雌激素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌损伤及心肌细胞凋亡的影响

目的：通过建立大鼠双侧卵巢切除及异丙肾上腺素诱导的心肌损伤模型,研究雌激素对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤及心肌细胞凋亡的影响。方法50只雌性 SD大鼠行双侧卵巢切除术和假手术后分为5组（每组10只）：假手术组（Sham组）;双侧卵巢切除组（OVX组）;心肌损伤组（OVX＋ISO＋Vehi组）,雌激素4μg· kg－1· d－1治疗组（OVX＋ISO＋E2 a组）,雌激素40μg·kg－1·d－1治疗组（OVX＋ISO＋E2 b组）。分别测量大鼠大体指标,颈总动脉置管监测心脏血流动力学参数,分离培养单个心肌细胞观察形态与收缩功能改变,以及蛋白免疫印迹法检测心肌细胞凋亡蛋白的表达。结果异丙肾上腺素明显降低心肌功能,增加心肌细胞肥大与凋亡,降低单个心肌细胞收缩功能（P＜0．05）。高剂量雌激素（40μg·kg－1·d－1）替代治疗显著改善异丙肾上腺素引起的心肌损伤与心肌功能下降（P＜0．05）,并通过增加 Bcl-2蛋白表达,减少 Bax蛋白表达与 Caspase-3的激活,降低心肌细胞肥大与凋亡（P＜0．05）。而低剂量雌激素（4μg·kg－1·d－1）只表现出轻度抗异丙肾上腺素心肌损伤的作用,但差异无统计学意义（P＞0．05）。结论适宜剂量的雌激素替代治疗通过降低心肌细胞凋亡,提高心肌细胞收缩功能,从而对异丙肾上腺素诱导的心肌损伤发挥保护作用。     

吗啡预处理对大鼠缺血再灌注损伤 心肌线粒体通透性转换孔的影响

目的：探讨吗啡预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌保护作用及对线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore,MPTP）的影响。方法：40只SD成年雄性大鼠,体质量220~280 g,随机分为S组（假手术组,仅穿线,不结扎冠状动脉前降支）,IR组（缺血再灌注组）,Mp+IR组（吗啡预处理缺血再灌注组),CsA+IR组 (环孢霉素A预处理缺血再灌注组), 每组10只。除S组外,其余大鼠心脏都经历30 min缺血和180 min再灌注,再灌注180 min时抽?庋逯辛姿峒∷嵬っ福╟reatine kinase-Mb,CK-Mb）和心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）,分离心肌线粒体,测定缺血再灌注心肌线粒体2-3［H］DOG,Cyt C,［Ca2+］m 和Ca2+摄取速率及MPTP t1/2（MPTP达到50%开放所需时间）并比较4组之间的差异。结果：Mp+IR组和CsA+IR组CK-Mb与cTnI明显较IR组降低（P＜0.01）。IR组心肌细胞线粒体2-3［H］DOG和［Ca2+］m 明显增加,高于S组,Cyt C含量明显低于S组,Mp+IR组较IR组2-3［H］DOG和［Ca2+］m下降,Cyt C 含量增加（P＜0.01）。2-3［H］DOG与［Ca2+］m呈正相关（r=0.797,P＜0.01), Cyt C与2-3［H］DOG呈负相关（r=-0.805,P＜0.01),Cyt C与［Ca2+］m呈负相关（r=-0.648,P＜0.01)。缺血再灌注后MPTP t1/2明显缩短,用吗啡和CsA干预使MPTP t1/2明显延长。结论：用吗啡预处理可以起到保护心肌的作用,其机制可能与降低钙超载,延长MPTPt1/2有关。     

醛固酮对3T3-L1脂肪细胞PTEN及p-Akt蛋白表达的影响

目的 观察胰岛素抵抗（IR）的脂肪细胞中Aktser473磷酸化（p-Akt）水平和与张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因（PTEN）蛋白的表达,以及醛固酮和螺内酯处理后上述蛋白表达的变化,从而探讨醛固酮在IR发病机制中的作用。方法 通过地塞米松与胰岛素共同诱导3T3 L1前脂肪细胞建立IR模型,western blots方法检测正常分化及IR的脂肪细胞PTEN蛋白和p-Akt水平,观察醛固酮和螺内酯对细胞PTEN蛋白表达及p Akt水平的影响。结果 IR脂肪细胞PTEN的蛋白水平较正常分化脂肪细胞显著升高［（0.83±0.11）vs（0.63±0.06）,P＜0.05］,高浓度醛固酮可增加PTEN蛋白表达,经螺内酯处理后PTEN蛋白表达明显下调（P均＜0.05）;IR脂肪细胞模型p-Akt水平明显低于正常分化脂肪细胞［（0.52±0.12）vs（0.78±0.12）,P＜0.05］,高浓度醛固酮可下调p-Akt水平,螺内酯可部分逆转醛固酮的抑制作用（P均＜0.05）。结论 醛固酮可能通过PI3K-AKT通路导致IR的发生。     

尿毒症对大鼠主动脉平滑肌 TRPC1通道表达的影响

目的：研究尿毒症对大鼠主动脉平滑肌细胞TRPC1通道表达的影响。方法应用Real－time PCR和Western blot检测尿毒症大鼠主动脉平滑肌细胞中TRPC1通道mRNA和蛋白的表达。结果（1）主动脉病理变化：假手术组动脉壁结构平整,内皮完整,动脉中膜平滑肌排列规则,尿毒症组大鼠主动脉壁局部增厚,平滑肌细胞增生。（2）血压变化：术前两组大鼠血压无明显差异,尿毒症组大鼠血压至少从术后第2周开始显著升高,两组相比差异有统计学意义（P＜0.05）,且随术后时间的延长,尿毒症组血压逐步升高,与假手术组比较差异有统计学意义。（3）与假手术组相比,尿毒症组TRPC1通道mRNA的表达量显著增加（P＜0.05）,TRPC1通道蛋白的表达量约是假手术组的2.6倍（P＜0.05）。与假手术组相比,尿毒症组TRPC1通道mRNA和蛋白的表达量均显著增加（ P＞0.05）。结论 TRPC1表达异常可能是尿毒症大动脉硬化、血压升高的分子机制。     

人趋化素样因子1基因转移对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的：探讨人趋化素样因子1（chemokine-like factor 1, CKLF1）基因转移对急性心肌梗死大鼠梗死面积及心功能的影响。方法：雄性3月龄Sprague-Dawley（SD）大鼠30只,随机分为3组,盐水组、CKLF1组、空质粒组,分别于股直肌内注射生理盐水100 μg、CKLF1真核表达质粒或空载质粒100 μg,并予以直流方波电脉冲刺激,第6天结扎冠状动脉前降支构建大鼠急性心肌梗死模型,第22天行超声心动图及血流动力学检查,然后处死大鼠,测定心肌梗死面积。结果：CKLF1组,左心室射血分数（67.02%±12.24%）明显高于盐水组（43.64%±7.82%）及空质粒组（47.56%±4.10%）,P＜0.05;左心室短轴缩短率（33.83%±10.15%）明显高于盐水组（18.49%±3.96%）及空质粒组（20.85%±2.24%）,P＜0.05;左心室压力上升最大速率［（5 720.01±826.32） mmHg/s,1 mmHg=0.133 kPa］明显高于盐水组［（3 955.69±685.91） mmHg/s］及空质粒组［（4 412.03±500.74） mmHg/s］,P＜0.05;左心室压力下降最大速率［（4 636.23±407.17） mmHg/s］明显高于盐水组［（2 984.82±615.24）mmHg/s］及空质粒组［（2 963.87±419.36） mmHg/s］,P＜0.05;而CKLF1组大鼠心肌梗死面积（29.63%±3.93%）明显小于盐水组（38.01%±5.48%）及空质粒组（37.50%±6.33%）,P＜0.05。结论：CKLF1基因转移可以缩小大鼠心肌梗死面积并改善其心功能。     

补肾活血化瘀方上调雄激素致不孕大鼠脂肪组织中胰岛素受体底物1及其酪氨酸磷酰化

目的：研究雄激素致不孕大鼠（androgen sterilized rat，ASR）胰岛素受体底物1的表达及其酪氨酸磷酸化程度，探讨胰岛素抵抗（insulin resistance．IR）的分子机制和补肾活血化瘀方的作用机制。方法：ASR大鼠随机分为模型组、溶媒组（注射中性茶油）和补肾活血化瘀方组，各组均为15只大鼠。观察大鼠体质量和胰岛素曲线下面积．并检测大鼠脂肪组织中胰岛素受体底物1（insulin receptor substrate-1．IRS-1）的表达及其酪氨酸磷酸化程度。结果：模型组大鼠体质量和胰岛素曲线下面积高于溶媒组和补肾活血化瘀方组（P〈0.05）。模型组脂肪组织中IRS—1及其酪氨酸磷酸化程度低于溶媒组（P〈0.05）．补肾活血化瘀方组IRS—1的表达及其酪氧酸磷酸化程度上升．与模型组比较有统计学差异（P〈0.05）。结论：补肾活血化瘀方能促进IR大鼠脂肪组织IRS—1蛋白的表达及其酪氨酸磷酸化水平．这可能是其提高组织对胰岛素敏感性从而改善IR的机制之一。     

雌激素替代治疗对大鼠心壁雌激素受体表达的影响

目的 :观察雌、孕激素替代治疗时去卵巢大鼠心脏雌激素受体 ( ERα)的表达。方法 :通过免疫组化方法 ,分别测定去势和雌激素替代治疗 ( ERT)组 SD大鼠心脏雌激素受体水平 ,并对血清雌激素及血脂水平进行了检测。结果 :1去势大鼠 ER(免疫阳性物质明显减少 ( P<0 .0 5 ) ,雌激素替代治疗 ( ERT) 8周后 ,ERα表达明显改善 ;2去势组雌性大鼠血清雌二醇水平较假手术组明显下降 ( P<0 .0 1 ) ,胆固醇 ( TC)、甘油三酯 ( TG)水平明显升高。结论 :ERα广泛存在于心肌组织中 ,且其表达受雌激素的调控     

阈下电刺激对大鼠缺血心肌细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响

目的：探讨阈下电刺激对大鼠缺血心肌细胞凋亡及bcl-2和bax表达的影响.方法：Wistar大鼠随机分为假手术组、急性心梗组、阈下电刺激组,假手术组手术不结扎,置入电极不给予电刺激;急性心梗组和阈下电刺激组采用左冠状动脉前降支结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型,急性心梗组仅植入电极,不给予电刺激,阈下电刺激组在建立心肌梗死模型后,给予25 Hz、0.3V阈下电刺激,TUNEL法检测3组大鼠心肌细胞凋亡,免疫组化和RT-PCR的方法检测心肌bcl-2及bax蛋白和mRNA的表达.结果：（1）与假手术组比较,急性心梗组、阈下电刺激组大鼠心肌细胞凋亡指数显著升高（P＜0.05）;与急性心梗组比较,阈下电刺激组大鼠心肌细胞凋亡指数降低（P＜0.05）.（2）与假手术组比较,急性心梗组、阈下电刺激组大鼠心肌细胞bcl-2和bax蛋白和mRNA的表达显著升高（P＜0.05）;与急性心梗组比较,阈下电刺激组大鼠心肌细胞bcl-2蛋白和mRNA的表达显著升高,而bax基因表达显著降低（P＜0.05）.结论：阈下电刺激能显著减少大鼠心肌梗死后缺血心肌细胞凋亡,其机制可能与上调bcl-2表达和下调bax表达有关.     

雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物的作用

目的观察雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物(IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对绝经后骨质疏松症的作用机制。方法用半定量RTPCR检测细胞IRS1、IRS2mRNA的表达;分别用免疫印迹和免疫共沉淀检测细胞IRS1、IRS2蛋白表达及磷酸化。结果雌二醇和孕酮均使人成骨细胞IRS2mRNA的表达上调,分别为对照组的421%±68%(P<0.05)和327%±54%(P<0.05),两者联合干预能进一步诱导人成骨细胞IRS2mRNA的表达上调496%±54%(P<0.01),但IRS1mRNA的表达不受影响(P>0.05)。雌二醇、孕酮、雌二醇和孕酮联合干预上调细胞IRS2蛋白的表达,分别为对照组的487%±65%、507%±54%和552%±47%,雌二醇、孕酮、雌二醇和孕酮联合干预使IRS1去磷酸化,分别为对照组的54%±7.6%(P<0.05),37%±4.2%,21.2%±3.0%(P<0.01),对IRS1蛋白的表达无影响。结论雌二醇和孕酮均可使人成骨细胞IRS2mRNA及蛋白的表达上调,并促使IRS2的磷酸化,二者之间存在正性协同效应。虽然二者在转录和翻译水平对IRS1表达无影响,但可促使IRS1蛋白去磷酸化。因而,雌激素与孕激素合用在骨质疏松的防治中可能具有重要的意义。     

去卵巢应激大鼠结肠组织5-羟色胺受体3表达及意义的探讨

目的: 研究不同卵巢激素水平对束缚应激刺激大鼠动物模型结肠组织5-羟色胺受体3(5-HT3R)的影响. 方法: 24只成年雌性SD大鼠,随机分为3组:假手术(Sham)组、去卵巢(OVX) 组、去卵巢加雌二醇(E2)和黄体酮(P)(OVX E2 P)组,每组8只. 4 wk后均予以束缚1 h应激刺激,观察大鼠排便和玻璃小球排出情况;并采用RT-PCR方法,检测3组大鼠结肠组织5-HT3R mRNA的表达. 结果: 去卵巢组较假手术组、去卵巢 雌二醇 黄体酮组大鼠排便量增加,玻璃小球排出时间缩短(P<0.01);去卵巢组与假手术组及去卵巢 雌二醇 黄体酮组比较,5-HT3R mRNA的表达明显增加(P<0.01);去卵巢 雌二醇 黄体酮组与假手术组比较,5-HT3R mRNA的表达减少(P<0.01). 结论: 卵巢激素在肠易激综合征(IBS)发病中对5-HT3R的调节方面有重要作用.     

雌、孕激素对去卵巢大鼠骨代谢及肾脏1,25-(OH)2D3受体mRNA表达的影响

目的:观察雌孕激素替代治疗对去卵巢大鼠骨组织计量学参数变化及大鼠肾脏1,25-(OH)2D3受体(VDR)mRNA 表达的影响,并探讨其可能的机制.方法:25只成年SD雌性大鼠,随机分为为5组,假手术组、单纯去势组以及去势 补充雌激素组、去势 补充孕激素组、去势 补充雌、孕激素组,每组5只.喂养3个半月后处死,取出肾脏,RT-PCR方法检测VDR mRNA的表达;取胫骨上段不脱钙骨制片,应用半自动图像数字化分析仪检测各组大鼠骨组织计量学参数.结果:与假手术组、雌激素及雌孕激素组相比,去卵巢大鼠松质骨骨量明显减少,伴有骨结构变差,骨形成和骨吸收的参数值增加(P<0.05);与去卵巢组相比,孕激素组大鼠无显著改变.去卵巢组大鼠肾脏VDR mRNA的相对表达量显著低于假手术组、雌激素组及雌孕激素组(P<0.05);而与孕激素组无显著差异.结论:雌激素能有效地抑制去卵巢大鼠的骨吸收和骨形成,降低骨转换,可能与促进去卵巢大鼠肾脏VDR mRNA的表达有关.     

外周定量CT对大鼠骨骼结构和力学特性的评价

目的　为探讨和评估外周定量CT(pQCT)在骨组织结构和力学特性测量中的价值。方法　将 5 0只 4月龄雌性未交配的健康Wistar大鼠 ,经适应性喂养 8周后 ,随机分成 6组 ,其中 1组处死作为基线组 (Base ,n =8) ,其余大鼠行去卵巢手术 (Ovariectomy ,OVX)或假手术 (Sham)。OVX组共16只 ,Sham组共 8只 ,雌激素干预组 (O +E)共 18只。处死时留取右侧胫骨和股骨分别进行骨组织形态计量学分析、pQCT测量、股骨远端凹入实验和股骨中段三点弯曲试验。结果　大鼠经OVX后胫骨近端骨小梁体积显著降低 (8 1%± 1 4 %比 19 5 %± 1 5 % ,OVX比Sham ,P <0 0 1)和pQCT检查股骨远段的小梁骨骨矿含量 (1 7± 0 3比 3 2± 0 5mg/mm ,OVX比Sham ,P <0 0 1) ,骨矿盐密度(TrabBMD ,15 8± 32比 32 0± 39mg/mm3 ,OVX比ShamP <0 0 1)显著减少 ,同时松质骨的力学特性下降 ,最大载荷和刚度均显著低于假手术组。经雌激素干预后以上各指标均得以改善。皮质骨骨量和结构主要表现为增龄性的改变 ,OVX和雌激素干预对其影响不明显 ,相关分析表明pQCT测得的股骨远端骨密度和组织计量学指标骨小梁的体积和数目呈显著正相关 (r分别为 0 88和 0 73,P <0 0 1) ,股骨松质骨骨量和骨密度与凹入实验的最大载荷和刚度也呈显著正相关 (r为 0     

雌二醇对去卵巢大鼠血清一氧化氮的影响

目的：观察雌二醇对去卵巢大鼠血清一氧化氮的影响。方法：采用去卵巢大鼠模型,通过肌注苯甲酸雌二醇2周,测量不同雌激素状态下大鼠血清一氧化氮（NO）的浓度,用镉还原法测NO2／NO3的量来反映NO浓度。结果：切除卵巢三周后,血浆雌二醇浓度显著下降（P＜0,05）,NO浓度轻度下降,但无统计学差异（P＞0．05）,当补充大剂量雌二醇后,发现去卵巢大鼠血清NO显著升高（P＜0．05）,血清E2水平也极显著升高（P＜0．01）。结论：雌二醇可促进去卵巢大鼠血清NO水平增加,这可能是雌激素抑制动脉粥样硬化和降低女性绝经后冠心病发病危险的重要机制之一。     

雌、孕激素对去卵巢大鼠肝脏维生素D受体mRNA表达的影响

目的探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响。方法25只成年SD雌性大鼠,随机分为Sham组(假手术组)、OVX组(单纯去卵巢组)、OVX+E组(去卵巢+补充雌激素组)、OVX+P组(去卵巢+补充孕激素组)OVX+E+P组(去卵巢+补充雌、孕激素组),每组5只。喂养3个半月后处死,取肝脏检测1,25-二羟维生素D3受体mRNA。结果与去卵巢组比较:(1)雌激素对去卵巢大鼠肝脏1, 25-二羟维生素D3受体mRNA的表达有显著上调作用;(2)雌、孕激素联合用药组1, 25-二羟维生素D3受体mRNA的表达介于单用雌激素和孕激素之间;(3)孕激素对去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达无显著上调。结论雌激素能促进去卵巢大鼠肝脏1, 25-二羟维生素D3受体的表达。     

雌、孕激素对去卵巢大鼠肝脏维生素D受体mRNA表达的影响

目的：探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响。方法：25只成年SD雌性大鼠，随机分为 Sham组（假手术组）、OVX组（单纯去卵巢组）、OVX＋E组（去卵巢＋补充 雌激素组）、OVX＋P组（去卵巢＋补充孕激素组）、OVX＋E＋P组（去卵巢＋补充雌、孕激素组），每组5只。喂养3个半月后处死，取肝脏检测1，2，5－二羟维生素D3受体mRNA结果:与去卵巢组比较 :(1)雌激素对去卵巢大鼠肝脏1,2,5-二羟维生素D3受体mRNA的表达有显著上调作用;(2)雌、孕激素联合用药组1，25－二羟维生素D3受体mRNA的表达介于单用雌激素和孕激素之间；（3）孕激素对去卵巢大鼠肝脏1，25－二羟维生素D3受体mRNA的表达无显著上调。结论：雌激素能促进去卵巢大鼠肝脏1，25－二羟维生素D3受体的表达。     

性激素对卵巢切除后大鼠膀胱结构和功能的作用

目的 探讨性激素对卵巢切除后大鼠膀胱结构和功能的作用.方法 将70只成年雌性大鼠平均分成7组进行假手术和双侧卵巢切除.除假手术组和单纯卵巢切除组外分别给予苯甲酸雌二醇0.25 mg/kg、苯甲酸雌二醇1 mg/kg、黄体酮、苯甲酸雌二醇0.25 mg/kg和黄体酮、丙酸睾酮,隔日肌注,4周后处死.光镜和电镜下观察大鼠膀胱形态学变化.结果 双侧卵巢切除后,膀胱壁变薄为(0.97±O.11)mm(P<0.05),雌激素和雄激素均可使膀胱重量和膀胱壁厚度明显增加,甚至超过假手术组(P相似文献   

visfatin对体外脂肪细胞胰岛素受体底物和PI3K表达的影响

目的：从胰岛素经典信号传导通路磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）角度探讨内脏脂肪素（visfatin）与2型糖尿病（T2DM）胰岛素抵抗（IR）的关系。方法：复苏、传代和诱导分化人源T2DM前脂肪细胞,构建 visfatin过表达载体,进行载体转化、培养和提取;以4个不同表达梯度（0.0、1.0、2.5和5.0 μg）转染传代脂肪细胞,以0.0 μg组为对照组,其余3组为观察组;Q-PCR法检测visfatin 、胰岛素受体底物1（IRS-1）、胰岛素受体底物2（IRS-2）和 PI3K（P85α） mRNA表达水平,Western blotting法检测visfatin、IRS-1、IRS-2和PI3K（P85α） 蛋白表达水平及IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平,[³H]-2-脱氧-D-葡萄糖摄取法测定细胞葡萄糖摄取率的变化。结果：各组 visfatin mRNA及蛋白表达水平随转染浓度梯度升高而升高（P<0.01）,所构建visfatin过表达载体有效。随visfatin表达增加,各组IRS-1和PI3K（P85α） mRNA和蛋白表达水平以及IRS-1磷酸化程度均明显升高（P< 0.01）,但IRS-2 mRNA和蛋白表达水平未出现明显变化（P>0.05）。脂肪细胞的葡萄糖摄取率随visfatin表达增加而升高（P<0.05）。结论：体外脂肪细胞visfatin过表达可增加IRS-1和PI3K的表达水平。     

雌激素对小鼠参考记忆的影响研究

目的:探讨雌激素去除(OVX)与雌激素替代(ER)对小鼠参考记忆的影响。方法:将3月龄的雌性C57BL/6J小鼠40只随机分为对照组和卵巢切除组,卵巢切除组又分为不给雌激素、给雌激素7d、给雌激素40d的3个亚组,每组10只。小鼠摘除卵巢后饲养至7月龄进行8臂迷宫实验,将给雌激素组小鼠于迷宫测试前7d和40d分别皮下埋植控释雌激素(17β-雌二醇)药丸(0.18mg/丸),测试各组小鼠在8臂迷宫的参考记忆错误率。结果:卵巢切除组不给雌激素亚组其参考记忆错误率明显高于对照组(P<0.05);给雌激素7d和40d亚组其参考记忆错误率明显下降(P<0.05,P<0.01),而且长期给雌激素亚组其参考记忆错误率明显少于短期给雌激素亚组。对照组和给雌激素组其错误率无显著性差异(P>0.05)。结论:雌激素去除明显损害了小鼠的空间参考记忆,而雌激素替代可以改善小鼠的记忆能力,并且长期的替代改善效果更明显。