伊普黄酮的合成

 目的 研究伊普黄酮的化学合成路线。方法 从基本的化工原料间苯二酚开始，经3步合成此化合物，即间苯二酚楞琪反应，异丙基化和闭环。结果 得到的样品经H-NMR波谱分析，证明是伊普黄酮。     

川陈皮素体外对微管蛋白聚合的影响

目的：研究川陈皮素对微管蛋白聚合的抑制作用，探讨其抗肿瘤的可能机制。方法：在离体条件下，将受试化合物加入到微管蛋白聚合-解聚反应体系中，于37 ℃，350 nm下检测反应体系吸光度的变化。结果：川陈皮素处理后反应体系的吸光度与对照组相比显著降低。在不同终浓度川陈皮素(5.0，7.5，10.0，12.5 μmol·L^-1)的反应体系中，其对应的最高吸光度分别为：0.130，0.109，0.086，0.071；对微管蛋白聚合的抑制率分别为16.7%，30.1%，44.9%，54.5%。提示它对微管蛋白聚合具有抑制作用。结论：川陈皮素能抑制体外微管蛋白聚合，这可能是其发挥抗癌作用的可能机制。     

基于指纹图谱结合多元统计分析的不同贮藏年限对广陈皮成分影响研究＊

目的 建立广陈皮HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，并结合多元统计分析，研究不同贮藏年限对广陈皮成分的影响。方法 色谱条件：采用Syncronis C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸（B），梯度洗脱；流速1.0 mL·min^-1；柱温30℃；进样量5 μL；检测波长330 nm。采用HPLC法建立10批次不同贮藏年限广陈皮药材的指纹图谱，标定其共有峰，进行相似度评价；运用聚类、主成分分析等多元统计方法，综合评价10批广陈皮药材成分变化差异；进一步对《中国药典》指标成分与差异色谱峰中的橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘红素与5-去甲川陈皮素等5种成分进行含量测定。结果 10批广陈皮药材指纹图谱相似度均大于0.990，共标定了19个色谱峰，说明不同贮藏年限广陈皮整体质量相对稳定；聚类分析将10批广陈皮分3类，主成分分析提取4个主成分，累积方差贡献率在89.760%，且通过对照品指认确定了其中4个差异色谱峰。含量测定橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘红素与5-去甲川陈皮素等成分含量范围分别为20.940-34.780 mg·g^-1、0.344-0.517 mg·g^-1、4.667-7.456 mg·g^-1、3.592-5.879 mg·g^-1、0.391-0.710 mg·g^-1。结论 建立的广陈皮指纹图谱和多成分含量测定方法简单、准确，具有良好的稳定性和重复性，可采用聚类分析与主成分分析等多元统计分析方法对不同贮藏年限广陈皮药材的成分变化及质量进行评价，为其质量控制和临床应用提供了参考。     

川陈皮素抗癌作用及机制的研究进展

川陈皮素是一种黄酮化合物，具有抗炎、抗氧化、抗病毒等作用。在体外试验中，川陈皮素对肿瘤细胞的生长表现一定的抑制作用。对国内外关于川陈皮素药理作用研究现状的基础上，以H₂₂、SMMC-7721、A549等细胞为代表，全面而又系统的阐述了川陈皮素的抗肿瘤作用及其机制，为川陈皮素的进一步研究和新药研发提供参考。     

川芎哚的有机合成研究

 目的：探讨有机合成川芎哚的方法。方法：以糠醇、色氨酸为原料(路线1)和以糠醇、色胺为原料(路线2)两种途径，经多步反应合成川芎哚。结果：路线1制备川芎哚的终产率为7%，其结构经UV，IR，MS和NMR确证；路线2制备川芎哚的终产率为12%，其结构经MS，UV确证。结论：两种合成路线都适于合成川芎哚，但路线2的产率高于路线1，是合成川芎哚的较好方法。     

基于多组学探讨川陈皮素调控脂质合成氧化逆转胃癌顺铂耐药的机制

目的 运用脂质代谢组学和网络药理学寻找川陈皮素对胃癌顺铂耐药细胞（AGS-DDP）的核心靶点，并结合细胞实验进一步探究川陈皮素逆转胃癌顺铂耐药的机制。方法 采用UPLC-Orbitrap质谱系统进行非靶向脂质组学分析。利用GENE Card、TCMSP数据库挖掘川陈皮素和甘油磷脂代谢通路的潜在靶点，通过微生信在线作图工具平台整合二者的交集靶点，并进行基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路富集分析，通过STRING数据库绘制蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络，运用Cytoscape软件将川陈皮素的核心靶点可视化。川陈皮素给药后，通过CCK-8法检测AGS和AGS-DDP细胞的存活率；流式细胞术检测AGS-DDP细胞的凋亡情况；划痕实验检测AGS-DDP细胞的迁移能力；Western blotting检测AGS-DDP细胞的B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators-activated receptor γ，PPARγ）和三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶（adenosine triphosphate citrate lyase，ACLY）蛋白表达。结果 AGS和AGS-DDP细胞通过脂质组学分析检测得到31个亚类中的1450个差异的脂质化合物，主要富集在甘油磷脂代谢通路，对川陈皮素潜在靶点进行KEGG富集分析结果显示川陈皮素具有逆转铂类耐药的潜力。细胞实验结果显示，与对照组比较，川陈皮素剂量相关性地抑制AGS-DDP细胞的存活率（P<0.05、0.01），增加AGS-DDP细胞对顺铂的敏感性（P<0.05），且能诱导AGS-DDP细胞凋亡并抑制其迁移能力（P<0.05、0.01）。Western blotting实验结果显示川陈皮素组Bax、E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P<0.05、0.01），Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、ACLY和PPARγ蛋白表达水平均显著降低（P<0.05、0.01）。结论 AGS和AGS-DDP细胞的差异脂质代谢产物主要富集在甘油磷脂代谢通路，川陈皮素通过调控脂质合成氧化关键基因抑制AGS-DDP细胞增殖、迁移，最终逆转胃癌顺铂耐药。     

枳壳麸炒前、后主要活性成分的含量变化

目的: 考察枳壳饮片麸炒前、后主要活性成分的含量变化。方法: 采用RP-HPLC测定柚皮苷、新橙皮苷、辛弗林、川陈皮素、橘皮素、水合橘皮内酯、橘皮内酯、马尔敏和葡萄内酯的含量,考察10批枳壳饮片麸炒前、后主要活性成分的含量变化。结果: 麸炒后枳壳饮片中柚皮苷、新橙皮苷、辛弗林、川陈皮素、橘皮素、水合橘皮内酯、橘皮内酯和马尔敏含量均略微下降,而葡萄内酯含量明显上升。葡萄内酯小剂量(0.6 mg·kg^-1)对正常小鼠小肠运动具有促进作用,高剂量(9 mg·kg^-1)则具有抑制作用。结论: 麸炒后葡萄内酯含量的升高是枳壳炮制的目的,可通过主要活性成分的变化规律阐述枳壳饮片的炮制机制。     

陈皮中多甲氧基黄酮类成分的高效分离及其抑制SARS-CoV-2 3CLpro的潜在活性研究＊

目的 实现陈皮中多甲氧基黄酮类成分（PMFs）的高效富集和纯化，研究其抑制SARS-CoV-2 3CL^pro的潜在活性。方法 采用固相萃取结合高速逆流对陈皮中的PMFs进行富集纯化，利用体外酶活实验测定其对3CL^pro的抑制活性，并借助分子模拟技术探讨其潜在机制。结果 从陈皮中分离得到高纯度（ > 97%）的川陈皮素、3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' – 七甲氧基黄酮和橘皮素；体外酶活实验表明3个成分对3CL^pro均有一定的抑制作用，其中3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' - 七甲氧基黄酮的活性较强，IC₅₀为（65.65 ± 1.00） μmol·L^-1；分子模拟显示各成分与蛋白结合活性强弱顺序与实验结果一致。结论 本研究实现了陈皮中PMFs的高效富集纯化，3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' - 七甲氧基黄酮对3CL^pro表现出的较强抑制活性为抗SARS-CoV-2潜在先导化合物的发现提供了新的指引。     

广陈皮在白血病 KG1a 细胞株凋亡中的作用机制分析

〔摘 要〕 目的：探究广陈皮中的主要成分川陈皮素及橙皮苷在白血病 KG1a 细胞株凋亡中的作用机制。方法：CCK–8 法 检测细胞抑制率;流式细胞术检测细胞周期变化;Western blot 检测细胞 Bcl–2、Bax、Caspase–3 蛋白表达。结果：川陈皮 素及橙皮苷浓度不同对于 KG1a 细胞增殖抑制率影响不同,时间增加,增殖抑制越明显,剂量浓度越高增值越依赖,川陈 皮素和橙皮苷对细胞阻滞周期有所不同且两者能够降低细胞的抗凋亡蛋白 Bcl–2 蛋白表达、增加 Bax 及 Caspase–3 蛋白表达。 结论：川陈皮素与橙皮苷可以有效抑制 KG1a 细胞增殖及诱导其凋亡。这可能与 Bcl–2 蛋白表达下调、Bax、Caspase–3 蛋 白表达上调相关。     

“一测多评”法测定陈皮中3种黄酮类成分

目的:建立陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素"一测多评"的方法,并验证该方法的准确度及可行性。方法:以橙皮苷为指标,计算川陈皮素、桔皮素与橙皮苷的相对校正因子。采用外标法测定陈皮中橙皮苷、川陈皮素、桔皮素的含量,并利用相对校正因子计算川陈皮素和桔皮素的含量,比较外标法与"一测多评"的结果,以验证"一测多评"法的准确度及可行性。结果:"一测多评"法与外标法共测定22批样品,川陈皮素与桔皮素测定结果 RSD均<2.9%,结果无显著差异。结论:"一测多评"法测定陈皮中的橙皮苷、川陈皮素、桔皮素是准确可行的。     

柑橘提取物诺必擂停抑制肝癌增殖的免疫学机制

目的研究诺必擂停（NOB）对小鼠肝癌移植瘤Heps的作用及其免疫学机制。方法建立小鼠肝癌移植瘤Heps实体型模型，解剖剥离肿瘤称重，计算抑瘤率；通过迟发性超敏反应观察整体细胞免疫机能；用MTT法检测T、B淋巴细胞增殖反应；乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测CTL、NK细胞杀伤活性。结果NOB灌胃给药对小鼠肝癌Heps有明显抑制作用；显著提高了荷瘤小鼠降低的迟发性超敏反应；荷瘤小鼠T、B淋巴细胞增殖反应明显提高；同时CTL、NK细胞杀伤活性显著增强。结论提高机体免疫功能可能是NOB抗小鼠肝癌移植瘤Heps增殖的一个重要途径。     

柑橘类黄酮诺必擂停对K562裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:观察柑橘类黄酮诺必擂停对K562裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其在抑制肿瘤血管生成方面的作用与机制.方法:构建l(562裸鼠移植瘤模型,25只裸鼠分为模型组、诺必擂停低、中、高剂量组和阳性对照组(n=5).造模24 h后分别给与1%羧甲基纤维素钠溶剂、诺必擂停(12.5,25,50 mg·kg~(-1))和环磷酰胺(20 mg·kg~(-1)),连续给药18 d,处死,取肿瘤称重计算抑瘤率;免疫组化法检测药物对肿瘤组织VEGF表达及MVD的影响;鸡胚绒毛尿囊膜实验测定药物对血管新生的作用.结果:诺必擂停可显著抑制K562裸鼠移植瘤的生长,抑瘤率达36%～58%,与模型组比较有显著差异(P<0.01);能显著降低肿瘤组织内微血管生成:诺必擂停低、中、高剂量组CD34表达均低于模型组(中、高剂量组分别P<0.05,P<0.01);抑制VEGF的表达:诺必擂停低、中、高剂量组VEGF均低于模型组(分别P<0.05,P<0.01和P<0.01);抑制CAM血管新生:2,4 μg作用下CAM微血管数显著低于对照组(P<0.01).结论:诺必擂停可以抑制K562裸鼠移植瘤的生长以及肿瘤血管的生成,其作用机制可能与下调肿瘤组织VEGF的表达有关.     

Nobiletin,a Polymethoxylated Flavone,Inhibits Glioma Cell Growth and Migration via Arresting Cell Cycle and Suppressing MAPK and Akt Pathways

Nobiletin, a bioactive polymethoxylated flavone (5,6,7,8,3^',4^'‐hexamethoxyflavone), is abundant in citrus fruit peel. Although nobiletin exhibits antitumor activity against various cancer cells, the effect of nobiletin on glioma cells remains unclear. The aim of this study was to determine the effects of nobiletin on the human U87 and Hs683 glioma cell lines. Treating glioma cells with nobiletin (20–100 µm ) reduced cell viability and arrested the cell cycle in the G0/G1 phase, as detected using a 3‐(4,5‐dimethylthiazol‐2‐yl)‐2,5‐diphenyltetrazolium bromide assay and propidium iodide (PI) staining, respectively; however, nobiletin did not induce cell apoptosis according to PI‐annexin V double staining. Data from western blotting showed that nobiletin significantly attenuated the expression of cyclin D1, cyclin‐dependent kinase 2, cyclin‐dependent kinase 4, and E2 promoter‐binding factor 1 (E2F1) and the phosphorylation of Akt/protein kinase B and mitogen‐activated protein kinases, including p38, extracellular signal‐regulated kinase, and c‐Jun N‐terminal kinase. Our data also showed that nobiletin inhibited glioma cell migration, as detected by both functional wound healing and transwell migration assays. Altogether, the present results suggest that nobiletin inhibits mitogen‐activated protein kinase and Akt/protein kinase B pathways and downregulates positive regulators of the cell cycle, leading to subsequent suppression of glioma cell proliferation and migration. Our findings evidence that nobiletin may have potential for treating glioblastoma multiforme. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

川陈皮素对乳腺癌细胞的化疗增敏作用

目的 探讨川陈皮素对乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外化疗增敏作用.方法 以MDA-MB-231细胞为研究对象,MTT法测定细胞增殖抑制率,DNA Ladder、核小体双抗体ELISA和流式细胞仪测定MDA-MB-231细胞凋亡情况,凝胶阻滞实验(EMSA)和ELISA检测川陈皮素对核转录因子(NF-κB)的转录激活的影响.结果 20 μmol/L川陈皮素分别与1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素联合使用肿瘤细胞增殖抑制率为75.1%和82.6%,单独使用1 nmol/L紫杉醇或50 ng/mL阿霉素肿瘤细胞增殖抑制率为40%和45%;核小体双抗体夹心酶免疫法和DNA凝胶电泳实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显促进MDA-MB-231细胞的凋亡,EMSA和ELISA实验表明川陈皮素与紫杉醇或阿霉素联合用药可明显抑制NF-κB的转录活性.结论 川陈皮素可以促进临床化疗药物对乳腺癌细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能是通过抑制NF-κB转录作用.     

浮小麦药材质量控制研究

目的:建立浮小麦药材的质量控制方法。方法:对浮小麦药材的性状鉴别、显微鉴别等方面进行生药学的研究;采用薄层色谱法(TLC)对浮小麦中5-二十一烷基间苯二酚进行定性鉴别;采用高效液相色谱法建立浮小麦药材中5-二十一烷基间苯二酚的含量测定方法。结果:对浮小麦的性状、显微特征进行了描述;薄层鉴别的色谱斑点清晰,特征性强,重复性好;在选定的高效液相色谱条件下5-二十一烷基间苯二酚同其他成分达到较好的基线分离,5-二十一烷基间苯二酚在129.5～259 0 ng呈良好的线性关系,Y=5 056.5X+201.5(r=0.999 9);平均回收率为101.26%,RSD 1.89%。结论:建立的方法简单易行、重复性好、结果准确,能有效鉴别和评价浮小麦药材,可作为浮小麦药材的质量控制方法。     

HPLC同时测定小承气汤中4个化学成分

目的:建立小承气汤中肉桂酸、大黄酸、芦荟大黄素和川陈皮素的HPLC同时测定方法。方法:采用Apollo C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈和0.011%冰乙酸溶液,梯度洗脱,时间25min,流速1mL/min,检测波长为254nm。结果:肉桂酸、大黄酸、芦荟大黄素和川陈皮素的线性范围分别为0.08-0.47、0.58-2.02、0.19-0.37和0.02-1.39μg,精密度为0.44%、0.17%、0.52%和0.33%,平均回收率分别为97.3%、99.1%、99.3%和100.5%。结论:建立的方法简便、灵敏、准确,可用于小承气汤的质量控制。     

黑曲霉对不同陈化年份广陈皮黄酮类成分的影响

目的:考察黑曲霉对不同陈化年份广陈皮黄酮类成分的影响。方法:将黑曲霉反接至无菌广陈皮,恒温恒湿培养,于不同时间点进行取样,采用超高效液相色谱法(UPLC)和紫外分光光度计法测定广陈皮黄酮类成分。结果:黑曲霉反接后,不同陈化年份广陈皮总黄酮、橙皮苷、川陈皮素及橘皮素含量均有提升,且UPLC指纹图谱显示有新成分增加。其中陈化2年黄酮类成分变化较大,除橘皮素含量变化不明显外,其总黄酮、橙皮苷和川陈皮素含量各增长了72.24%、69.93%和72.34%。结论:黑曲霉对不同陈化年份广陈皮的黄酮类成分均有一定影响,影响最大的是陈化2年广陈皮,其中具体的转化机制还有待深究。     

Inhibitory Effects of Nobiletin on Hepatocellular Carcinoma In Vitro and In Vivo

Nobiletin (5, 6, 7, 8, 3′ 4′‐hexamethoxyflavone) is a major anticancer component in juice from zhishi (Rutaceae). This study aimed to investigate the inhibitory effect of Nobiletin on hepatic cancer cells both in vitro and in vivo. The 3‐(4, 5‐dimethylthiazol‐2‐yl)‐2, 5‐diphenyltetrazolium bromide (MTT), growth curve, and clonogenic assay showed that nobiletin inhibited the proliferation of SMMC‐7721 cells in vitro. Hoechst staining observed the characteristics of cell apoptosis in nobiletin‐treated cells, and the apoptotic rates of treated groups were increased in a dose‐dependent manner. Flow cytometric analysis demonstrated that nobiletin could block the cell cycle arrested at G2 phase. Cell cycle analysis was performed using flow cytometry. Results showed that cell cycle phase distribution analysis showed G2 arrest. It was found that nobiletin downregulated the expressions of Bcl‐2 and COX‐2 and up‐regulated the expressions of Bax and caspase‐3 in SMMC‐7721 cells by western blotting. The experiment in vivo demonstrated that nobiletin significantly inhibited the growth of H22 transplantable tumor, downregulated the expressions of COX‐2, up‐regulated the expressions of Bax and caspase‐3 detected by immunohistochemistry and western blotting, and the ratios of Bcl‐2/Bax were decreased. Our results suggest that nobiletin has significant inhibitory effects on hepatocellular carcinoma both in vitro and in vivo. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.