管紧张素Ⅱ受体阻断对成年大鼠心肌成纤维细胞Col I和TIMP-1 mRNA水平的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）2型受体（AT2）在心肌成纤维细胞胶原代谢中的作用，以及AT2受体和AngⅡl型受体（AT1）作用的差异。方法差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞，将细胞分为4组进行药物干预：AngⅡ组、AngⅡ＋Losartan（ATl受体阻断剂）组、AngⅡ＋PD123319（AT2受体阻断剂）组、AngⅡ＋Losartan＋PDl23319组．应用半定量RT—PCR检测4组细胞中的I型胶原（Col I）、组织蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）mRNA水平的表达。结果以β-actin作为内参照，ATl受体阻断使Col I mRNA水平降至原水平的71．8％（P〈0．05），AT2受体阻断降至81．5％（P〈0．05），共阻断降至50．9％（P〈0．05）；ATl受体阻断使71，MP-1mRNA水平降至原水平的88．1％（P〈0．05），AT2受体阻断降至75．4％（P〈0．05），共阻断后降至44．1％（P〈0．05）。结论在成年大鼠心肌成纤维细胞，AT2受体阻断下调Col I和TIMP1 mRNA水平，说明AT2受体参与胶原的合成与降解代谢，有促进心肌纤维化的作用。     

PPARα／PGC—lα信号通路对大鼠肥大心肌细胞能量代谢的影响

目的：探讨过氧化物酶体增殖物活化受体仪（PPARα）／过氧化物酶体增殖物激活受体,辅激活子la（PGC一1仅）信号通路对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导大鼠肥大心肌细胞能量代谢的影响。方法：将原代培养的新生大鼠心肌细胞分为对照组（C组）、Ang刺激组（AngⅡ组）、PPARa激活剂及非诺贝特预处理组,即（AngII＋F）组,C组予生理盐水处理,AngII组加入AngⅡ（终浓度10mmol／L）刺激24h建立肥厚心肌细胞模型,（AngⅡ＋F）组心肌细胞在AnglI刺激前24h加非诺贝特（10Ixmol／L）预处理;HE染色后采用软件检测细胞表面积,用Western-blot检测心肌细胞中PPARa、PGC-1仅和腺苷酸转运体（ANT）蛋白表达水平,用高效液相层析法（HPLC）测量线粒体内腺苷酸含量,氚标iE--磷酸腺苷（3H-ADP）掺入法检测线粒体膜ANT转运活性。结果：与AngII组相比,非诺贝特可使PGC·la、ANT表达上调（P〈0．05）,细胞内线粒体内高能磷酸盐含量则未发现有显著变化（P〉O．05）,但显著逆转了AnglI诱导的心肌细胞肥大,改善了AnglI引起的ANT转运活性下降（P〈0．05）。结论：PPARa／PGC-la信号通路激活能有效预防心肌细胞肥大,可改善心肌能量代谢,对缺血后心肌有保护作用。     

去甲肾上腺素及血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌细胞胰岛素受体及胰岛素受体底物1酪氨酸磷酸化的综合效应

目的:初步探讨去甲肾上腺素（NE）与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对大鼠心肌细胞胰岛素受体β亚基（Ins-Rβ）及胰岛素受体底物1（IRS-1）酪氨酸磷酸化的综合效应,以及心肌胰岛素抵抗的机制。方法:培养新生大鼠心肌细胞。按照浓度梯度,将相同浓度的NE与AngⅡ的混合液加入培养基中,培养72 h后,采用Western blotting法检测胰岛素信号分子蛋白表达水平。另于每个实验组中加入AngⅡ受体阻断剂氯沙坦,分别观察NE与AngⅡ的独立效应。结果:相同浓度的NE与AngⅡ混合液可引起心肌细胞Ins-R、IRS-1及葡萄糖转运体4（GLUT4）等蛋白表达减少,Ins-Rβ亚基酪氨酸磷酸化等蛋白表达减少,IRS-1酪氨酸磷酸化蛋白表达增加（P<0.05）。1 μmol/L氯沙坦对Ins-Rβ亚基酪氨酸磷酸化蛋白表达无显著影响（P>0.05）,可减少IRS-1酪氨酸磷酸化蛋白表达（P<0.05）。结论:相同浓度的NE与AngⅡ的共同作用可降低大鼠心肌细胞Ins-Rβ酪氨酸磷酸化水平,升高IRS-1酪氨酸磷酸化水平。NE为引起Ins-Rβ酪氨酸磷酸化水平降低的主要原因,AngⅡ升高为IRS-1酪氨酸磷酸化水平升高的主要原因。     

TRPM7参与血管紧张素Ⅱ介导的心肌成纤维细胞胶原合成

目的 研究瞬时受体电位通道亚族M7（TRPM7）在血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）介导的心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）胶原合成中的作用。方法 将分离培养出的SD乳鼠CFs用1μmol/L的AngⅡ干预至不同时间点（0、6、12、24、48h）,分别检测CFs上TRPM7蛋白的表达水平,从而找出1μmol/L的AngⅡ诱导CFs上TRPM7蛋白表达的最佳时间点。然后,用腺病毒-TRPM7-shRNA（Ad-TRPM7-shRNA）基因沉默的方法敲低CFs上TRPM7基因的表达,1μmol/L的AngⅡ干预至最佳时间点,检测CFs在TRPM7基因沉默前后胶原合成情况的变化。结果 CFs用1μmol/L的AngⅡ干预至24h后TRPM7蛋白表达量达最高水平;CFs在1μmol/L的AngⅡ干预至24h后,与心脏纤维化相关的胶原蛋白（胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ）合成增多,而在TRPM7基因沉默后这些胶原的合成量则呈明显下降的趋势。结论 TRPM7参与AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞胶原合成,从而促进心脏纤维化的发生。     

瞬时受体电位M7通道与血小板源性生长因子和5-HT促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖相关性的研究

目的：探讨瞬时受体电位M7通道（transient receptor potential melastatin 7, TRPM7）在血小板源性生长因子（platelet derived growth factor, PDGF）和5-羟色胺（5-hydroxytryptamine, 5-HT）诱导的肺动脉平滑肌细胞（pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs）异常增殖中的作用。方法：利用贴块法和酶解法分离大鼠PASMCs。采用RT-PCR、Western blot和全细胞膜片钳技术观察TRPM7在PASMCs中的功能性表达。利用TRPM7阻断剂2-APB,采用MTT的方法检测TRPM7对PDGF和5-HT诱导的PASMCs异常增殖的作用。结果：RT-PCR、Western blot结果显示,TRPM7在大鼠PASMCs中有mRNA和蛋白表达。利用膜片钳技术检测到TRPM7电流,且PDGF可上调TRPM7内、外向电流。100 μmol•L^-1 2-APB可抑制PDGF和5-HT引起的大鼠PASMCs异常增殖。结论：TRPM7可能参与PDGF和5-HT诱导的大鼠PASMCs的增殖,有可能成为肺动脉高压临床治疗新的靶点。     

血管紧张素Ⅱ及氯沙坦对小鼠足细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ）对足细胞葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响,及血管紧张素1型受体阻断剂氯沙坦（Losartan,Lo）能否抑制AngII对足细胞GLUT4的作用。方法将小鼠MPC5足细胞分成对照组、AngⅡ10^-6 mmol/L组、AngⅡ10^-8 mmol/L组、AngⅡ10^-10 mmol/L组、Lo10^-6 mmol/L＋AngⅡ10^-6 mmol/L组,半定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测足细胞GLUT4mRNA的水平,间接免疫荧光检测GLUT4蛋白的表达。结果与对照组相比,AngⅡ10^-6 mmol/L组能够显著抑制GLUT4的表达及蛋白合成,GLUT4 mRNA的表达下降了56.1%（P=0.041）,间接免疫荧光表达下降了54.9%（P〈0.05）。AngⅡ10^-8 mmol/L组及AngⅡ10^-10 mmol/L组GLUT4的表达与对照组相比有所下降,但差异无统计学意义（P〉0.05）,AngⅡ10^-8 mmol/L组对GLUT4抑制强于AngⅡ10^-10 mmol/L组,两组间差异无统计学意义（P〉0.05）。Lo 10^-6 mmol/L＋AngⅡ10^-6 mmol/L组GLUT4的表达显著升高,与AngⅡ10^-6组相比,mRNA升高176.3%（P=0.006）,蛋白表达升高87.8%（P〈0.05）。结论 AngⅡ能够显著抑制足细胞GLUT4的表达及合成,具有浓度依赖性,这种作用能被氯沙坦所阻断。     

血管紧张素Ⅱ对心肌细胞c-myc蛋白表达的作用

目的 探讨钙内流及钙释放对心肌细胞c-myc蛋白定位及半定量表达有何影响。方法 应用血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ,10^7mol/L)刺激原代培养的大鼠心肌细胞钙内流、雷尼丁（RY,10^7mol/L)刺激胞内钙释放;免疫组织化学方法检测心肌细胞。myc蛋白定位表达,免疫印迹（Western blot)检测心肌细胞c-myc蛋白半定量表达。结果 免疫组织化学方法显示,RY诱导的心肌细胞c-myc蛋白表达及核转位表达早于Ang Ⅱ。Western bolt显示,Ang Ⅱ及RY刺激2h时,c-myc蛋白明显表达,24h下降,2、3、5d呈逐渐增加趋势,各时相点与24h比较差异显著（P＜0．05或0．01）。结论 c-myc蛋白表达与细胞内钙浓度变化有关,与钙的来源无关。     

Ang Ⅱ诱导大鼠原代海马神经细胞衰老的作用及机制

目的   探讨血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导大鼠原代海马神经细胞衰老的作用及相关机制。方法   从新生24h内的乳鼠取材,培养大鼠原代海马神经细胞。采用不同浓度诱导剂Ang Ⅱ和不同诱导时间两种方法处理神经细胞,通过衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色法检测神经细胞衰老情况,确定Ang Ⅱ诱导神经细胞衰老的最佳浓度和时间。进一步采用SA-β-gal染色法检测AT1受体阻断剂厄贝沙坦和AT2受体阻断剂PD123319对Ang Ⅱ诱导神经细胞衰老的影响,同时利用Western blot法检测细胞周期调控相关蛋白P53、P21的表达变化,探讨Ang Ⅱ诱导神经细胞衰老的相关机制。结果   10μmol/L Ang Ⅱ作用48h可诱导大鼠原代海马神经细胞衰老,细胞内P53、P21等蛋白表达增加。厄贝沙坦可抑制Ang Ⅱ所致神经细胞衰老,降低P53、P21等蛋白表达,而PD123319对此无作用。结论   Ang Ⅱ可诱导大鼠原代海马神经细胞衰老,此作用由AT1受体介导,其机制可能与P53、P21表达增加有关。     

非诺贝特对新生大鼠体外肥大心肌细胞的影响

目的：研究过氧化物酶体增殖物活化型受体α（PPARα）激活物非诺贝特对大鼠体外心肌细胞病理肥大的影响。方法：新生大鼠原代心肌细胞培养后，用不同时间、不同浓度的PPARα配体非诺贝特预处理细胞，然后以血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导其肥大。采用软件分析细胞面积，以RT-PCR法检测肥大心肌细胞α、一肌球蛋白重链（α-MHC、β-MHC）及PPARαmRNA表达的影响，单四唑（MTT）比色法测定非诺贝特对AngⅡ处理细胞活力的干预作用。结果：非诺贝特预处理24h可逆转AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，α/β-MHC mRNA表达比值降低及细胞活力的改变。同时增加PPARα mRNA的表达，并呈一定剂量依赖性；而非诺贝特和AngⅡ几乎同时处理细胞时，则无明显效应。结论：PPARα参与心肌细胞肥大过程，长期慢性非诺贝特预处理可能对心肌有保护效应。     

FoxO4在血管紧张素Ⅱ诱导的内皮祖细胞凋亡中的机制研究

目的探讨转录因子FoxO4参与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的内皮祖细胞（EPCs）凋亡的机制。方法从人脐静脉血中提取单个核细胞,血管内皮生长因子（VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导培养7d后鉴定为EPCs。AngⅡ诱导EPCs凋亡,加入AT受体拮抗剂（氯沙坦钾＋PD123319）进行干预。实验分为对照组、AngⅡ组和AngⅡ＋氯沙坦钾＋PD123319干预组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;免疫组织化学方法观察FoxO4在各组EPCs的表达水平。结果AngⅡ可以诱导EPCs凋亡,通过AT受体拮抗剂阻断干预降低了EPCs的凋亡。免疫组织化学显示FoxO4在对照组中低表达,AngⅡ组表达最高,AngⅡ＋氯沙坦钾＋PD123319干预组中表达水平显著降低,其表述趋势与各组EPCs凋亡率的变化一致。结论AngⅡ可诱导EPCs凋亡,FoxO4转录因子参与了高浓度AngⅡ诱导的EPCs凋亡过程。     

自噬在血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大中的作用

【目的】探讨自噬在血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导心肌细胞肥大中的作用.【方法】原代培养的乳鼠心肌细胞,采用Ang Ⅱ干预建立心肌肥大的模型;在光学显微镜下观察心肌细胞的形态,采用Real time PCR技术检测心肌细胞肥大标志物心房利钠多肽(ANP)的表达,Western blot法检测LC3蛋白的表达.【结果】 Ang Ⅱ可抑制自噬相关基因LC3蛋白的表达,自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤(3MA)会促进AngⅡ诱导的心肌细胞肥大.【结论】AngⅡ可能通过抑制自噬来诱导心肌细胞肥大.     

过氧化酶体增殖物激活受体α抑制血管紧张素Ⅱ促心肌纤维化作用的试验研究

目的：探讨体外条件下过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）促心肌纤维化的抑制作用。方法：培养新生Wistar大鼠原代心脏成纤维细胞(CFs),以AngⅡ10-7mol/L刺激,体外模拟心肌纤维化,再用不同浓度的PPARα激动剂苯扎贝特作用于细胞。用MTT比色法检测CFs的增殖情况,采用RT PCR法检测Ⅰ型胶原（collagen I）、基质金属蛋白酶（MMP） 2、金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP)-1 mRNA的表达。 结果：① AngⅡ刺激后12h,CFs的collagen Ⅰ、TIMP-1 mRNA表达明显增加,MMP-2 mRNA表达减少;苯扎贝特呈剂量依赖性抑制AngⅡ的作用, PPARα特异性抑制剂MK886可以完全抑制苯扎贝特的作用;② AngⅡ明显促进CFs增殖,苯扎贝特不能抑制AngⅡ的促增殖作用。结论： PPARα途径活化后抑制AngⅡ的促心肌纤维化作用。     

多胺在血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大中的作用

目的探讨多胺在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大中的作用。方法乳鼠心肌细胞原代培养,AngⅡ诱导心肌细胞肥大复制心肌肥大细胞模型。检测心肌细胞表面积、心肌细胞蛋白含量,RT-PCR检测ANP mRNA水平作为心肌肥大评价指标;高效液相色谱测定心肌细胞多胺含量。结果AngⅡ100nmol/L作用48h,显著增加心肌细胞表面积,细胞蛋白含量和ANP mRNA表达增加,同时,AngⅡ诱导细胞内腐胺含量明显增加。DFMO干预后,减少细胞内腐胺和总多胺水平,下调AngⅡ诱导的心肌细胞表面积、心肌细胞蛋白含量,ANP mRNA水平的增加。结论DFMO预处理耗竭细胞内腐胺,减少多胺含量可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大。     

丝氨酸通过甘氨酸受体缓解血管紧张素Ⅱ诱导的心肌纤维化

目的：探索丝氨酸是否对心肌纤维化具有保护作用及其可能的机制。方法：通过微渗透泵持续给予血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ）28 d建立小鼠心肌纤维化模型,观察丝氨酸对小鼠心肌纤维化的效应。乳大鼠原代心脏成纤维细胞单独培养或与原代心肌细胞共培养,分别用Ang Ⅱ和丝氨酸处理,检测心脏成纤维细胞胶原Ⅰ和胶原Ⅲ的表达;并检测丝氨酸对Ang Ⅱ诱导的原代心肌细胞炎症因子表达有无影响。应用siRNA技术干扰心肌细胞甘氨酸受体（glycine receptor, GlyR）,并检测丝氨酸抑制心肌纤维化是否依赖GlyR。结果：Masson染色提示,预防性使用丝氨酸可以减轻小鼠心肌纤维化;定量PCR结果提示丝氨酸可以抑制受损心脏组织中胶原Ⅰ和Ⅲ增多。虽然丝氨酸能直接抑制受损心肌细胞转化生长因子β和内皮素-1释放,但它并不能直接抑制心脏成纤维细胞合成胶原增多,只有与心肌细胞共培养时,丝氨酸才能抑制心脏成纤维细胞的胶原Ⅰ和Ⅲ产生增多。此外,当心肌细胞的GlyR表达降低后,丝氨酸抑制胶原生成的保护效应随之消失。结论：丝氨酸可通过激活心肌细胞甘氨酸受体,减少心肌细胞炎症反应,间接抑制心脏成纤维细胞产生胶原,进而改善心肌纤维化。     

丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大与凋亡干预的研究

目的在原代培养的新生大鼠心肌细胞上，观察丹参酮ⅡA（TSN）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的影响。方法应用细胞培养技术培养新生大鼠心肌细胞，采用相差显微镜测量细胞大小，测定心肌细胞^3H-亮氨酸掺入作为心肌细胞肥大的指标；用流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率，用Westamblot法检测心肌细胞凋亡蛋白P53、Bax和Bcl-2的表达。结果TSN能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞增大、心肌细胞^3H-亮氨酸掺入率的显著增加（P〈0.01）、心肌细胞凋亡率的增加（P〈0．05）、心肌细胞促凋亡蛋白P53和Bax表达的明显增高（P〈0.01），其效果与AngⅡ受体阻滞剂缬沙坦（Valsartan）相似。结论TSN可以抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，这可能与其同时抑制了心肌细胞的凋亡有关。     

血管紧张素Ⅱ上调乳鼠心室肌细胞TRPC1通道的表达

目的观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激心肌细胞,导致经典瞬时受体电位（TRPC）通道1表达的改变情况,并探讨其机制。方法分离和培养原代乳鼠心室肌细胞,运用Western blot法检测细胞TRPC1、TRPC3和TRPC6蛋白的表达,3H-亮氨酸掺入法测定细胞蛋白质合成速率。结果 AngⅡ能刺激心肌细胞TRPC1表达显著上调（P〈0.01）,心肌细胞TRPC1的表达随AngⅡ浓度增加而逐渐明显上调;但AngⅡ刺激并未明显增高TRPC3和TRPC6蛋白的表达（P〉0.05）。给予AT1受体拮抗剂氯沙坦、磷脂酶C（PLC）抑制剂U73122、钙池操作性钙内流阻滞剂SKF96365或钙调神经磷酸酶抑制剂环孢素A预处理后,都能抑制AngⅡ引起的TRPC1高表达（均P〈0.05）,但AT2受体拮抗剂PD123319却不能。SKF96365预处理在能明显抑制AngⅡ引起的TRPC1高表达的同时,也能抑制AngⅡ诱导的细胞肥大。结论 AngⅡ诱导大鼠心室肌细胞TRPC1表达上调并呈现剂量依赖性,这种上调是通过AT1R/PLC信号传导,激活钙调神经磷酸酶途径来实现的。     

血管紧张素Ⅱ引起血管平滑肌细胞内Ca2+浓度变化机制的研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)调节血管平滑肌细胞(VSMC)内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)的作用机制。方法应用改进的组织块贴壁法分离培养大鼠主动脉VSMC。采用Fluo-3/AM负载,应用confocal显微镜观察VSMC内[Ca2 ]i的变化。实验分为对照组和三磷酸肌醇受体系统(IP3Rs)阻断剂2-APB组。结果胞外无钙的情况下AngⅡ可引起一个快速、明显的[Ca2 ]i升高,而2-APB组[Ca2 ]i仅轻度升高,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论AngⅡ与其受体AT1结合,激活IP3RS系统促进细胞内储备钙释放,调节VSMC内[Ca2 ]i变化。     

Losartan延缓肾纤维机制探讨

目的 研究Losartan对肾小球系膜细胞（McS)结缔组织生长因子（CTGF0表达的影响。进一步探讨Losartan延缓肾纤维化的机制。方法 将体外培养的MCs分为3组：①正常对照组，未加任何刺激因素；②浓度为10^-5mol/L的AngⅡ组；③AngⅡ中加入10^-5mol/L的Losartan组。分别刺激MCs72小时后，提取细胞RNA，采用逆转录-聚合酶链反应技术测定MCs CTGF mRNA水平变化。结果 Losartan干预72小时后，MCs CTGF mRNA表达水平较AngⅡ组下降25.1%，但仍高于对照，为对照组的1.95倍。结论 Losartan通过部分抑制AngⅡ对CTGF mRNA表达的诱导而有益于延缓肾纤维化的进展，这可能是Losartan延缓肾纤维化的机制。     

镁离子对大鼠血管平滑肌细胞钙化相关因子表达的影响

目的 探讨镁离子对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化相关因子表达水平的影响。方法 选择5周龄健康雄性SD大鼠6只。以组织贴壁法进行原代VSMCs培养,至3～5代时用于细胞实验。将VSMCs采用随机数字表法分为正常对照组、高磷组（加入10 mmol/L β-甘油磷酸）、镁干预组〔加入10 mmol/L β-甘油磷酸＋3 mmol/L硫酸镁（MgSO4）〕、2-氨基乙氧基二苯基硼酸（2-APB）干预组（10 mmol/L β-甘油磷酸＋3 mmol/L MgSO4＋10-4 μmol/L 2-APB）。采用邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞培养14 d后钙化情况,酶联免疫吸附法检测细胞培养14 d后碱性磷酸酶（ALP）活性,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测0、3、6、10、14 d时细胞内基质G蛋白（MGP）mRNA和骨桥蛋白（OPN）mRNA的表达水平。结果 细胞培养14 d后,4组钙水平比较,差异有统计学意义（F=409.800,P＜0.05）;高磷组、2-APB干预组钙水平高于正常对照组和镁干预组 （P＜0.05）。4组ALP活性比较,差异有统计学意义（F=490.901,P＜0.05）;高磷组、2-APB干预组ALP活性高于正常对照组和镁干预组 （P＜0.05）。培养14 d后,4组MGP mRNA和OPN mRNA的表达水平比较,差异有统计学意义（F=1 279.905、1 157.247,P＜0.05）;镁干预组MGP mRNA和OPN mRNA的表达水平高于高磷组及2-APB干预组 （P＜0.05）。动态观察MGP mRNA和OPN mRNA的表达变化,结果显示在培养第3天时,高磷组MGP mRNA和OPN mRNA表达水平均降低（P＜0.05）,并随着时间的延长呈下降趋势|镁干预组MGP mRNA和OPN mRNA表达水平均升高（P＜0.05）,并随着时间的延长呈上升趋势。结论 高浓度镁离子在抑制VSMCs钙化过程中可上调MGP及OPN的表达,并呈一定时间依赖性,为临床进一步研究提供了参考依据。     

人参皂苷Rg1对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的影响

目的探讨传统中药人参皂苷Rg1对血管紧张素Ⅱ（ AngⅡ）所诱发心肌肥大的影响。方法采用酶消化法分离新生大鼠心室肌细胞,培养心肌细胞随机分为3组：正常对照组、Ang Ⅱ组、AngⅡ＋Rg1组。在接受药物处理24h后,检测心肌细胞总蛋白含量,β-MHC、TNF-α和IL-1β的mRNA表达量。结果 Ang Ⅱ处理导致培养心肌细胞的总蛋白含量以及β-MHC mRNA表达量显著增加,提示心肌肥大的发生;人参皂苷Rg1显著抑制了Ang Ⅱ的促心肌细胞肥大作用。同时,AngⅡ增加心肌细胞对TNF-α和IL -1βmRNA表达的效应也被人参皂苷Rg1所抑制。结论人参皂苷Rg1抑制了 AngⅡ诱导的心肌细胞肥大以及心肌细胞对炎性介质TNF-α、IL-1β的释放,这可能是人参皂苷Rg1对心脏疾病具有保护作用的细胞学基础。