肝细胞生长因子对ADPKD囊肿衬里上皮细胞合成细胞外基质、基质金属蛋白酶及其抑制剂的作用

目的；观察重组人肝细胞生长因子（rhHGF)对常染色体显性遗传性多囊肾病（ADPKD)囊肿衬里上皮细胞合成细胞外项质（ECM），基质金属蛋白酶及其抑制剂的作用。方法：采用放免法测定细胞合成层粘连蛋白（LN）和Ⅲ型前胶原氨基末端肽（PⅢNP），采用ELISA法检测细胞合成Ⅳ型胶原(ColⅣ），采用RT－PCR方法测定细胞表达转化生长因子β1（TGFβ1），基质金属蛋白酶2（MMP－2），金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP－1），金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP－2）mRNA的情况，用蛋白质印迹方法检测细胞上清液中MMP－2蛋白表达，明胶酶谱法检测MMP－2活性。结果：rhHGF及rhHGF 抗TGFβ1抗体组ADPKD囊肿衬里上皮细胞合成LN，ColⅣ显著增多，但两组比较无显著差异。对照组，rhHGF组，rhHGF 抗HGF抗体组及rhHGF 抗TGFβ1抗体组各间合成PⅢNP值均无显著差异。对照组，rhHGF组，rhHGF＋抗HGF抗体组各组比较TGFβ1mRNA表达无显著差异。与对照比较，rhHGF显著上调细胞MMP－2 mRNA和细胞上清液中MMP－2蛋白表达及MMP－2活性，显著下调细胞TIMP－1，TIMP－2 mRNA表达。结论：HGF促进了ADPKD囊肿衬里上皮细胞合成LN和ColⅣ，增加MMP－2表达，抑制TIMP－1，TIMP－2的表达。这些改变可能参与了ADPKD囊肿的发生及发展。     

通络方防治大鼠肾小球硬化的作用机制

目的 观察通络方对肾组织中Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨通络方防治大鼠肾小球硬化的作用机制.方法 通过光镜观察治疗组肾脏病理学改变,同时应用免疫组化技术及网像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中Ⅳ-C、FN、LN、TGF-β1表达情况.结果 通络方可明显降低大鼠肾组织中Col Ⅳ、FN、LN、TGF-β1表达(P<0.05或P<0.01),减轻肾脏的病理损害(P<0.01).结论 通络方可能是通过降低肾脏组织中Col Ⅳ、FN、LN及TGF-β1表达起到治疗作用的.     

转化生长因子β1对大鼠系膜细胞醛糖还原酶表达的影响

目的：对转染人转化生长因子（TGF）β1基因的大鼠系膜细胞（MsC)进行相关反应性基因的筛选,并观察TGF-β1对其中之一的醛糖还原酶表达的影响。方法：采用SSH-PCR和反向杂交法对转染人TGF-β1基因的MsC筛选其相关反应性基因,并进行测序及与GenBank资料作同源性序列比较;又分别应用半定量RT-PCR、Western blot法观察其在动物体内和培养的MsC中表达的变化。结果：经筛选获得的28个反应性基因cDNA片段,1个长度为337bp的cDNA片段与已知醛糖还原酶同源性完全一致;体外培养的MsC经TGF-β1作用,该酶mRNA和蛋白表达增强;在大鼠抗Thy1系膜增生性肾小球肾炎病变肾组织中,该酶mRNA和蛋白的表达随TGF-β1表达上调而明显增强。结论：醛糖还原酶是一个与TGF-β1基因表达密切相关的多元醇代谢通路的关键酶,可能参与TGF-β1介导的肾小球硬化的发生机制。     

内皮素1及内皮素受体A拮抗剂对人肾间质成纤维细胞的作用

目的 探讨内皮素1（ET－1）受体A拮抗剂（ETaRA）对人肾间质成纤维细胞（hRIF）的作用。方法 在体外培养的hRIF中进行如上试验：（1）MTT比色法检测细胞增殖情况。（2）逆转录多聚酶链反应法（RT－PCR）观察Ⅰ型胶原（ColⅠ）、转化生长因子β（TGF－β）、基质金属蛋白酶1（MMP－1）、金属蛋白酶组织抑制物1,2（TIMP－1,TIMP－2）mRNA表达的变化。结果 （1）ET－1（10^-11-10^-7mol/L,24h）可以促进hRIF增殖,10^-7mol/L增殖最显著（P＜0.05）,呈剂量相关;10^-7mol/L刺激8h,hRIF即明显增殖,24h达高峰（P＜0.01）。（2）ET－1（10^-11-10^-7mol/L,16h）可上调hRIFr ColⅠ、TGF-β、MMP-1、TIMP-1、TIMP-2mRNA表达,10^-7mol/L作用最显著（P＜0.05）,呈剂量相关。10^-7mol/L刺激hRIFs时,ColⅠmRNA在8h表达显著增加（P＜0.05）,24h达高峰;TGF－βmRNA在8h表达显著增加（P＜0.05）且达高峰;TIMP－1及TIMP－2mRNA在16h表达显著增加（P＜0.05）,24h达高峰;MMP－1mRNA在16h表达显著增加（P＜0.05）,且达高峰。（3）上述作用可特异地被ETaRA阻断。结论 ET－1可刺激hRIF增殖,并上调ColⅠ、TGF－β、MMP－1、TIMP－1、TIMP－2mRNA的表达,ETaRA可抑制上述反应。ET－1可能在上参与肾间质纤维化过程。     

Interleukin 1, transforming growth factor beta and messenger ribonucleic acid expression during the course of glomerulonephritis and glomerulosclerosis]

The accumulation of extracellular matrix is a prominent feature of progressive glomerulonephritis and glomerulosclerosis. This study was designed to evaluate the coeffective role of interleukin 1 (IL-1), transforming growth factor beta (TGF beta), and accumulation of collagen IV, fibronectin (FN), laminin (LN) in the progress of glomerulonephritis. Rat mesangial proliferation and sclerosis was induced by injection of anti-thymocyte serum (ATS). Total RNA of glomeruli were extracted from rat kidney at 3, 7, 14, 28, 60 days after ATS administration for northern blots. The results showed that IL-1, TGF beta mRNA expression was 2 to 3 folds higher than in the controls on the 7th to 14th day after injection of ATS. At the same time, there were increased accumulations of collagen IV, FN, and LN. Increased IL-1, TGF beta mRNA expression and accumulation of collagen IV, FN, LN were closely associated with mesangial proliferation, matrix expansion and focal glomerulosclerosis. These results suggest that increased IL-1, TGF beta mRNA expression and accumulation of collagen IV, FN, LN may play an important role in the progression of glomerulonephritis.     

THE LOCALIZATION OF ADRENOMEDULLIN IN RAT KIDNEY TISSUE AND ITS INHIBITORY EFFECT ON THE GROWTH OF CULTURED RAT MESANGIAL CELLSA

Objective:To observe the localization of adrenomedullin(AM) in rat kidney tissue and its inhibitory effect on the growth of cultured rat mesangial cells (MsC).Methods:A monoclonal antibody against AM developed by our laboratory was used to detect the localization of AM protein in rat kidney tissue by avidin-biotin complex immunohistochemistry.The expressions of AM and its receptor CRLR mRNA on cultured glomerular epithelial cells (GEC)and MsC were investigated by Northern blot assay,and the possible effect of AM secreted by GEC on MsC proliferation was observed using [^3H] thymidine incorporation as an index.Results:A specific monoclonal antibody against AM was successfull developed.AM was immunohistochemically localized mainly in glomeruli (GEC and endothelial cells),some cortical proximal tubules,medullary collecting duct cells,interstitial cells,vascular smooth muscle cells and endothelial cells.Northern blot assay showed the AM mRNA was expressed only on cultured GEC,but not on MsC,however,AM receptor CRLR mRNA was only expressed on MsC.GEC conditioned medium containing AM can inhibit MsC growth and AM receptor blocker CGRP8-37 may partially decreased this inhibitory effect.Conclusion:AM produced by GEC inhibits the proliferation of MsC,which suggests that AM as an important regulator is involved in glomerular normal physiological functions and pathologic processes.     

苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2和C-IV表达的影响

目的探讨苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制因子．2（TIMP-2）和IV型胶原（C—IV）表达水平的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为3组：正常对照组（c组）,糖尿病未治疗组（DM组）,糖尿病苯那普利（10mg／kg）治疗组（DB组）。8周后,用免疫组化方法（SP法）和RT—PCR方法检测各组大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2及C—IV的表达。结果DM组大鼠肾小球MMP-2蛋白、mRNA的表达较C组明显降低,TIMp-2及C—IV蛋白、mRNA明显升高,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,出现糖尿病。肾病（DN）典型的病理改变。DB组MMP-2蛋白、mRNA较DM组表达明显升高（P〈0．01）、TIMP-2和C—IV表达较DM组明显降低（P〈0．01）,病理改变好转。结论苯那普利可能通过逆转糖尿病大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2的表达,降低C—IV的堆积,对糖尿病肾病（DN）起保护作用。     

延肾口服液对人肾小球系膜细胞增殖及分泌FN、LN、Ⅳ-C的影响

【目的】观察中药复方制剂延肾口服液（YSH）对培养的人肾小球系膜细胞（huMsC）增殖及分泌细胞外基质（ECM）的影响,探讨其防治肾小球硬化的作用机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐法（MTT）比色法和双抗夹心ELISA法,检测灌服延肾大鼠不同浓度药物血清对培养的人肾小球系膜细胞的增殖及分泌纤维连接蛋白（FN）、层连蛋白（LN）和Ⅳ型胶原（Ⅳ-c）的影响。【结果】5％-20％YSH大鼠血清对原代培养的人肾小球系膜细胞增殖及产生FN、LN、Ⅳ-c有明显的抑制作用（P〈O．05或P〈0．01）,其抑制程度与药物浓度有-定的量效关系。【结论】延肾制剂对培养的人肾小球系膜细胞增殖及产生FN、LN、Ⅳ-C的抑制作用,是其防治肾小球硬化发生发展的重要作用机制之-。     

白细胞介素17对大鼠肝星状细胞胶原代谢的影响

目的：探讨白细胞介素17（IL-17）对大鼠肝星状细胞（HSCs）增殖及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达的影响及其与肝纤维化的关系。方法：采用Optiprep密度梯度离心法分离HSCs并进行鉴定、传代。采用免疫细胞化学法检测IL-17作用HSCs 72 h后α肌动蛋白（α-SMA）表达的影响。采用MTT法检测IL-17作用HSCs 24、48和72 h后细胞的增殖情况。采用RT-PCR法和ELISA法分别检测IL-17作用HSCs后MMP-9、TIMP-1 mRNA和蛋白表达的影响。结果：成功分离并培养HSCs,一定浓度的IL-17能促进HSCs α-SMA的表达并且促进HSCs增殖。IL-17能提高HSCs MMP-9和TIMP-1 mRNA和蛋白的分泌,呈浓度依赖性,且TIMP-1/MMP-9比值随IL-17浓度增加而递增。结论：IL-17不仅促进HSCs增殖,还能促进α-SMA、MMP-9和TIMP-1的表达,同时提高TIMP-1与MMP-9的比值,可能在肝纤维化中扮演重要角色。     

Effect of angiotensin Ⅱ and angiotensin Ⅱ type 1 receptor antagonist on the proliferation,contraction and collagen synthesis in rat hepatic stellate cells

Background Angiotensin Ⅱ （Ang Ⅱ） is a very important vasoactive peptide that acts upon hepatic stellate cells （HSCs）, which are major effector cells in hepatic cirrhosis and portal hypertension. The present study was aimed to investigate the effects of Ang Ⅱ and angiotensin Ⅱ type 1 receptor antagonist （AT1RA） on the proliferation, contraction and collagen synthesis in HSCs.
Methods HSC-T6 rat hepatic stellate cell line was studied. The proliferation of the HSC cells was evaluated by MTT colorimetric assay while HSC DNA synthesis was measured by ^3H-thymidine incorporation. The effects of angiotensin Ⅱ and AT1RA on HSCs contraction were studied by analysis of the contraction of the collagen lattice. Cell culture media were analyzed by RT-PCR to detect secretion of collagen Ⅰ （Col Ⅰ）, collagen Ⅲ （Col Ⅲ） and transforming growth factor β1 （TGF-β1） by enzyme linked immunosorbent assay. HSC was harvested to measure collagen Ⅰ, collagen Ⅲ and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 （TIMP-1） mRNA expression.
Results Ang Ⅱ （（1×10^-10-1×10^-4）mol/L）stimulated DNA synthesis and proliferation in HSCs compared with untreated control cells. AT1RA inhibited angiotensin Ⅱ induced proliferation of HSCs. A linear increase in the contractive area of collagen lattice correlated with the concentration of angiotensin Ⅱ （1×10^-9-1×10^-5 mol/L） and with time over 48 hours. AT1RA blocks angiotensin Ⅱ induced contraction of collagen lattice. Col Ⅰ, Col Ⅲ and TGF-β1 levels of the Ang Ⅱ group were higher than those of control group and this increase was downregulated by AT1RA. The mRNA expressions of Col Ⅰ, Col Ⅲ and TIMP-1 were higher in HSCs from the Ang Ⅱ group than the control group and downregulated by AT1RA.
Conclusions Angiotensin Ⅱ increased DNA synthesis and proliferation of HSCs in a dose-dependent manner, stimulated the contraction of HSCs dose- and time-dependently. Angiotensin also promoted excretion of Col I, Col Ⅲ and TGF-β1 lev     

IL-1β对人分泌中期子宫内膜细胞分泌MMP-9及TIMP-3蛋白的影响

目的初步研究白介素-1β(IL-1β)对离体培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其特异性组织抑制物-3(TIMP-3)的影响。方法原代培养人分泌中期子宫内膜细胞,利用粘附式细胞仪570型,采用间接免疫荧光法检测IL-1β对内膜细胞分泌MMP-9和TIMP-3的影响。结果(1)MMP-9:空白对照组为1491.38±68.95,50U/ml组为1592.40±47.57,100U/ml组为1702.63±75.31,500U/ml组为1994.49±52.98,1000U/ml组为2347.58±45.87。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌MMP-9表达量呈浓度依赖性显著升高(P<0.05);(2)TIMP-3:空白对照组为1643.31±61.29,50U/ml组为1597.27±49.07,100U/ml组为1443.93±81.23,500U/ml组为1343.28±54.80,1000U/ml组为1157.85±47.95。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌TIMP-3表达量呈浓度依赖性显著下降(P<0.05)。结论IL-1β通过促进MMP-9分泌,抑制TIMP-3分泌,使细胞外基质降解,有利于绒毛滋养层细胞侵入。     

脂多糖对血管平滑肌细胞表达MMP-2、9及TIMP-1、2的影响

目的 探讨脂多糖(1ipopolysaccharides，LPS)对培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)表达基质金属蛋白酶2、9(matrix metalloproteinase-2，-9；MMP-2，MMP-9)及其组织抑制因子1、2(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-1，-2；TIMP-1，TIMP-2)的影响。方法 贴块法进行血管平滑肌细胞培养，细胞免疫化学检测基质金属蛋白酶及其抑制剂的蛋白表达，原位分子杂交分析MMP-9 mRNA表达。结果 LPS是MMP-9的强诱导物。可在蛋白及mRNA水平诱导MMP-9的表达，同时LPS可诱导TIMP-1的表达，作用较对MMP-9减弱。LPS对二者诱导作用强度与LPS的浓度及作用时间呈正相关。LPS降低TIMP-2的表达，其表达与LPS的浓度及作用时间呈负相关。LPS对MMP-2的表达没有明显作用。结论 LPS诱导平滑肌细胞MMP-9、TIMP-1表达的同时可降低TIMP-2的表达，其作用呈浓度时间依赖性，在动脉粥样硬化发病过程中可能起一定作用。     

基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶组织抑制剂-2在卵巢恶性肿瘤中的表达及其意义

目的 :探讨基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )及基质金属蛋白酶组织抑制剂 - 2 (TIMP- 2 )在卵巢肿瘤中的表达及与卵巢恶性肿瘤临床病理特征和预后的关系。方法 :应用 RT- PCR方法检测 4 8例卵巢恶性肿瘤、2 1例良性卵巢肿瘤及 2 2例正常卵巢组织中 MMP- 2 m RNA及 TIMP- 2 m RNA的表达情况 ,进行阳性率及半定量的比较 ,并将其结果与临床及病理学资料进行统计学分析。结果 :MMP- 2在卵巢恶性肿瘤组织中的表达水平 (0 .92 8± 0 .796 )明显高于正常卵巢组织 (0 .5 2 7± 0 .5 78) (P <0 .0 5 )。 TIMP- 2在卵巢恶性肿瘤及良性肿瘤中阳性率及半定量 (分别为 75 .0 %、0 .777± 0 .6 5 3、76 .2 %、0 .771± 0 .6 35 ) ,明显高于正常卵巢 (分别为 4 5 .5 %、0 .382± 0 .6 33) (P <0 .0 5 )。其表达水平与卵巢恶性肿瘤的临床病理特征无相关性。多因素生存回归分析显示 MMP- 2、TIMP- 2可作为卵巢恶性肿瘤的独立预后因素。结论 :MMP- 2及 TIMP- 2可能与卵巢恶性肿瘤的发生发展有关。     

转染Smad 7基因的大鼠肾小球系膜细胞对Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的改变

 [摘要] 目的 探讨Smad 7基因对大鼠肾小球系膜细胞（MsC）Ⅰ、Ⅲ型胶原（ColⅠ、Col Ⅲ）表达的影响,为试图运用Smad 7对肾纤维化进行基因治疗提供实验依据。方法 经脂质体介导将含有Smad 7重组表达质粒转染大鼠MsC，用G418筛选及Northern blot、Western blot法鉴定；又分别采用RT-PCR和Western blot法，检测转染阳性MsC克隆ColⅠ、Col Ⅲ表达改变。结果 成功建立稳定高表达Smad 7的阳性MsC克隆（S-22与S-26），并证实两阳性MsC克隆ColⅠ及Col Ⅲ mRNA及蛋白的表达均被明显抑制, 其中S-22克隆ColⅠ及Col Ⅲ mRNA表达分别降低47 %和56 ％，其蛋白表达分别降低65 %和54 ％。结论 Smad 7可能通过抑制组织内ColⅠ及Col Ⅲ的生成而起到减轻肾纤维化进展的作用。     

大黄苷元对骨髓间充质干细胞移植脑缺血大鼠基质金属蛋白酶的影响

目的：观察大黄苷元对脑缺血再灌注损伤大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrowstromal cells,BMSCs）移植术后脑组织病理改变及基质金属蛋白酶的影响。方法：体外全骨髓细胞贴壁筛选培养法扩增BMSCs;线栓法制备大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型。190只大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄苷元组、BMSCs移植组（简称移植组）和BMSCs移植联合大黄苷元组（简称联合组）。再灌注后24 h将BMSCs由同侧颈内动脉移植入移植组和联合组大鼠脑内;大黄苷元组和联合组予大黄苷元灌胃用药。移植后7、14和28 d,模型各组取脑组织用于检测。光镜下观察脑组织微血管病理改变;免疫组织化学法测定BMSCs免疫球蛋白抗体G（immunoglobulin G,IgG）、Ⅳ型胶原（type Ⅳ collagen,col Ⅳ）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制物1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TI MP-1）的表达。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠微血管残缺、破损明显,脑组织中IgG和MMP-9表达增强,ColⅣ和TI MP-1表达减弱。与模型组比较,大黄苷元组、移植组和联合组大鼠微血管结构改善明显;大黄苷元组和联合组各时间点大鼠脑组织中IgG表达和MMP-9活性减弱,ColⅣ和TI MP-1表达增强。联合组大鼠于移植7d时的微血管结构较移植组完整,其各时间点大鼠脑组织中ColⅣ表达较移植组增强,14 d时大鼠脑组织中MMP-9活性较大黄苷元组降低,TI MP-1表达增强,28 d时TI MP-1表达较移植组增强。结论：大黄苷元可使脑缺血再灌注损伤大鼠微血管基底膜ColⅣ降解减少,通透性降低,并与BMSCs有协同作用,其作用机制可能与增加TI MP-1表达以调节MMP-9平衡有关。     

p27蛋白表达对肾硬化大鼠肾小球细胞增殖的影响

目的：研究p27蛋白表达对肾硬化大鼠肾小球细胞增殖的影响。方法：建立阿霉素肾硬化大鼠模型，用RT-PCR方法检测增殖细胞核抗原(PCNA) mRNA的表达，免疫组化检测肾小球内PCNA和p27的表达。结果：疾病组PCNA mRNA表达明显增强，增殖指数进行性升高。对照组p27蛋白有一定水平表达，而疾病组其表达进行性下降；p27蛋白表达与增殖指数和PCNA mRNA表达呈负相关。结论：肾硬化过程中肾小球细胞增殖呈进行性增加，p27表达下调参与调控肾小球细胞的增殖。     

阿霉素肾病大鼠肾小球中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在阿霉素肾病大鼠中的表达和意义。方法 25只Sprague-Dawlay(SD)雄性大鼠,随机分为对照组10只和观察组15只,观察组尾静脉内一次性注射阿霉素7.5 mg.kg-1(以生理盐水稀释至3 mL),对照组尾静脉内一次性注射等量生理盐水,对照组和观察组每日1次按10 mL.kg-1给予生理盐水灌胃,灌胃共8周。采用反转录聚合酶链式反应法检测肾组织MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达。结果实验8周时与对照组比较,观察组的24 h尿蛋白定量、肌酐和尿素氮水平均显著上升(P<0.01),血白蛋白显著降低(P<0.01)。对照组大鼠肾皮质区肾小球毛细血管襻开放较好,无细胞外基质(ECM)聚集;观察组大鼠肾组织可见部分毛细血管腔变窄甚至完全闭塞,肾小囊扩张,囊壁增厚,球囊粘连。观察组MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达较对照组明显下降(P<0.01),观察组中MMP-2/TIMP-2 mRNA半定量比值较对照组明显降低(P<0.01)。结论 MMP-2和TIMP-2在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中起到重要的作用;MMP-2/TIMP-2的比值失调使肾小球ECM降解减少,导致ECM过度积聚,参与肾小球硬化的发生发展。     

转录因子Ets-1在2型糖尿病肾病中的表达及其意义

目的:观察转录因子Ets-1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-2组织抑制剂(TIMP-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)在2型糖尿病肾病(DN)中的表达及探讨其意义。方法:糖尿病肾病组25例;轻微病变性肾病(MCD)20例设为对照组。采用免疫组织化学染色,观察各实验组肾组织内Ets-1、MMP-2、TIMP-2、α-SMA、vimentin及ColⅣ的表达,并行免疫双染共定位分析。结果:25例DN患者中,男15例,女10例;年龄35～67岁。对照组20例MCD患者中,男12例,女8例;年龄18～46岁。与对照组相比,DN组肾小球内Ets-1表达显著性增加(P<0.05),肾小管间质纤维化区域内Ets-1表达亦明显增加(P<0.05);DN组MMP-2在肾小球及肾小管间质内的表达显著性增加(P<0.05);TIMP-2在肾小球及肾小管间质内的表达也明显增加(P<0.05),肾小球及肾小管间质内MMP-2/TIMP-2比值却显著性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,DN组肾小球内α-SMA、vimentin及ColⅣ表达明显增加(P<0.05),肾小管间质内α-SMA及ColⅣ表达亦明显增加(P<0.05),vimentin在肾小管间质内表达则显著性增加(P<0.01)。免疫双染显示,2型DN肾组织内大多数Ets-1阳性细胞同时出现MMP-2阳性表达,而α-SMA阳性细胞同时具有ColⅣ阳性表达。结论:Ets-1转录因子可能通过调节MMP-2/TIMP-2系统平衡,影响ECM沉积,在2型DN基质重塑过程中起关键性作用。     

病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制剂-1、血小板源性生长因子、增殖细胞核抗原的表达

目的:探讨病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、血小板源性生长因子(PDGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及意义.方法:采用免疫组织化学方法检测58例病理性瘢痕、16例正常皮肤及16例非病理性瘢痕组织中MMP-1、TIMP-1、PDGF及PCNA的表达情况.结果:病理性瘢痕组织中MMP-1、TIMP-1、PDGF阳性表达率及PCNA指数均高于非病理性瘢痕及正常皮肤组织(P均＜0.05).病理性瘢痕组织中TIMP-1与PDGF、MMP-1、PCNA及PDGF与PCNA表达均呈正相关(P均＜0.05).结论:病理性瘢痕的形成与MMP-1、TIMP-1、PDGF及PCNA相互作用失衡有关.     

低氧应激对人肝癌细胞AFP、VEGF、TIMP-1、MMP-9表达的影响

目的 探讨低氧应激对人肝癌细胞(HepG-2细胞)甲胎蛋白(AFP)、血管内皮生长因子(VEGF)、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响.方法 低氧(5% O2、5% CO2、90% N2)和常氧培养HepG-2细胞.逆转录-多聚酶链式反应技术测定HepG-2细胞AFP、VEGF、TIMP-1、MMP-9 mRNA的表达.酶联免疫吸附法测定HepG-2细胞培养上清VEGF、TIMP-1、MMP-9蛋白含量,放射免疫测定法测定HepG-2细胞培养上清AFP蛋白含量.结果 低氧组AFP、VEGF、MMP-9mRNA和蛋白表达量显著高于常氧组;TIMP-1 mRNA和蛋白表达量显著低于常氧组(P＜0.01).结论 低氧应激上调人HepG-2细胞AFP、VEGF、MMP-9基因表达,下调TIMP -1基因表达.