左氧氟沙星联合万古霉素缩小金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的初步研究

目的:在体外初步探讨联合用药可缩小单药对细菌的耐药突变选择窗(MSW),为临床合理使用现有抗菌药物,防止细菌耐药产生提供理论依据。方法:应用肉汤法富集1010CFU/mL细菌,琼脂平板二倍稀释法测定左氧氟沙星、万古霉素单药和两药联用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的最低药物浓度(MPC)和MSW。结果:左氧氟沙星、万古霉素单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW分别为16和64。万古霉素和左氧氟沙星联合用药(1MIC 8MIC,2MIC 4MIC)使左氧氟沙星单药对ATCC29213的MSW缩小2～4倍。左氧氟沙星联合万古霉素用药(1MIC 16MIC,2MIC 8MIC)使万古霉素对ATCC29213的MSW缩小4～8倍。结论:万古霉素和左氧氟沙星联合用药可缩小各自单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW。     

环丙沙星联合多西环素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的影响

目的探讨环丙沙星联用多西环素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)值的影响,为防止产生细菌耐药提供依据。方法应用肉汤法富集浓度为1010CFU/ml金黄色葡萄球菌ATCC29213菌株,采用琼脂平板二倍稀释法测定环丙沙星、多西环素单药以及2药以不同浓度联用时对金黄色葡萄球菌ATCC29213的防耐药突变浓度(MPC)和耐药突变选择窗(MSW)。结果环丙沙星、多西环素单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC分别为3.00和20.16μg/ml,MSW分别为10和84。在联用多西环素浓度由0.12μg/ml至15.36μg/ml时,环丙沙星对ATCC29213的MPC由3.00μg/ml下降至0.30μg/ml。在联用环丙沙星浓度由0.30μg/ml至2.60μg/ml时,多西环素对ATCC29213的MPC由15.36μg/ml下降至0.24μg/ml。结论多西环素和环丙沙星联合用药可使各自单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC下降,MSW减小。     

几种抗菌药物在不同浓度时对金黄色葡萄球菌耐药突变株选择的影响

目的：了解左氧氟沙星、万古霉素、利福平、氯霉素、妥布霉素、阿齐霉素在不同浓度时对金黄色葡萄球菌ATCC29213耐药突变株选择的影响。将它们对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）、防耐药变异浓度（MPC）、突变选择窗（MSW）与药代动力学参数结合，为制定新的抗菌药物用药策略提供依据：方法：应用肉汤富集细菌法测定左氧氟沙星、万古霉素、利福平、氯霉素、妥布霉素、阿齐霉素对金黄色葡萄球菌ATCC29213的防MPC；琼脂平板二倍稀释法测定MIC；将金黄色葡萄球菌ATCC29213接种于不同药物浓度的琼脂平板上，计数平板上恢复生长的菌落数，描记细菌恢复生长曲线。结果：左氧氟沙星、万古霉素、利福平、阿奇霉素、氯霉素和妥布霉素对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC分别为0．125、1．0、0．002、0．5、3．0、0．5μg／mL；MPC分别为1．4、51．2、〉1024、4．8、16、16μg／mL；6种抗菌药物-金黄色葡萄球菌ATCC29213组合的MSW差异很大，以利福平的MSW最宽（SI：〉512000），氯霉素的MSW最窄（SI：5．3）：不同抗菌药物-金黄色葡萄球菌的菌落恢复生长曲线各不相同。结论：药物浓度对金黄色葡萄球菌恢复生长的耐药突变株菌落数有明显影响。在临床上，可以通过将MPC结合药代动力学参数，来选择药物浓度和用药方式，从而达到减少细菌耐药的目的：     

β-内酰胺类药物及与复方黄连注射液联合使用对金黄色葡萄球菌MSW的影响

目的测定β-内酰胺类药物单用及与复方黄连注射液联合使用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC和MPC,探讨β-内酰胺类与复方黄连注射液联合使用对耐药突变选择窗(MSW)的影响,为临床优化抗菌药物给药方案,限制耐药突变体选择性扩增提供一条新思路。方法采用MH琼脂二倍稀释法测定阿莫西林和头孢噻呋、复方黄连注射液单独用药和联合用药的最低抑菌浓度(MIC)、抑制99%接种细菌生长的最低抑菌浓度(MIC99)、防突变浓度(MPC)。结果阿莫西林单独使用时的SI(MPC/MIC99)值为15.2,与16MIC的复方黄连注射液联合使用后,SI降低至5.1,为其单独用药的1/3;头孢噻呋单独使用时其SI值为16.1,与16MIC的复方黄连注射液联合使用后,SI降低至4.2,为单独用药的1/4。结论β-内酰胺类药物和复方黄连注射液联合用药可以明显缩小MSW。     

环丙沙星联合多西环素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的影响

目的 探讨环丙沙星联用多西环素对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)值的影响,为防止产生细菌耐药提供依据.方法 应用肉汤法富集浓度为1010 CFU/ml金黄色葡萄球菌ATCC29213菌株,采用琼脂平板二倍稀释法测定环丙沙星、多西环素单药以及2药以不同浓度联用时对金黄色葡萄球菌ATCC29213的防耐药突变浓度(M...     

氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌及其耐药突变体的耐药性研究

目的:研究5种氟喹诺酮类药物(FQ)对金黄色葡萄球菌ATCC29213及其同源耐药突变体的最低抑菌浓度(MIC)、防细菌耐药突变体选择浓度(MPC)和突变选择窗(MSW),比较其防耐药变异能力,了解细菌对FQ耐药的发生发展过程。方法:肉汤法富集1010CFU.ml-1金黄色葡萄球菌ATCC29213,采用平板稀释法测定莫西沙星、加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌ATCC29213及筛选的耐药突变体的MIC、暂定MPC(MPCpr)和MPC。结果:莫西沙星、加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC分别为0.2、0.3、0.3、1.4、3.2μg.ml-1。选择指数(MPC/MIC)分别为6.5、4.8、9.7、11.2、12.8。5种氟喹诺酮类药物筛选的第一步突变体对筛选药物的MIC较ATCC29213升高2~8倍。左氧氟沙星筛选的第二步突变体的MIC较第一步突变体又升高8~16倍。所有突变体的MSW边界都较其源菌株明显升高。结论:莫西沙星、加替沙星限制金黄色葡萄球菌耐药突变菌体选择的能力强于司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星。金黄色葡萄球菌对FQ药物产生耐药是逐步发生的。第一步耐药突变体的产生,使筛选出下一步耐药突变体的几率明显增大,从而导致耐药菌的富集和扩散。     

左氧氟沙星联合头孢哌酮舒巴坦对铜绿假单胞菌突变选择窗的影响

目的 在体外研究左氧氟沙星(LVX)联合头孢哌酮舒巴坦(SCF)对铜绿假单胞菌突变选择窗(MSW)的影响,为防止细菌耐药的产生提供依据.方法 采用琼脂二倍稀释法,测定LVX与SCF单用及联用时,对临床分离10株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)和防耐药突变浓度(MPC),计算选择指数(SI=MPC/MIC).结果 LVX单用时,LVX对铜绿假单胞菌的SI值为16~64,LVX和SCF联用时,LVX对铜绿假单胞菌的SI值为8~32.两药联合使用后LVX对铜绿假单胞菌的SI值显著低于LVX单用(χ2=11.88,P<0.05).结论 LVX与SCF联合使用可降LVX单用对铜绿假单胞菌MPC,缩小MSW,减少耐药菌产生.     

中药影响左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的耐药突变选择窗的初步研究

目的:研究中药在左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗(MSW)上的影响。方法:采用琼脂平板稀释法测定几种中药制剂的最低抑菌浓度(MIC)、防突变浓度(MPC),得出其选择指数(SI)。选择SI值较低的中药制剂双黄连与大蒜素分别与左氧氟沙星联用,琼脂平板稀释法测定不同浓度下双黄连/大蒜素与左氧氟沙星联用对金黄色葡萄球菌MSW上的影响。结果:双黄连和左氧氟沙星联用(2MIC+8MIC,4MIC+4MIC)可使左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的MSW缩小至0.4～0.8倍;而不同浓度大蒜素与左氧氟沙星联用,则未见明显作用。结论:双黄连注射剂与左氧氟沙星联用可缩小左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的MSW,从而降低金黄色葡萄球菌对左氧氟沙星的耐药性。     

亚胺培南或美罗培南联合利福平降低不动杆菌防耐药突变浓度的体外研究

目的在体外探讨亚胺培南(IMP)和美罗培南(MER)单用及其分别与利福平(RFP)联用对不动杆菌的防耐药突变浓度(MPC)的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法采用琼脂二倍稀释法,测定IMP或MER与RFP在体外单独以及联合应用的最低抑菌浓度(MIC)、计算部分抑菌浓度(FIC)指数。用肉汤法富集浓度为1010CFU/ml不动杆菌,采用琼脂平板二倍稀释法测定IMP和MER单药以及分别与RFP联用时对16株临床分离不动杆菌的MPC,并计算相应的选择指数(SI)。结果 IMP或MER分别与RFP联合应用后均以无关作用为主,未见拮抗作用,存在一定比例协同作用。IMP和MER单用对上述16株不动杆菌的SI均为16～128;分别与RFP联合使用SI均下降为1～32,联合用药较单独用药SI下降2～32倍。结论 IMP或MER分别与RFP联合使用均可降低其单用对不动杆菌的MPC,缩小MSW,防止耐药突变菌的产生。     

头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南与左氧氟沙星联合应用对鲍曼不动杆菌防耐药突变浓度的影响

目的:研究头孢哌酮/舒巴坦(CFS)或美罗培南(MRP)与左氧氟沙星(LVX)联用对鲍曼不动杆菌防耐药突变浓度(MPC)的影响,为防止细菌耐药的产生提供试验依据。方法:将实验分为CFS、MRP、LVX单用组和CFS+LVX、MRP+LVX联用组。采用琼脂二倍稀释法,分别测定各组对鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC 19606和36株临床分离菌株的最低抑菌浓度(MIC),并计算部分抑菌浓度(FIC)指数;采用琼脂平板稀释法,测定各组对鲍曼不动杆菌的防耐药突变浓度(MPC),并计算相应的选择指数(SI)。结果:CFS或MRP与LVX联用后,协同作用所占的比例分别为55%(20/36)和50%(18/36)。对标准菌株ATCC 19606,CFS+LVX、MRP+LVX联用后MPC由联用前32.0、4.0 mg/L降为1.8、0.8 mg/L;对36株临床分离菌株,CFS+LVX、MRP+LVX联用后MPC分别由联用前8.0~32.0、1.0~2.0 mg/L降为0.25~1.0、0.25~0.5 mg/L;联用后SI均明显下降。结论:CFS或MRP与LVX联用后,均可降低其单用时对鲍曼不动杆菌的MPC,缩小耐药突变选择窗。     

山楂果胶寡糖联用氟喹诺酮类药物对葡萄球菌防耐药浓度的影响分析

目的探讨山楂果胶寡糖与氟喹诺酮联合用药对金黄色葡萄球菌防耐药浓度的影响,为临床合理使用现有抗生素、防治细菌耐药产生提供理论依据。方法采用标准琼脂二倍稀释法测定左氧氟沙星、环丙沙星对30株临床分离的金黄色葡萄球菌和金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923的最低抑菌浓度（MIC）,采用标准琼脂平板稀释法测定2种FQ药物对临床分离金黄色葡萄球菌的防突变浓度,计算单药和联合山楂果胶寡糖用药后该药的MPC50、MPC90。结果左氧氟沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范同在2～64mg／L,MPC90为32mg／L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围为0．5～16mg／L,MPC90降至8mg／L。环丙沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范围1～32mg／L,MPC90为16mg／L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围0．25～8mg／L,MPC90降至4mg／L,两组各项指标比较差异有显著性伊〈0．05）。结论联合山楂果胶寡糖用药能降低环丙沙星、左氧氟沙星MPC,减少细菌耐药突变体的选择性富集扩增,防止抗菌药物耐药的产生。     

金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度测定方法的影响因素分析

目的：对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度（MPC）测定中常见的影响因素进行分析,为规范MPC测定方法提供参考。方法：金黄色葡萄球菌ATCC25923为测试菌株,左氧氟沙星为测定药品,考察在3种MH琼脂、3种涂布方式及2种不同方法制得的浓缩菌液的试验条件下菌落培养状况及MPC测定结果。结果：仅1种MH琼脂可用于MPC测定,采用L型玻棒涂布更适宜于菌落的培养,2种方法制得的浓缩菌液MPC测定结果相同。结论：MPC测定方法的影响因素较多,有必要进行规范。     

赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响

目的 探究赶黄草水煎液在体外对金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜(MRSA)形成的影响。方法 采用微量肉汤稀释法测定赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),根据MIC和MBC绘制杀菌曲线,采用结晶紫染色法和激光共聚焦观察赶黄草水煎液对SA和MRSA生物膜形成的影响,并通过测定胞外多糖和胞外DNA的含量研究赶黄草水煎液破坏SA和MRSA生物膜的作用方式。结果 赶黄草水煎液对SA的MIC和MBC分别为1.36和2.71 mg/mL,对MRSA的MIC和MBC为2.71和5.73 mg/mL;赶黄草水煎液可使SA和MRSA均生长受到抑制,抑制生物膜的形成、减少胞外多糖和胞外DNA的释放。结论 赶黄草水煎液对SA和MRSA具有良好的抑菌作用,可通过抑制胞外多糖和DNA的分泌破坏生物膜的形成。     

柏黛膏的体外抗菌活性及其与青霉素的协同抑菌作用

目的评价柏黛膏抗菌活性及其与青霉素的协同抑菌效能。方法最低抑菌浓度(MIC)测定用琼脂二倍稀释法。结果柏黛膏与青霉素对金黄色葡萄球菌与大肠杆菌具有很好的抗菌活性,柏黛膏+青霉素对金黄色葡萄球菌与大肠杆菌抗菌MIC50和MIC90值分别为0.25,4.00 mg.L-1;1,4 mg.L-1。结论柏黛膏与青霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有协同抗菌功效。     

金黄色葡萄球菌NorA蛋白免疫检测方法的建立

目的建立金黄色葡萄球菌耐药转运蛋白NorA免疫检测方法。方法利用琼脂稀释法测定诺氟沙星（NFLX）对临床分离的6株金葡菌和标准菌株ATCC25923的MIC。对norA基因进行克隆、表达，提取表达产物包涵体，并进行了纯化。将纯化的表达蛋白作为免疫原免疫家兔，获取NorA蛋白的抗体血清。利用制得的抗体通过Western blotting检测临床分离的6株金葡菌的NorA蛋白表达水平。结果氟喹诺酮类药物耐药水平较高的临床分离金葡菌菌株的NorA蛋白表达水平一般较高，敏感菌株的耐药水平较低且接近。结论免疫检测方法可用于检测金葡萄菌耐药转运蛋白NorA的表达水平。     

清肺消炎丸体外抗菌活性研究

目的观察清肺消炎丸对9种肺炎常见病原菌的体外抗菌作用。方法采用琼脂稀释法,测定清肺消炎丸对9种药敏质控菌株的最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)。结果清肺消炎丸对肺炎链球菌、化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌的MIC分别为6.25、25、25、50mg/mL,相应的MBC分别为12.5、25、50、50mg/mL;对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌及白色念珠菌均无明显体外抑菌活性。结论清肺消炎丸对肺炎链球菌、化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌具有体外抗菌作用,其中对链球菌的抗菌活性较高。     

枇芩颗粒剂体外抑制金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的作用

目的 研究枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用。方法 采用滤纸片或牛津杯的琼脂扩散法观察枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抑菌作用,同时定量测定枇芩颗粒剂对这2种菌的最低抑菌浓度。结果 枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌均有明显抑菌作用,对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度为0.05 g·mL^-1,对痤疮丙酸杆菌最低抑菌浓度为0.10 g·mL^-1。结论 枇芩颗粒剂对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌均具有明显的抑制作用。     

左氧氟沙星与磷霉素联用对30株金黄色葡萄球菌的抗菌活性

目的 评价左氧氟沙星(喹诺酮类抗菌药)与磷霉素(合成抗菌药)联用对30株金黄色葡萄球菌的体外抗菌效应.方法 用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定不同浓度组合的抗菌药物对15株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)和15株甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的最低抑菌浓度,并计算部分抑菌浓度指数(FICI)判定联合效应.结果 左氧氟沙星与磷霉素联用后,其对金黄色葡萄球菌的MIC50显著降低,15株MSSA:HCI≤0.5占36.4%;0.52为0.15株MRSA:HCI≤0.5占81.8%;0.52为0.结论 体外左氧氟沙星与磷霉素联用对30株金黄色葡萄球菌主要为协同和相加作用.     

佛手抗菌活性及其药效成分橙皮苷对金黄色葡萄球菌的作用机制研究

摘要：目的 探究佛手的抗菌活性和机制,为佛手抗菌药物的开发和中药的抗菌机制研究提供参考依据。方法 采用琼脂二倍稀释法测定板蓝根水煎液、佛手水煎液、佛手挥发油和橙皮苷对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并通过菌体的生长曲线、胞外可溶性蛋白质含量和胞外核酸相对含量的测定研究橙皮苷对金黄色葡萄球菌的抗菌机制。结果 佛手水煎液、佛手挥发油和橙皮苷对这4种菌的抗菌效果均强于板蓝根水煎液,其中以橙皮苷对金黄色葡萄球菌的抗菌效果最好,MIC为0.05mg/mL,MBC为0.2mg/mL;橙皮苷作用下金黄色葡萄球菌菌体生长显著缓慢,胞外可溶性蛋白质含量和胞外核酸相对含量增加。结论 佛手对4种致病菌具有较好的抗菌活性,可通过改变金黄色葡萄球菌的细胞膜通透性来影响细菌的生长,从而达到抑菌效果。     

Frequencies of resistance to Melaleuca alternifolia (tea tree) oil and rifampicin in Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Enterococcus faecalis

This study was conducted to determine the frequencies at which single-step mutants resistant to tea tree oil and rifampicin occurred amongst the Gram-positive organisms Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Enterococcus faecalis. For tea tree oil, resistance frequencies were very low at <10(-9). Single-step mutants resistant to tea tree oil were undetectable at two times the minimum inhibitory concentration (MIC) for S. aureus RN4220 and derivative mutator strains or at 3 x MIC for the remaining S. aureus strains, including a clinical meticillin-resistant S. aureus isolate. Similarly, no mutants were recovered at 2x MIC for S. epidermidis or at 1x MIC for E. faecalis. Resistance frequencies determined in vitro for rifampicin (8 x MIC) ranged from 10(-7) to 10(-8) for all isolates, with the exception of the S. aureus mutator strains, which had slightly higher frequencies. These data suggest that Gram-positive organisms such as Staphylococcus and Enterococcus spp. have very low frequencies of resistance to tea tree oil.