HBV感染患者体内CD8^＋T细胞表达的最新研究进展

T细胞是人体重要的获得性免疫细胞，根据T细胞表面CD分子的不同，可将T细胞分为CD4^＋T细胞（CD3^＋CD4^＋），CD8^＋T细胞（CD3^＋CD8^＋）两大类亚群，二者在免疫过程中发挥着不同作用，其中CD4^＋T细胞主要以分泌细胞因子、调节细胞和体液免因应答为主即辅助性T细胞（Th）；而CD8^＋T细胞主要介导细胞免疫应答即细胞毒性T细胞（CTL）。     

恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8~+CD28~-表达及意义

目的探讨恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^-表达及意义。方法采用流式细胞仪检测35例恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-。结果恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-与正常对照有显著性差异（P〈0．05）：治疗有效后两者趋于正常（P〉0．05）；而无效组与正常对照组相比仍有显著性差异（P〈0．05）。结论恶性淋巴瘤患者外周血T细胞CD8^＋CD28^＋及CD8^＋CD28^-表达异常，不同治疗效果表达不同，恶性淋巴瘤患者有免疫功能异常，治疗有效后免疫功能恢复正常。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在原发性肝细胞癌肿瘤侵袭性、进展以及预后中的价值。方法应用三色免疫荧光标记法通过流式细胞仪对45例来自不同分期的原发性肝癌患者外周血、肿瘤组织和30例正常人外周血CD4^＋、CD8^＋、CD4／CD8、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CTLA4^＋ -T淋巴细胞亚群的比例进行分析比较,以说明原发性肝癌患者的细胞免疫功能状态。结果①原发性肝癌患者外周血淋巴细胞总数及CD4^＋T细胞比例、CD4／CD8比例低于正常对照组[分别为（1．5±0．4）×10^9,（2．1±0．4）×10^9;（27．6±3．3）％,（32．9±5．8）％;1．02±0．26,1．31±0．42]。②原发性肝癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋ -Treg及CD4^＋CD25^＋CTLA4^＋ -T细胞占CD4^＋T细胞的比例明显高于正常对照组[分别为（19．2±3．3）％,（8．4±2．5）％;（8．6±2．2）％,（2．1±0．8）％]。原发性肝癌患者不同分期之间上述比例差异有统计学意义（P〈0．05）。③肿瘤组织中CD4^＋CD25^＋CTLA4^＋ -T细胞比例明显高于肿瘤患者外周血中所占的比例（分别为（87．1±4．4）％,（57．3±3．3）％）。结论调节性T细胞在原发性肝癌患者中的数量分布与肿瘤临床分期有明显关系,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量的增多可以作为判断侵袭性、进展的一个潜在重要指标。     

人 CD4+T细胞在肠道细菌抗原刺激前后CD25与FOXP3的表达

目的：探讨新鲜分离及自身肠道菌群抗原刺激后的人外周血CD4^＋T细胞CD25和FOXP3表达的相关性及变化规律．方法：分离人的外周血单核细胞和淋巴细胞，单核细胞经自身肠道菌群抗原刺激后与淋巴细胞混合培养，新鲜分离及混合培养14d的淋巴细胞用三色流式细胞术在单细胞水平同时检测CD4，CD25和FOXP3的表达．结果：新鲜分离的淋巴细胞约43．4％表达CD4，在CD4^＋T细胞中，约5．8％表达CD25，而高表达的只有1．9％，约5．2％表达FOXP3，CD25和FOXP3均表达的占3．3％，CD25^hi FOXP3^＋细胞占1．6％，CD4^-细胞几乎不表达FOXP3．经抗原刺激后，淋巴细胞总数均轻度增加（与未刺激组比较，平均增加21．0％，P〈0．001）．CD4^＋细胞的比例均明显上升（67．1％vs43．4％，P〈0．001），CD25^＋，FOXP3^＋及CD25^＋FOXP3^＋细胞的比例变化不大．CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞占CD4^＋CD25^＋T细胞的比例及CD4^＋CD25^hi FOXP3^＋T细胞占CD4^＋CD25^hiT细胞的比例在所有研究对象中均呈下降趋势（前者从59．8％降到52．0％，后者从86．3％降到77．9％，均P〈0．05）．结论：CD25和FOXP3的表达具有一定的相关性，但CD25及CD25^hi均不能很可靠地标记人类的调节性T细胞，尤其是在淋巴细胞受到抗原刺激以后．肠道菌群抗原作为外来抗原刺激自身的淋巴细胞后，活化增殖的细胞中主要是CD4^＋CD25^＋FOXP3^-反应性T细胞，而不是CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞．     

CD4+T淋巴细胞亚群研究进展

在免疫应答期间．外周血T淋巴细胞发育为功能不同的亚群．并通过分泌特殊的细胞因子．影响细胞免疫,调节体液免疫应答。T淋巴细胞按表型不同可分为CD4^＋和CD8^＋两大亚群．它们多数表达T细胞受体．但识别的抗原和所受的主要组织相容性复合体（major histoconapatibility complex, MHC）的限制性不同。现将近年来关于CD4^＋T淋巴细胞亚群的研究进展综述如下。     

HCV感染者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的研究HCV感染者在病程各阶段外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法流式细胞仪检测丙型肝炎患者CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞,并将其分为急性期组,慢性期组检测CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD28^-T淋巴细胞。结果丙型肝炎患者CD4^＋T细胞降低,CD8^＋T细胞升高,CD4^＋／CD8^＋降低,与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。急性期组CD4^＋CD25^＋与正常对照组差异无统计学意义（P〉0．05）,但CD4^＋／CD28^-T细胞显著高于对照组（P〈0．05）、慢性期组CD4^＋CD25^＋T细胞显著增高,而CD4^＋CD28^-T细胞显著低于对照组（P〈0．05）。结论丙型肝炎患者CD4^＋／CD8^＋明显降低,机体免疫状态紊乱,在各病程阶段CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD28^-T细胞比率明显变化,说明此淋巴细胞亚群与丙型肝炎的发病及发展有密切关系。     

中国恒河猴CD8+T细胞缺失模型制备

目的：测试用抗-HuCD8^＋T细胞单克隆抗体方法去除中国恒河猴体内CD8^＋T细胞效果，为建立CD8^＋T细胞缺失恒河猴模型提供实验依据。方法：抗-HuCD8^＋T抗体cM-T807在0、3、7d注射2只中国恒河猴，不同的时间取外周血，腹股沟和腋下淋巴结。制备CD3／CD4／CD8标记的外周血和淋巴细胞悬液，流式法测定恒河猴外周血和淋巴结中CD8^＋T细胞的去除效果。结果：注射了cM-T807的中国恒河猴，24h后，外周血中的CD8^＋T细胞缺失99．9％，持续27d；168h后，淋巴结中CD8^＋T细胞缺失约90．0％，持续21d。结论：首次证实抗-HuCD8^＋T细胞抗体cM-T807能有效去除中国恒河猴体内CD8^＋T细胞，为建立CD8^＋T细胞缺失动物模型（CD8^＋T Cells del）奠定基础。     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

鼻咽癌及其高危人群外周血CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平及意义

目的：探讨鼻咽癌（NPC）及其高危人群外周血中CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平的变化及意义。方法：流式细胞仪检测外周血T细胞亚群、CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞及NK细胞水平。结果：鼻咽癌患者外周血CD4^＋CD25^＋占T淋巴细胞的（2.96±1.34）%,高于EBV-VCA-IgA抗体阳性健康携带者及健康者（P〈0.05）,但与临床分期无明显关系（P〉0.05）;EBV-VCA-IgA阳性组与正常对照组水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。NPC患者外周血CD3^＋、CD4^＋细胞明显降低,NK细胞水平高于EBV-VCA-IgA抗体阳性健康携带者及健康者（P〈0.05）。结论：鼻咽癌患者外周血中CD3^＋、CD4^＋细胞明显降低,CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平升高,提示鼻咽癌患者免疫功能低下,可能与肿瘤的发生发展密切相关。     

脐血和成人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分离及功能特征的比较

目的分离成人外周血、脐血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞,并检测其功能,以了解脐血CD4^＋CD25^＋T细胞的特性。方法应用免疫磁珠分选法从健康成人外周血、脐血淋巴细胞中分离纯化CD4^＋CD25^＋、CD4＋CD25-T细胞。应用流式细胞术检测分离纯度,胎盘蓝染色检测细胞存活率;RT-PCR技术检测CD4^＋CD25^＋、CD4＋CD25-T细胞中Foxp3的mRNA的表达;体外增殖实验检测其对CD4＋CD25-T细胞的免疫抑制作用。结果 MACS分离的CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4＋CD25-T细胞纯度达（92.7±1.6）%、（90.3±1.2）%,细胞存活率达（95.3±2.1）%;体外经抗CD3、CD28单克隆抗体刺激培养的脐血及成人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞同时得到扩增,而且高表达Foxp3;CD4^＋CD25^＋T细胞能有效的抑制效应T细胞的增殖,当效靶比为1︰1时,其抑制效应T细胞的作用最强,成人外周血抑制率为（81.36±1.61）%、脐血抑制率为（90.74±2.43）%。结论脐血和成人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞是一群具有免疫抑制功能的调节性T细胞,与成人外周血相比,培养后的脐血CD4^＋CD25^＋T细胞比成人外周血有更强的免疫抑制功能。     

昆明山海棠提取物预防急性移植物抗宿主病的实验研究

目的观察昆明山海棠（THH）提取物在急性移植物抗宿主病（aGVHD）中的作用及其可能的作用机制。方法建立aGVHD模型,BALB/c受鼠清髓性预处理后分别用生理盐水、环孢素A（CsA）、THH及CsA＋THH混合物灌胃。观察移植后受鼠aGVHD、生存时间、CD4^＋/CD8^＋比率、CD4^＋CD25^＋T细胞比率及脾细胞Foxp3 mRNA水平。结果生理盐水组出现典型aGVHD,20天内全部死亡。其余3组aGVHD临床、病理表现及生存时间均改善,组间无差异;CD4^＋/CD8^＋比率、受鼠CD4^＋CD25^＋T细胞比率及脾Foxp3 mRNA表达较生理盐水组升高,以联用组明显。结论THH可减轻小鼠aGVHD,延长其生存时间。机制可能与增加CD4^＋CD25^＋T细胞比率,上调Foxp3 mRNA表达,调节CD4^＋/CD8^＋比率有关。THH和小剂量CsA联合有协同作用。     

慢性HBV感染者外周血T细胞亚群研究

目的分析健康人及慢性HBV感染者T细胞亚群特点,探讨宿主细胞免疫功能与慢性HBV感染临床转归的关系。方法使用流式细胞仪检测30名健康人及137例各型HBV感染者外周血T细胞亚群。结果1．对照组与各型HBV感染者的外周血T细胞亚群比较：从慢性HBV携带（CHBVC）组、慢性乙型肝炎（CHB）组到肝炎后肝硬化（PHBC）组,患者外周血CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T绝对值呈逐渐下降趋势,显著低于对照组（P〈0．05）。PHBC组CD4^＋T/CD8^＋T比值显著高于对照组和CHBVC组（尸〈0．05）。2．不同程度CHB组间外周血T细胞亚群比较：从CHB（轻度）组、CHB（重度）组到慢性重型乙型肝炎（CSUB）组,患者CD3^＋F、CD4^＋T、CD8^＋T绝对值和CD4^＋T／CD8^＋T比值逐渐下降。CSHB组CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T绝对值显著低于CHB（轻度）组（P〈0．05）。结论HBV慢性感染机制复杂,不同的临床转归患者T细胞亚群状态不同。慢性HBV感染后,肝脏损害程度严重的患者T细胞亚群功能低下及紊乱程度明显。     

小儿类风湿关节炎患者外周血CD4+、CD8+ T细胞CD69表达及意义

目的分析小儿类风湿关节炎（RA）患者的外周血CD4^＋、cDB^＋T细胞CD69表达水平，探讨其在小儿关节炎症发生过程中的免疫病理作用。方法收集32例RA患儿和30例健康儿童外周血标本，利用流式细胞仪检测CD4^＋、cD8^＋T细胞CD69表达，分析它们在疾病发展过程中的作用。结果RA患儿外周血CD4^＋、CD5^＋T细胞CD69表达明显升高，与健康者比较有统计学差异（P〈0．05），所有患儿均接受了有效的药物治疗，待症状控制后，分析发现患者的CD4^＋、CD8^＋T细胞表达CD69水平显著下降（P〈O．05）。结论RA患儿外周血T细胞表达CD69水平明显升高，提示T细胞在关节炎症病变过程中激活、增殖，参与关节滑膜组织及全身免疫应答。     

中国HCV/HIV合并感染者或HIV单一感染者T淋巴细胞表面CD25和CXCR3表达的研究

目的探讨T淋巴细胞表面CD25分子和趋化因子受体CXCR3，在丙肝病毒（HCV）单一感染，艾滋病病毒（HIV）单一感染和HCV／HIV合并感染过程中的表达及意义。方法分离HCV感染组（n=21），HIV感染组（n=14），HCV／HIV感染组（n=28）及正常对照组（n=30）人外周血单个核细胞。采用流式细胞术。计数CD4^＋和CD8^＋t淋巴细胞数，检测外周血CD4^＋CD25^＋细胞百分含量和CD4^＋和CD8^＋淋巴细胞表面CXCR3的表达水平。结果CD4^＋T细胞表面CD25的表达在HCV感染组轻度升高，而在HIV感染组及HCVIHIV合并感染组CD25的表达显著降低（P〈0．001）。HIV感染组及HCV／HIV合并感染组CD4^＋T细胞表面CXCR3表达显著降低（P〈0．001）。CD8^＋T细胞表面CXCR3表达显著升高（P〈0．001）；HCV感染组CD4^＋及CD8^＋T细胞表面CXCR3表达轻度升高，但差异不显著。结论结果提示中国病毒感染者外周血T淋巴细胞表面CD25和CXCR3分子表达水平和机体免疫调节功能受到HIV感染的影响。     

脉冲高容量血液滤过对脓毒症患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的：探讨脓毒症患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的水平和意义以及脉冲高容量血液滤过（PHVHF）对它们的影响。方法：将2008年1月-2010年11月在安徽省立医院ICU住院的脓毒症患者40例按照疾病严重程度分为3组：脓毒症组14例,严重脓毒症组15例,脓毒症休克组11例。其中行PHVHF患者25例。40例脓毒症患者在入选当天和d5行流式细胞术检测血中CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例和CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋/CD8^＋水平。同时选取20例健康人为对照组。结果：健康对照组CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达率为（0.39±0.23%）;脓毒症组为（1.72±0.59%）;严重脓毒症组（2.72±0.22%）;脓毒性休克组（3.55±0.51%）,后3组间两两比较有显著性差异（均P〈0.05）。脓毒症组CD3^＋、CD4^＋和CD4^＋/CD8^＋较正常对照组显著升高（P〈0.05）。严重脓毒症组和脓毒症休克患者CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋较正常对照组显著降低（均P〈0.05）。与死亡组比较,生存组PHVHF能更有效地降低CD4＋CD25＋Treg细胞的异常表达（P〈0.05）,上调CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋/CD8^＋水平。结论：CD4^＋CD25^＋Treg细胞在脓毒症的免疫发病机制中可能起着重要作用,随病情加重,免疫抑制加强。PHVHF可调整脓毒症患者T细胞亚群比例,改善其免疫抑制状态,可作为脓毒症免疫调节治疗的手段之一。     

乙型肝炎外周血T淋巴细胞上CD28分子表达与病毒载量的关系

目的：分析HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者、HBeAg阳性乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞上CD28表达情况及其与HBV病毒载量的关系。方法采集健康人、HBeAg阳性乙肝病毒携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的外周血,抗体标记,采用流式细胞技术检测CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^＋T淋巴细胞,同时检测肝功能HBV DNA。结果慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组CD4^＋CD28^＋T细胞、CD8^＋CD28^＋T细胞百分率明显低于健康对照组（P〈0.05）;HBV DNA≥107组CD8^＋CD28^＋T细胞百分率低于HBV DNA＜107组（P〈0.05）。结论乙型肝炎病毒感染者CD8^＋T细胞上CD28的低表达与高病毒载量有关。     

食道癌患者CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞的变化及意义

[目的]初步探讨CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌患者外周血中的变化及临床意义。[方法]59例食道癌患者,分为鳞癌组47例,腺癌组12例,另外30例健康志愿者为对照组,用流式细胞术分别检测外周血中CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例。[结果]食道癌初诊患者组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例为（10．33±5．72）％,明显高于健康志愿者组（4．56±1．06）％（P〈0．01）,而食道鳞癌组和食道腺癌组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例没有明显差异。[结论]CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌初诊患者外周血中比例增加,可能是食道癌免疫抑制的一个重要原因。     

CD4^＋CD25%＋FoxP3^＋调节性T细胞在肺癌患者体内检测及其意义

目的研究肺癌患者外周血和肿瘤组织CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）的异常聚集,探讨其在肺癌患者体内调节免疫抑制作用。方法采用流式细胞术对28例肺癌患者的癌组织,相应的癌旁组织和外周血及15例正常志愿者外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞的检测。结果肺癌患者癌组织中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞在CD4^＋T细胞中所占比例是（10．5±1．6）％;外周血中和癌旁组织表达分别是（5．2±2．1）％和（3．6±1．2）％,癌组织明显高于外周血和癌旁组织（P〈0．05）。肺癌患者外周血中Treg细胞（5．2±2．1）％明显高于志愿者（1．8±1．2）％。结论CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞在肺癌组织及外周血中高表达,促进了肿瘤的进一步恶化,在癌组织学分型上也存在明显差异,肺腺癌表达阳性较高,可以作为肺癌免疫治疗的靶点。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对HCV感染者疾病进程影响的研究

目的：探讨HCV感染者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达状况以及与疾病进程的相关性。方法：选取HCV感染者69例及健康对照23例,应用流式细胞术检测外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达。结果：HCV感染组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞比例明显高于对照组（P〈0.01）;慢性感染组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于HCV无症状携带组（P〈0.05）;肝硬化组外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例高于慢性感染组（P〈0.05）。结论：HCV感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与疾病进程具有相关性。     

CD4^＋T细胞肿瘤研究取得进展

上海交通大学医学院附属瑞金医院血液科、上海血液研究所研究小组与法国Joseph Fouria大学Michallon医院合作，开展CD4^＋T细胞的抗肿瘤能力研究取得进展，研究发现CD4^＋T细胞能够特异性地杀伤从自体淋巴瘤细胞衍生的细胞株，并进一步提示使用肿瘤杀伤性CD4^＋T细胞可进一步增强过继转移或免疫治疗的有效性，特别是在肿瘤逃避CD8^＋T细胞介导的免疫杀伤作用时，CD4^＋T细胞能起到替代作用。该研究小组利用1例滤泡B淋巴细胞淋巴瘤患者的外周血淋巴细胞，将缺乏人类白细胞抗原Ⅰ（HLA-Ⅰ）的恶性淋巴瘤细胞CH1细胞株作为唯一的刺激源，以梯度稀释法得到3种自体的、细胞毒性的、具有肿瘤杀伤特异性的CD4^＋T细胞克隆。结果3种T细胞克隆可以杀伤来自于新鲜恶性B细胞的自体HLA-Ⅰ分子缺乏的淋巴瘤细胞株，但却对EB病毒（EBV）阳性的正常B细胞或K562细胞无杀伤溶解作用。3种肿瘤特异杀伤的CD4^＋T细胞均为TCR Vβ17-Dβ1—Jβ1．2，并具有同样的互补决定区CDR3。