不同转移潜能人肝癌细胞系酪氨酸磷酸化蛋白质差异分析

目的研究不同转移潜能人肝癌细胞系中酪氨酸磷酸化蛋白质表达的差异并筛查与肝癌转移相关的酪氨酸磷酸化蛋白质分子。方法应用双电泳(2-D E)、免疫印迹法及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析,对三种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep 3B、MHCC97L和MHCC97H进行酪氨酸磷酸化蛋白质组分析。结果对照2-DE胶和免疫印迹发光胶片,Hep3B检测到10个点,MHCC 9 7L检测到19个点, MHCC97H检测到17个点。经质谱鉴定,得到膜连蛋白Ⅰ等19个差异点。结论细胞内酪氨酸磷酸化蛋白的表达差异与肝癌的侵袭转移有关。     

乙型肝炎相关肝癌外周血树突状细胞负载肿瘤抗原前后免疫功能的变化

目的探讨肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)来源树突状细胞(DC)表面分子表达及负载肿瘤抗原前后免疫功能变化与免疫逃逸的关系。方法分离18例乙型肝炎相关原发性肝癌、11例乙型肝炎肝硬化患者和10名健康献血者PBMC,体外培养,并加入重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)诱导DC。以共聚焦显微镜和扫描电镜观察形态,以流式细胞仪检测DC表面人类白细胞抗原(HLA)-DR、CD1a、CD80、CD83、CD86等分子表达水平。以HCCLM6肝癌细胞株制备肿瘤抗原,分别负载3种DC,最后以混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC负载前后刺激同种异型T淋巴细胞增殖能力,并测定MLR上清液中IL-12的含量。结果肝硬化和肝癌组PBMC、DC得率低于正常组(P<0.05);HLA- DR、CD1a、CD80和CD86等分子表达水平也低于正常组(P<0.05);负载肿瘤抗原前肝硬化和肝癌组刺激同种异型T淋巴细胞增殖能力和MLR上清液中IL-12含量明显低于正常组,负载肿瘤抗原后3组均提高, 并以肝硬化组提高最为明显,但IL-12含量仍低于正常组。结论DC表型和功能缺陷可能是乙型肝炎病毒产生免疫耐受和肝癌细胞免疫逃逸的重要机制。肝硬化患者DC仍有一定功能。     

微血管张力测定技术在血管内皮去除中的应用

目的通过建立离体小动脉血管内皮去除的研究方法,提高微血管测量技术研究数据的可信度。方法选取♂自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY),测量血压后,获取肠系膜动脉环。采取机械(血管环围绕电极尖端旋转、推注气体)和药物(L-NAME和吲哚美辛)相结合的方式去除内皮。采用压力肌动图技术检测苯肾上腺素(PE)、乙酰胆碱(ACh)、硝普钠(SNP)对肠系膜动脉直径变化的影响。结果(1)SHR血压值高于WKY大鼠(P<0.01);(2)PE浓度依赖地收缩肠系膜动脉。内皮完整和内皮去除时,与WKY相比,SHR的收缩增强(P<0.05);(3)ACh、SNP能够浓度依赖地舒张肠系膜动脉。内皮完整时,与WKY相比,SHR的舒张减弱(P<0.01);内皮去除时,与WKY相比,SHR的舒张增强(P<0.01)。结论(1)成功建立离体微小动脉血管内皮去除的研究方法。(2)高血压大鼠存在明显的血管舒缩功能障碍。     

肝癌转移抑制基因在8号染色体上的功能定位

目的为进一步寻找和克隆可能的肝癌转移抑制基因奠定基础。方法以序列标签位点（STS）为路标，运用基因组物理图谱方法分析人类染色体8p上肝癌转移抑制基因相关染色体缺失状况，从NCBI的UniSTS数据库查询STS的引物序列，以微细胞杂交克隆DNA为模板（A9／C5F1和A9／C5F2为转移不抑制组，A9／C5F4、A9／C5F8和A9／C5F10为转移抑制组）进行STSPCR扩增。结果人类染色体8p上从D8S542位点起至D8S1973位点区段（位于染色体8p21．1～23．1区域，约18cM）存在转移抑制组杂交克隆STS位点不同程度的获得和转移不抑制组杂交克隆组STS位点的缺失。结论D8S542～D8S1973所在的人类染色体8p21．1～23．1区域可能存在肝癌转移抑制基因。     

不同转移潜能人肝癌细胞株趋化因子受体谱差异表达

目的对比观察不同转移潜能人肝癌细胞株趋化因子受体谱差异性表达。方法Pre- mier软件设计18对趋化因子受体引物,RT-PCR分析SMMC-7721、MHCC97-L、MHCC97-H和HCCLM6细胞侵袭转移潜能逐渐增强的人肝癌细胞株趋化因子受体谱。结果4组不同转移潜能细胞株趋化因子受体表达谱存在明显差异（P＜0．01）,其中CCR10、CXCR4、CXCR6表达随转移潜能增加逐渐降低。HCCLM6表达谱中CCR3、CCR4、CCR10、CCR12及XCR1比SMMC-7721表达明显降低甚至缺失（P＜0．01）,而CXCR1（P=0．006）、CXCR5（P=0．003）表达高于低转移潜能组SMMC-7721。MHCC97-H和MHCC97-L比较,除CXCR2、CXCR6、XCR1外差异均有统计学意义,其中CCR1（P=0．002）、CCR2（P=0．004）、CCR5（P=0．046）表达高于MHCC97- L。CXCR4在模板减量时只能在SMMC-7721组检测到。结论高低转移潜能肝癌细胞株趋化因子受体表达在mRNA水平存在差异性表达,与肝癌细胞株差异性转移潜能相关。     

维生素K2干预肝癌的实验研究

目的：研究维生素K2对人肝癌细胞的凋亡诱导作用，并探讨其作用机制；研究维生素K2的干预对荷瘤裸鼠肝癌肺转移及生存期的影响。方法：用流式细胞仪检测细胞凋亡率；RT—PCR方法检测凋亡相关基因caspase-3、bcl-2及bax的mRNA表达。建立人肝癌裸鼠原位移植模型，给予荷瘤裸鼠口服维生素K2（30mg·kg^-1·d^-1），另设对照组，观察两组裸鼠肝癌肺转移和生存期变化。结果：100μmol·L^-1的维生素K2与细胞共育6h后细胞的凋亡率为（28．5±1．6）％，与时照组（2．8±4．8）％比较。有显著差异（P〈0．05）。caspase-3mRNA的表达随着维生素K2浓度及作用时间的增长而增强；当100μmol的维生素K2分别作用细胞24h和72h后，caspase-3mRNA的表达分别为（0．495±0．250）和（0．603±0．098），与对照组比较（0．270±0．132）均有显著差异（P〈0．05）。人肝癌细胞中未检测到bcl-2mRNA表达。baxmRNA的表达于用药前后无变化。维生素K2干预荷瘤裸鼠后，其生存期（83．6±5．18d）较对照组（58．2±9．47d）明显延长（P〈0．05）；其肺转移灶（4．6±1．95个）较对照组（12±6．6个）明显减少（P〈0．05）。结论：维生素K2对人肝癌细胞有凋亡诱导作用，凋亡相关基因caspase-3参与了凋亡的调控；维生素K2能减少裸鼠肝癌肺转移率，能延长荷瘤裸鼠的生存期。     

增殖型糖尿病性视网膜病变行全视网膜光凝后5a随访观察

目的:观察增殖型糖尿病性视网膜病变(proliferativediabetic retinopathy,PDR)行全视网膜光凝术(panretinalphotocoagulation,PRP)后5a的疗效及预后分析。方法:对92例149眼PDR患者行PRP治疗后的1,3,6,12mo进行复查,以后每6mo进行复查,并在3mo后均复查FFA,必要时补充光凝,随访5a。结果:视力提高52眼,保持不变71眼,下降26眼。5a后患者的最终矫正视力情况:≤0.01者19眼,～0.1者64眼,～0.5者58眼,>0.5者8眼。在激光后的随访期间血糖水平基本控制在正常范围内的63眼中,5a后只有6眼发生玻璃体积血、牵拉性视网膜脱离等严重并发症,占9.5%,而在血糖水平控制不满意的29眼中,有9眼(31%)发生上述情况。结论:通过早期发现、及时治疗和定期随访观察而减少糖尿病性盲是完全可能的。对于PDR患者,确诊后应立即进行PRP治疗,并制定定期随访计划,必要时应复查FFA或补充激光,同时,要向患者阐明,严格正规的内科治疗,将血糖控制在正常范围内,可有效地降低或延缓PDR发展的倾向。     

跟骨腺泡状软组织肉瘤伴肺脑转移1例

腺泡状软组织肉瘤(alveolar soft part sarcoma,ASPS)是一种较为罕见的恶性肿瘤,由Christopherson等[1]于1952年首先报告,其发病率只占软组织肉瘤的0.5％-1％,该病易出现血行转移,转移部位以肺、骨多见,但与其它软组织肉瘤相比,ASPS易发生脑转移[2].目前,关于腺泡状软组织肉瘤脑转移的报道及文献较少见.     

多波长氪激光治疗视网膜分支静脉阻塞的疗效分析

目的:通过分析142例多波长激光治疗视网膜分支静脉阻塞(branch retinal vein occlusion,BRVO)的效果,讨论多波长激光在治疗BRVO中的重要意义。方法:通过对142例142眼BRVO患者应用美国科医人公司生产的多波长氪激光仪进行光凝治疗,在3mo后进行视力、眼压、裂隙灯、眼底镜及FFA检查,总结分析视力变化、视网膜出血吸收情况、黄斑水肿吸收情况。结果:经激光光凝治疗后3mo,出血吸收原面积的1/2以上者51眼(35.9%),吸收1/2～3/4者62眼(43.7%),吸收3/4至完全吸收者29眼(20.4%),同时,黄斑水肿完全吸收33眼(23.2%),黄斑水肿明显吸收96眼(67.6%),黄斑水肿轻度吸收或无变化13眼(9.2%)。治疗3mo后复查FFA,发现新生血管完全消退占有新生血管患者的71.2%,部分消退者占28.6%,无变化或加重仅占0.2%。结论:不失时机的应用多波长氪激光光凝治疗BRVO能明显提高视力,促进视网膜出血和黄斑水肿的吸收,同时可预防严重并发症的产生。     

髋臼旋转截骨术的康复护理

目的探讨康复锻炼对髋臼旋转截骨术后功能恢复的重要性。方法对 40例该术式病人分为常规组和对照组，常规组按照骨科常规术后护理方法，对照组在此基础上实施 5期康复护理法。结果参照关节活动范围 (ROM)检测[1]，对照组，总有效率为 100％。常规组总有效率 79％，两组比较，P< 0.05。结论术后康复护理及锻炼能够促进功能恢复。