大鼠骨髓间充质干细胞移植后肝内定居的实验研究

目的探索大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)同种异体移植后在受体大鼠模型肝内定居分布情况。方法利用密度梯度离心法分离、纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞。取第三代MSCs经CFSE标记后从门静脉植入同种异体正常组和肝损伤组大鼠体内,于移植后的第14d取出的肝脏,通过冰冻切片行荧光检测,研究MSCs在大鼠肝脏内定居分布情况。结果经门静脉移植的MSCs在正常组和肝损伤组的肝脏内均能定居,且定居的细胞数量上肝损伤组明显多于正常组。结论经门静脉移植的MSCs可以定居于肝脏内,且定于肝脏的干细胞数量与肝脏是否损伤密切相关。     

同种异体骨髓间质干细胞移植在大鼠肝内定居能力初步研究

目的探索绿色荧光蛋白标记的大鼠骨髓间质干细胞（MSCs）经不同途径移植到同种异体大鼠后其定居于肝脏的能力。方法从大鼠骨髓中分离培养获取MSCs，以绿色荧光蛋白进行标记，体外扩增后，分别从大鼠尾静脉和门静脉注入同种异体正常和肝脏损伤大鼠体内，于移植后的第3、7天通过荧光定量PCR检测移植的MSCs在大鼠肝内的表达情况。结果所有大鼠移植同源异体MSCs后全部存活，无意外死亡。从门静脉、尾静脉注入MSCs，在大鼠肝脏受损时其定居量大于非肝脏受损大鼠（P〈0．05）。在肝细胞受损大鼠，从门静脉注入MSCs与从尾静脉注入比较肝脏定居量差异不显著（P〉0．05）。非肝脏受损大鼠，从门静脉注入MSCs与从尾静脉注入比较细胞定居于肝脏量差异显著（P〈0．05）．并与移植后时间有关。结论干细胞定居于肝脏的时间与细胞数量可能与肝脏是否受损伤关系密切．与移植途径关系不密切；在正常动物干细胞可定居于肝脏，定植的细胞量与移植途径和移植后时间有关。     

不同途径大鼠骨髓基质干细胞同种异体肝脏移植效果的比较

目的 比较不同移植途径大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向同种异体大鼠肝脏移植的效果.方法 选用SD大鼠30只,随机分成3组(肝内移植组、门静脉移植组、股静脉移植组),每组10只,取浓度为1×106/mlferidex标记的BMSCs1ml,分别经大鼠肝实质、门静脉、股静脉3种途径移植到大鼠体内,于移植后12h、1d,3d、5d、7d、14d用MRI分别对三组大鼠肝脏进行扫描,并于移植后第14天普鲁士蓝染色光镜观察大鼠肝脏组织切片.结果 肝内移植组所有大鼠在移植后各个时间点MRI均能检测到肝脏细胞移植部位椭圆形低信号区,低信号范嗣随着时间的延长逐渐缩小,信号强度逐渐升高;门静脉移植组所有大鼠在移植后各个时间点MRI均能检测到肝门区门静脉内分支状低信号改变.信号强度低于肝内移植组,随着时间的延长低信号分布形态无明显变化,信号强度逐渐升高:股静脉移植组在各个时间点均未检测到明显低信号改变.移植后14d三组大鼠肝脏组织切片均可见含蓝色颗粒的细胞,肝内移植组最多,门静脉移植组次之,股静脉移植组最少,差异有显著统计学意义(P<0.05).结论 股静脉、门静脉与肝内移植三种途径的比较,肝内移植途径效果最好.     

同种异体骨髓间质干细胞移植在大鼠肝内定居能力初步研究

目的 探索绿色荧光蛋白标记的大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)经不同途径移植到同种异体大鼠后其定居于肝脏的能力。方法 从大鼠骨髓中分离培养获取MSCs,以绿色荧光蛋白进行标记,体外扩增后,分别从大鼠尾静脉和门静脉注入同种异体正常和肝脏损伤大鼠体内,于移植后的第3、7天通过荧光定量PCR检测移植的MSCs在大鼠肝内的表达情况。结果 所有大鼠移植同源异体MSCs后全部存活,无意外死亡。从门静脉、尾静脉注入MSCs,在大鼠肝脏受损时其定居量大于非肝脏受损大鼠(P<0.05)。在肝细胞受损大鼠,从门静脉注入MSCs与从尾静脉注入比较肝脏定居量差异不显著(P>0.05)。非肝脏受损大鼠,从门静脉注入MSCs与从尾静脉注入比较细胞定居于肝脏量差异显著(P<0.05),并与移植后时间有关。结论 干细胞定居于肝脏的时间与细胞数量可能与肝脏是否受损伤关系密切,与移植途径关系不密切;在正常动物干细胞可定居于肝脏,定植的细胞量与移植途径和移植后时间有关。     

脑脉1号胶囊对移植骨髓间充质干细胞存活的影响

目的：提高骨髓间充质干细胞（ bone mesenchymal stem cells , BMSCs ）对靶器官植入是干细胞移植领域研究的热点。文中旨在研究调节脑中血海中药脑脉1号（ NMYH）胶囊对BMSCs移植大鼠脑缺血区后存活的影响。方法采用随机法将60只SD 大鼠分为模型组（无血清 L-DMEM ＋等渗盐水）、BMSCs 组（细胞悬液＋等渗盐水）、NMYH 组（无血清L-DMEM＋NMYH）、BMSCs＋NMYH组（细胞悬液＋NMYH）。每组根据取材时间点又随机分为7 d、14 d、21 d组,每组每个时间点均为5只大鼠。制作大脑中动脉栓塞模型大鼠。全骨髓贴壁法分离获取第3代BMSCs,将氯甲基苯甲酰氨标记的BMSCs立体定向移植至大脑纹状体区,于移植后7、14、21 d灌注取脑,荧光显微镜下观察标记细胞在脑内存活及分布情况;免疫组织化学染色检测脑缺血边缘区血管内皮细胞标志物CD34的表达。结果第14天,BMSCs＋NMYH组的荧光吸光度为1．61±0．25,较BMSCs组（1．23±0．17）显著增加（P＜0．05）;第21天,BMSCs＋NMYH组的荧光吸光度为0．36±0．09,较BMSCs组（0．23±0．09）显著增加（P＜0．05）;第7、14、21天,BMSCs组、NMYH组和BMSCs＋NMYH组CD34的表达较模型组均显著增加（P＜0．01）;第7、14、21天,BMSCs＋NMYH组CD34的表达较BMSCs组均显著增加（P＜0．05）。结论移植后的BMSCs能在脑组织内存活,分化,并向缺血区迁移,而NMYH可促进BMSCs移植后的存活,机制可能与其提高缺血区微血管再生,从而能增加移植细胞区域的血供有关。     

移植骨髓间充质干细胞在溃疡性结肠炎大鼠结肠的分布

目的:观察不同数量大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)移植于溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)大鼠模型,探讨BMSC移植的最适数量.方法:分离培养、DAPI荧光标记SD大鼠BMSCs.免疫复合法建立大鼠UC模型,分A、B、C组分别经尾静脉注射1×106、5×106、1×107个DAPI标记的BMSCs.移植后第7、14 d各处死5只大鼠,取结肠做恒冷切片,荧光显微镜下记数各组DAPI标记BMSCs在病灶部位和周围正常部位的细胞数.结果:移植7、14 d,各组均见BMSCs分布于结肠黏膜,溃疡部位阳性细胞数明显高于非溃疡部位阳性细胞数(P＜0.05).移植7、14 d,B组损伤部位的荧光标记细胞多于A组(P＜0.05),但B组与C组间差异不明显.结论:经静脉给UC大鼠移植BMSCs的最适数量为5×106个.     

骨髓基质干细胞对大鼠外科性肝损伤的修复作用及其体内示踪

目的：探讨骨髓基质干细胞（Bone marrow stromal stem cells BMSCs）对大鼠外科性肝损伤的修复作用及其在活体内迁移和定居的示踪。方法：选用SD大鼠40只,随机分成移植组和对照组,每组20只,移植组切除大鼠肝脏的70%,同时取feridex标记的浓度为1×106/ml的BMSCs1ml,注射到大鼠肝右叶内,对照组在相同条件下切除大鼠肝脏的70%,在相同部位注射等量的生理盐水。分别于术后12h、1d、3d、5d、7d、14d,抽取血清检测两组大鼠的肝功能指标,并用MRI对两组大鼠肝脏进行扫描,术后14d普鲁士蓝染色两组大鼠肝脏组织切片,光镜观察肝脏的病理变化。结果：移植组大鼠的ALT (谷丙转氨酶)在移植后1d、3d、5d显著低于对照组（P＜0.05）,AST(谷草转氨酶)、TB(总胆红素)在移植后12h、1d、3d、5d显著低于对照组（P＜0.05）,ALP(碱性磷酸酶)、DBILI(直接胆红素)在移植后12h、1d、3d、5d、7d均显著低于对照组（P＜0.05）;移植组大鼠在术后12h、1d、3d、5d、7d、14d MRI均能检测到肝脏移植部位椭圆形低信号区,低信号范围随时间的延长逐渐扩大,信号强度逐渐降低,而对照组大鼠在术后12h MRI可检测到肝脏移植部位的高信号区,此后肝内高信号区消失;移植后14d移植组大鼠肝脏组织切片可见含蓝色颗粒的细胞分布在肝血窦中,且肝脏细胞未见明显肥大、水肿病变,而对照组大鼠未见含蓝色颗粒的细胞,且大鼠肝脏细胞肥大、水肿明显。结论：BMSCs对外科肝损伤具有修复作用,并且BMSCs可从移植部位向周围肝组织逐渐迁移,并到达周围肝组织肝血窦发挥修复肝脏的作用。     

骨髓基质细胞源神经干细胞对局灶性脑缺血大鼠行为及神经细胞凋亡的动态影响

目的探讨骨髓基质细胞(BMSCs)源神经干细胞对局灶性脑缺血大鼠行为及神经细胞凋亡的影响.方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型.32只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组、缺血对照组、缺血骨髓基质细胞移植组和缺血骨髓基质细胞源神经干细胞移植组.分别于移植后1d、7d、14d、28d对大鼠进行神经功能缺损评分和空间学习能力检测,并在移植后14d和28d分别应用TUNEL法检测神经细胞凋亡.结果移植后7d各组神经功能均有不同程度的恢复,BMSCs源神经干细胞移植组大鼠的神经功能评分[(6.3±2.32)分]显著优于BMSCs移植组[(7.1±1.88)分].移植14d后可提高大鼠空间学习能力,且各时间点BMSCs源神经干细胞移植组的空间学习能力改善优于BMSCs组.随移植后时间的延长,BMSCs源神经干细胞移植组和BMSCs移植组的神经功能和空间学习能力更趋改善.BM-SCs源神经干细胞移植组缺血边缘区凋亡细胞数[(4.8±1.12)个]明显少于BMSCs移植[(6.3±2.73)个].结论骨髓基质细胞源神经干细胞移植可改善大鼠神经行为、减少神经细胞凋亡,显著优于BMSCs移植.     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑梗死的治疗作用

目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺血性脑损伤的保护和修复作用,探讨不同时间点移植BMSCs对大鼠脑梗死治疗效果的差异. 方法 建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,在MCAO术后3、6、12、24、72 h这5个时间点经尾静脉移植BMSCs到脑梗死大鼠,并与PBS移植组和空白对照组进行脑梗死体积和神经损伤严重程度评分(NSS)比较. 结果 MCAO术后28 d,TTC染色显示:与PBS移植组和空白对照组比较,BMSCs移植组的脑梗死体积明显减小(P＜0.05);随着细胞移植时间推后,梗死体积逐渐增大,BMSCs 3、6、12、24、72 h移植组脑梗死体积分别为(40±27)、(80±25) 、(123±21)、(161±19)和(202±27) mm3.BMSCs移植组大鼠NSS明显低于PBS移植组和空白对照组(P＜0.05),并且BMSCs移植越早,NSS越低. 结论 在MCAO术后3～72 h移植BMSCs对大鼠脑梗死都有治疗效果,并且移植越早,治疗效果越好.     

人骨髓基质细胞脑移植改善大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的观察人骨髓基质细胞(BMSCs)移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用,探讨BMSCs脑移植治疗HIBD的可行性.方法36只新生大鼠随机分为对照组、HIBD组和移植组(均n=12).HIBD组和移植组大鼠7日龄时结扎左侧颈总动脉后吸入8%氧气2h制成HIBD模型.对照组仅分离左颈总动脉,不予结扎和缺氧.分离培养人BMSCs,损伤后3 d将BMSCs立体定位脑移植到移植组大鼠左侧感觉运动皮层.3～4周龄时,观察大鼠行为学和组织学的改变,并用免疫荧光检测移植细胞的存活情况.结果缺氧缺血后3周,HIBD组海马DG区和皮层单位面积内神经元数目较正常组减少[海马DG区:(39.2±5.6)个vs(51.1±3.9)个,P＜0.001;皮层:(12.3±3.0)个vs(17.8±3.0)个,P＜0.001].BMSCs移植后海马DG区和皮层单位面积内神经元数目[海马:(44.9±3.1)个,皮层:(17.5±3.1)个]较HIBD组增加(P＜0.01).与对照组比较,HIBD组在T迷宫、感觉运动功能测试中表现出明显的不足.BMSCs脑移植组各项行为学测试成绩较HIBD组均有明显改善.免疫荧光显示移植后3周,BMSCs在脑内存活.结论BMSCs脑移植可以改善新生鼠HIBD.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。