5种海洋动物多糖对体外小鼠脾淋巴细胞及大鼠睾丸支持细胞增殖作用的比较

 目的研究脉红螺、隔贻贝、角蝾螺、福氏玉螺、纵条肌海葵5种海洋动物粗多糖对体外小鼠脾淋巴细胞转化率和大鼠睾丸支持细胞增殖率的作用。方法5种粗多糖分别以100,1 000 mg·L^-1两个浓度组,体外对小鼠脾淋巴细胞和大鼠睾丸支细胞作用72 h后,用MTT法对小鼠脾淋巴细胞的转化率和大鼠睾丸支持细胞的增殖率进行测定。结果角蝾螺(P<0.05),玉螺(低浓度组P<0.05;高浓度组P<0.001)、海葵(P<0.001)多糖能显著提高小鼠的脾淋巴细胞转化率和大鼠睾丸支持细胞的增殖率。结论角蝾螺、玉螺、海葵粗多糖有促进体外小鼠脾淋巴细胞转化和大鼠睾丸支持细胞增殖的作用。     

不同时间点模拟失重和辐射大鼠HPAA的变化和太空燮理汤的作用

目的:在不同时间点观察模拟失重和辐射大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的变化和太空燮理汤的作用.方法:采用头低位-30°尾部悬吊法模拟失重,60Co-γ射线照射模拟辐射.中药组大鼠从实验第1天开始按7g/(kg·d)给予太空燮理汤灌胃,其余各组大鼠灌服等容积的生理盐水.采用放免法检测3个时间点(实验第11、16和21天)各组大鼠血清中CORT、下丘脑中CRH和垂体中ACTH的含量.结果:实验第11、16和21天悬吊组和悬吊加辐射组大鼠血清CORT和垂体ACTH含量高于正常组;悬吊组和悬吊加辐射组大鼠下丘脑CRH含量在实验第11天高于正常组.在实验第16天和21天低于正常组;实验第11天悬吊加辐射组大鼠血清中CORT的含量高于悬吊组;实验第11、16和21天,中药组大鼠血清CORT含量低于悬吊加辐射组,垂体ACTH含量低于悬吊加辐射组;中药组大鼠下丘脑CRH含量在实验第11天低于悬吊加辐射组,在实验第16天和21天高于悬吊加辐射组.结论:单纯失熏和失重加辐射均可引起机体下丘脑-垂体-肾上腺轴功能的紊乱;失重加辐射复合因素对血中CORT含量的影响与单一失重因素作用不同;太空燮理汤能够调节失重加辐射引起的机体下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱.     

中药复方对模拟失重大鼠骨代谢的影响

目的:观察中药复方对尾部悬吊模拟失重大鼠骨代谢的影响。方法:50只Wistar大鼠按随机区组实验设计法分成正常组、模型组、悬吊中药低(3.52g·kg^-1)、中(7.04g·kg^-1)、高剂量(14.08g·kg^-1)组,每组10只,实验周期21d。造模前7d悬吊中药3个剂量组给予中药复方,空白与模型组给予蒸馏水灌胃,每日1次。第8天灌胃1h后,模型组与悬吊中药3个剂量组尾部悬吊,正常组大鼠笼中自由活动,继续饲养14d。实验结束,检测各组动物血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、股骨羟脯氨酸(HOP)含量及股骨、腰椎骨密度(BMD)的变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠血清ALP显著降低(P<0.05),BGP,TRAP含量无明显变化,股骨、腰椎BMD明显降低(P<0.05);与模型组相比中药各剂量组血清ALP含量无显著变化,中药中剂量组血清BGP显著增高(P<0.05),中药中、高剂量组血清TRAP显著降低(P<0.05),中药中剂量组股骨BMD显著增加(P<0.05)。结论:中药复方能明显促进骨形成作用,有效抑制骨吸收作用,减弱溶骨过程从而促进骨矿盐的沉积和矿化,增强BMD而达到防治骨丢失的作用;有效的防护和治疗失重性骨丢失采取联合措施很有必要。     

狼疮方2号对狼疮模型血清中几种细胞因子的影响

 目的研究中药复方狼疮方2号(LCF-2)对BXSB狼疮模型鼠血清中细胞因子的作用及对脾指数、胸腺指数的影响,探讨其对SLE的作用机制。方法 将BXSB狼疮模型鼠随机分为空白对照组、中药组、西药组、中西药合用组。重量法测定小鼠脾指数及胸腺指数;双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中IL-2,IL-6,TNF-a的含量。结果 LCF-2组能够升高已降低的胸腺指数,与空白对照组比差异有显著性,对已升高的脾指数作用不明显,而中西药组可以降低升高的脾指数(P<0.01),升高降低的胸腺指数(P<0.05);中药组能显著抑制TNF-a(P<0.05),上调IL-2水平(P<0.01),对IL-6的降低作用无统计学意义;中西药合用药组能抑制TNF-a(P<0.01),上调IL-2水平(P<0.05),抑制IL-6(P<0.05)。结论 中药复方LCF-2与西药泼尼松均对BXSB狼疮小鼠有明显的治疗作用,但两者的作用机制不同。中西药合用组疗效优于中药、西药组。     

黄花倒水莲对辐射损伤小鼠防护作用的研究

目的: 初步探讨黄花倒水莲提取物对小鼠辐射损伤的防护作用。方法: 以辐射损伤小鼠作为研究对象,分别以黄花倒水莲提取物2,4,8 g·kg^-1·d^-1灌胃,阴性对照组、辐射模型组给予等量生理盐水。灌胃5 d后,除阴性对照组外各组小鼠接受6 Gy的⁶⁰Co γ射线一次性全身均匀照射,然后再继续灌胃10 d,最后1次灌胃24 h后,检测各组小鼠外周血中红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、淋巴细胞数(Lymph),计算脾指数和胸腺指数,用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠脾细胞、骨髓细胞的DNA损伤。结果: 与阴性对照组比,辐射模型组、黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显减少(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的尾部DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)明显增大(P<0.01或P<0.05);但与辐射模型组比, 黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显增加(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的Tail DNA%和Tail Moment明显减少(P<0.01),存在剂量-反应关系。结论: 黄花倒水莲提取物对辐射所致小鼠造血系统和免疫器官损伤有一定的防护作用。     

牛磺酸对染铅大鼠生长发育和贫血的改善作用

 目的探讨牛磺酸(taurine,Tau)对染铅大鼠生长发育和贫血的影响。方法Wistar大鼠随机分为2组,空白对照组和铅染毒组(60 mg·kg^-1·d^-1的醋酸铅灌胃),然后将已染铅大鼠随机分为4组,即铅对照组、Tau治疗组(200,400,800 mg·kg^-1·d^-1)。观察各组动物生长状况,测定血铅、血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)计数、全血ALAD(δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶)活性、尿液中ALA(δ-氨基-γ-酮戊酸)含量。结果①各Tau治疗组大鼠血铅水平均低于铅对照组(P<0.05或P<0.01)。②各治疗组大鼠脏器系数与铅对照组比较,Tau 400 mg组中心脏、肺、肾、胸腺、脾的脏器系数和Tau 800 mg组中肾和胸腺的脏器系数显著增加(P<0.05或P<0.01)。③与铅对照组比较,各Tau组Hb含量、RBC和ALAD活性显著升高(P<0.05或P<0.01);Tau 400,800 mg组尿中排出的ALA显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论Tau对染铅大鼠的生长发育和贫血有明显的改善作用。     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响

 目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响。方法MRL/lpr狼疮鼠随机分为ATO组(0.4mg·kg^-1·d^-1,ip)、环磷酰胺(CTX)组(50mg·kg^-1每周1次,ip)和生理盐水(NS)组(按体重取量,ip),给药2个月。取脾脏制成脾细胞悬液,加入佛波醇酯(PMA)和ionomycin活化,同时加monensin抑制蛋白转运,于37℃,5%CO₂培养4h后,用四色流式细胞术测脾脏CD3⁺(T)细胞和CD3⁺CD4⁺(Th)细胞的百分率以及CD3⁺CD4⁺(Th)细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平;分离血清,用ELISA法测血清中抗ds-DNA抗体、IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的浓度。结果①给药后,ATO组小鼠血清的抗ds-DNA抗体水平较给药前明显下降(P<0.01),而NS对照组则明显升高(P<0.05)。②ATO组CD3⁺细胞和CD3⁺CD4⁺百分率均显著低于NS组(P<0.01);③ATO组的血清IFN-γ和IL-12浓度均低于NS组(前者P<0.01,后者P=0.018);④ATO组Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12表达均显著低于NS组(P<0.01)。结论三氧化二砷能显著降低MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体的水平,抑制T细胞和Th细胞增生和活化功能,降低IFN-γ和IL-12的血清水平和Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平。     

附子理中汤对脾阳虚证大鼠免疫细胞因子的影响

目的: 观察附子理中汤对免疫细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨其对脾阳虚证免疫功能影响的可能机制。 方法: Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只。在模型组基础上,附子理中汤低、中、高剂量组按5,10,20 g·kg^-1 ig,每天1次,连续4周。检测胸腺指数、脾脏指数、IL-2,IL-6,IL-10,TNF-α含量。 结果: 与对照组比较,模型组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均降低(P<0.05或P<0.01),IL-10显著升高(P<0.01)。与模型组比较,附子理中汤中、高剂量组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均升高(P<0.05或P<0.01),IL-10降低(P<0.05或P<0.01)。 结论: 附子理中汤对细胞免疫因子产生影响,通过细胞免疫因子之间的效应可能是其改善脾阳虚大鼠免疫功能的机制之一。     

湿热痹片对佐剂性关节炎大鼠T细胞及细胞因子网络的调节作用

目的:观察湿热痹片对灭活结核分枝杆菌(Mtb)诱导的佐剂性关节炎大鼠T细胞及细胞因子水平的影响。方法:采用热杀死结核分枝杆菌(H37RaMtb)免疫SD大鼠,以诱导佐剂性关节炎,用ELASA法检测大鼠外周血T淋巴细胞亚群、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;同时测定大鼠踝关节滑膜组织中IL-1β,IL-6,IL-10及血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平的变化。结果:与模型对照组比较,湿热痹组CD8⁺T细胞水平升高(P<0.05),CD4⁺/CD8⁺比值降低(P<0.05);促炎细胞因子TNF-α,IL-1β及IL-6水平下调(P<0.01),VEGF含量降低(P<0.01),同时抗炎因子IL-10水平上升(P<0.01)。结论:湿热痹片通过调节T细胞及细胞因子网络平衡而发挥对类风湿关节炎的治疗作用。     

慢性阻塞性肺疾病肺脾气虚证大鼠模型的建立及评价

目的 建立并评价慢性阻塞性肺疾病（COPD）肺脾气虚病证结合模型。方法 采用“香烟烟熏法+脂多糖（LPS）气管滴注联合番泻叶浸液灌胃”构建COPD肺脾气虚证大鼠模型。将40只SPF级SD雄性大鼠随机分成空白组、模型组、番泻叶低、中、高剂量病证结合模型组，共5组。除空白组外各组均每日烟熏，并于第1天、第14天气管内滴注LPS。番泻叶低、中、高剂量病证结合模型组在造模第28天予4 ℃不同剂量番泻叶浸液（5、10、20 g·kg^-1）灌胃3周，造模共49 d。采集宏观指标：一般情况（体质量、摄食量、粪便含水量、肛温）及行为学指标（抓力测试、鼠尾悬挂实验）。测定肺功能，肺组织病理，血清D-木糖、淀粉酶、胃泌素含量，肺泡灌洗液白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）水平，外周血T淋巴细胞亚群（CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺）水平，计算胸腺指数、脾指数。结果 一般情况方面，番泻叶高剂量组大鼠死亡2只。与空白组比较，番泻叶中、高剂量组体质量、摄食量均显著降低（P<0.01），粪便含水量显著升高（P<0.01），番泻叶高剂量组肛温较空白组显著降低（P<0.01）。行为学指标方面，与空白组比较，各造模组大鼠抓力均显著降低（P<0.01）；番泻叶中、高剂量组静止不动时间明显增加（P<0.05，P<0.01）。肺功能方面，与空白组比较，各造模组大鼠第0.3秒用力呼气容积（FEV_0.3）、FEV_0.3/用力肺活量（FVC）均显著降低（P<0.01）。肺组织苏木素-伊红（HE）染色可见各造模组大鼠支气管壁增厚，杯状细胞增生，部分肺泡融合呈肺气肿改变。胃肠功能指标方面，与空白组比较，番泻叶中、高剂量组D-木糖、胃泌素、α-淀粉酶水平均显著降低（P<0.01）。免疫炎症指标方面，与空白组比较，番泻叶中、高剂量组脾、胸腺指数均显著减小（P<0.01），各造模组大鼠外周血CD4⁺水平均显著降低（P<0.01），CD4⁺/CD8⁺明显下降（P<0.05，P<0.01），肺泡灌洗液IL-1β、IL-6显著升高（P<0.01）。结论 利用香烟烟熏加LPS气管滴注同时联合番泻叶灌胃能够成功建立COPD肺脾气虚病证结合模型。结合宏观及微观评价，推荐番泻叶浸液剂量10 g·kg^-1（番泻叶中剂量组）作为COPD肺脾气虚病证结合模型造模灌胃浓度。     

黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关Bax和Caspase-12的影响

目的 研究黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）和胱天蛋白酶-12（Caspase-12）蛋白与mRNA表达的影响,以探究黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变的作用机制。方法 选用动物实验方法进行研究,将60只雄性SD大鼠通过高糖高脂饲料喂养联合链尿佐菌素（STZ）腹腔注射诱导成糖尿病大鼠动物模型,连续3 d随机血糖≥16.7 mmol·L^-1者为糖尿病大鼠造模成功,将48只造模成功的糖尿病大鼠随机分为模型组、α-硫辛酸组（0.026 8 g·kg^-1·d^-1）、中药高、低剂量组（2.5、1.25 g·kg^-1·d^-1）,每组各12只,并设正常组10只。监测大鼠体质量和随机血糖水平;干预16周末通过Key point肌电采集系统检测大鼠坐骨神经传导速度;分别通过蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠坐骨神经中Bax和Caspase-12蛋白与mRNA的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量显著下降（P<0.01）,随机血糖水平显著升高（P<0.01）;干预16周,与模型组比较,中药高剂量组大鼠体质量明显升高（P<0.05）,其他给药组体质量变化差异无统计学意义;各给药组随机血糖水平均显著降低（P<0.01）。与正常组比较,干预16周,模型组大鼠运动和感觉神经传导速度显著降低（P<0.01）;与模型组比较,各给药组大鼠运动和感觉神经传导速度均明显升高（P<0.05,P<0.01）。与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12蛋白表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各给药组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12蛋白表达均显著降低（P<0.01）。与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12 mRNA表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,α-硫辛酸组、中药高剂量组大鼠坐骨神经Bax mRNA表达明显降低（P<0.05,P<0.01）,中药低剂量组坐骨神经Bax mRNA表达降低有下降趋势;各给药组大鼠坐骨神经Caspase-12 mRNA表达显著降低（P<0.01）。结论 黄芪桂枝五物汤加减可能通过抑制坐骨神经细胞凋亡来改善和修复糖尿病大鼠坐骨神经损伤。     

牛磺酸通过调控miR-126对高糖诱导的大鼠内皮细胞凋亡的影响及其作用机制＊

目的 探讨牛磺酸通过调控miR-126对高糖诱导的大鼠内皮细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 体外培养的大鼠胸主动脉内皮细胞，分为NC组（葡萄糖浓度5.5 mmol·L^-1）、HG组（葡萄糖浓度为30.0 mmol·L^-1）、HG+低浓度牛磺酸组（葡萄糖浓度为30.0 mmol·L^-1，牛磺酸浓度为5.0 μmol·L^-1）、HG+中浓度牛磺酸组（葡萄糖浓度为30.0 mmol·L^-1，牛磺酸浓度为10.0 μmol·L^-1）和HG+高浓度牛磺酸组（葡萄糖浓度为30.0 mmol·L^-1，牛磺酸浓度为20.0 μmol·L^-1）。将模拟物（miR-126 mimics）及其阴性对照（miR-NC）、miR-126抑制物（anti- miR-126）及其阴性对照（anti-miR-NC）分别转染至大鼠胸主动脉内皮细胞。细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-126表达水平。蛋白质印迹（Western blot）检测细胞裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved-caspase3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3前体（Pro-caspase3）蛋白表达。结果 与NC组比较，HG组大鼠胸主动脉内皮细胞活性显著降低（P<0.05）；与HG组比较，HG+低浓度牛磺酸组、HG+中浓度牛磺酸组、HG+高浓度牛磺酸组大鼠胸主动脉内皮细胞活性显著升高（P<0.05）。与NC组比较，HG组大鼠胸主动脉内皮细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达显著上升，Pro-caspase3蛋白表达显著降低（P<0.05）；与HG组比较，HG+低浓度牛磺酸组、HG+中浓度牛磺酸组、HG+高浓度牛磺酸组大鼠胸主动脉内皮细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达显著降低，Pro-caspase3蛋白表达显著升高（P<0.05）。与NC组比较，HG组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著降低（P<0.05）；与HG组比较，HG+低浓度牛磺酸组、HG+中浓度牛磺酸组、HG+高浓度牛磺酸组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著升高（P<0.05）。与HG+miR-NC组比较，HG+miR-126组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著升高，细胞活性、Pro-caspase3蛋白表达显著升高（P<0.05）；凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达显著降低（P<0.05）。与HG+牛磺酸组和HG+牛磺酸+anti-miR-NC组比较，HG+牛磺酸+anti-miR-126组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著降低，细胞活性、Pro-caspase3蛋白表达显著降低，凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论 牛磺酸通过上调miR-126促进高糖诱导的大鼠内皮细胞凋亡，为治疗糖尿病提供了理论依据。     

四神丸调节结肠炎大鼠PP结T细胞亚群及Treg/Th17间平衡的作用机制

目的:探讨四神丸对结肠炎大鼠派伊尔结(Payer's patch,PP结)中Treg/Th17细胞间平衡的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、四神丸组(2.5 g·kg^-1)及美沙拉嗪组(0.15 g·kg^-1)。除正常组外,其余各组建立2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法诱导的大鼠结肠炎模型后,ig给药7 d。采用流式细胞仪检测大鼠小肠PP结中T淋巴细胞亚群的表达水平并计算Treg/Th17,Western blot检测结肠组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)和信号转导和转录激活因子5a(STAT5a)的表达量。结果:与正常组比较,模型组CD4⁺T淋巴细胞水平明显升高,CD8⁺T细胞水平显著降低,且CD4/CD8间比例明显升高,CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞明显降低,Th17细胞明显升高,Treg/Th17降低,而且结肠组织中RORγt蛋白表达量升高,STAT5a蛋白表达量则明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,四神丸组大鼠小肠PP结中CD4⁺T淋巴细胞水平明显降低,CD8⁺T细胞水平显著升高,且CD4/CD8间比例明显降低(P<0.01),同时,四神丸组则CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞显著升高,Th17细胞明显降低,Treg/Th17升高,而且结肠组织中RORγt蛋白表达量降低,STAT5a蛋白表达量则显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论:四神丸可以调节T淋巴细胞亚群,并通过抑制RORγt表达、提高STAT5a的蛋白分泌调节Treg/Th17间的平衡。     

补益中药调整应激模型动物免疫细胞受抑及其可能机制

目的 :观察补益中药对应激小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法 :建立小鼠应激模型。观察菟丝子、川断、女贞子、枸杞子等补益中药对应激小鼠免疫细胞增殖过程中胞浆内Ca²⁺ 浓度、细胞膜流动性、IL-2 ,IL-2R以及细胞周期的影响。结果 :补益类中药均可增强应激小鼠脾淋巴细胞的增殖功能 ;降低胞浆内Ca²⁺浓度 ,恢复细胞膜的流动性 ,增强IL-2的活性、提高IL-2R阳性细胞数 ,与应激组比较有显著性差异 (P<0.01)。而四药合用的结果更佳 ,可促进细胞进入DNA合成期 ,减少细胞滞留在G。/G1期 (P<0.01) ,接近正常对照组水平。结论 :补益类中药可调整应激小鼠脾淋巴细胞的增殖功能 ,缓解应激对机体的不利反应。     

逍遥散加减方对高催乳激素血症大鼠卵巢颗粒细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨以肝脾为核心,运用逍遥散加减方治疗高催乳素血症(HPRL)模型大鼠,观察逍遥散加减方对体外培养HPRL大鼠卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。方法:选用SD雌性大鼠120只,随机分为正常组、模型组、阳性药溴隐亭组(1 mg·kg^-1)、逍遥散加减方高、中、低剂量组(55,22.5,13.75 g·kg^-1)。采用ip甲氧氯普胺,制作HPRL大鼠模型。给药30 d后,采用MTT检测各组细胞培养24,48,72,96 h细胞增殖情况;采用流式细胞仪分析细胞周期各时相的变化及细胞凋亡指数。结果:与正常组比较,模型组24,48,72,96 h大鼠卵巢颗粒细胞增殖明显降低,细胞凋亡指数显著增高,S期的细胞增殖明显降低,G₀/G₁期细胞相对比例明显增加(P<0.05);与模型组比较,溴隐亭组、逍遥散加减方高、中、低剂量组明显增加大鼠卵巢颗粒细胞增殖(P<0.05),逍遥散加减方高剂量组降低卵巢细胞凋亡指数,使S期的细胞增殖显著增多,G₀/G₁期细胞相对比例减少(P<0.05),其中加味逍遥散高剂量组的作用与溴隐亭组相近。结论:逍遥散加减方促进卵巢颗粒细胞增殖,降低细胞凋亡指数,其作用机制可能是通过促进颗粒细胞从G₀期向S期转化,増加S期细胞比例完成。     

猫眼草水提物对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及机制探讨

目的:探讨中药猫眼草对小鼠Lewis肺癌的生长抑制、免疫调节、血液系统、细胞周期的影响,并对其抗癌作用机制进行探讨。方法:选择C₅₇BL/6小鼠移植性Lewis肺癌为实验模型进行试验,观察猫眼草对肺癌的抑制、免疫调节以及对小鼠血细胞的影响,同时采用流式细胞仪检测瘤组织的细胞周期、凋亡率,应用TUNEL法观察猫眼草对肺癌细胞凋亡的影响。结果:①猫眼草7.5,15,30,60 g.kg^-1组抑瘤率分别为0.61%,16.93%,32.81%和58.26%,与模型组相比30,60 g.kg^-1组有显著性差异(P<0.05)。②猫眼草各组对荷瘤小鼠胸腺指数无明显影响,60 g.kg^-1组可显著降低荷瘤小鼠脾指数(P<0.05)。③猫眼草各组对荷瘤小鼠血液系统无影响。④流式细胞仪检测猫眼草30,60 g.kg^-1组可使Lewis肺癌组织肿瘤细胞S期细胞比例增高,凋亡率分别为(16.43±18.69)%,(24.37±15.48)%,与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。⑤TUNEL法测定猫眼草30,60 g.kg^-1组的凋亡指数(AI)分别为(4.00±7.15)%,(5.93±5.96)%;60 g.kg^-1与模型组相比有显著性差异,有明显诱导细胞凋亡的作用(P<0.01)。结论:猫眼草可抑制Lewis肺癌生长,对小鼠血液系统无明显毒副作用,其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。     

加味茵陈蒿汤对湿热哮喘大鼠气道白细胞介素-6, 信号转导因子-3表达的影响及与气道炎症的关系

目的: 探讨加味茵陈蒿汤对湿热哮喘大鼠气道急性炎症的影响及其可能的机制。 方法: 50只健康雄性SD大鼠随机分成5组,每组10只,分别为空白组、湿热哮喘模型组、加味茵陈蒿汤低、高剂量组(6.29,12.58 g ·kg^-1 ·d^-1)、地塞米松组(0.08 mg ·kg^-1 ·d^-1)。多因素干预建立湿热哮喘大鼠模型,实验第16天开始给药,末次激发24 h以内处死大鼠,腹主动脉采血,留取肺组织检测。对各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞进行计数和炎性细胞分类,酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定BALF中细胞因子白细胞介素(IL)-2,IL-4,IL-5,IL-6,干扰素-γ(IFN-γ)水平,免疫组织化学染色检测气道信号转导因子-3(STAT3)蛋白表达,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,RT-PCR定量检测肺组织STAT3水平。应用SPSS 17.0软件进行统计分析。 结果: 与正常组比较,模型组IL-4,IL-5,IL-6水平升高(P<0.05),IL-2,IFN-γ水平降低(P<0.05),气道STAT3蛋白、肺组织STAT3 mRNA水平升高;与模型组比较,各给药组大鼠IL-4,IL-5,IL-6水平降低(P<0.05),IL-2,IFN-γ水平均升高(P<0.05),且哮喘大鼠BALF中IL-6,气道STAT3蛋白,肺组织STAT3 mRNA分别与BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞,淋巴细胞,IL-4,IL-5,IL-6呈正相关(P<0.01),与IL-2,IFN-γ呈负相关(P<0.01)。各给药组均可降低气道炎症及STAT3信号通路表达,地塞米松组疗效最优,其次为加味茵陈蒿汤低剂量组。 结论: 加味茵陈蒿汤能明显降低气道炎症,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路表达从而调节Thl/Th2细胞因子失衡有关。     

黄芩苷对大鼠肝细胞凋亡的影响

目的 :研究黄芩苷对体外培养大鼠肝细胞凋亡的影响。方法 :将黄芩苷作用于体外培养的大鼠肝细胞 ,以肿瘤坏死因子 (TNF-α)和放线菌素D(Act D)诱导细胞凋亡 ,MTT法检测细胞活性 (A值 ) ;溴甲酚绿法检测细胞功能 (ALB值) ;琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测法定性定量检测细胞凋亡情况。结果 :经 0.2,2.0μg·ml^-1浓度黄芩苷作用后肝细胞活性 (A值)及分泌白蛋白功能 (培养上清中ALB值 )均高于凋亡模型组 (A值P<0.05,ALB值P<0.01) ,其中 0.2μg·ml-1浓度组肝细胞的ALB值比空白对照组还高 (P<0.01) ;琼脂糖凝胶电泳显示 :只有凋亡模型组出现了典型的”梯状”条带 ;流式细胞术检测结果表明 :各中药组的凋亡率与凋亡模型组相比均有显著性差异 (P<0.01)。结论 :不同浓度的黄芩苷均对TNF-α和ActD所诱导的肝细胞凋亡有抑制作用。     

八珍汤对60Co γ照射小鼠骨髓细胞及脾细胞凋亡研究

目的 :探讨八珍汤对⁶⁰Coγ射线照射小鼠骨髓细胞及脾细胞凋亡的影响。方法 :利用⁶⁰Coγ射线一次性全身照射小鼠 ,动态观察其骨髓细胞、脾细胞凋亡情况。结果 :实验观察到照射后模型组小鼠骨髓细胞在 6h其凋亡数最多 ,以后随时间延长而逐渐减少 ,八珍汤组小鼠骨髓细胞和脾细胞凋亡数与模型组相比两者在 6h处有显著性差异 (P<005,P<001) ;在 12 ,18,24h也能相应的拮抗细胞的凋亡。结论 :八珍汤对⁶⁰Coγ射线照射小鼠骨髓细胞及脾细胞凋亡有较好的抑制作用 ,可能也是八珍汤补血的机制之一。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马NLRP3通路的免疫调节作用

目的 探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体通路的作用及其机制。方法 60只雄性SD大鼠随机平均分为6组，分别为正常组、模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤高、中、低剂量组，NLRP3抑制剂（MCC950）组。除正常组外，其余采用孤养联合慢性不可预见性应激（CUMS） 21 d，制备抑郁大鼠模型。柴胡加龙骨牡蛎汤高、中、低组分别灌胃13，6.5，3.25 g·kg^-1柴胡加龙骨牡蛎汤溶液，MCC950组腹腔注射1 mg·kg^-1，正常组、模型组灌胃等体积生理盐水，给药21 d期间持续追加造模。采用糖水偏好实验（SPT）和新奇摄食实验评价大鼠的抑郁行为，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测海马组织匀浆中白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-18含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组大鼠海马中NLRP3，凋亡相关微粒蛋白（ASC）及半胱氨酸天门冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组糖水偏好率显著降低（P<0.01），新奇摄食时间显著延长（P<0.01）；海马组织中NLRP3，ASC，Caspase-1蛋白表达显著增强（P<0.01），IL-1β和IL-18水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较，柴胡加龙骨牡蛎汤高、中组糖水偏好率显著提高（P<0.01），新奇摄食时间显著缩短（P<0.01）；海马中NLRP3，ASC，Caspase-1蛋白表达明显减弱（P<0.05，P<0.01），IL-1β和IL-18水平显著降低（P<0.01）。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤可减轻CUMS诱导的抑郁行为，其机制可能与抑制NLRP3炎症小体通路有关。