柱前衍生化UPLC测定板蓝根颗粒中主要游离氨基酸的含量

目的:采用柱前衍生化法测定板蓝根颗粒中6种游离氨基酸的含量.方法:采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)进行柱前衍生化,超高效液相色谱法测定板蓝根颗粒中精氨酸、脯氨酸、苏氨酸、丙氨酸、γ-氨基丁酸、缬氨酸的含量.Waters AccQ Tag TM Ultra C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,5μm),流动相AccQ Tag Ultra Eluent A与AccQ Tag Ultra Eluent B进行梯度洗脱,流速0.7 mL·min-1,柱温55℃,检测波长260 nm.结果:精氨酸的线性范围为4.155 ～49.86 μg,r=0.999 9;苏氨酸的线性范围为0.595 ～5.95 μg,r =0.999 8;丙氨酸的线性范围为0.445 ～4.45 μg,r =0.999 9;γ-氨基丁酸的线性范围为0.515 ～5.15μg,r=0.999 9;脯氨酸的线性范围为8.858 ～ 106.3 μg,r=O.999 9;缬氨酸的线性范围为0.585～5.85μg,r=0.999 8.平均回收率分别为100.6％,98.34％,98.35％,100.2％,98.44％,98.18％;平均RSD分别为1.8％,1.5％,1.9％,2.0％,2.4％,2.0％(n=6).5家企业的的板蓝根颗粒中氨基酸类成分的含量存在差异.结论:该方法操作简单,重复性好,灵敏度高,结果准确可靠.     

HPLC测定复方南板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定复方南板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红含量的方法。方法:色谱柱为Agilent C18(4.60 mm×150 mm,5μm),流动相甲醇-2%磷酸(梯度洗脱);流速0.9 mL.min-1,检测波长289 nm,柱温35℃,进样量20μL。结果:靛蓝、靛玉红分别在0.030 4～0.608μg(r=0.999 3)和0.0993～1.986(g(r=0.999 6)与峰面积积分值线性关系良好,平均加样回收率靛蓝为98.1%(RSD 2.31%)、靛玉红为101.4%(RSD 2.61%)。结论:该方法灵敏度高、简便、准确,可用于复方南板蓝根颗粒的质量控制。     

HPLC法测定板蓝根和板蓝根颗粒中RS-告伊春和腺苷

目的 建立板蓝根颗粒及药材中腺苷和RS-告伊春的测定方法.方法 RS-告依春的测定采用Dikma Dia-monsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,μm);流动相:乙腈-水-三乙胺(10:90:0.2,用冰醋酸调PH值5.2);柱温:室温;体积流量:0.8 mL/min;检测波长:245 nm;腺苷的测定采用Dikma Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(5:95);柱温:室温;体积流量:1.0 mL/min;检测波长:260nm.结果 RS-告依春的线性范围为0.676～13.1μg/mL;板蓝根颗粒和药材的平均回收率分别为101.66%、99.74%,RSD分别为0.9%、1.4%(n=6);腺苷的线性范围分别0.005～0.05 mg/mL,板蓝根颗粒和药材的平均同收率分别为97.76%、97.32%,RSD分别为1.62%、0.62%(n=6).结论 所建立的方法准确、可靠,可用于板蓝根颗粒及药材的质量控制.     

柱前衍生HPLC同时测定驴胶补血颗粒中6种水解氨基酸

目的:建立柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定驴胶补血颗粒中6种水解氨基酸含量的方法.方法:采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长254nm,柱温30℃.结果:L-谷氨酸的线性范围0.169 ～1.014 μg(r =0.9995),平均回收率101.43％,RSD 3.20％;L-羟脯氨酸的线性范围0.178～ 1.068 μg(r =0.999 9),平均回收率101.23％,RSD 3.25％;甘氨酸的线性范围0.381～2.286 μg(r=0.9995),平均回收率102.87％,RSD 2.32％;L-丙氨酸的线性范围为0.162 ～0.972 μg(r=0.999 5),平均回收率102.37％,RSD 3.36％;L-精氨酸的线性范围0.118 ～0.708 μg(r =0.999 6),平均回收率102.73％,RSD 2.41％;L-脯氨酸的线性范围0.253 ～ 1.518 μg(r =0.9999),平均回收率98.69％,RSD 2.34％.结论:建立的方法可靠,可用于驴胶补血颗粒中氨基酸的含量检测.     

RP-HPLC测定板蓝根制剂中R,S-告依春

目的:建立高效液相色谱法测定板蓝根制剂中R,S-告依春的含量。方法:采用Shiseido C18 MG(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相甲醇-0.02%磷酸溶液(7:93),检测波长245 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃。结果:R,S-告依春在0.004 9～0.312 0 g·L-1内呈良好线性,r=1.000 0,平均回收率99.0%(RSD 2.04%)。结论:通过对市售15批板蓝根颗粒,8批复方板蓝根颗粒和3批板蓝根茶的含量测定,证明方法简单,准确可靠,重复性好。     

HPLC测定复方龟鹿颗粒中甜菜碱的含量

目的:建立测定复方龟鹿颗粒中甜菜碱含量的方法。方法:采用HPLC柱前衍生化来测定复方中的甜菜碱,shim-pack CLC-ODS色谱柱(6.0 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-水(35∶65,其中含有0.1 mol.L^-1NaClO₄),流速1 mL.min^-1,检测波长254 nm。结果:甜菜碱在0.090～0.585μg线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率98.4%,RSD 2.5%(n=5)。结论:本法准确可靠,可用于复方龟鹿颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定复方甘草酸苷分散片中甘氨酸与蛋氨酸的含量

目的：通过2-4-二硝基氟苯柱前衍生,建立高效液相色谱法测定复方甘草酸苷分散片中的甘氨酸与蛋氨酸的含量。方法：采用色谱柱C18柱（4.6mm×200mm;5μm）;流动相为：0.025mol.L-1醋酸钠溶液（用醋酸调节pH值至6.0）-甲醇-乙腈（60：30：10）;检测波长：360nm。结果：甘氨酸和蛋氨酸浓度分别在10.58～39.68μg.mL-1（r=0.9994）、10.44～39.15μg.mL-1（r=0.9996）与各自峰面积线性关系良好,二者平均加样回收率分别为99.7%（RSD=0.6%）和99.2%（RSD=0.2%。结论：本方法准确、简便,适用于复方甘草酸苷分散片的质量控制。     

高效液相色谱法测定复方芩桑消痤颗粒中黄芩苷的含量

目的:建立测定复方芩桑消痤颗粒中黄芩苷的高效液相色谱方法.方法:色谱柱为Shjm-pack ODS (4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸(45:55),检测波长280nm,流速为1.00mL·min-1,柱温为35℃.结果:黄芩苷在12.2μg·mL-1～61.0μg·mL-1同呈良好的线性关系,r=0.9995(n=5),平均回收率为100.3%(n=9),RSD为1.98%(n=9),稳定性试验RSD为0.91%(n=5),重复性试验RSD为1.89%(n=5),精密度试验RSD为1.03(n=5).结论:建立的定量方法操作简单、精密度高、重现性好,是控制复方芩桑消痤颗粒质量的有效方法.     

RP-HPLC双波长切换法同时测定复方酸枣仁颗粒中芒果苷和斯皮诺素

目的:建立复方酸枣仁颗粒中芒果苷和斯皮诺素含量测定的反相高效液相色谱方法。方法:采用液-液萃取法纯化样品。采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-1%冰醋酸水系统作为流动相,梯度洗脱;波长检测程序0～25 min,258 nm,25～35 min,335 nm;流速1.0 mL·min-1;柱温30℃。结果:在上述色谱条件下,测得芒果苷和斯皮诺素分别在4.320×10-3～5.200×10-2g.L-1(r=0.999 4)和5.200×10-3～1.040×10-1g.L-1(r=0.999 7)线性关系良好;芒果苷和斯皮诺素的平均回收率(n=9)分别为94.6%(RSD 1.9%)和95.1%(RSD 2.3%)。结论:方法操作简便,准确,重复性良好,可用于复方酸枣仁颗粒的质量控制。     

离子对RP-HPLC同时测定复方苦参注射液中氧化苦参碱和苦参碱含量

目的:建立同时测定复方苦参注射液(苦参、白土茯苓)中氧化苦参碱和苦参碱含量的方法.方法:采用离子对RPHPLC法,Hypersil ODS2色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水-磷酸(10:30:65:0.05,含33mmol·L-1的SDS),流速1.0mL·min-1,检测波长210nm,柱温为室温.结果:氧化苦参碱、苦参碱分别在17.44～174.4μg·mL-1(r=0.9996,n=6)和1.96～39.20μg·mL-1(r=0.9997,n=6)范围内呈良好线性关系;平均回收率分别为100.4%(RSD=2.1%,n=9)和99.7%(RSD=1.4%,n=9).结论:本测定方法简便、快速、准确,为复方苦参注射液质量评价提供了可靠方法.     

柱前衍生RP-HPLC法测定黄芩中氨基酸含量

目的采用柱前衍生RP-HPLC法对黄芩中游离及总氨基酸进行测定。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱为Ultimate Amino Acid氨基酸分析专用柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈-水(80∶20,V/V),B为三水合醋酸钠缓冲溶液(pH 6.5)-乙腈(93∶7,V/V),梯度洗脱;检测波长为254 nm。结果 21种氨基酸在0.002 5~2.500 0 mmol/L内呈良好的线性关系(R20.999 0)。21种游离氨基酸平均回收率在93.72%~105.03%之间,RSD在0.81%~3.15%之间(n=6);总氨基酸平均回收率在95.22%~102.04%之间,RSD在0.47%~2.44%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合黄芩中氨基酸含量测定。     

PITC柱前衍生HPLC测定柴胡炮制前后17种氨基酸含量

目的:建立一种同时测定鳖血柴胡中17种氨基酸含量的方法,为该药材的质量控制提供参考。方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,采用Prevail C18色谱柱,流动相[乙腈-水(4∶1)]-[乙酸钠缓冲溶液(p H 6.5)-乙腈(97∶3)]梯度洗脱,检测波长254 nm,测定柴胡炮制前后氨基酸的含量。结果:17种氨基酸在32 min内可良好分离;样品平均加样回收率93.4%~107.1%,RSD 1.8%~3.9%。结论:与其他柱前衍生测定氨基酸含量的方法相比,该方法具有可操作性强、成本低、易推广等优势,可作为柴胡及其炮制品中氨基酸的含量测定方法。     

柱前衍生化RP-HPLC法分析龟板中氨基酸

目的采用柱前衍生RP-HPLC法对龟板中13种氨基酸进行分析。方法用6mol/L HCl水解提取龟板中总氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用外标法,梯度洗脱的方式分析。结果13种氨基酸在40min内均可得到很好的分离,回收率(除甘氨酸外)为91.68%~106.26%,RSD为0.718%~4.386%。结论所建立的方法分离效果好、灵敏、准确、简便,且采用普通的C18色谱柱,可广泛用于含有多种氨基酸样品的分析。     

板蓝根颗粒中精氨酸的柱前衍生化HPLC测定

目的　建立一种定量分析方法评价板蓝根颗粒的质量。方法　柱前衍生化 HPL C法 ,以 Phenom enODS C1 8柱 (10μm,4 .6 mm× 2 5 0 mm )分析柱 ;0 .1m ol/ L醋酸钠缓冲液 (p H6 .4 ) -乙腈 (86∶ 14 )为流动相 ,流速 1.0 ml/ m in;36 0 nm下进行检测 ,分析了不同来源的板蓝根颗粒中精氨酸的含量。结果　通过该法 ,成功地测定了板蓝根颗粒中精氨酸的含量 ,并且发现 ,不同来源的板蓝根颗粒中精氨酸的含量差别很大。结论　该法操作简单 ,重复性好 ,准确可靠 ,可以作为板蓝根质量控制的一种方法     

柱前衍生化RP-HPLC同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量及其多元统计分析

目的:建立柱前衍生化反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量的方法并进行多元统计分析。方法:采用柱前衍生化RP-HPLC检测,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Wonda Sil C18-WR色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相A为0.05 mol·L^-1乙酸钠缓冲液(pH 6.5),流动相B为乙腈-甲醇-水(3∶1∶1),梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温35℃。建立主成分分析(PCA)及系统聚类分析(HCA)模型进行多元统计分析并进行质量评价。结果:从锁阳中共分离鉴定了17种氨基酸,含7种人体必需氨基酸。17种氨基酸在各自质量浓度范围内呈良好线性关系,r在0.9990~0.9999;平均回收率在98.03%~103.89%,RSD均<3.5%。PCA和HCA结果基本一致,均可将12个市级产区明显区分为6个区域;PCA可根据不同市级或省级产区对锁阳进行聚类,而HCA可根据省级产区对锁阳进行归类,说明不同市级、省级产区锁阳的氨基酸含量具有产区差异性,且含量分布表现出明显的地域聚集性特点;PCA表明甘肃、内蒙古所产锁阳氨基酸含量较高,质量较佳。结论:所建方法可用于不同产区锁阳中17种游离氨基酸的含量测定,为其综合质量评价提供参考。     

补中益气丸中氨基酸类成分指纹图谱

目的:对5个不同药厂生产的20批补中益气丸氨基酸类成分指纹图谱进行比较研究.方法:以柱前衍生化HPLC,测定不同药厂补中益气丸氨基酸类成分指纹图谱,提取指纹图谱数字化信息,采用相似度分析、聚类分析等多种统计方法分析不同药厂产品特征.结果:不同药厂补中益气丸氨基酸类成分指纹图谱中有9个共有峰,相似度在0.8 ～1.00;A药厂样品中氨基酸类成分较多,指纹图谱特征与标准汤剂指纹图谱相似度最高.结论:方法稳定、可靠、重复性好,为区分不同药厂补中益气丸提供参考.     

柱前衍生化HPLC法测定注射用芪红脉通中氨基酸

目的：建立中药注射剂注射用芪红脉通中氨基酸含量测定方法。方法：采用OPA-FMOC柱前衍生化法,用HPLC方法同时检测注射用芪红脉通中17种氨基酸。结果：所测17种氨基酸线性关系良好。结论：本试验建立的HPLC检测氨基酸的分析方法,选择性强、重复性好,可用于注射用芪红脉通中氨基酸的检测及质量控制。     

SPE-高效液相色谱法测定鼻咽清毒颗粒中龙胆苦苷的含量

目的:采用SPE-高效液相色谱法测定鼻咽清毒颗粒中龙胆苦苷的含量.方法:以甲醇-水(30:70)为流动相,hypersil ODS(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,流速为1 mL/min,检测波长为275 nm.结果:龙胆苦苷的测定在0.02235～0.1676 mg/ml范围内线性关系良好,平均回收率为98.1%,RSD为1.7%.结论:方法简单、灵敏、快速,可用于鼻咽清毒颗粒中龙胆苦苷的含量测定.     

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??OBJECTIVE To establish the quantification method for free amino acids including threonine, alanine, lysine and tyrosine in the inner part of Poria cocos. METHODS AQC (6-quinolyl-N-hydroxy-succinimidyl-carboxylate) was used as deriving reagent, and pre-column derivatization combined with ultra-high performance chromatography was applied to quantify threonine, alanine, lysine and tyrosine in 24 batches of the inner part of Poria cocos from Yunnan, Hubei and Anhui provinces. The experimental data were analyzed by partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) using Simca-p+11 software. RESULTS Alanine existed in every batch of sample, and its content ranged from 16.97-69.92 ??g??g^-1 in samples collected from different origins. Threonine, lysine and tyrosine were not found in some samples. The PLS-DA result showed that the samples from Yunnan and Anhui provinces clustered well. While the amino acid contents in the samples from Hubei province varied greatly. CONCLUSION AQC combined with pre-column derivatization is a convenient, rapid and sensitive method to quantify the free amino acids in Poria.     

牦牛皮胶氨基酸类成分的高效液相色谱指纹图谱

目的 采用高效液相色谱法研究并建立牦牛皮胶氨基酸类成分的指纹图谱,为牦牛皮胶的质量控制提供有效的方法.方法 采用柱前衍生-RP高效液相色谱法,梯度洗脱进行分离,固定相为Agilent Analytical XDB-C18,(4.6 mm ×250mm,5μm);流动相为pH6.4的醋酸钠缓冲液(A) - 60％乙腈(B),检测波长为360 nm,体积流量为1.0 mL/min,分析时间为48 min.结果 10批样品具有较高的相似度.天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸的平均质量分数分别为5.58％、10.49％、3.35％、23.25％、1.74％、14.19％、8.98％、2.48％、0.29％、1.6％、3.07％、2.12％和3.57％.结论 该方法稳定可靠,可为其氨基酸质量的全面控制提供参考.