密蒙花提取物对干眼症雄兔泪腺局部炎症反应影响的研究

目的:观察密蒙花提取物对去势所致干眼症雄兔基础泪液分泌量、泪腺局部炎症因子TGF-β1、IL-1β、TNF-α的影响,探讨密蒙花提取物抗雄激素水平下降所致的干眼症的作用机制。方法:将30只日本大耳雄兔随机分为空白组(A),模型组(B),治疗组(C、D、E),每组6只,对B、C、D、E组行去势术建立动物模型,对C、D、E组分别以密蒙花提取物1倍剂量和2倍剂量以及染料木黄酮连续灌胃1月,对全部实验兔行Schirmer I试验,采用免疫组织化学的方法,对兔泪腺组织中炎症因子TGF-β1、IL-1β、TNF-α进行检测。结果:C、D、E组Schirmer I试验测量值明显高于B组(P(0.01),泪腺导管及腺泡上皮细胞中,IL-1β、TNF-α阳性表达的细胞数均明显低于B组而TGF-β1阳性表达的细胞数均明显高于B组(P(0.01)。以上检测结果C、D组均优于E组(P(0.05)。结论:密蒙花提取物对于雄激素水平所致兔干眼症有良好的实验疗效,其作用机制可能与其中主要成分黄酮类物质拟雄激素效应调节体内性激素水平有关,从而可抑制泪腺局部炎症反应来起到疗效。     

益气养阴活血利水法治疗单纯性糖尿病视网膜病变临床研究

目的 通过与导升明片的比较,观察与评价益气养阴活血利水法治疗气阴两虚、血络瘀阻证早期糖尿病视网膜病变的临床疗效.方法 将合格受试对象40例按就诊先后随机分成益气养阴活血利水中药治疗组和导升明组(各20例,分别观察32和34只患眼),分别予以中药汤剂和导升明口服,30天为1个疗程,连续用3个疗程,观察治疗前后各组相关体征及中医证候的改善情况,并评价临床疗效.结果 治疗前后相比,中药治疗组和导升明组均能显著改善患者视力,差异有统计学意义;在视力、眼底、荧光素眼底血管造影及综合疗效方面两组总有效率均在80%以上,两组组间相比差异有统计学意义(P<0.05);两组中医证候疗效相比差异有统计学意义(P<0.05),中药组能明显改善中医证候.结论 中药组和导升明组均能明显改善糖尿病视网膜病变气阴两虚、血络瘀阻证患者的视力、眼底;益气养阴活血利水法能明显改善中医证候.     

益气养阴活血利水法对兔视网膜脱离后ERG及视网膜组织超微结构的影响

目的研究益气养阴活血利水之复明片对免实验性视网膜脱离后视网膜电图及视网膜组织超微结构的影响。方法将72只有色家免随机分为正常对照纽（A组）、模型组（B组）、VitB1混合液对照组（C组）、复明片组（D组）,每组18只。B、C、D组制作视网膜脱离模型。造模后第1天下午开始给药,A组与B组均予温开水,C组予VitB1混合溶液,D组予复明片混悬液灌胃,体积为5mL／kg,1次,d。并于造模前1d及造模后的1、6、13、20d,行暗适应ERG、最大混合反应ERG、明适应ERG检查;于造模后7、14、21d分别观察各组视网膜复位情况,取材后电镜下观察超微结构改变。结果益气养阴活血利水之复明片能提高RD后免眼暗适应ERG、暗适应最大反应、明适应ERG的a波和b波振幅,缩短其潜时,与模型组及对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）;能促进脱离视网膜复住。减轻脱离及复住视网膜组织及细胞的形态学损伤,改善视功能。结论益气养阴活血利水之复明片通过抑制兔视网膜脱离后的细胞增殖、抑制炎症反应以及抑制基质的降解而起到保护视网膜组织结构、促进视网膜脱离后视功能恢复的作用。     

密蒙花提取物滴眼剂对实验性干眼症大鼠泪腺组织形态学的影响

目的观察密蒙花提取物滴眼剂对去势所致干眼症雄鼠基础泪液分泌量、泪膜稳定性以及泪腺电镜显微结构的影响。方法将45只（90眼）Wister雄性大鼠随机分为空白组（A1、A2、A3）、模型组（B1、B2、B3）、密蒙花组（C1、C2、C3）共9小组,1、2、3分别代表给药时间为1月、2月、3月,每组5只（10眼）,对B、C组行去势术建立动物模型,对C组以密蒙花提取物滴眼剂连续滴眼1月,对全部实验大鼠行Schirmer I试验、测量泪膜破裂时间,电镜观察泪腺超微结构变化。结果C组Schirmer I试验测量值明显高于B组,差异具有统计学意义（P﹤0.01）,泪膜破裂时间明显长于B组,差异具有统计学意义（P﹤0.01）,显示密蒙花提取物滴眼剂能够显著维持泪腺基础分泌量和泪膜的稳定性;电镜示C组显微结构明显改善。结论密蒙花提取物滴眼剂中主要成分为黄酮类物质,可显著改善泪腺组织超微结构,维持泪腺基础分泌量和泪膜的稳定性。     

活血散结中药复方含药血浆对PDGF干预下兔RPE细胞增殖的影响

目的：观察活血散结中药复方含药血浆对血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)干预下兔RPE细胞增殖的影响。

方法：酶消化法获取RPE原代细胞,进行RPE细胞的原代培养和传代; 制备活血散结中药复方含药血浆; 选取第4代兔RPE细胞为实验细胞,PDGF低、中、高剂量(5、10、20μg/L)干预48h后,CCK-8法检测并选取适宜细胞实验干预浓度; 建立PDGF干预下RPE细胞增殖模型。实验分组为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%含药血浆组,PDGF(10μg/L)+20%含药血浆组,分别加入相应处理因素干预24h后,Transwell法测定兔RPE细胞迁移力; 而干预48h后,CCK-8法测定兔RPE细胞的细胞活力OD值。

结果：10%和20%浓度的活血散结中药复方含药血浆能有效抑制PDGF干预下RPE细胞的细胞活力、细胞迁移。

结论：活血散结中药复方含药血浆能够抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖,这可能是其有效治疗增殖性玻璃体视网膜病变的机制之一。     

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症泪腺TGF-β_1及其基因表达的影响

目的观察密蒙花总黄酮对去势雄鼠导致干眼症泪腺TGF-β1及其基因表达的影响。方法90只健康1月龄SPF级Wistar雄性大鼠切除双侧睾丸及附睾建立干眼症模型;30只匹配大鼠切开阴囊而不切除睾丸作为假手术组。手术1周后,雄激素治疗组用丙酸睾酮注射液1 mg/kg股四头肌内注射,每3日1次（30只模型鼠）;密蒙花总黄酮治疗组以密蒙花总黄酮0.02 g/kg与生理盐水混悬液灌胃,每日1次（30只模型鼠）;正常组（30只正常鼠）、假手术组、模型组（30只）以生理盐水灌胃,每日1次。造模1、3、5个月后各组随机抽取10只大鼠处死,取双眼泪腺组织免疫组织化学法检测TGF-β1的表达,采用实时定量PCR（real-time PCR）法荧光定量检测TGF-β1mRNA的表达。结果造模5个月后,正常组和假手术组大鼠泪腺组织细胞中几乎无TGF-β1阳性表达,而模型组、雄激素治疗组和密蒙花总黄酮治疗组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1大量阳性表达,表现为大量棕黄色颗粒沉着。正常组、假手术组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均光密度值（OD）高于模型组,差异有统计学意义（P〈0.05）;密蒙花总黄酮治疗组和雄激素治疗组大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均OD值大于模型组,差异有统计学意义（P〈0.05）;密蒙花总黄酮治疗组的大鼠泪腺组织细胞中TGF-β1的平均OD值小于雄激素治疗组,差异有统计学意义（P〈0.05）。TGF-β1mRNA在不同组大鼠泪腺组织细胞中的表达差异比较与TGF-β1表达相同（P〈0.05）。结论密蒙花总黄酮可抑制去势雄鼠干眼症泪腺炎症反应,上调TGF-β1mRNA的表达以增加TGF-β1的合成是其作用途径之一。     

活血利水法治疗外伤性前房积血继发性青光眼33例

根据中医眼科血水同治的原则,采用活血利水为主治疗外伤性前房积血继发性青光眼33例33只眼,与采用活血化瘀法治疗的31例31只眼进行对照,取得了较好的临床疗效,报告如下。     

围绝经期性激素水平下降所致兔干眼症模型的建立

目的 建立围绝经期性激素水平下降所致的干眼症白兔模型,为探讨围绝经期性激素水平下降导致干眼症的发病机制和实验治疗提供依据.方法 对6只成年白兔采用双侧卵巢切除术制作干眼症模型,术后饲养45 d,同时取6只正常白兔作空白对照,2组均采用Schirmer Ⅰ试验观察其基础泪液分泌量、测定泪膜破裂时间观察其泪膜稳定性的改变,并进行形态学(光镜、免疫组织化学)检测.结果 白兔模型建立后,模型兔Schirmer Ⅰ实验测量值明显低于正常白兔(P＜0.01)、泪膜破裂时间明显短于正常白兔(P＜0.01),泪腺导管及腺泡上皮细胞中IL-1β、TNF-α、Fas、FasL、Bax阳性表达的细胞数均明显高于正常白兔(P＜0.01),而TGF-1β、bcl-2阳性表达的细胞数与正常相比差异无统计学意义.结论 双侧卵巢切除术是成功的围绝经期性激素水平下降导致的干眼症白兔模型的造模方法,能模拟围绝经期干眼症自然临床病理过程,为研究实验治疗围绝经期干眼症提供了较为理想的动物模型.     

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症模型角膜和泪腺组织中TNF-α,IL-1β表达的影响

目的:探讨密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症动物模型角膜及泪腺组织炎症因子表达的影响与组织损伤的关系。方法:选取150只健康1月龄Wistar雄性大鼠随机分为5组(正常组、假手术组、手术对照组、雄激素治疗组、密蒙花总黄酮治疗组,分别用A,B,C,D,E组表示),每组30只。将C,D,E三组实验鼠切除双侧睾丸及附睾;B组只切开阴囊,不切除睾丸,作为假手术对照组,A组不作处理。自造模后1wk,待伤口基本愈合开始用药。A,B,C组以生理盐水灌胃,1次/d;D组用丙酸睾酮注射液大腿肌肉注射,3d1次;E组以密蒙花提取物生理盐水混悬液灌胃,1次/d。各组实验动物分别于用药1,3,5mo后随机取10只,行SchirmerⅠ试验、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)及角膜荧光素染色检查并处死各组动物,取双眼泪腺、角膜组织采用免疫组织化学方法观察各组角膜和泪腺组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)蛋白的表达。结果:A与B组泪腺、角膜上皮细胞中TNF-α,IL-1β阳性表达均不明显;C组泪腺、角膜上皮细胞中TNF-α,IL-1β阳性表达的细胞数明显高于D,E组(P<0.05);D,E各组间差异不显著(P>0.05)。结论:去势雄鼠干眼症角膜和泪腺组织局部炎症反应可能是角膜损伤和泪腺分泌功能丧失的原因之一,TNF-α,IL-1β表达增加与其炎症反应有关。密蒙花总黄酮能够下调去势雄鼠角膜和泪腺局部TNF-α,IL-1β蛋白的表达,可能是其治疗干眼症的关键机制之一。     

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症模型角膜和泪腺组织的保护作用

目的探讨密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症动物模型角膜及泪腺组织的保护作用与炎症反应的关系。方法150只健康1月龄Wistar雄性大鼠随机分为5组(正常组、假手术组、手术对照组、雄激素治疗组、密蒙花总黄酮治疗组,分别用A、B、C、D、E组表示),每组30只。A组不作处理;B组只切开阴囊,不切除睾丸,作为假手术对照组;C、D、E三组实验鼠切除双侧睾丸及附睾。自造模后1周,待伤口基本愈合开始用药。A、B、C组以生理盐水灌胃,1次/天;D组用丙酸睾酮注射液大腿肌肉注射,1次/3天;E组以密蒙花提取物生理盐水混悬液灌胃,1次/天。各组实验动物分别于用药1、3、5个月后随机取10只,行Schirmer I试验(SIT)、泪膜破裂时间(break-up,BUT)及角膜荧光素染色检查并处死各组动物,取双眼泪腺、角膜组织进行光镜和透射电镜观察。结果SIT、BUT、角膜荧光素染色:A、B组这3项指标无明显变化(P0.05);C、D、E组去势治疗1个月,角膜荧光素染色、SIT、BUT各段时间差异均无统计学意义(P0.05);C组3个月起角膜荧光素染色阳性,且随实验时间延长而加重;5个月起泪液浸湿滤纸长度较实验前短、BUT明显低于正常对照组,且随观察时间的延长而缩短,差异有统计学意义(P0.05);D、E组于去势3、5个月后,角膜荧光素染色点较C组减少,SIT、BUT明显高于C组,差异有统计学意义(P0.05);D、E两组间3个月后,SIT、BUT及角膜荧光素染色差异无统计学意义(P0.05);D、E两组间5个月后,差异有统计学意义(P0.05)。角膜和泪腺结构:A与B各组结构均无明显改变;C组自1个月起结构开始改变,且随时间延长逐渐加重;D、E两组间结构改变较C组相比明显减轻。结论密蒙花总黄酮能减轻去势雄鼠逐渐加重的泪腺分泌功能损害和角膜上皮缺失并减轻其局部炎症反应,对干眼症模型角膜和泪腺有一定的保护作用。