吲哚美辛防治增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究

目的研究玻璃体腔内注射吲哚美辛（indomethacin,IN）对兔增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）的防治作用,并评价其对视网膜的毒性．方法防治实验15只健康有色成年兔分为3组（每组5只10只眼）：对照组、低剂量组、高剂量组．兔眼玻璃体腔内注入富含血小板的血浆制作PVR动物模型．术后1d,对照组玻璃体腔内注入溶剂无水乙醇,低剂量组注入含5mgIN的无水乙醇溶液,高剂量组注入含7．5mgIN的无水乙醇溶液．给药后7、14、21、28d分别行眼底检查并记录玻璃体腔内PVR的增殖程度．处死动物,抽取玻璃体及剪取玻璃体中的增殖条带,TUNEL法检测凋亡细胞,400倍光镜下计数各组的凋亡细胞数．毒性实验5只健康有色成年兔共10只眼行闪光视网膜电图检查（FERG）后玻璃体腔内注入含7．5mgIN的无水乙醇溶液,28d后行FERG检查,对给药前后的a波和b波的潜伏期及波幅进行统计分析．处死动物,取视网膜组织行透射电镜检查．结果防治实验：术后7d3个组间的PVR的增殖程度无差别（χ^2=6．00P≥0．05）,术后14、21、28d,与对照组相比,低剂量组和高剂量组的PVR的增殖程度均比对照组低（P〈0．05）,但高剂量与低剂量组间的PVR增殖程度无差异（P〉0．05）．高剂量与低剂量组的凋亡细胞数比对照组明显增多（P〈0．01）,但治疗组间的凋亡细胞数无差异（P〉0．05）．毒性实验：玻璃体腔内注射IN后28d,FERG的a波、b波的潜伏期延长（P〈0．05）,波幅降低（P〈0．01）．透射电镜示：视网膜有一定的改变．结论吲哚美辛能使实验性PVR模型的增殖程度降低,并能诱导PVR形成时玻璃体中及增殖膜上的增殖细胞凋亡．玻璃体腔内注射IN7．5mg时,对视网膜存在一定的毒性作用。     

脂质体介导质粒pcDNA3.1/ KDRn3基因在转染小鼠视网膜组织中的表达及定位

目的：将真核表达质粒pcDNA3.1/ KDRn3以脂质体介导转染C57BL/6J小鼠视网膜组织,观察其表达及定位。方法：首先对真核表达质粒pcDNA3.1/KDRn3进行扩增和酶切鉴定,然后将20只健康C57BL/6J小鼠随机分成对照组及玻璃体腔注射后2、5、7和14 d组,每组4只鼠8眼。注射组每眼玻璃体腔注射脂质体pcDNA3.1/ KDRn3复合物1 μL,分别于注射后2、5、7及14 d摘除眼球,制成石蜡切片,用KDRn3蛋白免疫荧光染色在激光共聚焦显微镜下观察KDRn3蛋白表达及定位。结果：Xho Ⅰ和BamHⅠ进行双酶切,切下900 bp大小片段,与目的片段大小一致,表明该质粒确实为KDRn3。注射后2 d在视网膜神经节细胞层细胞胞浆内可见红色荧光信号,注射后5和7 d组视网膜神经节细胞层、内核层部分细胞胞浆内可见红色荧光信号;注射后14 d视网膜神经节细胞层、部分内核层细胞胞浆内可见红色荧光信号,但发出红色荧光信号的细胞数明显减少。　结论：阳离子脂质体可有效将pcDNA3.1/ KDRn3基因转染小鼠视网膜组织,并得到持续表达。     

蛇毒降纤酶对兔眼外伤性PVR增殖性细胞核抗原表达的影响

目的:探讨蛇毒降纤酶对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体中增殖性细胞核抗原(pro liferating ce llnuclear an tigen,PCNA)的影响。方法:对20只兔子采用兔眼后节穿通伤加注血法或/和加蛇毒降纤酶制备实验模型,随机分成正常对照组(20眼)、全血组(10眼)、蛇毒降纤酶组(10眼)。利用免疫组化SP法观察实验各组,检测PVR玻璃体腔增殖膜中PCNA的含量。结果:蛇毒降纤酶组增殖膜中PCNA阳性细胞数为30±8,全血组为9±4;蛇毒降纤酶组增殖膜中PCNA的阳性表达低于全血组(P<0.01)。结论:蛇毒降纤酶能够降低PVR玻璃体腔PCNA的表达,抑制PVR的发生、发展。     

干扰素联合氟尿嘧啶抑制增殖性玻璃体视网膜病变的观察

目的观察干扰素-r联合氟尿嘧啶对兔增生性玻璃体视网膜病变（Proliferative Vitreoretinopathy,PVR）的抑制作用。方法将有色家兔24只随机分为4组。左眼为实验眼,建立PVR动物模型,各组分别于建模第2d在玻璃体腔内注射等体积药物,并在7、14、30d行裂隙灯、眼底、F-ERG、眼B超及视网膜组织病理学检查。结果与用等体积的干扰素-r或氟尿嘧啶组比较,联合用药组的PVR级别低于其余各组（P〈0.05）;视网膜略增厚但未见明显视网膜脱离;视网膜组织病理学检查：表面少量纤维增殖;而F-ERG b波波幅则与单独用药无统计学意义。结论 0.5mg氟尿嘧啶联合104干扰素-r对兔增生性玻璃体视网膜病变可起到抑制作用,其疗效优于单独用等体积的氟尿嘧啶或干扰素-r,且未见明显毒副作用。     

色素上皮衍生因子对鼠视网膜新生血管形成的保护作用

目的本课题通过小鼠视网膜新生血管动物模型观察玻璃体内注入色素上皮衍生因子(PEDF)对视网膜新生血管形成的影响,并探讨其治疗作用。方法选取鼠龄为7天的健康昆明小鼠28只(56只眼),随机分为4组:正常组、高氧组、PEDF干预组和对照生理盐水组,每组7只。正常对照组鼠在正常空气环境中饲养,其余3组鼠置于氧箱中,建立高氧诱导的视网膜新生血管动物模型。正常组鼠不做任何处理,PEDF干预组幼鼠在出生后第12天向玻璃体腔内注射PEDF 1μl,而对照生理盐水组注射相同体积的生理盐水。各组小鼠均在出生后第17天处死,摘除眼球制作标本,进行组织病理学观察。在光学显微镜下观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞细胞核数目。采用CD31分子免疫组化方法鉴别视网膜内界膜与血管内皮细胞。结果正常对照组标本HE染色未见突破内界膜的内皮细胞核,高氧组和对照生理盐水组标本可见较多的突破内界膜的内皮细胞核,与正常组比较差异具有显著性(P<0.05),PEDF干预组的数目明显少于高氧组和对照生理盐水组,差异均具有显著性(P<0.05),且未见明显药物毒性反应。CD31分子免疫组化染色证实突破内界膜的细胞为血管内皮细胞。结论玻璃体内注入一定剂量的PEDF,能够有效抑制高氧诱导下的小鼠视网膜新生血管形成,PEDF有望成为防治血管增生性视网膜病变的一种有效的方法。     

Genistin防治增生性玻璃体视网膜病变的研究

目的：研究Genistin对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)的防治作用。方法：用自体富含血小板血浆玻璃体腔内注射制备兔外伤性PVR模型,并同时将二甲基亚砜、2 μg或40 μg genistin、1mg氟尿嘧啶各0.1 mL注入兔眼玻璃体内,在不同时间点用眼底镜检查眼底情况,进行PVR分级。第28天行40 μg genistin组模型眼及正常眼ERG检查;同天将4组模型眼球取出制作病理标本,行光镜检查。结果：A组第10天出现视网膜脱离,PVR随着时间延长发展至更严重等级。40 μg genistin和氟尿嘧啶组也发生PVR,但其严重程度低于对照组(P＜0.05)。组织学检查40 μg genistin组未发现明显视网膜形态改变,视网膜电图检查也未观察到显著功能变化。结论：Genistin玻璃体腔内注射是安全的,并能有效抑制兔外伤性PVR的发生发展。     

雷珠单抗联合玻璃体切割及光凝治疗 Coats 病所致玻璃体积血并视网膜脱离

目的：观察评估玻璃体腔内注射雷珠单抗联合玻璃体切割及光凝治疗Coats病导致玻璃体积血合并视网膜脱离的疗效。方法选择9例（9眼）因Coats病导致玻璃体积血合并视网膜脱离的入院患者,术前1周行玻璃体腔内注射雷珠单抗,联合后段玻璃体切割、视网膜切开放液、硅油眼内注入术,术中及术后视网膜光凝,术后随访5～24个月。结果术后视网膜复位9眼（100％）,7眼保持术前视力,2眼术后视力提高。结论玻璃体腔内注射雷珠单抗联合玻璃体切割及光凝治疗Coats病引起的玻璃体积血合并视网膜脱离效果显著,并能有效保存及提高视力。     

色素上皮衍生因子对早期糖尿病大鼠视网膜谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的 观察色素上皮衍生因子(PEDF)对糖尿病大鼠视网膜谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)的影响,探讨PEDF视网膜神经保护作用的机制.方法 链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射建立糖尿病模型,随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病PEDF干预组和干预对照组.PEDF干预组于成模后第4周玻璃体腔注射重组大鼠PEDF...     

散血明目片防控增殖性玻璃体视网膜病变的机制研究

目的观察散血明目片对兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy, PVR)模型中增殖信号通路相关蛋白PI3K、Akt、P38MAPK、MEK表达的影响,探讨散血明目片对兔外伤性PVR的防治作用。方法实验以42只新西兰大白兔为对象,采用巩膜穿通法联合向玻璃体腔注射富含血小板血浆形成PVR模型,随机分为7组,每组6只,分别为:A组空白组、B组模型组、C组散血明目片组、D组PD98059组、E组LY294002组、F组MK-2206组、G组抑制剂混合组。造模后30 min,D组、E组、F组、G组分别向玻璃体腔注射0.1 mL的PD98059、LY294002、MK-2206及3种混合抑制剂。B、C组则予以玻璃体腔内注射0.1 mL生理盐水。术后第1天C组予以散血明目片10 mg/kg溶液灌胃,除A组外其余组以生理盐水10 mL/kg灌胃,连续灌胃28 d。28 d后采用B超观察术眼玻璃体、眼底情况;取材后采用免疫组化法、RT-qPCR法对送检组织进行相关蛋白表达的测定。结果 B超结果显示散血明目片能抑制兔PVR中视网膜的增殖,维持视网膜正常形态。免疫组化与RT-qPCR检测结果显示,散血明目片能有效降低兔视网膜及增殖膜中PI3K、Akt、MEK、P38MAPK的表达,其中以下调PI3K、Akt、P38MAPK的表达更显著。结论散血明目片可抑制PVR的发生与发展,降低视网膜及增殖膜中相关增殖蛋白的表达,其防治PVR方面可能与MAPK、PI3K/Akt信号通路有关。     

玻璃体腔注射C3F8联合玻璃体手术治疗脉络膜脱离型视网膜脱离的疗效

目的:探讨玻璃体腔注射C3F8联合23 G微创玻璃体切除术治疗脉络膜脱离型视网膜脱离的临床疗效?方法:临床确诊的脉络膜脱离型视网膜脱离患者29例(29眼)纳入研究?患者入院后先行玻璃体腔内注射0.8 mL C3F8,3 d后行经结膜无缝合玻璃体切除及硅油填充术?观察玻璃体手术前后视力?眼压变化情况,以及手术后视网膜复位率及并发症等情况?结果:玻璃体腔注射C3F8后29眼眼压均得到不同程度回升,眼前节炎症减轻,注气后3 d内共有23眼脉络膜复位?行玻璃体切除联合硅油填充后,视网膜复位25眼,占86.2%,3眼通过二次手术达到视网膜复位?术前?术后1个月?术后3个月平均LogMAR视力为2.14 ± 0.39?1.58 ± 0.57?1.23 ± 0.59,与手术前视力比较,差异均有统计学意义(P < 0.05)?结论:玻璃体腔注射C3F8联合玻璃体切除术治疗脉络膜脱离型视网膜脱离安全有效?     

阿霉素联合地塞米松玻璃体内注射的临床应用

目的　应用阿霉素、地塞米松术中注入玻璃体腔 ,观察对增生性玻璃体视网膜病变PVR的抑制作用。方法　对 4 2眼视网膜脱离伴PVR的患者施行手术加玻璃体腔药物注射 ,与单纯手术组30眼视网膜脱离伴PVR作对比分析 ,并行有关血流动力学观察。结果手术加注药物组与单纯手术组比较 ,术后 3～ 5个月视网膜表面增生膜和网膜下机化膜比术前加重的发生率分别为 :7 1%和 2 6 7%(P <0 0 5 )。两组环扎术均可导致眼部血流动力学改变 ,术后 1～ 2周的视网膜中央动脉 (CRA)和中央静脉 (CRV)的收缩期最大平均流速分别为 6 3cm/s± 2 5cm/s和 4 8cm/s± 1 4cm/s ,比正常值分别下降 33 7%和 16 7%。结论　提示阿霉素联合地塞米松玻璃体内注射是防治PVR的一种有价值的方法     

活化增视颗粒对实验性PVR中MCP-1和TGF-β2的影响

目的通过研究活化增视颗粒对兔眼实验性增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体中MCP-1以及TGF-β2的影响,探讨活化增视颗粒对PVR的作用机制。方法将45只新西兰大白兔随机平均分为模型对照组、沃丽汀组、活化增视颗粒组,采用兔眼玻璃体内注射巨噬细胞的方法建立PVR的动物模型,各组于3、7、14、21、28 d分别随机处死3只,ELISA检测玻璃体液中MCP-1和TGF-β2的质量浓度。结果活化增视颗粒组在7 d时可显著降低兔玻璃体内MCP-1表达,与沃丽汀组及对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),活化增视颗粒组在3 d时玻璃体内TGF-β2质量浓度开始升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),与沃丽汀组相比差异无统计学意义(P>0.05),至14 d时达到高峰,与对照组及沃丽汀组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论活化增视颗粒主要在PVR炎症期及增生早期通过降低玻璃体中MCP-1和升高玻璃体中TGF-β2的质量浓度来抑制PVR的发生。     

丝裂霉素治疗增生性玻璃体视网膜病变的实验研究

目的：评价丝裂霉素（MMC）治疗增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的效果。方法：将健康家兔加只随机分为丝裂霉素组和对照组。丝裂霉素组向玻璃体腔注入RPE细胞后将含有MMC的BSS混悬液和BSS液各0．2mL注入兔眼玻璃体腔；对照组向玻璃体腔注入RPE细胞后BSS液各0．2mL注入兔眼玻璃体腔；评价其治疗PVR的效果。结果：丝裂霉素组中有1只眼发生药物毒性反应，排除试验。药效实验表明；21d及28d，丝裂霉素组视网膜脱离发生率为12．7％和12．9％。对照组组视网膜脱离发生率为63．3％和72．1％，两组视网膜脱离发生率差异具有统计学意义（P〈0．01）结论：丝裂霉素对减少实验性PVR的发生是有效的。     

鱼精蛋白对糖尿病模型大鼠眼玻璃体和血清中血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的探讨鱼精蛋白对糖尿病模型大鼠眼玻璃体和血清中血管内皮细胞生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法 110只Wistar大鼠,随机选10只为空白对照组,其余100只大鼠行链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型,造模成功后分为糖尿病模型组和鱼精蛋白治疗组。模型组再分为观察1、2、3、4、5月亚组(M1、M2、M3、M4、M5组),治疗组分为治疗1次、2次和3次亚组(T1、T2和T3组)。T1组大鼠在造模3月后行双眼玻璃体腔注射鱼精蛋白1次,T2组在造模3、4月后分别行双眼玻璃体腔注射鱼精蛋白,共2次,T3组在造模3、4、5月后分别行双眼玻璃体腔注射鱼精蛋白,共3次,每次50μg,5μL。各治疗组大鼠均在注药结束1周后处死,以酶联免疫吸附法检测血清中和左眼玻璃体中VEGF蛋白的含量,并摘取右眼石蜡包埋作病理切片,行HE染色,观察视网膜形态学改变。结果观察期内糖尿病大鼠眼玻璃体和血清中VEGF的表达逐渐升高(P<0.05);经鱼精蛋白注射2次后的大鼠,其玻璃体中VEGF的表达较未注药组降低(P<0.05),且治疗3次后降低更明显(P<0.01);而治疗组血清中VEGF的表达较相应时间模型组大鼠无明显变化。大鼠视网膜HE染色可见糖尿病模型组视网膜内层增厚,局部中断、内外核层细胞排列紊乱,出现血管增殖,而治疗组视网膜病变明显好转。结论鱼精蛋白作为一种有效的VEGF抑制剂,经玻璃体腔注射,可能为治疗糖尿病视网膜新生血管及眼部其他新生血管提供新的药物选择。     

蛇毒降纤酶联合阿霉素治疗实验性外伤性玻璃体视网膜病变

目的 观察玻璃体腔注射蛇毒降纤酶和阿霉素治疗外伤性玻璃体出血的效果;同时观察玻璃体腔细胞因子含量的变化.方法 建立外伤性玻璃体出血动物模型.随机分为生理盐水组、蛇毒降纤酶组、阿霉素组、联合用药组.直接眼底镜观察玻璃体出血指数、增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)程度;酶联免疫吸附法(enzyme-hked immunosorbent assay.ELISA)测定玻璃体腔基质金属蛋白9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)、转化生长因子β 1(transforming growth factor-beta I,TGF-β 1)浓度. 结果 联合用药组玻璃体出血指数、PVR程度、玻璃体腔MMP-9、TGF-β 1浓度都低于生理盐水组.结论 玻璃体腔注射蛇毒降纤酶和阿霉素可以促进玻璃体腔出血的吸收、降低外伤性PVR程度;同时下调玻璃体腔MMP-9、TGF-β 1浓度.     

蛇毒降纤酶对兔眼外伤性PVR层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的影响

目的:探讨蛇毒降纤酶对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体腔中的层粘连蛋白(lam in in,LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳco llagen,ⅣC)的影响。方法:对20只兔子采用兔眼后节穿通伤加注血法或/和加蛇毒降纤酶制备实验模型,随机分成正常对照组(20眼),全血组(10眼),蛇毒降纤酶组(10眼)。利用免疫组化SP法观察实验各组,检测PVR玻璃体腔增殖膜中LN、ⅣC的含量。结果:蛇毒降纤酶组增殖膜中LN、ⅣC阳性面积比值分别为0.5931±0.15786,0.5354±0.19216;全血组LN、ⅣC阳性面积比值分别为3.8271±1.3537,1.4288±0.66307。蛇毒降纤酶组增殖膜中LN、ⅣC的阳性表达均低于全血组(P<0.01)。结论:蛇毒降纤酶能够降低PVR增殖膜中LN、ⅣC的阳性表达,抑制PVR的发生、发展。     

维拉帕米和中性蛋白酶联合防治增殖性玻璃体视网膜病变的实验研究

目的: 研究玻璃体腔内注射钙拮抗剂维拉帕米(Verapamil,Ver)和中性蛋白酶(Dispase)对兔增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)的防治作用.方法: 20只健康日本大耳白兔随机分为对照组(Ctrl)、维拉帕米组(Ver)、Dispase组及维拉帕米联合中性蛋白酶组(VD)组.制备PVR模型后,治疗组立即玻璃体腔注入相应药物,对照组注入生理盐水,以评析药物防治PVR的效果.结果: 3个用药组PVR平均增生级别均低于Ctrl组,差异有统计学意义(P＜0.05),VD组的抑制作用增强;Ver组和VD组抑制视网膜前增生细胞较Ctrl组和Dispase组有差异,但Ver组与VD组比较无差异,Ctrl组与Dispase组亦无差异;电镜未发现用药组视网膜有毒性反应.结论: Ver联合Dispase经玻璃体腔注射途径对PVR发生发展有防治作用,两者呈一定协同作用,对视网膜无明显毒性损伤.     

蛇毒降纤酶对兔眼外伤性PVR纤维连接蛋白、波形蛋白的影响

目的探讨蛇毒降纤酶对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体中纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、波形蛋白(vitronectin,VN)的影响。方法对20只兔子采用兔眼后节穿通伤加注血法或/和加蛇毒降纤酶制备实验模型,随机分成正常对照组(20眼)、全血组(10眼)、蛇毒降纤酶组(10眼)。利用免疫组化SP法观察实验各组,检测PVR玻璃体腔增殖膜中FN、VN的含量。结果蛇毒降纤酶组增殖膜中FN、VN阳性面积比值分别为0.7323±0.1869、0.4635±0.1071;全血组FN、VN阳性面积比值分别为4.6211±1.1502、1.0289±0.2654。蛇毒降纤酶组增殖膜中FN、VN的阳性表达均低于全血组(P<0.01)。结论蛇毒降纤酶能够降低PVR增殖膜中FN、VN的阳性表达,抑制PVR的发生、发展。     

玻璃体腔联合用药治疗实验性外伤性玻璃体出血

目的 观察玻璃体腔注射蛇毒降纤酶和曲安奈德治疗外伤性玻璃体出血的效果,同时观察玻璃体腔细胞因子含量的变化.方法 建立外伤性玻璃体出血动物模型.随机分为生理盐水组、曲安奈德组、蛇毒降纤酶组、联合用药组.直接眼底镜观察玻璃体出血指数、增生性玻璃体视网膜病变(PVR)程度;酶联免疫吸附法(ELISA)测定玻璃体腔基质金属蛋白9(MMP-9)、转化生长因子β1(TGF-β1)浓度.结果 联合用药组玻璃体出血指数、PVR程度、玻璃体腔MMP-9、TGF-β1浓度都低于生理盐水组.结论 玻璃体腔注射蛇毒降纤酶和曲安奈德可以促进玻璃体腔出血的吸收、降低外伤性PvR程度;同时下调玻璃体腔MMP-9、TGF-β1浓度.     

玻璃体腔内注射康柏西普联合视网膜光凝治疗增生性糖尿病视网膜病变的中长期临床观察

目的:观察玻璃体腔内注射康柏西普联合全视网膜光凝治疗增生性糖尿病视网膜病变的中长期临床效果。方法:收集2014.1~2014.9我院确诊为糖尿病视网膜病变Ⅳ期有少量玻璃体积血光凝困难患者,共12例12只眼。先行玻璃体腔注射康柏西普,再于注射1 w后开始行全视网膜光凝,若合并黄斑水肿联合黄斑格栅样光凝。光凝于1月内完成,术后随访2年。结果:注射康柏西普后,12例患者玻璃体积血吸收,1月内均能完成全视网膜光凝,4例患者联合黄斑格栅样光凝,10例患者术后3月随访时视力有不同程度提高。中长期随访中,4例患者因反复玻璃体出血及增殖加重联合玻璃体切割手术治疗,2例患者因新生血管增生补充光凝,6例患者随访期内病情稳定。结论:玻璃体腔注射康柏西普能促进玻璃体出血吸收,减轻视网膜水肿,使部分光凝困难患者完成光凝,提高视力。中长期随访中,部分患者仍有反复出血及增殖加重,需补充激光或联合手术。