超声辅助酶提取、双水相萃取及大孔树脂纯化天麻素的工艺研究

目的：优化超声辅助酶提取天麻中天麻素工艺并通过双水相萃取和大孔树脂进一步纯化,为精制天麻素提供工艺参考。方法：通过单因素试验考察和正交优化试验得到最佳超声辅助酶提取条件。通过双水相工艺考察得到最佳双水相萃取条件。通过大孔树脂工艺考察对大孔树脂型号进行筛选,对上样条件、洗脱条件进行优化。结果：超声辅助酶提取选择α-淀粉酶,最佳提取条件设定为料液比为1∶30,加酶量为0.8%,酶解时间为80 min,酶解温度为60℃,酶解pH值为5.5。最佳双水相萃取条件设定为乙醇体积分数为47.5%,硫酸铵质量分数为15.0%,萃取液浓度为0.2 g/mL,大孔树脂筛选型号为HPD100,最佳上样浓度为0.2 g/mL,径高比为1∶5,上样流速为3 BV/h,上样量为100 mL,最佳洗脱液体积分数为30.0%,洗脱流速为4 BV/h,洗脱液用量为230 mL。结论：本研究对超声辅助酶提取工艺优化结果较好,采用双水相体系和大孔树脂纯化,使天麻素纯度明显提高。且这一系列工艺稳定可靠,可为后续制剂及新药研发奠定基础。     

果胶酶法提取番茄总皂苷的工艺研究

目的确定酶法提取番茄总皂苷的工艺条件。方法以番茄皂苷A的质量浓度为考察指标,对酶解温度、酶解pH、酶解时间、酶添加量进行单因素实验,在单因素实验的基础上,按照L9(34)正交试验设计优选其提取工艺条件。结果酶解法的最佳工艺条件为:酶解温度55℃,酶解时间2 h,酶添加量0.4‰,pH4.0,此条件下,番茄酶解液中的番茄皂苷A质量浓度值最高。通过验证实验,证明在最佳酶解条件下,加酶组的总皂苷平均得率为0.25%,明显高于不加酶组的0.14%。结论该工艺是酶解法提取番茄水溶性皂苷的最佳工艺,能有效提高番茄皂苷得率和降低提取液的黏稠度。     

桔梗茎叶总皂苷的提取工艺

目的:优选桔梗茎叶总皂苷的最佳提取和纯化工艺,为桔梗非药用部位的综合开发利用提供参考。方法:以桔梗茎叶总皂苷收率、桔梗皂苷D的含量与转移率为指标,采用正交试验考察溶剂用量、提取温度、提取时间与提取次数对桔梗茎叶皂苷提取工艺的影响,再进一步通过大孔吸附树脂富集纯化总皂苷。结果:最佳提取工艺参数为在100℃条件下,加12倍量的水,提取2次,每次1.5 h。优化纯化工艺参数为最佳工艺提取药液离心后浓缩至1.0 g生药/mL,通过AB-8型大孔吸附树脂,上样量为桔梗茎叶提取物量∶树脂量=0.8∶1,上样流速为1.0 mL·min~(-1),用5 BV的75%乙醇洗脱。结论:优选的提取和纯化工艺稳定可行,可用于桔梗茎叶皂苷的提取。     

超声酶法提取三七总皂苷的研究

目的:优选三七总皂苷的最佳提取方法和提取工艺。方法:以三七提取液中总皂苷的含量和提取物得率为指标,考察乙醇回流法、超声法、超声纤维素酶法、超声果胶酶法、超声复合酶法提取三七总皂苷的优劣,并采用四因素(纤维素酶用量、果胶酶用量、超声时间、加水量)三水平正交设计法对超声复合酶法提取工艺条件进行优选。结果:得到了如下较理想的提取工艺条件:在pH为4.5,酶解温度为50°C,酶解时间为2.5 h条件下,纤维素酶用量为15 U/g(生药)、果胶酶用量为140 U/g(生药),超声时间为90 m in,加水量为8倍量。结论:所得三七提取液中总皂苷的含量为10.33%,提取物得率为35.17%,超声酶法操作简便,工艺条件稳定。     

土贝母总皂苷大孔树脂分离纯化工艺优选

目的:优选大孔树脂分离纯化土贝母总皂苷的工艺条件.方法:以吸附量和解吸率为考察指标,通过静态和动态试验比较不同型号大孔树脂对土贝母总皂苷的分离纯化性能,选出最佳树脂并对其纯化工艺进行优选.结果:HPD-750型树脂对土贝母总皂苷有较好的吸附分离性能,最佳工艺条件为树脂径高比为1∶5,上样液质量浓度1.6 g·mL-1,最大上样量为13 mL,1 BV水洗除杂,8 BV 95％乙醇洗脱,吸附和洗脱流速均为1 mL· min-1,收集洗脱液,回收乙醇至干,采用紫外分光光度法检测总皂苷质量分数为63.53％.结论:该优选工艺简单易行,能较好地分离纯化土贝母总皂苷.     

纤维素酶法提取断血流皂苷的工艺研究

目的:研究纤维素酶酶解断血流提取总皂苷的工艺条件.方法:以断血流皂苷A提取率作评价指标,分别考察体系pH、温度、酶解时间、酶用量等因素,并采用正交实验优化最佳酶解工艺.结果:纤维素酶解断血流的最佳工艺参数为:纤维素酶量5 U/g,提取pH值为7.0,酶解温度为60 ℃,时间为40 min时,断血流皂苷A提取率为90.92%,与未加酶组相比,提取率提高18.13%.结论:纤维素酶解断血流提取总皂苷工艺可行.     

大孔吸附树脂纯化核桃内种皮总多酚的工艺优选

目的:优选大孔吸附树脂纯化核桃内种皮总多酚的工艺条件。方法:以核桃内种皮为原料,采用乙醇回流法提取总多酚,通过静态吸附-洗脱试验筛选大孔吸附树脂型号,通过单因素试验考察上样液质量浓度、上样量、吸附流速、洗脱液浓度和用量等对核桃内种皮总多酚大孔树脂纯化工艺的影响。结果:选择X-5型大孔树,其最佳纯化工艺条件为上柱液pH 5.0,质量浓度3 g·L-1,吸附流速3 BV·h-1,上样量9.5 BV,加70%乙醇2 BV洗脱,收集洗脱液;总多酚纯度由粗提物的64.52%提高至79.64%,转移率89.83%。结论:优选的纯化工艺稳定可行,X-5型大孔树脂适用于核桃内种皮总多酚的初步纯化。     

大孔吸附树脂纯化酸枣仁醇提物工艺研究

目的:优化酸枣仁醇提物纯化工艺.方法:采用8倍量80%乙醇提取3次,每次2 h;运用正交试验设计,以D101干树脂:生药、吸附流速、洗脱液浓度、洗脱液用量为考察因素,以固形物中总黄酮含量、酸枣仁皂苷A含量作为综合评价指标.结果:吸附流速对固形物纯度(总黄酮+酸枣仁皂苷A)有显著性影响,未纯化前纯度为10.77%,纯化后纯度为41.43%,纯度提高284.68%.结论:确定最优纯化工艺:用1倍量生药的干树脂吸附0.2 g/mL的药液,吸附速度为2.2mL/min(即100 mL药液2.5 h),用4 BV的50%乙醇洗脱,收集洗脱液,此时固形物的纯度最高.     

大孔吸附树脂对白叶总皂苷的纯化工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂富集纯化白簕叶总皂苷.方法:以白簕叶总皂苷产率为评价指标,考察静态吸附量和解吸率筛选出最适型号树脂,再对上样pH值、动态吸附流速、最佳上样量、洗脱剂浓度等纯化工艺条件参数进行研究.结果:大孔吸附树脂法纯化白簕叶总皂苷的最优条件为:选用AB-8型大孔吸附树脂,吸附液pH值为5～6,吸附流速为1.0 mL/min,吸附液用量与树脂体积比为4∶ 1,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量与树脂体积比为4∶ 1,解吸流速为2.0 mL/min.     

大孔吸附树脂法富集纯化穿山龙总皂苷工艺研究

目的:探讨大孔吸附树脂法富集纯化穿山龙总皂苷的工艺。方法:以洗脱所得总固物的量及总固物中穿山龙总皂苷的含量为考察指标,考察树脂型号、洗脱溶剂用量等工艺条件与药材-树脂比例、色谱柱径高比、洗脱流速、收集洗脱液的量等工艺参数。结果:最佳工艺为药材-树脂(1:2),色谱柱径高比1:13,收集8BV洗脱液的量。总固物得率为5.79%～6.27%,穿山龙总皂苷的含量为55.08%～57.79%。结论:方法操作简单、安全、稳定,适合广泛应用推广。     

CCD-RSM法优化大孔吸附树脂纯化垂盆草复方中总黄酮及总皂苷工艺

目的:采用星点设计-效应面优化法(CCD-RSM)研究D101型大孔吸附树脂同时分离纯化垂盆草复方中的总黄酮、总皂苷的工艺条件及参数。方法:以上样药液的浓度、洗脱液乙醇浓度和洗脱液用量为考察因素,以总黄酮解吸附率、总皂苷解吸附率、总黄酮纯度、总皂苷纯度及总评归一值(OD)为指标,采用多元线性回归及二次多项式拟合,建立方程式,根据最佳模型描绘效应面,再根据效应面优选纯化工艺参数。结果:二次多项式拟合的相关系数明显优于多元线性回归方程,根据效应面优化的最佳纯化工艺参数为:上样药液浓度3mL/g(药液/饮片),洗脱液乙醇浓度80%,洗脱液用量7倍柱体积(BV),2种有效部位的总纯度达60%以上,验证实验表明预测值与实测值无显著性差异。结论:CCD-RSM法用于同一工艺条件下同时纯化垂盆草复方中2种有效部位的优化,模型预测性良好,实验设计有较高的可靠性,得到的工艺条件稳定。     

大孔吸附树脂精制注射用广炎灵粉针工艺研究

目的:通过对5种大孔吸附树脂的筛选,确定适用于精制注射用广炎灵粉针的树脂及工艺条件。方法:以丁香苦苷A的静态、动态吸附量和脱附率为指标筛选树脂,并优化了吸附和洗脱条件。结果:HPD100树脂具有较好的吸附性能和解吸效果。最佳工艺条件为:上样量为5:4～5:6(树脂:药材),4BV蒸馏水洗脱除杂质,洗脱溶剂为50%乙醇,用量为3BV,洗脱液流速为2BV.h-1。结论:HPD100大孔吸附树脂综合性能良好,适用于注射用广炎灵粉针的精制。     

大孔吸附树脂纯化荔枝核总皂苷的工艺研究

目的:研究SA-1型大孔吸附树脂吸附提取荔枝核总皂苷的工艺条件及参数。方法:以荔枝核总皂苷为考察指标,研究树脂吸附容量、洗脱溶媒及其用量等工艺条件。结果:通过SA-1型大孔树脂吸附后,先经4倍量柱体积水洗,再以80%乙醇为洗脱溶酶,3倍量柱体积洗脱效果最佳,总皂苷的纯度可达68.10%。结论:此法能较好地分离纯化荔枝核总皂苷,是简便、可行的提取方法。     

大孔树脂对中华常春藤总皂苷的纯化研究

目的:探讨大孔树脂纯化常春藤总皂苷的工艺条件。方法:选用AB-8和D101两种型号大孔吸附树脂,采用测定静态吸附量方法筛选树脂,并对总皂苷进行纯化,利用分光光度法测定纯化前后常春藤总皂苷的含量。结果:实验表明AB-8树脂的分离效果最好,其最佳工艺为上柱液流速3BV/h,样液浓度为2.00mg/mL,30%乙醇为洗脱液,洗脱液流速控制在2BV/h。在此条件纯化后,常春藤提取物中总皂苷含量由2%提高到37%。结论:AB-8大孔树脂可以较好地分离纯化常春藤总皂苷。     

大孔吸附树脂分离纯化三七花蕾总皂苷的研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化三七花蕾中总皂苷的工艺条件及参数.方法:以三七花蕾总皂苷的吸附量和洗脱率为指标,筛选大孔吸附树脂,并研究所选树脂分离纯化三七花蕾总皂苷的吸附和洗脱条件.结果:AB-8树脂对三七花蕾总皂苷有较好的吸附分离性能.最佳工艺条件为:上样浓度为0.2 g生药/ml,以3BV 70%乙醇溶液洗脱,吸附及洗脱流速均为2BV/h,洗脱液蒸干,即得纯化的三七花蕾总皂苷提取物.纯化后三七花蕾总皂苷含量为87.60%.结论:AB-8大孔吸附树脂分离纯化三七花蕾中总皂苷是可行的.     

效应面法优化复方扶芳藤胶囊的复合酶提取工艺

目的:优化复方扶芳藤胶囊的复合酶提取工艺。方法:采用单因素试验考察Celluclast~1.5L纤维素酶用量、Pectines XXL果胶酶用量、pH值、酶解温度、料液比和提取时间对人参皂苷Rb1转移率、总糖得率和干膏得率的影响,然后采用效应面法优化提取工艺。结果:优化的最佳工艺条件为:纤维素酶用量为1.0%、果胶酶用量为1.0%、pH值为5.2、酶解温度为56℃、料液比为1∶14.38、提取时间为4 h,人参皂苷Rb1的转移率为79.75%,总糖得率为13.57%,干膏得率为16.78%,实际OD值与理论值偏差为-2.51%。结论:纤维素酶联用果胶酶能高效提取复方扶芳藤胶囊有效成分,效应面法优化的提取工艺合理、可行。     

果胶酶提取金丝桃素工艺研究

目的:探讨贯叶连翘中金丝桃素的酶提取法的最优酶及最佳工艺。方法:在果胶酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、复合酶SPE-007A中筛选出最优酶,并以高效液相色谱法测定金丝桃素含量为指标,继考察浸提倍数、加酶量、pH值、温度、酶解时间等因素对提取工艺的影响,并用正交试验优选提取条件,从而得到最佳工艺。结果:最优酶为果胶酶,优选出的工艺为pH4.6、酶用量1.5%、酶解温度50℃、酶解时间5 h、酶解液浸提倍数15倍。结论:该工艺高效、稳定,可用于今后对贯叶连翘的研究。     

果胶酶法对翠云草黄酮提取的研究

本文探索果胶酶法提取翠云草中黄酮的工艺条件,用果胶酶提取,采取L9（34）正交试验研究果胶酶用量、酶解时间、pH值、酶解温度4个因素对黄酮提取率的影响。实验结果表明,果胶酶法提取翠云草黄酮的最佳提取条件为：果胶酶浓度0.075mg/ml,酶解时间2.5h,酶解pH=5.0,酶解温度50℃。在此条件下,黄酮的平均提取率为1.40%,RSD=2.0%;加样回收率为95.7%。可见,果胶酶法提取翠云草黄酮效果良好。     

优化酶提取贯叶连翘药材活性成分工艺

目的:探讨贯叶连翘中金丝桃素的酶提取法的最优酶及其最佳工艺。方法:以高效液相色谱法测定金丝桃素含量为指标,在纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、复合酶SPE-007A中筛选出最优2种酶,继考察这2种酶复合后的浸提倍数、加酶量、pH、温度、酶解时间等因素对提取工艺的影响,并用正交试验优选提取条件,从而得到最佳工艺。结果:最优酶为纤维素酶与果胶酶复合酶,pH 4.8、酶用量(纤维素酶/果胶酶)2.0%/2.0%、温度50℃、酶解时间6 h、酶解液浸提倍数15倍。结论:该工艺高效、稳定,可用于今后对贯叶连翘的研究。     

阴离子交换树脂纯化三七发酵产物中总皂苷的工艺优选

目的:为了得到高纯度的三七总皂苷,利用阴离子交换树脂对三七发酵产物进行纯化,优选纯化工艺参数。方法:选用三七发酵产物为研究对象,以总皂苷含量或纯度为指标,采用单因素试验考察树脂型号、径高比、上样液质量浓度、上样流速、吸附时间、洗脱剂种类、洗脱液用量、洗脱流速、上样液p H等条件对洗脱液中总皂苷含量的影响。结果:选取D301型阴离子树脂,径高比1∶8.3,上样液质量浓度0.25 g·m L~(-1),树脂干重-生药量(1∶0.64),上样流速2 BV·h~(-1),上样液p H 9,吸附时间15 min,洗脱流速2 BV·h~(-1),加水5 BV洗脱杂质,加60%乙醇4 BV对目标成分进行洗脱。三七发酵产物中总皂苷纯度90%。结论:利用阴离子交换树脂纯化三七发酵产物中总皂苷的方法简便可行,纯化效果好,能满足于工业生产的要求,为该有效部位的新药及相关产品开发提供参考。