消毒剂-磺胺耐药基因的检测

目的检测临床分离的革兰阴性杆菌菌株Ⅰ类整合子消毒剂-磺胺耐药(qacE△1-sul1)基因的携带情况。方法采用聚合酶链反应技术,对311株革兰阴性杆菌临床分离菌株(分别为大肠埃希菌96株,肺炎克雷伯菌肺炎亚种71株,铜绿假单胞菌64株,鲍氏不动杆菌61株,阴沟肠杆菌19株)进行qacE△1-sul1基因的检测。结果 311株革兰阴性杆菌中180株qacE△1-sul1基因阳性,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亚种、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、阴沟肠杆菌qacE△1-sul1基因阳性率分别为69.8%、53.5%、37.5%、75.4%、26.3%。大肠埃希菌和鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1基因阳性率高于肺炎克雷伯菌肺炎亚种、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌,差异有显著意义(q=3.019～6.129,P<0.05)。结论临床分离菌株qacE△1-sul1基因高携带率可能是目前医院感染的高发因素之一,临床应重视消毒剂的合理使用,并定期了解医院细菌耐消毒剂的情况。     

鲍曼不动杆菌消毒剂——磺胺耐药基因研究

目的了解鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因（qacE△1-sul1）存在情况。方法自临床分离27株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应法检测qacE△1-sul1基因和Ⅰ类整合酶基因（intⅠ1）。结果27株AB菌检测qacE△1-su1Ⅰ基因阳性22株（81-4％），intⅠ1基因阳性23株（85.2％）。qacE△l-su1Ⅰ基因和intⅠ1基因具有相关性。结论我院临床分离的鲍曼不动杆菌qacE△1-sul1基因携带率较高。这和qacE△1-sul1基因与Ⅰ类整合酶基因整合在一起有关。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌遗传标记和耐药基因的研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的遗传标记基因(整合子qacE△1、转座子tnpU)、氨基糖苷类修饰酶编码aac(6′)-Ib基因和喹诺酮类药物耐药qnrA基因分布状况,为临床使用药物治疗感染和消毒灭菌工作提供参考。方法收集本院的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共60株,采用PCR方法检测这些菌株中qacE△1、tnpU、aac(6′)-Ib和qnrA基因,MIC法药物敏感试验分析菌株的耐药性。结果 60株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qacEΔ1基因检出率61.7%,tnpU基因检出率7.6%,aac(6′)-Ib检出率为11.7%,qnrA基因检出率3.3%。60株菌中有38株含1种或以上基因,其药敏敏感度最高的是亚胺培南、厄它培南、哌拉西林/他唑巴坦,敏感率均为97.4%,而对氨苄西林和头孢唑啉完全耐药。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药与耐药基因传递机制整合子和转座子系统密切相关,分离株携带qacE△1、tnpU、aac(6′)-Ib和qnrA基因是细菌呈多重耐药的主要原因,提示临床应慎重用药。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及遗传学特征

目的:了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及其遗传学特征。方法:对35株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ,aac(6′)-Ⅱ,ant(3″)-Ⅰ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰb等7种氨基糖苷类修饰酶基因,TEM,SHV,LEN,OKP,CTXM-1,CTXM-2,CTXM-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,OXA-2,DHA,ACT-1等15种β-内酰胺酶基因,intI1,intI2,intI3等3种整合子基因,tnpA(TnA转座子标记),merA(Tn21/Tn501转座子标记),qacEΔ1-sul1消毒剂耐药基因,qnr喹诺酮类耐药基因,共检测29种耐药基因并对部分产物进行测序。结果:35株肺炎克雷伯菌中检出β-内酰胺酶基因22株,阳性率62.9%。整合子基因阳性22株,阳性率62.9%。氨基糖苷类修饰酶基因阳性26株,阳性率74.3%。tnpA全部阴性。merA阳性2株,阳性率5.7%。qacEΔ1-sul1阳性13株,阳性率37.1%。qnr全部阴性。在测序中发现一种新的基因型,并以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名,登录于美国NCBI(登录号:EF375621)。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因及耐消毒剂基因的携带率非常高,耐药基因谱及其遗传学特征非常复杂。     

铜绿假单胞菌消毒剂磺胺耐药基因研究

目的 探讨铜绿假单胞菌（PA）消毒剂磺胺耐药基因存在状况。方法 对临床分离的96株铜绿假单胞菌采用PCR检测消毒剂磺胺耐药基因（qacE△1-sulⅠ）。结果 96株PAqacE△1-sulⅠ阳性42株（阳性率43．8％）。结论 铜绿假单胞菌qacE△l-sulⅠ携带率很高。     

肺炎克雷伯菌连续分离株耐药性及Ⅰ类整合子遗传标记研究

目的 了解肺炎克雷伯菌(KPN)连续分离株整合酶基因存在情况和耐药性.方法 应用双基因聚合酶链反应法对44株KPN连续分离株进行检测.结果 44株KPN菌连续分离株中qacE△1-sul1基因阳性12株(27.3%).结论 在肠杆菌科细菌耐药机制中,Ⅰ类整合子起着非常重要的作用,它的3'-保守端有季胺类化合物(消毒剂)的耐药基因(qacE△1)和磺胺耐药基因(sul1)重叠基因,为Ⅰ类整合子遗传标记,整合子使细菌能够很快获得新的耐药基因以适应环境要求.     

多重耐药铜绿假单胞菌耐消毒剂基因存在状况

目的了解铜绿假单胞菌（Pa）耐消毒剂基因qacE△1-sul1的存在状况。方法从临床分离的Pa中筛选出多重耐药Pa,采用聚合酶链反应（PCR）检测qacE△1-sul1基因。结果20株多重耐药Pa中17株为阳性。结论大部分多重耐药Pa携带qacE△1-sul1基因,携带率高。     

Ⅰ类整合子在耐多药产ESBLs大肠埃希菌中的分布探讨

目的了解耐多药产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌中Ⅰ类整合子携带情况。方法纸片扩散法(K-B法)测定大肠埃希菌对6种3类抗生素的敏感性并筛选出产ESBLs酶菌株;聚合酶链反应(PCR)检测整合子遗传标记qacE△1sul1。结果 71株大肠埃希菌中QacE△1-sul1共检出阳性菌株55株(74.46%),其中多耐模式检出率最高为88.89%(40株)。不同耐药模式中遗传标记基因的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05);产酶菌株在不同耐药模式中检出差异有统计学意义(P<0.05);非产酶菌株中检出差异无统计学意义(P>0.05)。结论耐多药产ESBLs大肠埃希菌中Ⅰ类整合子携带率高。     

多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因及耐消毒剂基因的检测

目的了解我院多重耐药铜绿假单胞菌中氨基糖苷类修饰酶编码基因及耐消毒剂基因的存在状况。方法聚合酶链反应（PCR）法对多重耐药的铜绿假单胞菌进行氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因、qacE△1-sul1耐消毒剂基因的检测。结果本组7株多重耐药的Pa菌分别检出aac（6’）-Ⅰ、aac（6’）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ和ant（2″）-Ⅰ等4种氨基糖苷类修饰酶基因和qacE△1-sul1型耐消毒剂基因。结论多重耐药铜绿假单胞菌存在多重耐药基因。     

下呼吸道肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的了解下呼吸道标本中肺炎克雷伯菌耐药特点及产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的检出率、基因型特点.方法收集下呼吸道标本中分离出的肺炎克雷伯菌,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并使用对CTX-M型ESBLs基因特异的引物,pCR扩增产酶菌的ESBLs基因.结果下呼吸道产ESBLs肺炎克雷伯菌占25%.ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌.35株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,16株携带CTX-M型基因.结论该院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率、耐药性高,CTX-M型基因的出现应引起临床医生的足够重视.     

临床分离133株肺炎克雷伯菌耐药机制和基因分型研究

目的 研究临床分离肺炎克雷伯菌的耐药机制及基因多态性.方法 用WHONET5.4分析菌株药敏情况.PCR检测菌株Ⅰ类整合酶、ISCR和ESBLs基因;ERIC-PCR检测基因型,SPSS分析其多态性.结果 除亚胺培南和美洛培南,产ESBLs菌的耐药率明显高于不产ESBLs菌(P<0.005).对Ⅰ类整合酶、ISCR、blaTEM、blaSHV、blaCTX-M,88株产ESBLs株的阳性率分别为59.1%、43.2%、69.3%、4.5%、45.5%;45株不产ESBLs株的阳性率分别为40.0%、15.6%、22.2%、4.4%、6.7%.根据指纹图谱把133株肺炎克雷伯菌分为126种,经SPSS系统聚类分析,归为20个大类.结论 南方医院产ESBLs肺炎克雷伯菌主要是CTX-M基因型,整合子和ISCR可以共存;ERIC-PCR是一种效果较好的基因分型方法,该院肺炎克雷伯菌呈散发存在.     

痰标本中肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因的检测及耐药分析

目的分析痰标本中肺炎克雷伯菌的耐药特点及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、基因分型。方法收集安徽省内34家医院痰标本中分离到的114株肺炎克雷伯菌,用琼脂稀释法检测其耐药性,标准纸片扩散法及PCR法检测ESBLs基因并初步分型。结果114株肺炎克雷菌中产ESBLs58株(50.9%),其中CTX-M-1型12株,CTX-M-9型15株,TEM型42株,SHV型49株,OXA-1型2株;产ES-BLs肺炎克雷伯菌的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。结论痰标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率高,且呈多重耐药。     

鲍曼不动杆菌耐药基因的初步研究

目的 了解鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii, Ab)中β-内酰胺酶和氯己定－磺胺耐药基因存在状况。方法 对20株Ab菌采用K-B纸片扩散法进行了抗菌药物敏感性的测定,采用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、ADC、DHA、SHV、PER等5种β-内酰胺酶基因和氯己定－磺胺（qacE△1-sul1）耐药基因。结果 20株Ab菌中TEM基因阳性12株(60%)、ADC基因阳性11株(55％)、DHA基因阳性10株(50％)、SHV基因阳性1株(5%),PER基因阴性,qacE△1-sul1基因阳性14株(70%)。结论 该20株菌β-内酰胺类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶密切相关,氯己定－磺胺基因携带率亦较高。     

大肠埃希菌Ⅰ类整合子遗传标记研究

目的了解我院大肠埃希菌（ECO）的Ⅰ类整合子遗传标记qacE△1-sull基因存在状况。方法对临床分离的34株ECO菌，采用PCR方法检测Ⅰ类整合子遗传标记qacE△1-sull基因。结果34株ECO菌qacE△1-sull基因阳性有28株（82．4％）。结论本组34株ECO菌药敏实验显示，β-内酰胺酶和氨基糖苷类抗生素耐药性高与Ⅰ类整合子遗传标记qacE△1-sull基因高检出率有关。     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布

目的阐明广州地区肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因型分布。方法用药敏纸片法对67株耐三代头孢菌素类抗生素的肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型筛选,采用PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,对部分ESBLs菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)。结果 67株菌中有58株菌ESBLs表型阳性,β-内酰胺酶基因检测显示,44株产CTX-M、43株产SHV(其中10株产超广谱的SHV)、14株产OXA-1群、38株产TEM,7株菌产AmpC。产CTX-M的菌株有20株产CTX-M-1群(包括15株产CTX-M-15)和24株产CTX-M-9群(包括14株产CTXM-14)。PFGE结果显示产ESBLs菌株同源性低。结论广州地区耐三代头孢肺炎克雷伯菌以产CTX-M-1群和CTX-M-9群ESBLs为主。     

124株肺炎克雷伯菌耐药性分析和产ESBLs株耐药基因分型研究

目的 探讨肺炎克雷伯菌耐药性以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行状况.方法 用K-B法检测肺炎克雷伯菌对24种常用抗生素的耐药情况;用PCR扩增所有产酶株的TEM、SHV及CTX-M基因片段,分析ESBLs各基因型的流行状况.结果 肺炎克雷伯菌除对碳青霉烯类药物敏感外,对其他抗生素耐药严重;产ESBLs肺炎克雷伯菌检出50株,检出率40.32％.ESBLs基因分型结果显示,多株同时携带2种或2种以上基因型,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型基因共同存在.结论 常用抗菌药物耐药严重、呈多重耐药.ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌的基因型以CTX-M为主.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药谱的连续监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌耐药谱的变化,为临床用药提供依据。方法用法国BioMerieux公司的VITEK-60全自动细菌鉴定仪鉴定细菌。采用K-B单片琼脂扩散法做药敏试验；用WHONET5．0分析软件对产ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果进行统计。结果检出624株肺炎克雷伯菌,其中产ESBILs 269株,占43．1％。药敏结果显示除哌拉西林外,18种抗生素对不产ESBLs肺炎克雷伯菌有较高的抗菌活性。产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率均明显高于不产ESBLs菌。结论本院检出的肺炎克雷伯菌产ESBLs株可能是头孢菌素型(CTX-M型)和SHV型酶介导。ESBLs尚未得到有效控制。3年间产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药谱变化不大,亚胺培南、美洛培南对产ESBLs株耐药率最低。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌肺炎临床及基因型分析

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药情况和基因型,探讨产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎（HAP）的危险因素。方法对140例大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌HAP患者（其中产ESBLs菌者88例为阳性组,非产ESBLs菌者52例为阴性组）细菌耐药情况进行分析。通过病例对照研究和多因素Logistic回归分析产ESBLs细菌HAP的危险因素。对保留的53株产ESBLs菌株以随机扩增多态性DNA（RAPD）分型法进行基因分型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药率明显高于非产ESBLs菌。Logistic多因素回归分析结果表明,入住ICU天数延长、使用三/四代头孢菌素是独立的危险因素。通过RAPD分型,37株产ESBLs大肠埃希菌分为27型,16株产ESBLs肺炎克雷伯菌分为13型。结论入住ICU时间、三/四代头孢菌素使用是产ESBLs细菌HAP的主要危险因素;RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速、可靠的基因分型方法。     

儿童肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药物敏感分析

目的了解儿童肺炎克雷伯菌感染状况、特点及细菌耐药性分析,以期指导临床合理用药。方法采用VITEK全自动微生物分析鉴定系统对临床分离的肺炎克雷伯菌菌株进行细菌鉴定和药物敏感试验。结果共分离出肺炎克雷伯菌122株,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌62株(50.82%),不产ESBLs肺炎克雷伯菌60株(49.18%);产ESBLs肺炎克雷伯菌62株中有45株(72.58%)从痰液分离中得到。分离出来的产ESBLs肺炎克雷伯菌菌株对青霉素类抗生素如氨苄西林、替卡西林及头孢噻吩完全耐药,对头孢西丁和亚胺培南完全敏感;分离出来的不产ESBLs肺炎克雷伯菌菌株对青霉素类抗生素氨苄西林完全耐药,对头孢西丁和亚胺培南完全敏感。结论肺炎克雷伯菌产ESBLs率较高;临床治疗前应尽可能进行肺炎克雷伯菌培养及药敏试验,以合理和规范用药。     

358株肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性分析

目的分析肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药情况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法采用回顾性调查的方法对358株肺炎克雷伯菌的标本来源及耐药性进行分析。结果 358株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs阳性142株,阳性率为39.7%;ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌对所测抗菌药物耐药性显著高于产ESBLs阴性菌,并且出现2株对亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌在医院感染中十分流行,多重耐药明显。