中医药对呼吸道合胞病毒感染Th1／Th2漂移影响的研究进展

对近几年来呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）感染状态下Th1／Th2漂移状态以及中医药对RSV感染Th1／Th2漂移状态影响的研究进展进行综述，为以后相关研究进行展望。认为应深入探讨免疫病理损伤在RSV感染过程中的发生及变化规律及中药对其的影响，从而探索中药疗效的新机制，指导RSV感染的临床治疗。     

银翘散调节呼吸道病毒感染相关性哮喘Th1/Th2细胞因子的临床观察

[目的] 观察银翘散对呼吸道病毒感染相关性哮喘（RVA）的临床疗效及对Th1/Th2细胞因子的影响。[方法] 将68例RVA患者随机分为对照组32例,常规西药治疗;治疗组36例,在常规西药的基础上加用银翘散治疗。2组均治疗10 d。观察治疗前后患者的哮喘控制评分（ACT）,肺功能[第1秒时间肺活量（FEV1）、一秒率（FEV1/FVC%）、呼气峰流速（PEF）]、中医证候疗效及Th1/Th2细胞因子[分泌性免疫球蛋白A（sIgA）、白介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）、IFN-γ/IL-4]的变化。[结果] 治疗后两组患者的ACT评分均较治疗前明显改善,且治疗组优于对照组（P<0.05）;治疗组对肺功能的改善优于对照组（P<0.05）。治疗组中医证候有效率为94.44%（34/36）,对照组中医证候有效率为71.87%（23/32）。治疗后,治疗组sIgA水平高于对照组（P<0.05）。IFN-γ及IFN-γ/IL-4低于对照组（P<0.05）,IL-4水平两组之间未见差异（P>0.05）。[结论] 银翘散联合常规西药治疗RVA的临床疗效优于单用常规西药治疗,可能与银翘散可调节患者Th1/Th2细胞因子,逆转因子间的失衡,进而减少气道炎症相关。     

呼吸道合胞病毒感染小鼠Th17细胞亚群的变化

目的观察辅助性T淋巴细胞17（Th17）在呼吸道合胞病毒（RSV）感染小鼠肺部炎症中的变化,探讨其在RSV感染后宿主免疫机制中的作用。方法 30只3～5周龄雌性BALB/c小鼠随机分为实验组（18只）和对照组（12只）。实验组每只小鼠鼻腔滴入0.1 mL滴度为107.5TCID 50/mL的病毒液,对照组鼻腔滴入0.1 mL的2.5%灭活鸡血清的DMEM维持液。在处理后的第1、4、8 d分别处死小鼠,并留取肺脏和肺门淋巴结。用HE染色观察RSV感染后肺组织病理变化;实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织中RSV-F、IL-17A、IL-17F和IL-23p19 mRNA表达水平;流式细胞术检测小鼠肺门淋巴结中Th17细胞水平。结果在RSV感染后第4 d小鼠肺组织出现典型间质性肺炎表现,第8 d炎性细胞明显减少;肺组织中RSV病毒的相对表达量在第4 d为9.208±0.548,较第1 d显著增多（P〈0.01）,到第8 d则较第4 d显著减少（P〈0.01）;肺组织中IL-23p19和IL-17A等细胞因子的表达在RSV感染后也呈现增高的趋势,并在第4 d达到高峰,但IL-17F mRNA表达在RSV感染后不同时间点与对照组比较无显著变化（P〉0.05）;RSV感染后第4 d和第8 d小鼠肺门淋巴结Th17亚群比例分别为（0.370±0.043）%和（0.853±0.048）%,均明显高于相应的对照组（P〈0.05）,而且第8 d的Th17比例也显著高于第4 d（P〈0.01）。结论在RSV感染小鼠导致的肺部炎症反应过程中,出现肺组织中IL-17A的表达增加和肺门淋巴结Th17细胞水平增高,说明Th17细胞可能参与宿主的抗病毒免疫过程。     

儿童非细菌性下呼吸道感染血清Th源细胞因子在发病中的作用

目的：探讨非细菌性下呼吸道感染发病机理与免疫功能的关系。方法：对急性非细菌性下呼吸道感染62例患儿，取鼻咽部分泌物采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（桥联酶标法）（法血清和酶联免疫吸附）检测为呼吸道合胞病毒（RSV）、流感病毒（Flu）A，B型、副流感病毒（PIV）1、2、3型、腺病毒（ADV）3．7型，肺炎支原体（Mp）。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清γ-干扰素（IFNγ-）、自细胞介素一4（IL-4）水平，并进行统计学和相关性分析。结果：非细菌性下呼吸道感染患儿血清IFN-γ降低，IL-4升高，二者呈显著负相关性（γ=-07296，P〈0．01），提示Th1细胞功能被抑制，分泌IFN-γ减少，Th2细胞功能异常增高，分泌IL-4增多。结论：非细菌性下呼吸道感染存在细胞免疫功能异常，Th1／Th2比例失衡，Th2细胞过度活化，其细胞因子偏移分泌状态，类似哮喘样免疫反应-Th2占优势，具有诱发和发展哮喘的免疫病理基础。     

RSV下呼吸道感染患儿辅助性T细胞亚群Th1／Th2及相关因子的研究

目的：探讨辅助性T淋巴细胞Th1/Th2亚群及其相关细胞因子IFN－γ,IL－4在呼吸道合胞病毒（RSV）下呼吸道感染患儿发病机制中的作用。方法：用单克隆抗体双色免疫荧光FITC／PE双标记,流式细胞仪检测30例RSV下呼吸道感染患儿急性期外周血单个核细胞（PBMCs)辅助性T淋巴细胞CD4^ 及其Th1亚群CD4^ ,CD45RA^ ,Th2亚群CD4^ ,CD45RO^ 的表达,并用ELISA方法同时检测患儿血清中细胞因子IFN－γ,IL－4水平。同期检测15例年龄,性别无差异的健康婴儿为对照。结果：RSV下呼吸道感染组患儿外周血辅助性T淋巴细胞CD4^ 明显低于对照组（P＜0．05）,Th1细胞CD4^ CD45RA^ 明显下降（P＜0．05）,Th2细胞CD4^ ,CD45RO^ 虽有下降,但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）,Th1/Th2比值与对照组相比明显降低（P＜0．05）,RSV下呼吸道感染组患儿血清中IFN－γ,IL－4水平均有降低,以IFN－γ水平下降最为明显（P＜0．01）,IFN－γ／IL－4比值降低（P＜0．05）,结论：婴幼儿RSV下呼吸道感染急性期的免疫功能紊乱主要表现为Th1及其功能下降,Th2及其功能对增强,Th1/Th2的失衡是导致该病发生Th2样反应的重要免疫机制。     

中老年反复呼吸道感染患者外周血Th细胞亚群分析

以20例健康中老年人为对照,采用酶联免疫斑点法检测35例中老年反复呼吸道感染患者外周血Th细胞亚群。结果显示,患病组Th1细胞数明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Th2细胞数两组间差异无统计学意义(P>0.05)。     

反复呼吸道感染患儿外周血lncRNA NEAT1的表达及与Th1/Th2平衡的关系

【摘要】 目的 探讨长链非编码RNA核富集转录体1（LncRNA NEAT1）在反复呼吸道感染（RRI）患儿血浆中的表达情况,并分析其与Th1/Th2平衡的关系。 方法 选取2018年6月~2019年3月本院收治的68例RRI患儿为RRI组,并选取同期74例健康幼儿为健康组。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测血浆lncRNA NEAT1水平;以流式细胞仪检测Th1、Th2细胞占CD4+T细胞的比例,计算Th1/Th2比值;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-4（IL-4）水平;观察RRI患儿血浆lncRNA NEAT1、Th1、Th2、Th1/Th2水平与IFN-γ、IL-4,及lncRNA NEAT1表达水平与Th1/Th2平衡的关系。 结果 与健康组相比,RRI组患儿血浆lncRNA NEAT1表达水平、外周血CD4+Th2细胞比例、IL 4水平明显升高（t=9.198、10.218、27.449,P均＜005）,外周血CD4+Th1细胞比例、Th1/Th2比值、IFN-γ水平明显降低（t=10.689、14.572、23.665,P均＜0.05）;RRI组患儿血浆lncRNA NEAT1表达水平与IFN γ呈负相关（r=〖CD*3/5〗0383,P＜0.05）,Th1/Th2比值与IL-4、lncRNA NEAT1表达水平与Th1/Th2比值均呈负相关（r=〖CD*3/5〗0.428,P＜0.05）,Th1细胞比例、Th1/Th2比值与IFN-γ呈正相关（r=0.458、0.327,P均＜0.05）,lncRNA NEAT1表达水平、Th2细胞比例与IL-4（r=0.484、0.537,P均＜0.05）呈正相关。 结论 RRI患儿血浆lncRNA NEAT1呈高水平,Th1/Th2比值呈低水平,lncRNA NEAT1与Th1/Th2有一定负相关性,两者可能相互作用,从而共同影响RRI发生发展。     

中医药对呼吸道合胞病毒感染Thl/Th2漂移影响的研究进展

对近几年来呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染状态下Thl/Th2漂移状态以及中医药对RSV感染Thl/Th2漂移状态影响的研究进展进行综述,为以后相关研究进行展望。认为应深入探讨免疫病理损伤在RSV感染过程中的发生及变化规律及中药对其的影响,从而探索中药疗效的新机制,指导RSV感染的临床治疗。     

变应性鼻炎模型气道Th1和Th2失衡的研究

目的：通过对大鼠变应性鼻炎模型上、下气道Th1和Th2失衡的研究,探讨上、下气道炎症反应的相关性及其机制。方法：以卵蛋白为致敏原建立大鼠变应性鼻炎模型。HE染色观察鼻黏膜和肺组织的病理学改变;免疫组化检测鼻黏膜和肺组织中IL-5和IFN-1的表达;以酶联免疫吸附测定法（enzyme—linked immunosorbentassay,ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（bronchialalveoluslavagefluid,BALF）中IL-5和IFN-γ的水平。结果：变应性鼻炎大鼠模型组鼻黏膜和肺组织有明显炎症细胞浸润。模型组鼻黏膜和肺组织IL-5的表达明显高于对照组,并且和嗜酸性粒细胞的数量呈正相关。模型组鼻黏膜和肺组织IFN-γ的表达低于对照组。模型组BALF中IL-5的含量高于对照组,而IFN-γ的含量低于对照组。结论：变应性鼻炎大鼠上、下气道有Th1和Th2的失衡,鼻的变应性炎症不仅导致鼻黏膜局部的病理学和免疫组织学的改变,同时还引起下气道的炎症反应。     

呼吸道合胞病毒引起的下呼吸道感染中血清IL-4、IL-12水平的相关性

目的：探讨IL－4和IL－12在呼吸道合胞病毒（RSV）引起的下呼吸道感染中所起的作用。方法：①用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法（APAAP）检测出30例RSV抗原阳性患儿；②应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测患儿和正常儿童血清中IL－4、IL－12水平进行相关分析。结果：治疗前RSV下呼吸道感染患儿血清IL－4水平显著升高，IL－12水平显著降低，与对照组比较有统计学意义（P＜0．05）。②治疗后病情好转患儿的IL－4水平下降IL－12水平升高，与正常对照无显著性差别（P＞0．05）。③血清IL－4、IL－12之间有显著负相关关系（r=-0.432,P＜0．05）。结论：RSV下呼吸道感染存在Th1/Th2功能紊乱，主要表现Th2细胞功能亢进，IL－4、IL－12参与了RSV下呼吸道感染时的免疫病理机制。     

脾氨肽对反复呼吸道感染患儿Th1/Th2细胞因子的影响

目的 探讨脾氨肽对反复呼吸道感染(RRI)患儿Th1/Th2细胞因子的影响.方法 选择我院收治的RRI患儿66例,将其随机分为治疗组和对照组(各33例).对照组予以常规抗感染、对症治疗;治疗组在对照组治疗基础上给予脾氨肽冻干粉2 mg,睡前口服,急性感染期1次/d;急性感染期过后,隔日1次;3个月为1个疗程.观察两组患儿的疗效及治疗前后上清液单个核细胞(PBMC)中白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化.结果 治疗前两组患儿上清液PBMC中IL-4和IFN-γ水平间差异均无统计学意义(P＞0.05),治疗3个月后两组患儿上清液PBMC中IL-4和IFN-γ水平间差异均有统计学意义(P＜0.01).停药6个月后,两组患儿临床疗效间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脾氨肽能增强RRI患儿Th1介导的细胞免疫,抑制Th2介导的体液免疫,调节Th1/Th2细胞因子平衡,临床疗效确切,安全性高,是治疗儿童RRI较理想的药物.     

Coexistence of Th1/Th2 and Th17/Treg imbalances in patients with allergic asthma

Background  Recent recognition is that Th2 response is insufficient to fully explain the aetiology of asthma. Other CD4⁺ T cells subsets might play a role in asthma. We investigated the relative abundance and activities of Th1, Th2, Th17 and CD4⁺CD25⁺ Treg cells in patients with allergic asthma.

Methods  Twenty-two patients with mild asthma, 17 patients with moderate to severe asthma and 20 healthy donors were enrolled. All patients were allergic to house dust mites. Plasma total IgE, pulmonary function and Asthma Control Questionnaire were assessed. The proportions of peripheral blood Th1, Th2, Th17 and CD4⁺CD25⁺ Treg cells were determined by flow cytometry. The expression of cytokines in plasma and in the culture supernatant of peripheral blood mononuclear cells was determined by enzyme linked, immunosorbent assay.

Results  The frequency of blood Th2 cells and IL-4 levels in plasma and culture supernatant of peripheral blood mononuclear cells were increased in all patients with allergic asthma. The frequency of Th17 cells and the plasma and culture supernatant levels of IL-17 were increased, whereas the frequency of CD4⁺CD25⁺ Treg cells and plasma IL-10 levels were decreased in patients with moderate to severe asthma. Dermatophagoides pteronyssinus specific IgE levels were positively correlated with the percentage of blood Th2 cells and plasma IL-4 levels. Forced expiratory volume in the first second was negatively correlated with the frequency of Th17 cells and plasma IL-17 levels, and positively correlated with the frequency of Treg cells. However, mean Asthma Control Questionnaire scores were positively correlated with the frequency of Th17 cells and plasma IL-17 levels, and negatively correlated with the frequency of Treg cells.

Conclusions  Imbalances in Th1/Th2 and Th17/Treg were found in patients with allergic asthma. Furthermore, elevated Th17 cell responses, the absence of Tregs and an imbalance in Th17/Treg levels were associated with moderate to severe asthma. 

     

IL-12对哮喘患者Th1/Th2的调节

目的 探讨白细胞介素１２（ＩＬ－１２）对哮喘患辅助性Ｔ细胞亚群的调节作用,方法 收集１４例支气管哮喘患,１０例正常对照的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,加入不同浓度ＩＬ－１２进行体外培养,收集细胞培养上清液,以酶联免疫吸附法测定ＩＬ－４及ＩＦＮ－γ,并用酶联免疫斑点法（ＥＬＩＳＰＯＴ）检测哮喘患体外培养的ＰＢＭＣ中的Ｔｈ１和Ｔｈ２阳性率。结果 哮喘患ＰＢＭＣ培养上清液中ＴＮＦ－γ产生减少,     

Th1、Th2、Th17 细胞变化及环境因素与习惯性流产的关系研究

目的 探讨Th1、Th2和Th17细胞的变化、转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达及环境因素与习惯性流产的关系.方法 选取2011年6月～2012年9月河南省开封市妇产医院就诊的50例习惯性流产非孕期患者作为病例组（HA组）,同期某社区50例正常非孕妇女为健康对照组（NNP组）,分别抽取抗凝静脉血5 mL,应用聚多糖密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC）,采用流式细胞仪检测三种亚群细胞的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）检测IFN-γ、IL-4和IL-17的含量,实时荧光定量PCR检测T-bet 、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达.同时进行环境因素问卷调查,比较两组各环境因素的差异.结果 ①HA组患者Th1、Th17细胞百分比[（11.66±3.45）％、（3.65±0.75）％]均明显高于NNP组[（7.05±1.83）％、（0.72±0.11）％],差异有统计学意义（P＜0.05）,Th2细胞的百分比[（1.15±0.33）％]低于NNP组[（3.59±0.62）％],差异有统计学意义（P＜0.05）.②HA组IFN-γ和IL-17在的含量分别为（1163.27±45.25）μg/L和（162.26±25.28）μg/L,明显高于NNP组[（736.25±44.32）、（57.45±11.26） μg/L],差异有统计学意义（P＜0.05）,而IL-4的含量[（118.45±26.75） μg/L]低于NNP组[（220.45±24.63）μg/L],差异有统计学意义（P＜0.05）.③与NNP组比较,HA组T-bet和STAT-3 mRNA表达均明显升高,而GATA-3 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）.④HA组BMI≥24.0 kg/m2者所占比例为58％,明显高于NNP组（28％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 习惯性流产患者IFN-γ、IL-17的水平较高,而IL-4的水平较低,提示习惯性流产患者体内存在T细胞亚群分化失衡,且此种失衡可能与转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的调控有关,同时肥胖可增加习惯性流产发生的可能性.     

特应性皮炎患儿外周血Th17、Th1/Th2细胞亚群的研究

目的检测特应性皮炎(AD)患儿外周血中辅助性T细胞亚群(Th1、Th2和Th17)数量和比例的变化,探讨其在AD发病机制中的作用。方法选择40例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1/Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γ、IL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并进行相关分析。结果AD患儿PBMC中CD4+IL-4(+Th2)细胞的数量、CD4+IL-17(+Th17)细胞的数量均高于健康对照组([19.56±4.9)%vs(12.91±1.7)%,P0.05;(26.61±2.6)vs(11.4±1.2),P0.05],Th1/Th2细胞的比值低于健康对照组([0.98±0.13)vs(1.84±1.6),P0.05]。结论IL-17+Th17细胞与Th1/Th2比值变化可能参与AD患儿的免疫学发病机制。     

系统性红斑狼疮患者Th0、Th1和Th2细胞水平检测

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血辅助性T淋巴细胞（Th）亚群在SLE发病中的作用。方法采用流式细胞术对SLE患者和正常人外周血中T淋巴细胞内细胞因子（IFN-γ、IL-4）和表面抗原（CD4）进行分析;记录患者临床资料,根据临床表现及系统性红斑狼疮活动指数（SLE-DAI）分组。结果与正常对照组比较,SLE患者外周血中Th2细胞百分比升高（P〈0．05）,Th1／Th2比值降低（P〈0．05）。Th1、Th2细胞百分比在SLE组与正常对照组之间差异无显著性（P〉0．05）。SLE患者SLEDAI〉10组Th1／Th2比值低于SLEDAI≤10组和正常组（P〈0．05）。Th2细胞百分比在SLEDAI〉10组显著升高（P〈0．05）。与阴性对照组比较,伴有口腔溃疡SLE组其Th1细胞百分数降低,有关节炎组其Th2细胞百分数升高。Th1／Th2比值与SLEDAI积分成负相关;Th0与血清补体C3成正相关。24h尿蛋白定量、白细胞数、血小板数与Th1、Th2、Th0及Th1／Th2比值无相关性。结论SLE患者体内存在Th2优势活化状态,活动期SLE患者Th1／Th2失衡尤其突出;Th亚群细胞失衡在SLE发病中有着重要作用。     

肝癌患者血清Th1/Th2细胞因子含量检测及其与机体免疫功能的关系

目的：研究肝癌患者血清中Th1/Th2细胞因子的含量及其与机体免疫功能的关系。方法：将在本院就诊的肝癌患者纳入研究的观察组,同期在我院体检的健康者纳入研究的对照组,采用酶联免疫吸附法检测两组受试者血清中Th1、Th2细胞因子以及补体C3和C4的含量,流式细胞法检测T细胞亚群含量。结果：（1）Th1/Th2细胞因子：观察组的Th1细胞因子肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、干扰素-γ（IFN-γ）含量低于对照组,Th2细胞因子白介素-6、10（IL-6、IL-10）含量高于对照组（P〈0.05）;（2）免疫功能：观察组的CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4含量低于对照组,CD8＋T细胞的含量高于对照组（P〈0.05）;（3）细胞因子与免疫功能的关系：TNF-a、IFN-γ含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈正相关,与CD8＋T细胞含量呈负相关;IL-6、IL-10含量与CD4＋T细胞、CD16/65＋NK细胞、补体C3和C4的含量呈负相关,与CD8＋T细胞含量呈正相关。结论：肝癌患者存在Th1/Th2漂移,血清中Th1细胞因子TNF-a和IFN-γ含量降低、而Th2细胞因子IL-6、IL-10含量升高,且与机体的天然免疫和细胞免疫功能密切相关。